MTODO DE ENSAYO PARA LA DETERMINACIN

CUANTITATIVA DEL FSFORO

Mtodo espectrofotomtrico del fsfomolibdovanadato
1. ALCANCE: Este mtodo es aplicable a suelos (opcional), roca fosfrica,
fertilizantes o abonos orgnicos e inorgnicos en todas sus presentaciones.

1.1.

Principio del mtodo: Determina la cantidad de fsforo proveniente de

todos los compuestos fosfatados, tanto orgnicos como inorgnicos
presentes, reaccionando con el molibdovanadato y formando complejos
coloreados que absorben a una longitud de onda de 400 nm. La
absorbancia de esta solucin es proporcional a la concentracin de
fsforo presente en la muestra.

2. REACTIVOS NECESARIOS

cido clorhdrico (HCl) concentrado 35 % - 37 %

cido ntrico (HNO3) concentrado 65 %

Reactivo de Molibdovanadato.

Solucin estndar de 2 mg de fsforo/cm 3

Solucin estndar de trabajo de 0,1 mg de fsforo/cm 3.

3.

MATERIALES Y EQUIPOS
Matraces aforados 250 y 100 ml
Pipetas aforadas
Papel filtro
Embudos
Equipos de digestin
Espectrofotmetro equipado con celda de 10 nm (1 cm)
Equipo de filtracin
Material usual de laboratorio

4. PROCEDIMIENTO
4.1.

Preparacin de la curva estndar:

Se transfieren alcuotas de la solucin estndar de trabajo que contenga 0,5 mg P,

0,8 mg P, 1 mg P y 1,5 mg P en un matraz aforado de 100 cm 3. Se adicionan 20
cm3 de reactivo molibdovanadato a cada uno y se diluye hasta volumen con agua
mezclando bien. Se deja en reposo por 10 minutos para que desarrolle el color,
luego se lee % A a 400 nm contra 100 % T o le que es correspondiente a 0 % de
Absorbancia, tomando como cero el valor de 0,5 mg de estndar. Se prepara la
curva estndar graficando miligramos de P contra absorbancia (%A) en papel
semilogartmico.
4.2.

Determinacin:

Se pesa cerca de 1 gramo de muestra y se somete a digestin adicionando 40 cm 3

de HCl 1:3 y varias gotas de cido ntrico HNO 3; se lleva hasta ebullicin. Se
enfra, se transfiere a un matraz aforado de 250 cm 3 y se diluye hasta volumen con
agua. Se filtra y se coloca una alcuota que contenga entre 0,5 mg a 1,5 mg de
fsforo en un matraz aforado de 100 cm 3. Se adicionan 20 cm 3 de reactivo
molibdovanadato, se diluye hasta volumen con agua y se mezcla bien. Se deja en
reposo por 10 minutos para que desarrolle color y luego se lee % T a 400 nm
contra 100 % T fijada en 0,5 mg de estndar; o se lee la absorbancia, tomando
como cero el valor de 0,5 mg de estndar de la misma forma que en los
estndares de fosfato, ajustando el cero (0) con el estndar de 5 mg. Se lee la
concentracin de P en la curva. Cuando se tengan varias series, se cuadra el cero
(0) con el estndar de 5 mg antes de cada lectura.

5. DATOS
Tipo de Muestra: Roca Fosfrica
Nmero de muestra: 257
M=

Peso de muestra = 1,0121 gramos

Fd = Factor de dilucin = 250 ml.

Va = Volumen de alcuota = 2,0 ml

Concentracin de
fosforo (ppm)
0,5
0,8
1,0
1,5

Absorbancias (AU)
Muestra 257
0,000
0,221
0,360
0,696

6. CALCULOS
Clculo de los miligramos de fsforo en la alcuota

Dnde:
m = pendiente
Abs = Absorbancia leda de la muestra.
b = Intercepto
El factor de correlacin R debe ser cercano a 1.
m = pendiente = 1,3821
b = Intercepto = 0,4953
R = factor de correlacin = 0,9998
Abs = Absorbancia leda de la muestra = 0,198

Reemplazando los datos de la muestra 257 en la formula anterior:

mg de FOSFORO (P) = (m * Abs) + b
mg de FOSFORO (P) = (1,4408 * 0,198) + 0,4900
mg de FOSFORO (P) = 0,6846 = Y

Frmula para calcular Fsforo Total:

Y = mg de FOSFORO (P) en la Alcuota obtenidos del grfico.

Fd = Factor de dilucin.
M = Peso de muestra
Va = Volumen de alcuota
Luego aplique la formula y reemplace en:
%P= (Y*Fd*100) / (M*Va*1000)
Grfica: curva de calibracin Absorbancia vs. mg de P2O5

IMGENES DE LA DETERMINACIN DE FOSFORO Deben hacerla segn los

calculos.

Podemos observar que entre mayor sea su tramitansia (color mas debil) menor
sera su adsorvancia (color mas intenso) y visceversa permitiendonos inferir
que si los contenidos de fosforo son muy elevados en una muestra cualquiera
su adsorvancia sera alta y ligado a esto se presentara una acumulacion de
energia. Es dicer, Cuando una molecula absorve un foton aumenta su energia
interna provocando que sea inestable, ocasionandole que tenga que liberar su
energia sobrante, permitiendole asi regresar a su estado inicial que es mucho
mas estable. Se denomina estado inicial o estado fundamental y su estado
mas energetico se conoce como estado excitado. La absorcion de radiacion
conduce a un paso del estado fundamental a excitado (excitacin) y en el
contrario llamado (relajacion) presenta una liberacion de energia ya sea en
forma de calor o en forma de radiacion electromagnetica que es la que se le
fue aplicada al inicio del proceso.
http://www.bioquimica.ucv.cl/paginas/central/bioquimica%20clinica/apuntes
%20de%20espectrofotometria.pdf