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NATAL
2013
NATAL
2013
Resumo
Avaliar as caractersticas fsico-qumicas do leite fundamental para
identificao fraudes econmicas, estabelecer base para pagamento do produtor e
verificar o seu estado de conservao. O objetivo deste estudo foi avaliar a
qualidade fsico-qumica do leite, estimar a sua carga de contaminao
microbiolgica, suas condies de processamento, alm de investigar possveis
fraudes de reconstituintes de densidade no mesmo. Foram feitas anlises
quantitativas de alizarol, acidez Dornic, densidade, lipdeos, resduo seco, resduo
seco desengordurado, e anlises qualitativas de acar, sal, amido, redutase
(Reduo do Azul de Metileno) e peroxidase. Todos os testes realizados obtiveram
resultados satisfatrios, que possibilitou-nos atestar a boa qualidade do leite
analisado, que encontrou-se inserido dentro dos valores preconizados pela
legislao federal, legislao esta que norteia o setor lcteo brasileiro.
1) Introduo
Entende-se por leite, sem outra especificao, o produto oriundo da ordenha
completa, ininterrupta em condies de higiene, de vacas sadias, bem alimentadas e
descansadas (BRASIL, 1997). Segundo a FAO (2005), o Brasil o stimo produtor
mundial de leite, representando 4,4% da produo mundial.
No Brasil ainda comum o comrcio do leite informal tambm chamado de
leite clandestino. O comrcio de leite cru proibido no Brasil desde a dcada de
1950 pela Lei n.o 1.283, de 18/12/1950, e pelo Decreto n.o 30.691, de 29/03/1952
(BRASIL,1997).
O comrcio informal de leite uma grande ameaa sade pblica visto que,
segundo a Organizao Mundial de Sade (OMS), dezesseis doenas bacterianas e
sete virticas so veiculadas pelo produto, dentre elas a tuberculose, a brucelose e
gastroenterites, sendo esta uma grave consequncia da baixa qualidade do leite
proveniente do mercado informal (BADINI et al., 1997).
Entende-se por falsificao a adio ou subtrao parcial ou total de qualquer
substncia na composio de um produto (BEHMER, 1987). De acordo com o
RIISPOA, considera-se fraudado, adulterado ou falsificado o leite que: 1) for
adicionado de gua; 2) tiver sofrido subtrao de qualquer dos seus componentes,
exceto a gordura nos tipos C e magro; 3) for adicionado de substncias
conservadoras ou quaisquer elementos estranhos sua composio; 4) for de um
tipo e se apresentar rotulado como de outro de categoria superior; 5) estiver cru e for
vendido como pasteurizado; 6) for exposto ao consumo sem as devidas garantias de
inviolabilidade (BRASIL, 1997).
fundamental avaliar as caractersticas fsico-qumicas do produto, para
considerar a possibilidade da ocorrncia de fraudes econmicas, estabelecer base
para pagamento e verificar o seu estado de conservao (AGNESE et al., 2002).
2) Objetivos
O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade fsico-qumica do leite, estimar
a sua carga de contaminao microbiolgica, suas condies de processamento,
alm de investigar possveis fraudes de reconstituintes de densidade no mesmo.
3) Materiais e Mtodos
Prova do Alizarol
Objetivo da anlise:
Avaliar a resistncia do leite ao aquecimento a que ser submetido para
tratamento trmico. Alguns fatores, como desequilbrio salino e acidez podem reduzir
a estabilidade das micelas de casena, provocando coagulao/precipitao de
grumos no leite.
Fundamento:
A soluo de alizarol a mistura de lcool e alizarina, sendo este ltimo um
indicador de pH. Neste teste, o lcool presente na formulao do alizarol avalia a
estabilidade das micelas de casena. J a alizarina estima o pH da amostra, atravs
do desenvolvimento da cor amarela/marrom em pH baixo (cido), e da cor
violeta/lils em pH alto (alcalino), auxiliando, assim, a diferenciao entre o
desequilbrio salino e a acidez excessiva. Quanto maior a graduao alcolica da
soluo de alizarol, maior ser o rigor da anlise.
O teste do alizarol indica a acidez (provocada por microrganismos) e a
estabilidade do leite ao processo de tratamento trmico. Consiste na adio de um
indicador de pH (alizarina) soluo de lcool etlico em concentraes que variam
de 0,065 a 0,075% a 0,4%.
