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CONSULTORIO VETERINARIO LOS

PASTORES

REPRODUCCIN EN CANINOS
POR
MVZ Agustn I. Guevara Romero

MXICO

2015

INDICE

TEMA

PAGINA

1.-

SUMARY

2.-

INTRODUCCIN

3.-

ANATOMIA DEL APARATO REPRODUCTOR

4.-

CICLO ESTRAL DE LA PERRA

11

5.-

CITOLOGA VAGINAL EXFOLIATIVA

15

6.-

INSEMINACIN ARTIFICIAL

21

7.-

DIAGNSTICO DE GESTACIN

23

8.-

EVALUACIN DEL MACHO

25

9.-

COLECCIN Y EVALUACIN DEL


EYACULADO

28
32

10.-

MANEJO DE SEMEN REFRIGERADO Y


CONGELADO

11.-

BIBLIOGRAFA

34

Sumary
Reproduction is a biological process by which beings give rise to another being,
transmitting their genetic information in order to perpetuate their species.
In order to understand the process of reproduction in the canine species, it is
important to know and form basic anatomy and physiology of the reproductive
system of the male and the female likewise considered that in the case of the
canine species, reproductive management is individual and not group, as in the
case of livestock herds.
In the male and female reproductive apparatus are combined urinary and
genital system, since they have common structures.
Before carrying out the reproduction of a couple of copies, is the evaluation of
the male and the female. The male evaluates you physical condition general,
external genitalia as testis, epididymis, penis, foreskin, as well as internal
organs as the vas deferens, prostate and pelvic urethra, reaching the
assessment of ejaculate seminal.
Similarly, in the female is general physical examination and the corresponding
evaluation to their external sex organs such as the vulva, clitoris, taking into
account the observation of external clinical signs, it is the edema of the same
vulva which can be seen the presence of serosanguinous discharge, which tells
us that the dog entered in heat.
On the other hand, the female requires knowing the reproductive system is
divided into ovaries and tubular organs: uterus, oviduct, cervix, vagina, clitoris
and vulva.
Know the estrous cycle of the bitch, identifies the stage which are in their
breeding cycle may be proestrus, oestrus, right-handed or anoestrus, same
which are the stages of the estrous cycle of the dog through the CVE.
The diagnosis gestation made by studios such as; simple image plate of
abdomen, ultrasound, not forgetting to carry out physical auscultation of the
female.

2.- INTRODUCCIN A LA REPRODUCCIN CANINA.


La reproduccin es un proceso biolgico mediante el cual los seres vivos dan
origen a otro ser, transmitiendo su informacin gentica a fin de perpetuar su
especie.1
En el caso de los caninos se debe tener un especial cuidado, ya que el manejo
reproductivo es individual y no grupal.
Para poder comprender el proceso de reproduccin en la especie canina, es
importante conocer y de forma bsica la anatoma y fisiologa del aparato
reproductor del macho y la hembra.2, 4 (fig. 1.1)
En los aparatos reproductivos del macho y la hembra estn combinados el
Sistema urinario y el Sistema genital, ya que tienen estructuras de uso comn.
El primero se encarga de remover los desechos del organismo por medio de la
produccin y excrecin de la orina.
El segundo produce las clulas especializadas para la procreacin. Adems de
estar preparado anatmicamente y fisiolgicamente para obtener un perfecto
acoplamiento entre el macho y la hembra durante el coito. 18
Antes de llevar a cabo la reproduccin de una pareja de ejemplares, se realiza
la evaluacin del macho y la hembra. Al macho se le evala la condicin fsica
general, los genitales externos como testculos, epiddimo, pene, prepucio, as
como rganos internos como los conductos deferentes, prstata, uretra plvica,
llegando a la evaluacin de eyaculado seminal. 2

Fig. 1.1 Genitales externos del macho.

De igual forma, en la hembra se realiza el examen fsico general y la


evaluacin correspondiente a sus rganos sexuales externos tales como vulva,
cltoris, tomando en cuenta la observacin de signos clnicos externos, como es
la edematizacin de la vulva misma que se puede ver con la presencia de
secrecin serosanguinolenta, lo que nos indica que la perra ha entrado en
celo.3

Por otra parte, en la hembra se requiere conocer que el aparato reproductor se


divide en ovarios y rganos tubulares: tero, oviducto, crvix, vagina, cltoris y
vulva.3, 4 (Fig. 1.2).

Fig. 1.2.- Anatoma aparato reproductor de

Fig. 1.3.- Vulva edematizada con secrecin

la hembra

sanguinolenta

Conocer el ciclo estral de la perra, permite identificar mediante la CVE 1 la etapa


en la cual se encuentra su ciclo reproductivo que puede ser proestro, estro,
diestro o anestro. Por otro lado, el anlisis del ciclo estral mediante la CVE,
brinda la oportunidad de realizar inseminacin artificial y lograr la gestacin en
la perra cuando las circunstancias son adversas, como por ejemplo, el no poder
transportar a la pareja cuando la distancia geogrfica no lo permite, o en caso
de agresividad o por falta de libido.
El ciclo estral de la perra se divide en cuatro etapas: proestro, estro, diestro y
anestro. Estas etapas se observan mediante la tcnica de la CVE*, la cual
consiste en la observacin y el anlisis de las clulas que se obtienen del
epitelio vaginal exfoliado de la perra.4 (fig. 1.4)

Fig. 1.4.- Citologa vaginal


exfoliativa (estro)

El diagnstico de gestacin se realiza mediante estudios como son; placa


radiogrfica simple de abdomen, ultrasonografa, no olvidando realizar la
auscultacin fsica de la hembra.(Fig. 1.5)

Fig. 1.5.- Diagnstico de gestacin


mediante ultrasonido.

1* CVE.-Citologa vaginal exfoliativa

3.- ANATOMIA DEL APARATO REPRODUCTOR DE LA ESPECIE CANINA


Para poder comprender el funcionamiento o la fisiologa de la reproduccin en
la especie canina es importante conocer la anatoma tanto del macho como de
la hembra y tener bases para el estudio de la reproduccin.
Aparato reproductor del macho
El aparato reproductor del macho se clasifica segn su localizacin en: rganos
genitales internos y genitales externos.
Los genitales internos comprenden: conductos deferentes, prstata y uretra
plvica.
Los genitales externos comprenden: testculos, epiddimo, prepucio y pene.
Los testculos son considerados como rganos sexuales primarios, mientras
que conductos excretores, glndulas accesorias (prstata), pene y prepucio, se
les considera como rganos sexuales secundarios. (Fig. 2.1)
Este sistema es responsable de producir los espermatozoides, clulas que
fertilizarn el vulo de la hembra y los fluidos que ayudarn a su transporte y
mantenimiento.

