LIEBERMANN-BURCHARD

La prueba se realiza con muestras disueltas en cloroformo o diclorometano

nicamente.
Al adicionar el cido sulfrico hacerlo en la campana de extraccin. La reaccin libera
calor, utilizar pinzas para tubo de ensayo. Si la solucin o el tubo de ensayo no estn
completamente secos pueden generarse salpicaduras.

PROCEDIMIENTO:
1) Tomar 0.5 ml de solucin clorofrmica anhidra en un tubo de ensayo limpio y
seco.
2) Aadir 0.5 ml de anhdrido actico.
3) Aadir cuidadosamente por la pared del tubo, una gota de cido sulfrico
concentrado.
4) Observar y anotar los cambios de coloracin.

Se considera positiva la prueba cuando aparecen coloraciones violetas, verde o azul.

Prueba tomada de la tesis Contribucin al estudio fitoqumico y determinacin de la accin
antimicrobiana de Senecio candidissimus:

PROCEDIMIENTO:
1) Se disuelven 1.5 mg de muestra en cloroformo.
2) Aadir unas gotas del reactivo, observndose cambios de coloracin.

El reactivo se prepara agregando una gota de cido sulfrico a la mezcla de 1 ml de

anhdrido actico y 1 ml de cloroformo.

CARR PRICE

PROCEDIMIENTO:
1) Tomar 5 ml de la alcuota.
2) Adicionar en gotas un volumen mximo de 0.5 ml del reactivo de Carr Price.

El reactivo se prepara disolviendo 22.5 g de tricloruro de antimonio en 100 ml de

cloroformo, almacenar a temperatura ambiente en oscuridad. Filtrar antes de su uso.
3) La precipitacin del reactivo indica la presencia de carotenoides.

MAYER

PROCEDIMIENTO:

El reactivo de Mayer se prepara:

1) Disolver 1.3 g de bicloruro de mercurio en 60 ml de agua.
2) Aadir 5 g de yoduro de potasio.
3) Aforar a 100 ml.

Los alcaloides se detectan como un precipitado blanco o color crema soluble en cido
actico y etanol.

DRAGENDORFF
Todos los ensayos deben hacerse siempre con la muestra disuelta o redisuelta en HCl
5% acuoso.
La solucin acuosa cida debe estar libre de turbidez y precipitados antes de hacer
los ensayos para alcaloides.
Luego de realizados los ensayos, se deben desechar las muestras en un frasco
dispuesto para ello en el laboratorio, esto con el fin de no contaminar el ambiente
con metales pesados.

PROCEDIMIENTO:
1) Tomar 0.5 ml de solucin cida en un tubo de ensayo.
2) Aadir una gota de reactivo.
3) La prueba es positiva cuando se observa precipitado rojo, naranja o marrn,
persistente por 24 horas.

Para preparar el reactivo:

Solucin A: 0.85 g de nitrato de bismuto disuelto en una mezcla de 10 ml de cido actico
glacial y 40 ml de agua.
Solucin B: Disolver 8 g de yoduro de potasio en 20 ml de agua.
Mezclar 5 ml de solucin A con 5 ml de solucin B. Aforar a 100 ml con agua
destilada.

Prueba tomada de la tesis Contribucin al estudio fitoqumico y determinacin de la accin

antimicrobiana de Senecio candidissimus:
Modificacin de Munier y Machelobuf. Para alcaloides.

PROCEDIMIENTO:

Solucin A: Se disuelven 0.85 g de nitrato de bismuto, en una mezcla de 10 ml de cido

actico glacial y 40 ml de agua.
Solucin B: Se disuelven 8 g de yoduro de potasio en 20 ml de agua.
El reactivo se prepara mezclando 5 ml de solucin A, 4 ml de solucin B y 100 ml de
agua.
El reactivo es estable por un ao, la prueba es positiva para alcaloides al dar la placa
coloraciones rojas o naranjas, persistentes por 24 horas.

SHINODA
Antes de realizar el ensayo, si se trata de muestras que contienen demasiada
clorofila, estas se deben eliminar precipitndolas con acetato de plomo en solucin.
Si la muestra est en solucin clorofrmica o diclorometnica, se debe evaporar para
eliminar el solvente y redisolverla en 1 ml de alcohol.
Realizar la prueba en la campana de extraccin de gases y sujetando el tubo de
ensayo con una pinza.

PROCEDIMIENTO:
1) Tomar 1 ml de solucin en un tubo de ensayo limpio.
2) Aadir algunas limaduras de Mg sujetar el tubo con una pinza.
3) Aadir cuidadosamente por la pared del tubo unas gotas de HCl concentrado
(37%).

La aparicin de coloraciones naranja a violeta es prueba positiva para la presencia de

flavonoides.
Concentrar a sequedad, extraccin con 150 ml de HCl a 1% a 50 C. Filtrar sobre celita.
Prueba tomada de la tesis Contribucin al estudio fitoqumico y determinacin de la accin
antimicrobiana de Senecio candidissimus:
La prueba es para compuestos de tipo flavonoide.

PROCEDIMIENTO:
1) A 1 mg de muestra disuelta en etanol y con limaduras de magnesio se le aplica
calor (60 C).
2) Aadir unas gotas de HCl por las paredes.

Se considera positiva con la aparicin de coloraciones naranja, rojo, rosa, azul y violeta.