Actvidad bactericida de la curcumina, imipenem y colistina contra cultivos de

pseudomonas aeruginosa
Bactericidal activity of curcumin, imipenem and colistin against
pseudomonas aeruginosa cultures

Actvidad bactericida de la curcumina, imipenem y colistina contra cultivos de

pseudomonas aeruginosa
Bactericidal activity of curcumin, imipenem and colistin against
pseudomonas aeruginosa cultures
Autores:
Tapia, Allison1,2; Tasayco, Junior1,2; Tellez, Walter

1,2

; Torres, Belen1,2; Ubaqui,

Liz1,2; Vsquez, Jos1,2; Vega Gomez, Yolverth1,2; Vega Laura, Sharon1,2; Vega
Obregon, Milagros1,2; Ventura, Wilder1,2; Vilca, Geaninna1,2; Vizcardo,
Ronald1,2; Yaya, Ines1,2
Asesor:
Dr. Pinto2
Filiacion institucional:
1

Estudiante de medicina de la faculta de medicina Hiplito Unanue

Laboratorio de microbiologia de la facultad de medicina Hiplito Unanue

Financiamiento: Autofinanciado

Planteamiento del problema:

Las infecciones nosocomiales (infecciones por bacilos Gram negativos del tipo de las
entero bacterias y bacilos Gram negativos no fermentadores como Pseudomona
aeruginosa) son un problema frecuente en Unidades de Cuidados Intensivos y se asocian
a un incremento de la mortalidad, elevan los costos de atencin y afectan la calidad de
vida del individuo durante su recuperacin. Por ello se necesita realizar un diagnstico
temprano y como consecuencia, tratamiento oportuno especfico de enfermedades
infecciosas y as evitar aparicin de bacterias resistentes al efecto de antibiticos.
El problema de investigacin en que nos enfocamos nos permite poder determinar cual
sera ese tratamiento oportuno entre la curcumina o medicamentos de primera lnea
imipenem o colistina, ya que la aparicin de P. aeruginosa multirresistente (MDR)
reduce el nmero de opciones teraputicas, triplica la mortalidad en pacientes de terapia
intensiva y duplica los das de estancia hospitalaria
Formulacion del problema de investigacin:
La curcumina tiene mejor actividad bactericida frente a el imipenem y la colistina en
un estudio in vitro contra la Pseudomona aeruginosa 2015?
justificacin y usos de los resultados:
Pseudomona aeruginosa se ha convertido en el origen de variadas infecciones
nosocomiales en ambientes hospitalarios, especialmente en pacientes con mecanismos
de defensa comprometida. Esta bacteria al ser capaz de producir la enzima MBL
(metalo--lactamasa) y al bomba de salida, las cual le permite resistir prcticamente a
todo

tipo

de

antibiticos.

Por

ello

el

resurgimiento

de

antimicrobianos

antipseudomnicos como la colistina, el cual ha demostrado ser eficaz en infecciones

por Pseudomonas aeruginosa multidrogorresistente (PMDR). A si como se tiene al
imipenem el cual posee una alta sensibilidad y la bacteria tiene una baja resistencia a
este antibitico. Por lo que se busca un tratamiento alternativo mediante el uso de la
curcumina, un extracto natural derivado de rizomas de la planta Curcuma longa
(Zingiberaceae) cultivadas en regiones de la India y el sudeste asitico. Se ha
demostrado que posee in vitro potencial propiedad anti-microbiana contra una amplia
gama de microorganismos incluyendo hongos , as como varias bacterias Grampositivas y Gram-negativas. Segn estudio indica la propiedad de inhibir las bombas de
salida lo cual permite la reduccin de la mnima concentracin inhibitoria (MIC). Lo
cual indica el uso potencial de la curcumina como un complemento a los
antimicrobianos en el tratamiento de la infeccin bacteriana resistente a los
medicamentos por lo que el presente estudio busca evitar el aumento de la resistencia de
esta bacteria con la ayuda de la curcumina, favoreciendo a los pacientes que estn en la
unidad de cuidados intensivos , ya que son ms susceptibles a infecciones con esta
bacteria oportunista.
Fundamento terico:
Las bacterias del genero Pseudomonas son microorganismos de distribucio ubicua en
nuestro planeta, encontrndose en tierra, materia organica, vegetales y agua. Estas
bacterias son gram negativos, mviles rectos y ligeramente curvados 1. La especie ms
importante desde el punto de vista mdico es la Pseudomonas aeruginosa. La
importancia de esta especie de Pseudomonas se debe a que es la responsable de muchos
de los casos de infecciones nosocomiales2. Asi tambin se ha apreciado su resistencia
intrnseca a diversas clases de antibiticos 2, por lo cual su tratamiento es muy difcil. En
la actualidad, se estn llevando a cabo diversos estudios para combatir la resistencia de