Fig. 2.1.-Aanatoma del aparato reproductor del


macho

Testculos
Los testculos son dos rganos ovales encargados de la produccin de
espermatozoides y la produccin de hormonas esteroides. Estn situados en la
regin inguinal del perro son simtricos en posicin horizontal. Estn protegidos
y sostenidos por el escroto. El cual est constituido por fibras musculares muy
delgadas (msculo cremaster), un peritoneo o membrana que recubre
internamente a los testculos y tambin a sus conductos deferentes, nervios,
vasos sanguneos y linfticos.18
Epiddimos
Los epiddimos se encuentran dorsales a los testculos estos se dividen en
cabeza (transporte), cuerpo (maduracin) y cola (almacn) de

espermatozoides. El epiddimo se contina con los conductos deferentes, los


cuales transportan a los espermatozoides a la uretra durante el proceso de
eyaculacin. (Fig. 2.2)
La cabeza del epiddimo se encuentra hacia el polo craneal y la cola del mismo
se dirige hacia el polo caudal.
A partir de aqu su circulacin es a travs de los conductos deferentes que
entran en el abdomen cruzando el canal inguinal y que estn conectados con la
uretra.

Fig. 2.2.- Anatoma de los epiddimos

Conductos deferentes
Se encuentran mediales a los testculos, estos se dirigen hacia craneal a travs
del anillo inguinal y terminan dorsal a la prstata.
Prstata
Glndula formada de tejido muscular liso, se encuentra en el inicio de la uretra
y la rodea cerca del cuello de la vejiga. Tiene canales evacuadores que
desembocan en la uretra.
Es la nica glndula sexual accesoria, encargada de producir lquido prosttico
el cual sirve como medio de transporte y sustento a los espermatozoides. La
prstata es bilobulada mide aproximadamente 1.5 a 3 cms. el fluido prosttico
consta de tres fracciones que corresponden al eyaculado, la primera fraccin
es un lquido transparente que proviene de la prstata; la segunda fraccin es
de aspecto lechoso, esto es debido a la presencia de los espermatozoides que
provienen de la cola del epiddimo y la tercera fraccin tambin es transparente
proveniente de la prstata.
La uretra est formada por membranas mucosas rodeadas de tejido cavernoso
erctil, transporta tanto orina como secreciones seminales, es larga; su primera
porcin est dentro de la pelvis conectada con la vejiga urinaria.
Pene
El pene que esta sostenido a los huesos de la pelvis por tejido fibroso y se
encuentra entre los muslos del perro, tiene una parte fija de forma cilndrica,
ligeramente aplastada a los lados y una parte movible conformada por el
glande cuyo extremo anterior es cnico.18

El pene es el rgano copulador del perro y cumple con dos funciones, la de


expulsar la orina y la de expulsar por medio de la eyaculacin el semen hacia la
vagina de la perra18. El pene del perro es de tipo vascular, la ereccin del pene
depende de que este se llenen de sangre los cuerpos cavernosos y esponjosos
que rodean a la uretra y que se disponen a todo lo largo del pene, produciendo
una rigidez para poder penetrar a la hembra. El glande del perro abarca desde
la punta del pene hasta el bulbo peneano en su parte posterior, en su interior y
a todo lo largo est dispuesto el hueso peneano (considerado como cuerpo
esponjoso osificado), que ayuda junto con el glande a la insercin del rgano
durante la cpula, el glande recibe temperatura y presin lo que esto provoca
estimulacin en el perro para producir la eyaculacin. (Fig. 2.3)

Fig. 2.3.-rganos externos del macho, Pene,


Prepucio, Testculos.

Prepucio
El prepucio es una extensin de piel la cual cubre en su totalidad al pene, aqu
se debe observar que hay un deslizamiento entre la mucosa del pene y la
mucosa interior del prepucio, no debe haber adherencias y a la inspeccin del
pene ste debe desenvainar totalmente. Existen dos alteraciones en esta parte
anatmica que consisten que cuando hay incapacidad de desenvainar el pene
se denomina fimosis y cuando no vuelve a envainar el pene se llama
parafimosis. (Fig. 2.4)

Fig. 2.4.- Desenvaine del pene

Aparato reproductor de la hembra


Los rganos del aparato reproductor de la hembra, casi todos se encuentran
alojados en el abdomen, producen vulos y ayudan a que estos puedan ser
fertilizados, se desarrollan durante la gestacin o involucionan para dar paso al
nuevo ciclo sexual de la hembra. Tambin estn preparados para recibir al
pene durante la cpula. El aparato reproductor de la hembra se divide en
ovarios y rganos tubulares: tero, oviducto, crvix, vagina, cltoris y
vulva. (Fig. 2.5)

Fig. 2.5.- Anatoma del aparato


reproductor de la hembra

Ovarios
Son dos rganos pares suspendidos de la regin sublumbar por el ligamento
ancho o mesoovario, estn localizados caudalmente a los riones, son de
forma oval cubiertos por la Bursa ovrica dejando una pequea abertura hacia
cavidad abdominal. La funcin de los ovarios es la produccin de vulos,
secrecin de estrgenos y progesterona, por medio de la formacin de folculos
y la formacin del cuerpo lteo respectivamente. Cabe mencionar que los
ovarios al estar cubiertos por la Bursa ovrica, esta no permite la observacin
por laparoscopia el desarrollo y crecimiento folicular, as como la formacin del
cuerpo lteo.
Dada la estrecha unin que hay entre la Bursa ovrica y el ovario, cuando se
realiza la ovariohisterectoma, pueden quedar remanentes tanto de la bursa
ovrica como del ovario, dando como consecuencia la revascularizacin de
estos pequeos residuos de tejido ovrico y con el tiempo la perra presentar
ciclos estrales, esta condicin se denomina Sndrome del remanente ovrico.
Oviductos
Los oviductos son unos tubos cortos y estrechos los cuales se conectan a cada
uno de los ovarios con los cuernos uterinos, donde se lleva a cabo la
fertilizacin del vulo con el espermatozoide.
tero
El tero se clasifica como bicornual de fusin baja, es decir, tiene un cuerpo
uterino corto y cuernos uterinos extremadamente largos y delgados dispuestos
en forma de V. La vagina es larga y la os externa del crvix se encuentra en el
techo de la porcin craneal de la misma. La vagina termina en su parte ms
profunda en un fondo de saco o fornix. (http://animalosis.com/anatomia-reproductora-de-laperra/)