Material:
Pipeta;
Tubos de ensaio;
Reagentes:
Soluo de alizarol;
Procedimento:
Pipetar em um tubo de ensaio 5 mL de leite. Adicionar 5 mL de soluo de
alizarol e agitar. Observar a cor formada e interpretar os resultados de acordo com a
tabela abaixo:
Cor
da
Acidez
Qualidade
pH
>21D
Leite
:
<
Pardo
Vermelho
19 D 21 D
fermentado
Leite
pouco
6,0
~
Castanho
Vermelho
>21D
16 D 18 D
cido
Leite Normal
6,4
~
Leite Alcalino
6,8
>
reao
Amarelo
lils
Violeta
< 16 D
cido
6,8
Acidez Titulvel
Objetivo da anlise:
Avaliar, sob o ponto de vista quantitativo, o teor de acidez da amostra, ou
seja, o teor de compostos de carter cido. O desenvolvimento da acidez do leite
deve-se, principalmente, degradao da lactose (carboidrato presente no leite) em
cido ltico, pela ao de microrganismos. O resultado obtido na anlise um
indicador das condies de higiene e de refrigerao do leite, desde a ordenha at a
chegada da matria-prima indstria.
Fundamento:
A anlise baseia-se na titulao dos compostos de carter cido com uma
soluo alcalina de concentrao conhecida: hidrxido de sdio 0,111 mol/L (soluo
Dornic). A utilizao do indicador de pH fenolftalena determina o trmino da titulao
pela viragem para colorao rsea estvel por pelo menos 30 segundos. A acidez do
leite pode aumentar atravs da hidrlise da lactose por enzimas microbianas
(fermentao), que leva a formao de cido ltico. Neste experimento, o que se
destina a acidez total do leite atravs de titulao cido-bsica.
Material:
Pipetas;
Erlenmeyer;
Bureta.
Reagentes:
Soluo de dornic (NaOH N/9)
Soluo alcolica de fenolftalena a 1%
Procedimento:
Transferir, com auxlio de uma pipeta, 10 mL de leite para um bquer de 100 mL.
Adicionar 2 gotas da soluo alcolica de fenolftalena a 1%. Titular com soluo de
hidrxido de sdio at o aparecimento de uma colorao rsea.
OBS: O resultado deve ser expresso em graus Dornic. Cada grau Dornic
equivalente a 0,1mL da soluo de NaOH N/9. Um grau Dornic corresponde a 0,001
g de cido ltico contido em 10 mL de leite, ou seja, a 0,01% de cido ltico (g cido
ltico/100 mL de leite).
Cloretos (sal)
Objetivo da anlise:
Identificar a presena de substncias adicionadas ao leite a fim de aumentar o
teor de slidos ou mascarar fraude por aguagem.
Fundamento:
Em presena de NaCl no leite, o nitrato de prata (AgNO3) reage com o NaCl,
produzindo um precipitado branco (teste positivo). Na ausncia de NaCl, o AgNO3
reage com o K2CrO4, produzindo um precipitado vermelho (teste negativo).
AgNO3 + NaCl AgCl + NaNO3
2AgNO3+ K2CrO4 Ag2CrO4 + 2KNO3
O nitrato de prata reage com os cloretos, em presena de cromato de
potssio como indicador. Teores superiores concentrao normal de cloretos no
leite produzem colorao especfica no teste.
Material:
Tubo de ensaio;
Pipetas.
Reagentes:
Nitrato de prata;
Cromato de potssio.
Procedimento:
Em um tubo de ensaio, adicionar 10 mL da amostra, 5 mL de AgNO3 10% e 5mL
de K2CrO4 5%. Em paralelo realizar um teste positivo adicionando em um tubo de
ensaio 10 mL da amostra, 2 g sal, 5 mL de AgNO3 10% e 5 mL de K2CrO4.
Homogeneizar. Observar.
Amido
Objetivo da anlise:
Identificar a presena de substncias adicionadas ao leite a fim de aumentar o
teor de slidos ou mascarar fraude por aguagem.
Fundamento:
O aquecimento da amostra promove a abertura da cadeia helicoidal da
molcula de amido e ocorre ento a formao de um composto azul de adsoro do
iodo (soluo de iodo/iodeto de potssio lugol), com o desenvolvimento da
colorao caracterstica aps resfriamento. A presena de amido na amostra
determinada pelo surgimento de colorao azulada devido adsoro de iodo da
soluo de lugol aps aquecimento j que esse provoca a abertura da cadeia
helicoidal do amido, facilitando a adsoro.