diversos microorganismos a las terapias antibiticas incluyendo estudios para combatir

la resistencia bacteriana de la Pseudomonas aeruginosa. Estas investigaciones evalan
diversas sustancias antibiticas de las cuales las mas estudiadas ltimamente son la
colistina y el imipenem. La colistina es un antimicrobiano que fue descubierto en 1949
y fue dejado de usar ampliamente en 1980; sin embargo, debido al aumento de la
resistencia de los microorganismos hacia los carbapenmicos y a la poca resistencia
conferida internacionalmente hacia la colistina por parte de los microorganismos, se esta
volviendo a estudiar su uso ante infecciones con bacterias multidrogoresistentes
(MDR)3. Con respecto al imipenem, este es un carbapenmico que muestra segn
ltimos estudios gran poder bactericida sobre la pseudomonas aeruginosa 4. Estas dos
sustancias mencionadas anteriormente son sintticas y tienes ciertos efectos adversos
indeseables por cualquier paciente. Por lo tanto, se esta buscando alternativas
antibiticas libre de resistencia y con menos cantidad de efectos adversos. La
curcumina, uno de los principales curcuminoides que contiene la crcuma, un rizoma de
origen indio, el cual tiene actividad antibacteriana, antifungica, antiviral, entre otros 5;
este compuesto fue descubierto ya hace dos siglos 6;sin embargo, las investigaciones del
mismo con respecto a sus propiedades ante los problemas de salud de la actualidad es
muy reciente.
Hiptesis

Hiptesis alterna:
La curcumina tiene actividad bactericida con sensibilidad para pseudomona
aeruginosa comparado con la colistina e imipenem en un estudio in vitro
realizado en el laboratorio de microbiologa de la Universidad Nacional Federico
Villareal en el 2015.

Hiptesis nula:
La curcumina no tiene actividad bactericida con sensibilidad para pseudomona
aeruginosa comparado con la colistina e imipenem en un estudio in vitro
realizado en el laboratorio de microbiologa de la Universidad Nacional Federico

Villareal en el 2015.
Objetivo general:

Determinar si la curcumina tiene actividad bactericida con sensibilidad para

pseudomona aeruginosa comparado con la colistina e imipenem en un estudio in
vitro.

Objetivos especficos:

Reconocer si la curcumina tiene actividad bactericida con sensibilidad para

pseudomona aeruginosa.

Identificar si la curcumina tiene igual actividad bactericida comparado con la

colistina contar la pseudomona aeruginosa.

Identificar si la curcumina tiene mejor actividad bactericida comparado con la

colistina contar la pseudomona aeruginosa.

Determinar si la curcumina es mejor que el imipenem

Metodologia:
Tipo y diseo general de estudio.
a)

Ocurrencia de los hechos: Prospectivo.

b)
c)

Acopio de informacin: Longitudinal.

Por el anlisis y el alcance de los datos: Cuantitativo, con aleatorizacin,
experimental puro.

Poblacin de estudio, seleccin y tamao de muestra, unidad de anlisis y observacin:

El presente trabajo tendr como poblacin de estudio a las cepas MDR de Pseudomonas
aeruginosa presentes en el Hospital Nacional Hiplito Unanue. La seleccin y tamao de la
muestra se realizar de acuerdo a la aplicacin de la siguiente formula:
2

n=

n=

(Z 1 + Z 1 ) x(S 1+ S 2)
2

( x 1x 2 )

7.84 x (0.16+ 0.0529)

0.0676

n=24.69136
Por lo tanto, se usaran 25 placas Petri para cultivo de Pseumonas aeruginosa por cada grupo de
estudio.

CRITERIOS DE INCLUSION Y EXCLUSION:

Criterios de inclusion:
-

Ser Cepa de Pseudomona Aureginosa.

Cultivo de Pseudomna Aureginosa no contaminada.

El cultivo debe tener el tamao adecuado para la realizacin del experimento.

Criterios de exclusion:
-

No se cepa de Pseudomona Aureginosa; es decir ser puede ser cepa de Pseudoma

flurescens, putida, mallei, stutseri, malthophilia, etc.

Cuando el cultivo de pseudomona auroginosa est contaminada.

El cultivo que no tiene el tamao adecuado para la realizacin de experimento.

Intervencin propuesta:

Primero, se proceder a realizar el sembrado en cada una de las placas Petri de cada
grupo propuesto para luego aplicar inmediatamente despus de dicho sembrado el disco
de inhibicin. Los grupos se dispondrn de la siguiente manera y solo uno de los
miembros del equipo de investigacin sabr que se le administra a cada placa Petri.