Esta caracterstica, aunada al hecho de que los pliegues longitudinales de la


mucosa vaginal aumentan de tamao durante el estro, ocultan el principio del
crvix, visualizndose nicamente la entrada del fondo de saco y que puede
confundirse con la entrada del crvix, por lo que se le conoce como
pseudocervix.
Su principal funcin es retener a los embriones en el cuerpo de la futura madre,
distribuyndolos en sus dos cuernos durante la gestacin. Y es el rgano clave
durante el parto para la expulsin de los cachorros.

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Vulva

Vagina

Bursa ovrica

Cuernos uterinos

Vejiga

Ovario
Crvix

Imagen de matriz de perra, donde se aprecian sus estructuras anatmicas


Foto cortesa de la Dra. Rosa Ma. Pramo Ramrez del Depto. de Reproduccin Canina
de la FMVZ UNAM

Crvix
Es una estructura que separa al tero de la vagina, protege al tero del exterior
a excepcin de situaciones tales como el parto y el periodo de estro, el lumen
del crvix se llama canal cervical, se encuentra dorsal a la vagina y se halla
limitado por un fondo de saco el cual se llena de semen el cual posteriormente
pasar por el canal cervical al interior de la vagina.
Vagina
La vagina es un rgano tubular fibroso y muscular que se extiende desde el
crvix hasta la vulva de la perra. La vagina est constituida por un epitelio
escamoso estratificado que descansa sobre una capa basal gruesa; este
epitelio es capaz de engrosar de acuerdo a las variaciones que por la
produccin de los estrgenos que se producen en los ovarios lo cual determina
la etapa del ciclo estral.
Vulva
La parte ms externa del aparato urogenital femenino es la vulva, separada de
la cavidad vaginal por un membrana himenal, est situada entre los muslos de
la perra en posicin ms baja que el ano; Tiene la forma de un tringulo
invertido y est formada por un par de labios y una pequea estructura llamada
cltoris, esta se inflama y se pone turgente durante el estro para que pueda ser
utilizada en el acoplamiento durante la cpula.
Otras estructuras importantes para la reproduccin son las glndulas mamarias
o mamas de la perra, dependiendo del tamao de la raza podrn llegar a ser
cuatro o hasta doce, estn colocadas paralelamente a lo largo de la lnea
ventral de la hembra, en la pubertad aumentan de volumen, pero se desarrollan
totalmente durante la primera gestacin. Estn constituidas de un tejido
glandular para producir la leche y desembocan en un pezn

11

4.- CICLO ESTRAL DE LA PERRA


El ciclo estral de la perra (Canis familiaris), a diferencia de otras especies,
presenta caractersticas muy particulares, por ejemplo, tiene un prolongado
ciclo sexual por tener una fase ltea muy larga, ya que hay presencia de
progesterona an en hembras no gestantes, por lo que el diagnstico de
gestacin no requiere de la determinacin de niveles de progesterona est o no
gestante la perra, con pseudogestacin o piometra.
La perra se clasifica como monostrica no estacional, puede tener hasta tres
ovulaciones al ao con intervalos de 4 a 12 meses, el intervalo interestro
promedio es de aproximadamente 7 meses, pudiendo ser muy variables en
perras con ciclos normales de 4.5 a 13 meses o ms. 3, 5 Otra particularidad en
la perra es que al momento de la ovulacin, los ovocitos expulsados, son
inmaduros, no son aptos para ser fertilizados an, ya que requieren pasar por
un proceso de maduracin el cual dura aproximadamente 24 a 48 horas.
La adenohipfisis produce tres hormonas en la reproduccin de la hembra:
FSH (hormona folculo estimulante), LH (hormona luteinizante), y PRL
(prolactina). La funcin principal de FSH es estimular el crecimiento de los
folculos estrales; la LH es necesaria para el proceso ovulatorio y para la
luteinizacin de la granulosa lo que resulta en la formacin del cuerpo lteo. La
PRL es responsable del desarrollo del tejido secretor de la glndula mamaria y
el mantenimiento de la lactacin lo que permite establecer en la hembra el
instinto protector materno, tambin tiene efecto luteotrfico.
La liberacin de FSH y LH est modulada por la GnRH (hormona liberadora de
las gonadotropinas) mediante pulsos de liberacin y existen dos formas de
influenciar su liberacin; una es variar la frecuencia de liberacin de GnRH ya
que es esencial para mantener la liberacin constante de FSH y LH por la
adenohipfisis; la otra forma es modificar la sensibilidad de la adenohipfisis a
GnRH por efecto de los estrgenos y la progesterona. El incremento de las
concentraciones de estrgenos aumenta la sensibilidad a la GnRH y aumenta
la secrecin de gonadotrofinas. La progesterona tiene un efecto opuesto.
La FSH controla la sntesis estrognica de los folculos ovricos y acta sobre
las clulas de la granulosa.
La LH acta sobre la sntesis de estrgenos, ya que controla la produccin de
la molcula esencial precursora (testosterona) por las clulas de la teca interna.
Las acciones de los estrgenos son:
- Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales
- Estimular el crecimiento de los conductos de la glndula mamaria
- Causar actividad secretoria en el oviducto, para favorecer la sobrevivencia del
vulo y el espermatozoide.
- Regular la secrecin de gonadotropinas.