Material:
Tubo de ensaio;
Pipetas.
Reagentes:
Lugol;
Amido.
Procedimento:
Em um tubo de ensaio, adicionar 10 mL da amostra. Em banho-maria aquecer
at ebulio por 3 minutos. Resfriar. Adicionar 3 gotas de soluo de lugol. Observar.
Em paralelo, promover um teste positivo adicionando em um tubo de ensaio 10 mL
da amostra, 3 mL de soluo de amido 1%. Aquecer em banho-maria at ebulio
mantendo por 3 minutos. Resfriar. Adicionar 3 gotas de soluo de lugol. Observar.
Densidade a 15C
Objetivo da anlise:
Verificar a relao massa (g) / volume (L) do leite. A densidade da amostra, em
uma determinada temperatura, dependente de sua composio centesimal. A
anlise auxilia na descoberta de fraudes, principalmente pela adio de gua.
Fundamento:
A imerso de um densmetro de massa constante, o termolactodensmetro,
provocar deslocamento de uma quantidade de amostra que ser, em massa, igual
do densmetro utilizado e, em volumes, proporcional densidade da amostra.
Esse deslocamento far o lquido alcanar um valor na escala graduada em graus
densitomtricos. O instrumento provido de termmetro, permitindo a leitura
simultnea da temperatura.
Material:
Termolactodensmetro
Proveta.
Procedimento:
Transferir para uma proveta de 250 mL com 5 cm de dimetro uma
quantidade de amostra previamente homogeneizada e resfriada que permita
mergulhar o termolactodensmetro. Introduzi-lo lentamente evitando que mergulhe
alm do ponto de afloramento e que se encoste s paredes da proveta. Fazer a
leitura
do
nvel
do
leite
no
menisco
superior.
Levantar
um
pouco
Reconstituintes da densidade:
Substncias adicionadas com o intuito de mascarar a fraude por adio de gua.
Normalmente so representadas por acar, sal e amido.
Lipdeos:
Objetivo da anlise:
Verificar o teor de gordura do leite. Trata-se de constituinte que apresenta
maior variao em seu teor, e algumas indstrias levam em conta essa variao
para efetuar o pagamento da matria-prima.
Fundamento:
Baseia-se na separao e quantificao da gordura, por meio do tratamento
da amostra com cido sulfrico e lcool isoamlico Mtodo de Gerber. O cido
dissolve as protenas que se encontram ligadas gordura, diminuindo a viscosidade
do meio, aumentando a densidade da fase aquosa e fundindo a gordura, devido a
liberao de calor proveniente da reao, o que favorece a separao da gordura
Procedimento:
Transferir, com auxlio de uma pipeta, 10 mL de cido sulfrico para o
lactobutirmetro de Gerber. Adicionar lentamente 11 mL da amostra e 1mL de lcool
amlico. Estas condies devem ser feitas sem molhar o gargalo do lactobutirmetro.
Arrolhar e agitar at a dissoluo completa da casena. Centrifugar por 3 a 5
minutos. Retirar o lactobutirmetro de Gerber mantendo a posio vertical (rolha
para baixo). Manejando a rolha, colocar a camada amarelo-claro transparente
(lpides) dentro da haste graduada do lactobutirmetro de Gerber. O nmero de mL
ocupado pela camada oleosa dar a % de lpideos. A leitura deve ser feita no
menisco superior.
Materiais:
Disco de Ackemann
Procedimento:
Determina-se o resduo seco fazendo coincidir as graduaes dos crculos
interno e mdio, correspondentes densidade e gordura, respectivamente. A
posio da flecha indicar, no crculo externo, o resduo seco por cento p/v.
Material:
Pipeta de 10 mL;
Tubos de ensaio;
Reagentes:
Soluo de Guaiacol incolor a 1% em etanol (1:1);
H2O2 de 10 a 20 volumes;
Procedimento:
Transferir 10 mL da amostra para um tubo de ensaio de 20 mL. Adicionar 2 mL
da soluo de guaiacol e 2 a 3 gotas de H2O2. Agitar. O aparecimento de uma
colorao salmo indica peroxidase positiva, ou seja, boa pasteurizao.
