IDENTIFICACIN DE HEMBRAS CANINAS DOMSTICAS EN ESTRO

MEDIANTE LA OBSERVACIN DE CRISTALIZACIN DE LA SALIVA

COMO MTODO DIAGNSTICO COMPLEMENTARIO COMPARADO
CON CITOLOGIA VAGINAL

FRANCISCO ESTEBAN NARVEZ ORTIZ

UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TRABAJO DE INVESTIGACIN ESTRUCTURADO DE MANERA

INDEPENDIENTE COMO PRERREQUISITO PARA OBTENER EL TTULO
DE MDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

AMBATO ECUADOR

2015

RESUMEN EJECUTIVO

El trabajo de investigacin denominado, Identificacin de hembras caninas domsticas

en estro mediante la observacin de cristalizacin de la saliva como mtodo
diagnstico complementario comparado con citologa vaginal se realiz en las
instalaciones del Hospital Clnico Veterinario Chile y la Clnica Veterinaria Vida
Animal ubicadas en el sector centro norte de la ciudad de Ambato obteniendo los
siguientes resultados luego de haber tomado y comparado muestras de citologa
vaginal y cristalizacin de saliva obtenidas de 30 hembras caninas que se presentaron
a la consulta por motivos relacionados a la presentacin de celo.
Se utiliz el anlisis estadstico de t mediante el cual se pudo comparar si existe
diferencia entre los dos mtodos utilizados, se obtuvieron muestras de 30 hembras
caninas de diferentes razas y edades pero que se encuentren dentro de los parmetros
fisiolgicos normales.
Se tomaron 3 muestras con un intervalo de 1 da entre muestra y muestra, la prueba
estadstica de t realizada para la primera muestra, determina que no existe diferencia
significativa entre los dos mtodos utilizados ya que el valor estadstico de t, 1.40 se
encuentra dentro del rango dado por el valor crtico de t que es de -2.04 y 2.04; para la
muestra nmero 2 realizada el 3er da se obtiene un resultado similar con un valor
estadstico de t de 1,43 que se encuentra dentro del rango marcado por el valor critico
de t que igualmente es de -2.04 y 2.04, mientras que para la muestra nmero 3
realizada al 5to da se obtuvo un valor estadstico de t -2.79 que queda por fuera del
rango que lo determina el valor critico de t que es de -2.04 y 2.04 por lo tanto existe
una diferencia significativa entre los 2 mtodos utilizados para determinar el celo; con
los resultados obtenidos en las 3 muestras se obtienen 2 positivas y 1 negativa por lo
que se asignara un 66.6% de fiabilidad al mtodo de determinacin de estro mediante
la observacin de la cristalizacin de la saliva.

INDICE DE CONTENIDO
CAPITULO I
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.2. ANLISIS CRTICO Y SUBJETIVO DEL PROBLEMA

1.3. JUSTIFICACIN

1.4 OBJETIVOS

3
CAPITULO II

2.1. ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS

2.2. CATEGORAS FUNDAMENTALES

2.2.1. Ciclo estral en hembras caninas domsticas
2.2.2. Caractersticas y composicin de la saliva
2.2.3. Cristalizacin de saliva
2.2.3.1 Tipos de Cristalizacin
2.2.3. Citologa vaginal
2.2.3.1. Fundamento de la citologa vaginal
2.2.3.2. Toma de muestras
2.2.3.4. Observacin e interpretacin de los resultados

5
5
9
10
11
13
13
13
15

2.3 HIPTESIS

19

2.4 VARIABLES DE LA HIPTESIS.

19

2.5 OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES

20

CAPITULO III
3.1. ENFOQUE.

23

3.2. MODALIDAD

23

3.3. TIPO DE INVESTIGACIN

23

3.4. UBICACIN DEL ENSAYO

23

3.5. CARACTERIZACIN DEL LUGAR

3.5.1 Clima

24
24

3.5.2. Descripcin de recurso animal

24

3.6. FACTORES DE ESTUDIO

3.6.1. Cristalizacin de Saliva
3.6.2. Citologa exfoliativa vaginal
3.6.2.1 Tnica muscular

24
24
25
25

3.7. POBLACION Y MUESTRA

3.7.1. Caractersticas del universo
3.7.2. Poblacin
3.7.3. Muestra

26
26
26
26

3.8. MATERIAL EXPERIMENTAL

27

3.9. MATERIALES DE CAMPO

27

3.10. MATERIALES DE ESCRITORIO

27

3.11. DATOS A RECOLECTAR

3.11.1 Peso del animal
3.11.2 Revisin de Signos Vitales
3.11.3 Toma de la muestra de saliva
3.10.4 Toma de Muestra para realizacin de citologa vaginal

27
27
27
28
29

CAPITULO IV
RESULTADOS Y DISCUSION

31

4.1 ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS

31

4.2 VERIFICACION DE LA HIPOTESIS

42

CAPITULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

43

5.1 CONCLUSIONES

43

5.2 RECOMENDACIONES

44

CAPITULO IV
PROPUESTA

45

6.1 TEMA

45

6.2 OBJETIVOS
6.2.1 Objetivo General
6.2.2 Objetivos Especficos

45
45
45

6.3 JUSTIFICACIN

45

6.4 MANEJO TECNICO

Toma de Muestras
Extraccin de la muestra de la saliva
Manejo de la Muestra
Colocacin de la muestra en el portaobjetos
Interpretacin
Observacin de la muestra en el Microscopio