12

- Detener el crecimiento de los huesos largos al iniciar el cierre de la placa


epifisiaria de crecimiento
- Favorecer el metabolismo proteico.
Las acciones de la progesterona, son:
- Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales.
- Estimular el crecimiento lbulo-alveolar de la glndula mamaria.
- Estimular la actividad secretora del oviducto y de las glndulas endometriales.
- Estimular la conducta de estro en la perra, en coordinacin con los estrgenos
- Prevenir la contractibilidad del tero durante la gestacin
- Promueve el cierre del crvix
- Disminuye la inmunidad local
La receptividad sexual en la perra, depende del ovario y sus hormonas. En los
ltimos aos, los eventos endcrinos se han delineado en forma parcial en la
perra. En la actualidad se hacen pruebas radioinmunes para determinar los
niveles sricos de LH, FSH, prolactina, estradiol y progesterona.
En la perra, la progesterona se empieza a producir an antes de ovular, y en la
medida que crecen los folculos.
Cabe sealar que es importante conocer cuando se presenta la pubertad en
esta especie; la pubertad ocurre cuando la tasa ovulatoria alcanza su pico
mximo, lo cual ocurre despus del tercer o cuarto ciclo estral, esta se presenta
cuando el animal ha llegado a un 70 % de su peso adulto; hay que considerar
que las razas de talla pequea son ms precoces que los animales de talla
grande o gigantes; por ejemplo, los animales de raza como el chihuahueo
inicia su actividad reproductiva alrededor del los 8 a 10 meses de edad
mientras que razas grandes como el Gran Dans o el San Bernardo, su
actividad sexual inicia tardamente hacia los dos aos de edad. El ciclo estral
de la perra se divide en cuatro etapas: Proestro, Estro, Diestro y Anestro.
Proestro
Por lo general el proestro tiene una duracin de 3 20 das. En este periodo la
hembra puede atraer al macho pero no acepta ser montada, no es receptiva
para la cruza.2
En esta etapa las estructuras ovricas que caracterizan este estadio, son las
ovogonias que al iniciar la meiosis se comienzan a organizar clulas del
estroma, las cuales darn origen a clulas de tipo escamosos (granulosa) que
rodean al ovocito, formando el folculo primario. 4 (Fig. 3.1)

Fig. 3.1.- Clulas caractersticas de la etapa de


proestro (CVE)

13

Los signos clnicos que se observan en la perra, la vulva se vuelve turgente,


edematizada, y enrojecida, de ella se descarga una secrecin
serosanguinolenta por los labios vulvares, la secrecin sanguinolenta contiene
numerosos eritrocitos que por diapdesis emigran a travs de los capilares
uterinos por efecto de los niveles de estrgenos, producidos por los folculos en
crecimiento. Por eso es importante determinar el tiempo de ovulacin mediante
la citologa vaginal exfoliativa, monitorearla desde el inicio del sangrado y
complementar con la determinacin de los niveles de progesterona srica. 4
(Fig.3.2)

Fig. 3.2.- Vulva edematizada con secrecin


sanguinolenta.

Estro
El estro tiene una duracin aproximada de 3 a 20 das, es el periodo de
receptividad sexual o frtil, contina la secrecin serosanguinolenta aunque
ahora un poco ms clara y en forma ocasional puede persistir hasta el diestro.
Con el inicio de la conducta para la monta, aumentan los niveles de
progesterona y declinan los niveles de estrgenos. Las estructuras ovricas
que se desarrollan son folculos de Graff, los cuales ovulan al inicio de esta
etapa ovocitos primarios o inmaduros, mismos que maduran pasados 2 a 3
das y ya pueden ser fertilizados.
Al observar los signos clnicos vemos que la vulva contina edematizada y
turgente, el sangrado contina, los folculos empiezan a luteinizar antes de la
ovulacin y aumentan los niveles de progesterona.
La ovulacin es espontnea ocurre en los primeros dos das de iniciado el
estro. La ovulacin es causada por un pico de las concentraciones de hormona
luetinizante en plasma (LH), en las perras la ovulacin ocurre dos das despus
del pico de LH y los oocistos permanecen viables dentro del tracto reproductivo
despus de cuatro a cinco das para luego degenerar.
En estudios que se han llevado a cabo recientemente, se ha observado que
aproximadamente un 50% de las hembras ovulan entre los das 9 y 13 de
haber iniciado el celo, y otro 50% de hembras ovulan antes o despus de esos
das, es por eso que si se realizan las cruzas en esos das (9 al 13 da) habr
perras que no queden gestantes o si quedan preadas, sern perras con
camadas pequeas o con pocos cachorros y parirn antes o despus de la
fecha que se esperara.

14

Las citologas vaginales durante el estro contienen clulas superficiales y


clulas de descamacin anucleadas, sin la presencia de neutrfilos an cuando
puede haber gran cantidad de bacterias.
Diestro
Podemos definir al diestro como el periodo entre la ltima aceptacin del
macho para la cruza y el cese de la actividad ltea. El diestro tiene una
duracin de 80 a 100 das en una perra vaca, pero en una perra gestante el
diestro es de 63 + 3das. El diestro se caracteriza en la citologa vaginal por la
presencia de clulas epiteliales intermedias, clulas parabasales, neutrfilos y
algo muy caracterstico en esta etapa es la presencia de neutrfilo
intracitoplasmtico.

5.- CITOLOGA VAGINAL EXFOLIATIVA (CVE)

Eventos endocrinolgicos que ocurren durante las etapas del ciclo estral de la perra

15

La Citologa Vaginal Exfoliativa (CVE) es una tcnica que sirve para determinar
las diferentes etapas del ciclo estral de la perra, adems nos ayuda a
determinar el momento ptimo en que la hembra es frtil y est lista para la
reproduccin.
Durante el ciclo estral de la perra la mucosa cambia de un epitelio bajo,
cuboidal a un epitelio estratificado, queratrinizado escamoso. 3
La CVE se fundamenta en el hecho de que por efecto de los estrgenos
producidos por los folculos ovricos existe engrosamiento de las capas del
epitelio vaginal, lo que produce su descamacin. 3

Fig. 4.1.- Fundamento de la citologa Vaginal Exfoliativa

Coadyuva

a
las
observaciones
detectadas
en
el
comportamiento
de la perra
como es la
aceptacin
del macho; el
aumento de tamao o edematizacin de la vulva, secrecin sanguinolenta a
travs de sta. Estos signos actan de manera sincrnica con la ovulacin, por
lo que para determinar el momento exacto de la ovulacin se requiere del
apoyo de pruebas sanguneas para determinar los niveles de progesterona en
suero.3
Durante el proceso de observacin de la CVE es posible, determinar procesos
infecciosos como piometra y vaginitis, o tumorales como Tumor Venreo
Transmisible (TVT).
Procedimiento
El procedimiento para la realizacin de la CVE permitir la observacin y
evaluacin de los cambios morfolgicos que ocurren en las clulas de
descamacin vaginal como consecuencia del efecto de los estrgenos
producidos por los folculos. 3.