Procedimento:
Em um tubo de ensaio adicionar 10 mL do leite, 1mL de HCl concentrado e 1
mL de soluo de resorcina 0,5%. Em paralelo, promover um teste positivo
adicionando em um tubo de ensaio 10 mL de leite, 1g de acar, 1mL de HCl
concentrado e 1 mL da soluo de resorcina 0,5%. Homogeinizar. Aquecer em
banho-maria por 5 minutos. Observar.
4) Resultados e Discusses.
Com base nos resultados obtidos, foi possvel determinar as condies do
produto, se o mesmo encontrava-se apto para o consumo e se sofreu alguma
alterao em suas caractersticas iniciais, quer seja por problemas associados ao
processamento, quer seja por fraudes e/ou adulteraes.
O Regulamento Tcnico de Identidade e Qualidade (RTIQ) do Leite
Pasteurizado, apresentado na Instruo Normativa n 62, de 29 de dezembro de
2011, do Ministrio da Agricultura (IN 62/2011), traz os principais parmetros para
este produto, tanto para os padres fsico-qumicos, quanto para os microbiolgicos.
Estes parmetros serviram de base para a avaliao do produto analisado, visto se
tratar da legislao federal sobre o assunto.
O produto analisado enquandra-se na categoria de Leite Pasteurizado
Integral, segundo os dados do fabricante, e os dados obtidos nos ensaios sero
detalhados abaixo.
AVALIAO FSICO-QUMICA:
Com o objetivo de avaliar a qualidade fsico-qumica do leite, foram realizadas
as anlises de alizarol, acidez Dornic, densidade, lipdeos, resduo seco e resduo
seco desengordurado.
O teste do alizarol realizado para se avaliar a estabilidade trmica do leite
frente pasteurizao e/ou estimar seu pH e/ou sua acidez. A IN 62/2011 afirma que
o leite pasteurizado deve ser estvel em alizarol com graduao alcolica de 72%
(v/v).
experimento, mas de costume que o teor alcolico do mesmo esteja entre 68-72%.
O resultado do teste foi satisfatrio, visto que o leite apresentou colorao vermelho
lils, indicativo de um pH aproximado de 6.8, pH normal do leite. A figura a seguir
mostra a colorao obtida no teste do alizarol.
minutos, o que atesta sua boa condio microbiolgica. A figura a seguir apresenta o
resultado do teste da Peroxidase, com colorao salmo, caracterstico de
resultados positivos.
5) Concluso
6) Anexo
Clculo para acidez:
A soluo N/9, ou seja, 0,111 mol/L
1 mol de NaOH ------ (reage)---- 1 mol de cido ltico
0,111 mol de NaOH--------------------- X mols de cido Ltico.
x = 0,111 mols de cido ltico em 1000 mL;
10,00 g ----------------------1000 mL
X ----------------------------1,8 mL
X = 0,018g de cido ltico
7) Bibliografia
AGNESE, A. P.; NASCIMENTO, A. M. D. do; VEIGA, F. H. A.; PEREIRA, B. M.;
OLIVEIRA, V. M. de. Avaliao fsicoqumica do leite cru comercializado
informalmente no Municpio de Seropdica RJ. Revista Higiene Alimentar, v.16,
n. 94. p. 58-61, 2002.
BADINI, K. B.; NADER, FILHO, A.; AMARAL, L. A. Hbitos dos consumidores de leite
cru, produzido e comercializado clandestinamente nos municpios de Botucatu/ SP e
de So Manuel/SP. Revista Higiene Alimentar, v. 11, n. 51. p. 15-17, 1997.
BEHMER, M. L. A. Tecnologia do leite: leite, queijo, manteiga, casena, iogurte,
sorvetes e instalaes: produo, industrializao, anlise. 15. ed. So Paulo: Nobel,
1987. 320 p
BRASIL, 2011. Instruo Normativa n. 62, de 29 de Dezembro de 2011. Dirio
Oficial, 30 de dezembro de 2011. Seo 1, p.06-11. Regulamento Tcnico de
Identidade e Qualidade do Leite Pasteurizado.
.
BRASIL. Ministrio da Agricultura. Decreto n. 30.691, de 29 de maro de 1952,
alterado pelos Decretos ns.1255, de 25 de junho de 1962, n. 1236, de 2 de