Grupo 1 (25 placas petri): grupo experimental 1 (sin administracin de

antimicrobianos)

Grupo 2 (25 placas petri): grupo experimental 2 (con administracin de

colistina)

Grupo 3 (25 placas petri): grupo experimental 3 (con administracin de

imipenem)

Grupo 4 (25 placas petri): grupo experimental 4 (con administracin de

curcumina)

Grupo 1: grupo control, a este grupo solo se administrar discos de inhibicin sin
ningn antimicrobiano inmediatamente despus del sembrado por agotamiento en agar
Mueller Hinton, y luego ser incubado a 37C por 24 horas.
Grupo 2: grupo colistina, a este grupo se le administrar discos de inhibicin
conteniendo colistina inmediatamente despus del sembrado por agotamiento en agar
Mueller Hinton, y luego ser incubado 37C por 24 horas.
Grupo 3: grupo imipenem, a este grupo se le administrar discos de inhibicin
conteniendo imipenem inmediatamente despus del sembrado por agotamiento en agar
Mueller Hinton, y luego ser incubado 37C por 24 horas.
Grupo 4: grupo curcumina, a este grupo se le administrar discos de inhibicin
conteniendo curcumina inmediatamente despus del sembrado por agotamiento en agar
Mueller Hinton, y luego ser incubado 37C por 24 horas.

Definiciones operacionales:

Procedimientos para la recoleccin de informacin, instrumentos a utilizar y

mtodos para el control de calidad de datos:
Para la recoleccin de informacin de los grupos propuestos en el presente trabajo se
proceder a medir el dimetro del halo de inhibicin con un pie de rey o vernier luego
de haber pasado las 24 horas de incubacin, procedimiento que ser realizado en cada
placa Petri de cada grupo de estudio. As mismo se empleara el mtodo del Epsilon test
para determinar la concentracin inhibitoria mnima [7].
Los instrumentos de a utilizar son placas Petri, incubadoras, esterilizadoras, sistemas de
autoclave, distintos agares, vernier, cepas de Pseudomonas aeruginosa, entre otros.

Para el control de la calidad se utilizaran cepas control para supervisar la exactitud y

fiabilidad de la metodologa empleada. La cepa control para dicho fin ser la cepa
ATCC 29212 que es la cepa mas usada para supervisar ensayos de antibiticos [7]. As
como tambin se empleara MacFarland 0.5 para el control del inoculo [7].
Mtodos y modelos de anlisis de datos:
En el trabajo de investigacin utilizaremos el clculo de coeficiente de cramer ya que mide la
relacin entre dos o ms variables., se necesita tener calculado el dato estadstico de chi
cuadrado y para finalizar se elaboran los cuadros estadsticos y as presentar de la forma ms
clara los resultados obtenidos.

Limitaciones:
Las limitaciones son que el presente estudio es in vitro siendo recomendable que se
evalue dicho poder bactericida de todos los antimicrobianos estudiado en este trabajo
pero esta vez in vivo.
Referencias:
1. Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiologia mdica. 7a edicin. Travessera
de Gracia,17-21 08021 Barcelona, Espaa; 2014.
2. Lujn D. Pseudomonas aeruginosa: Un adversario peligroso. Acta Bioqum Cln
Latinoam. 2014; 48(4): 465-74
3. Hart M. Colistina, el resurgir de un antimicrobiano. Revista Cubana de
Medicina. 2014; 53(2): 237-238.
4. Ghamgosha M, Shahrekizahedani S, Kafilzadeh F, Bameri Z, Taheri R, Farnoosh
G. Metallo-beta-Lactamase VIM-1, SPM-1, and IMP-1 Genes Among Clinical
Pseudomonas aeruginosa Species Isolated in Zahedan, Iran. Jundishapur J
Microbiol. 2015 Abr 18; 8(4): e17489.

5. Moghadamtousi S, Kadir H, Hassandarvish P, Tajik H, Abubakar S, Zandi K. A

Review on Antibacterial, Antiviral and Antifungal Activity of Curcimin. BioMed
Reaserch International. 2014 abr 29. Volumen 2014; ID del artculo 186864: 112.
6. Gupta S, Patchva S, Koh W, Aggarwal B. Discovery of Curcumin, a Component
of the Golden Spice, and its Miraculous Biological Activities. 2012 Mar; 39(3):
283-299.
7. Sociedad Espaola de Enfermedades Infecciosas y Microbiologa Clnica.
Procedimientos en Microbiologa Clnica. Mtodos bsicos para el estudio de la
sensibilidad a los antimicrobianos.