El ciclo estral de la perra se divide en cuatro etapas:


a) Proestro
b) Estro

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c) Diestro
d) Anestro
Proestro
Se observan clulas parabasales que son redondas, bien definidas, con ncleo
central y de tamao uniforme; clulas intermedias de bordes irregulares y
ncleo redondo. Ambos tipos celulares se encuentran agrupados y pueden
observarse eritrocitos. (Fig. 4.2)

Clulas intermedias
Eritrocitos

Fig. 4.2.- Etapa de proestro se observan clulas


intermedias y eritrocitos

Estro
En esta etapa se localizan clulas superficiales, su forma es poligonal, de
citoplasma trasparente y ncleo picntico; clulas anucleadas en forma de
escamas separadas entre s, puede o no observarse eritrocitos. (Fig.4.3).

Clulas anucleadas

Clulas superficiales

Fig.4.3.-Etapa de estro clulas superficiales y anucledas.

Diestro
Se encuentran clulas parabasales e intermedias, neutrfilos y estras de
moco; la caracterstica principal es que se pueden observar neutrfilos
intracitoplasmticos. (fig. 4.4)
Neutrfilos

17

Parabasales
Bacterias

Fig.4.4.-Clulas parabasales e intermedias; aqu se observan


neutrfilos as como bacterias.

Anestro
Se encuentran pocas clulas parabasales, intermedias, superficiales, ncleos
sueltos y moco, aunque en menor nmero. (Fig. 4.5)

Fig.4.5.-se observan ncleos sueltos,


moco, algunas clulas parabasales y
ncleos sueltos.

Clulas anucleadas

18

Clulas intermedias
Clulas superficiales

Clulas intermedias

Eritrocitos

ESTRO
Clulas parabasales

Clulas parabasales

DIESTRO
PROESTRO

Fig. 4.6.- Esquema de las diferentes etapas del ciclo estral.


(Tomado de Manual de prcticas de manejo reproductivo en perros.- Dra. Rosa Ma. Pramo Ramrez y
MPA Juan A. Balczar Snchez)3

Material:
- Guantes
- Algodn hmedo
- Hisopos de algodn con mango flexible de plstico de 15 cm.
- Portaobjetos
- Tincin de Diff-Quick

Fig. 4.7.-Material para realizar Citologa


vaginal exfoliativa

Mtodo:
1.- Sujetar los labios vulvares con el dedo ndice por la parte de atrs de la
vulva, con apoyo de con los dedos pulgar y cordial y se limpian los labios con
algodn humedecido en agua, as como la parte interna del pliegue que se
forma en la parte dorsal, a fin de eliminar la suciedad acumulada. (Fig. 4.8)

19

v
Fig. 4.9.- Modo de sujetar la vulva

Fig. 4.10.- Se verifica el hisopo adherido


Fig. 4.11.- Hisopo sin contaminar

2.- Verificar que el algodn del hisopo est


bien
adherido al mango del mismo, sin contaminarlo. (Figs. 4.10 y 4.11)
3.- Introducir el hisopo deslizndolo sobre el dorso o techo de la vulva para
evitar el meato urinario o la fosa del cltoris y se dirige en direccin vertical o
bien a 90 hasta topar con el cingulum (estructura que provoca que se
abotonen los perros durante el coito), de ah se redirige el hisopo horizontal y
se introduce hasta el interior de la vagina, para realizar tres movimientos
circulares tan amplios como sea posible sin lastimar a la perra. (Fig. 4.12)

Fig. 4.13.-Tomando muestra con hisopo

4.- El hisopo se retira con suavidad de la misma forma en que fue introducido,
se realiza la impronta rodando tres veces el hisopo para imprimir las clulas
exfoliadas
en
la
laminilla. (Fig.- 4.13)

20

Fig. 4.13.- Se realiza la impronta de las clulas


exfoliadas.

En seguida, se utilizan tinciones como Diff-Quick.


Tincin de Diff-Quick
1.- Se sumerge la laminilla en fijador, el cual consiste en una solucin a base
de alcohol al 70%, se introduce y se extrae de inmediato y se seca al aire. (Fig.
3.3)

Fig. 4.14.- Fijacin de la laminilla con


metanol 70 %.

2.- Se sumerge la laminilla en la tincin roja A durante 15 segundos sin


descuidar la superficie de impresin celular en la laminilla.(Fig. 4.15)

Fig. 4.15.- Tincin A roja

3.- Posteriormente se sumerge en tincin azul B durante 15 segundos y se enjuaga en


agua corriente, evitando mojar los

21

Fig. 4.16.- Tincin B azul

4.- Observar al microscopio todo el campo celular de la laminilla.

6.- INSEMINACIN ARTIFICIAL


La inseminacin artificial es una tcnica de reproduccin asistida en perros,
que consiste en depositar el eyaculado en la regin craneal de la vagina 10.
La inseminacin artificial es la tcnica que se ha difundido en la reproduccin
canina, permite brindar asistencia a los animales de alto valor y edad
avanzada, as como proporcionar mayor cobertura a hembras dominantes,
incluso, aquellas que se encuentran a largas distantes, lo que impide el
apareamiento de los animales.11
La inseminacin artificial se puede realizar con semen fresco, refrigerado y
congelado.10, 11
Una vez obtenido el semen, es introducido y depositado en la vagina de la
perra, previa evaluacin del ciclo estral de la perra por medio de CVE, la
determinacin de los niveles sricos de progesterona, as como la evaluacin
del semen colectado, esta ltima es muy recomendable para asegurar la
viabilidad y vitalidad de las clulas espermticas. 3,11, 12
Tipos de inseminacin artificial
Los diferentes tipos de inseminacin artificial corresponden a los siguientes:
-

Intravaginal
Intrauterina
Transcervical
La tcnica de inseminacin artificial intravaginal consiste en colocar el
eyaculado en la parte craneal de la vagina, se utiliza semen fresco o
refrigerado.10
La inseminacin artificial intrauterina se realiza por medio de la tcnica
quirrgica denominada celiotoma y consiste en depositar el eyaculado en el
interior de los cuernos uterinos; en esta tcnica se puede utilizar semen fresco,
refrigerado o congelado.10
La inseminacin artificial transcervical es aquella en la cual se aplica el semen
dentro del tero mediante vaginoscopa o por medio de un catter escandinavo,
se utiliza semen fresco o refrigerado.10

22

En la inseminacin artificial se utiliza la segunda porcin del eyaculado del


perro, es la que posee la mayor cantidad de espermatozoides, es evaluada o,
en su defecto, se conserva a corto plazo mediante la refrigeracin o se
preserva a largo plazo en congelacin. 10, 12
Material para inseminacin artificial: (Fig. 3.6)
1.- Pipeta para inseminacin
2.- Jeringa de 5 ml sin mbolo
3.- Manguera de hule ltex de 0.5 cm

Fig. 3.6.- Material para inseminacin artificial

Mtodo de inseminacin artificial:


Una vez que el semen del perro ha sido extrado y evaluado, la jeringa,
previamente conectada a la pipeta de plstico, se carga con un poco de aire
por medio de la manguera de hule, se toma el volumen total de semen extrado
y se inserta en la parte dorsal de la vulva de la misma forma en que se
introdujo el hisopo para CVE; se introduce el semen en el interior de la vagina y
se levanta a la perra de los miembros plvicos por unos minutos para asegurar
que se llene el fondo de saco vaginal, se da un ligero masaje en el cltoris para
estimular las contracciones vaginales. (Fig. 3.7 y 3.8) 3, 10

23

Fig.- 3.8.-Introduccin de pajilla de


inseminacin artificial

Fig. 3.7.- Elevacin de los miembros


plvicos de la perra

7.- DIAGNSTICO DE GESTACIN


Una vez proporcionada la monta a la hembra, se requiere conocer si ha
quedado gestante; debido a que las etapas de proestro y estro son
prolongadas, que abarcan hasta cuarenta das hace difcil conocer la fecha
exacta de gestacin.3
El diagnstico de gestacin en la perra es de vital importancia porque permite
determinar si hay fallas en la concepcin, valorar con exactitud la viabilidad de
los cachorros en el tero, conocer el nmero de cachorros o, en su defecto
presencia de fetos muertos. Asimismo, ayuda en la deteccin de alguna
distocia y programar la cesrea.
El diagnstico de gestacin se puede realizar por medio de diferentes
mtodos:
-

Palpacin abdominal manual


Deteccin de relaxina plasmtica
Ultrasonografa
Estudio radiogrfico (Rx)

Palpacin abdominal
La palpacin abdominal se puede realizar desde del da 22 al da 28 posterior
a la monta. Se lleva a cabo en abdomen medio y caudal ejerciendo presin
suave en direccin de la regin sublumbar, lo que permite desplazar las
vsceras. 2, 3
Antes de 28 das las vesculas amniticas son difciles de palpar y despus de
los 35 das, se agrandan y se vuelven confluentes lo que las hace difciles de
palpar como entidades individuales. Es difcil palpar perras obesas y tensas.
La palpacin es mal indicador del tamao de la camada. La palpacin no sirve
para evaluar viabilidad de los cachorros.17
Ultrasonido
Esta tcnica se lleva a cabo, desde el da 20 al 35 despus de la ltima monta,
lo que permite revisar la salud del tero y determinar la gestacin normal, o si
existe alguna alteracin como pseudogestacin o piometra.
A los 24 a 30 das son visibles las vesculas amniticas. Despus de los 23 a
30 das se detecta latido cardiaco. El latido cardiaco debe ser mayor a 200
lpm. Despus de 32 a 36 das se ve movimiento. La mineralizacin del
esqueleto se puede visualizar despus de 35 das. La ecografa es el mejor
indicador de viabilidad de los cachorros. Despus de la evaluacin del
movimiento, puede evaluarse el ritmo cardiaco. Un ritmo cardiaco de 150 a 170
lpm indica estrs fetal.17

24

Cuando se desconoce el tiempo de gestacin, se calcula la edad gestacional


mediante las siguientes frmulas: (fig. 3.9).

*2DBP X 15 + 20 = TG + 3 das
*SG X 6 + 20 = TG + 3 das

DBP = 1.5 cm

Fig. 3.9.- Diagnstico de gestacin por


ultrasonido, midiendo dimetro biparietal

De acuerdo con las frmulas mencionadas anteriormente tenemos que:


DBP = 1.5 x 15 + 20 = 42.5 + 3 das
El resultado obtenido es la edad gestacional del (os) cachorros
Estudio radiogrfico
Puede encontrase mineralizacin de los fetos. Las radiografas son tiles al
final de la gestacin, para diagnosticar tamao de la camada, viabilidad del
cachorro.
A los 55 y 60 das de gestacin es importante verificar el nmero exacto de
cachorros en gestacin mediante este estudio, que nos demuestra la viabilidad
y medir el dimetro cfalo-plvico. La Rx es el mejor indicador del tamao de
la camada. Puede haber errores en camadas muy grandes (9 o ms
cachorros). Si el o los cachorros estn muertos, son visibles en la Rx que se
produce por la descomposicin el gas interno, el desmoronamiento de los
crneos y el esqueleto axial.17

Deteccin de relaxina

2 DBP.- Dimetro biparietal; TG.-Tiempo gestacional (Edad); SG.-Saco gestacional.

25

La relaxina estimula la produccin de enzimas colagenolticas, que ablandan el


tejido que rodea a la pelvis y permiten mayor distensin del canal del parto al
nacimiento de los cachorros.
La relaxina es una hormona que es secretada por la placenta de las perras,
aumenta a partir de la implantacin de los fetos en las paredes uterinas los
das 20 a 28 de gestacin. 3,
La relaxina se secreta en mayor cantidad durante el diestro en perras
preadas. Resultado positivo a los 21 das. La relaxina permanece positiva an
despus del parto.17
No hay correlacin entre el tamao de la camada y la viabilidad de los
cachorros in tero y el estudio de la relaxina.
8.- EVALUACIN DEL MACHO
Para lograr xito en la reproduccin, tanto la hembra como el macho deben
tener un estado de salud ptimo (Fig. 4.1). Para el caso del macho, la
evaluacin es rigurosa sobre todo si va a servir como semental. Con
frecuencia son solicitados los servicios del mdico veterinario para realizar la
evaluacin reproductiva de perros, ya sea en criaderos, cuando se va a
realizar la adquisicin de algn semental, o cuando se ha recuperado de
alguna enfermedad y ha pasado por procesos febriles, que afectan la
fertilidad.14

Fig.4.1.- Ejemplar en buenas condiciones de salud.

La evaluacin
del macho se
realiza al menos dos veces al ao, o cuando el macho ha sufrido alguna
enfermedad. La evaluacin del macho es obligatoria cuando ste se va adquirir
y cuando llega a la pubertad (7 a 9 meses)3.
Para determinar si un macho es capaz de reproducirse se realizarn los
exmenes siguientes:
-

Examen clnico general


Examen clnico reproductivo
Evaluacin de comportamiento reproductivo (libido)
Evaluacin del eyaculado

Examen clnico general

26

El examen clnico general debe incluir la bsqueda de enfermedades o


condiciones que sean hereditarias como criptorquidismo o displasia de la
cadera14. Se debe revisar al perro de manera ordenada de craneal a caudal.
-

Cabeza.- Revisar ojos, odos, boca, fosas nasales (Fig. 5.2)


Cuello.- Verificar vrtebras cervicales
Trax.- Evaluar campos pulmonares, funcin cardiaca sea correcta
Columna vertebral.- Vrtebras lumbares y sacro coccgeas (Fig. 5.2)
Miembros torcicos y pelvianos.- Aplomos (fig. 5.3 y 5.4)

Fig. 5.2.-Revisin de boca y fosas


nasales

Fig. 5.3.- Ejemplar en buen estado de


salud

Fig. 5.4.- Revisin de miembros anteriores y


posteriores (aplomos)

Examen clnico reproductivo


Este examen incluye la evaluacin de los genitales del macho.
-

Escroto
Testculos
Epiddimo
Prepucio
Pene
Prstata

27

Fig. 5.5.-Observacin de escroto,


testculos y epiddimo

Fig.- 5.6.-Prepucio cubre a todo lo


largo al pene

Fig. 5.7.- Desenvaine del pene

Fig. 5.8.- Pene desenvainado

Examen de comportamiento sexual (libido)


Una de las partes importantes de la evaluacin del macho es conocer el patrn
de comportamiento sexual que conlleva al apareamiento natural. 2, 3, 14.
El patrn de comportamiento incluye funciones y estmulos que recibe el
animal para responder correctamente ante la hembra en celo, es lo que se
conoce como cortejo y consiste en diferentes funciones del semental.
Funciones del semental
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)

Detectar y olfatear
Dominar
Montar
Desenvainar
Penetrar
Eyacular
Dejar gestante a la hembra

28

Fig. 5.9.-Funciones del semental

Estas actividades de comportamiento dependen de la libido del semental, es


decir, de su grado de deseo sexual; sin embargo, pueden alterarse por
situaciones como las que a continuacin se mencionan.
-

Aburrimiento
Cansancio
Estrs
Dominancia jerrquica
Maltrato
Falta de familiarizacin con el manejador
Inexperiencia
Preferencia

8.- COLECCIN Y EVALUACIN DEL EYACULADO


Se deben tomar en cuenta ciertas consideraciones antes de realizar la
recoleccin de semen para su evaluacin, en el sentido de saber cundo se
realiz la ltima recoleccin de semen, as como posibles apareamientos o
servicios y eyaculaciones, ya que esto podra afectar los resultados de la
evaluacin del eyaculado.3,14 En animales que se utilicen con frecuencia para la
reproduccin, el semen se recolecta y se evala para la inseminacin artificial;
refrigerar o congelar para almacenarlo por tiempo indeterminado.
El eyaculado o la fraccin rica en espermatozoides se caracteriza en trminos
de volumen, color, motilidad, pH, concentracin espermtica y anormalidades. 3,
6,14
(cuadro)

Cantidad

2 30 ml

Color

Blanco lechoso

pH

6.3 a 7.1

Concentracin

>De 100 mill/ml

Anormalidades

> 80% normales

29

Cuadro 1.-Valores normales del eyaculado del perro.


Las caractersticas macroscpicas que se evalan en el eyaculado son 6:
-

Volumen
Color
pH

Caractersticas microscpicas6:
-

Motilidad
Concentracin
Anormalidades
Vivos y muertos

Material y mtodo para coleccin y evaluacin del eyaculado (Fig. 5.1)

1
2
5
3
4

Fig.6.1.- Material para coleccin de


semen.

1.- Cono de hule ltex


- 2.- Tubo de vidrio
- 3.- Guantes
- 4.- Laminillas portaobjetos y cubreobjetos
- 5.- Pipeta Pasteur
Tcnica de coleccin de semen
1.- Estimular al perro mediante la interaccin con una perra en celo, (tambin
se evala vista y olfato).

30

2.- Se localiza el bulbo peneano y se realiza un masaje rpido y firme sobre el


prepucio, se desliza atrs del bulbo peneano hasta desenvainar
completamente el pene, se inserta dentro del cono de ltex y se continan los
movimientos de masaje hasta que se obtiene una ereccin firme.
3.- Se rota el pene hacia la parte posterior del perro pasando la extremidad
posterior sobre el brazo del manejador, se observa la salida de la primera
fraccin del eyaculado, que es trasparente y corresponde a la secrecin de la
prstata. Luego de seguir estimulando se observa la segunda fraccin del
eyaculado, que corresponde a la fraccin rica en espermatozoides. (fig. 6.2)

Fig- 6.2.- Obtencin de semen.

4.- Se deja de estimular al perro, se toma una gota de semen para observar al
microscopio, la motilidad en su conjunto y la movilidad individual, que debe ser
uniforme y progresiva.3 (Fig. 6.3)

Fig. 6.3.- Observacin macro y microscpica del eyaculado

Concentracin de semen6.
Material y mtodos
-

Pipeta de dilucin
Cmara de conteo
Solucin Fucsina-formalina 5%

Mtodo:
1.- Homogenizar el eyaculado.

31

2.- Se toma el volumen de semen con la pipeta, luego tomar el diluyente con la
misma, de tal forma que se obtenga una dilucin 1:100.
3.- Se llenan las dos camaritas de la cmara de Neubauer.
4.- En el microscopio contar los espermatozoides que se ubican en los cuadros
de las esquinas y el cuadro que se encuentra al centro, de tal manera se
involucran cinco cuadros en los que se cuentan los espermatozoides, se
suman y se promedian, el resultado es igual a X 10 6 , que se relaciona con la
concentracin. Para obtener el nmero total de espermatozoides del eyaculado
se multiplica por el volumen total obtenido.6, 14

Fig.- . 6.4.-Se cuentan los espermatozoides que se


encuentran en los cuadros marcados con rojo.

Anormalidades, vivos y muertos


Para observar espermatozoides vivos, muertos y las anormalidades que
existan en el eyaculado, se tie un frotis con tincin Eosina Nigrosina.
Se coloca una gota de semen en la laminilla, se le agrega una gota de la
tincin Eosina Nigrosina, se mezclan de manera que se homogenicen y, en
otra laminilla, se realiza el frotis. Al microscopio se realiza el conteo de
espermatozoides vivos, muertos y las anormalidades hasta tener un conteo de
100 espermatozoides. Los espermatozoides teidos con Eosina Nigrosina
son espermatozoides muertos y los que no se tien son clulas vivas. 3, 14
Las anormalidades se clasifican en:
a) Primarias
b) Secundarias
Las anormalidades primarias se deben a defectos durante la
espermatognesis y las anormalidades secundarias son relacionadas con el
transporte y el manejo. El total de las anormalidades no debe ser mayor del
15% y el nmero de espermatozoides muertos no debe rebasar el 5%. 3, 14
Anormalidades primarias
-

Macrocefalia

32

Microcefalia
Cabeza doble
Colas dobles
Gota citoplasmtica proximal

Anormalidades secundarias
-

Colas dobles
Colas enrolladas
Cabezas sueltas
Colas sueltas y gota citoplasmtica distal

10.- MANEJO DE SEMEN REFRIGERADO Y CONGELADO


La criopreservacin permite la disponibilidad del semen tiempo despus de
haber sido recolectado, manteniendo la viabilidad de los espermatozoides.
Ventajas
-

Transportar semen de un lugar a otro


Se obtiene una mayor cobertura de hembras con un solo eyaculado
Se conserva semen de animales muertos
Es posible realizar preservacin gentica de la especie
Control de enfermedades transmisibles de la hembra al macho
Prevenir enfermedades como brucelosis y TVT

Desventajas
-

El procedimiento es de un alto costo


Se requiere material especfico
El personal requiere ser capacitado

Para transporte, lo ms conveniente ser conservarlo bajo condiciones de


refrigeracin (4C), de esta manera el semen puede ser preservado entre dos
a cuatro das.3
Cuando se quiere conservar por un periodo prolongado, se procede a efectuar
la congelacin a una temperatura de hasta -179C. 6, 7
Para proteger de los daos causados por los cambios de temperatura se
utilizan diluyentes de semen que protegen las membranas espermticas, les
proveen de energa, estabilizan su pH y la presin osmtica. 7

Diluyentes para semen refrigerado


El diluyente debe tener las siguientes caractersticas
-

Fuente de nutrientes
Amortiguador (buffer)
Agente antimicrobiano
Que contenga glicerol6

33

Tipos de diluyentes
-

Lactosa
Lactosa yema de huevo
Leche descremada
TRIS - yema de huevo

Se utiliza principalmente leche ultrapasteurizada, descremada o light, pero


tambin se puede utilizar yema de huevo, sta en particular protege al
espermatozoide del choque de fro debido a que aporta fosfolpidos y protenas
de baja densidad.3, 7
Diluyentes para semen congelado
Prcticamente los diluyentes para semen lquido o congelado contienen:
-

Yema de huevo y leche como componentes bsicos y como nutrientes


Lactosa que mantiene la presin osmtica, aporta energa, es protector
de membrana.
Glicerol como protector contra choque hipotrmico, con accin
deshidratante de los espermatozoides
Vitamina E y cido ctrico como antioxidantes

Mtodo de refrigeracin
1.- Colectar el semen y mantenerlo a 37C
2.- Evaluar el eyaculado
3.- Diluir 1:1 (leche descremada)
4.- Se introduce al refrigerador a 4C para bajar la temperatura del semen
5.- Se mantiene hasta el momento de su utilizacin (viable 72 hrs), cuando se
vuelve a calentar a 37 C
Frmula para calcular el nmero de pajillas que se pueden obtener de un
eyaculado:
Una vez que el semen ha adquirido las condiciones para ser congelado se
procede a realizar el clculo para determinar el nmero de pajillas que sern
las dosis exactas para inseminar, las cuales se congelarn en nitrgeno lquido
a una temperatura de -179C.

Nmero de pajillas = (% mov.)([ ])(%norm)(%vivos)((Vol. ml.)


[ ] deseada
* [ ] = concentracin
Volumen total = (#pajillas) (Vol. pajilla)
Volumen diluyente = Vol. total Vol. espermatozoides

34

Mtodo Congelacin de semen


1.- Evaluacin de movilidad (70%) de semen al microscopio ptico
2.- Centrifugar y eliminar el sobrenadante
3.- Reconstituir 1:1 (diluyente sin glicerol)
4.- Observar viabilidad al microscopio ptico
5.- Refrigerar a 4C por 30 minutos con camisa de agua
6.- Continuar realizando 4 pases con intervalos de 30 minutos entre cada uno,
con el uso de glicerol a concentraciones de 0.6, 0.9, 1, 1.5 mililitros.
7.- Observar viabilidad en cada pase
8.- Congelar en una hielera con una gradilla a - 79C
9.- Introducir a congelacin en nitrgeno lquido a -196C

11.- BIBLIOGRAFA
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35

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