46
46
46
46
46
47
47

ANEXOS

49

INDICE DE FIGURAS

Figura 1.
Representacin de los cambios fsicos producidos durante el proestro y el estro.
Figura 2.
Ilustracin de los cambios hormonales producidos durante el estro y el proestro.
Figura 3.
Cristal tipo A
Figura 4.
Cristal tipo B.
Figura 5.
Cristal tipo C.
Figura 6.
Secuencia del correcto hisopado de la vagina en las perras.
Figura 7.
Tipos celulares epiteliales a reconocer durante un hisopado vaginal.
Figura 8.
Imagen citolgica de proestro. Clulas epiteliales parabasales e intermedias en
presencia de eritrocitos y algunos neutrfilos. Las clulas epiteliales comienzan a
formar ngulos a medida que comienza la queratinizacin.
Figura 9.
Imagen caracterstica de estro. Las clulas epiteliales superficiales no presentan
ncleo, hay presencia de bacterias y algunas clulas con ncleo picntico.
Figura 10.
Diestro. Clulas epiteliales parabasales e intermedias. Las clulas presentan bordes
ms redondeados, ncleo visible, presencia de eritrocitos y clulas epitelilales con
neutrfilos en su interior (clulas metestrales).
Figura 11.
Ubicacin del ensayo
Figura 12.
Proceso realizado para la Visualizacin de la Cristalizacin de saliva.
Figura 13.
Procedimiento para la recoleccin de la muestra para la realizacin de la citologa
vaginal.
Figura 14.
Representacin grfica Prueba de T Muestra 1
Figura 15.
Representacin muestra 1.
Figura 16.
Representacin grfica Prueba de T Muestra 2
Figura 17.
Representacin de muestra 2

7
8
11
11
12
14
15

16

17

18
23
28

30
35
36
38
39

Figura 18.
Representacin grfica Prueba de T Muestra 3
Figura 19.
Representacin muestra 3.

INDICE DE TABLAS

41
41

Tabla 1.
Parmetros fisiolgicos de las pacientes caninas.
31
Tabla 2.
Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva y citologa vaginal,
en la primera toma.
34
Tabla 3.
Prueba de T realizada en la Muestra 1.
34
Tabla 4.
Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva y citologa vaginal,
en la segunda toma.
37
Tabla 5.
Prueba de T realizada en la Muestra 2.
37
Tabla 6.
Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva y citologa vaginal,
en la tercera toma.
39
Tabla 7.
Prueba de T realizada en la Muestra 3.
40

CAPTULO I

PROBLEMA DE INVESTIGACIN

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Lo que busca el estudio es comprobar la eficacia de la tcnica de cristalizacin de
saliva en comparacin con el estado real de la ovulacin. En la reproduccin canina,
uno de los problemas ms comunes con el que nos encontramos, es el poder
determinar el momento preciso para realizar la monta o bien para llevar a cabo la
inseminacin artificial debido a la gran variacin que se presenta en la duracin del
proestro y el estro logrndose la elaboracin de tcnicas como la de citologa vaginal
exfoliativa para detectar la etapa de estro en la cual ocurre la ovulacin, niveles de
progesterona srica, prueba con relaxina.
La arborizacin est ntimamente ligada con el nivel estrognico que en el caso de la
hembra canina alcanza su pico aproximadamente 2 das antes de la ovulacin lo que
hace suponer que el mximo de cristalizacin estar presente en el periodo ovulatorio.
Con el fin de dar una pronta solucin al problema de la determinacin del ciclo estral
se plantea la posibilidad de realizar la tcnica de la arborizacin de la saliva en las
pacientes caninas. Se encuentra utilidad en tal estudio debido a la relacin estrecha de
la arborizacin con el nivel de estrgenos circulante, y su difusin a los lquidos
celulares.
Rydberg en 1948 encuentra arborizacin del moco cervical humano detectando la
presencia de substancias como el cloro, sodio y la mucina lo cual result importante ya
que cuando estas substancias son agregadas a otros fluidos como la saliva se presenta
una cristalizacin igual a la del moco cervical del humano, bovino y suino.

1.2. ANLISIS CRTICO Y SUBJETIVO DEL PROBLEMA

Perdidas econmicas y de
tiempo de parte del
propietario o criador

Deficiente deteccin
del inicio del proestro

Elevados costos en
mtodos de diagnsticos
tradicionales de estro

Inestabilidad de
criterios sobre el estado
reproductivo

Inoportuna deteccin de estro en Hembras Caninas domsticas

Tiempo inadecuado para

la monta o Inseminacin
Artificial

Proestro y Estro
Prolongados

Variabilidad fisiolgica
entre hembras

1.3. JUSTIFICACIN
El trabajo a desarrollarse se basa en la aplicacin de una tcnica rpida, eficaz y
econmica de diagnosticar el estro, lo que aproximar al momento de la ovulacin,
que indica el momento adecuado para la reproduccin, se evaluar los resultados de la
deteccin del celo mediante pruebas de cristalizacin de la saliva, que pueden ser
observadas mediante microscopio.
De esta manera se podr aplicar una tcnica alternativa para determinar su fiabilidad y
comprobar si el animal se encuentra o no listo para realizar la monta o inseminacin
artificial segn lo amerite el caso.

El tiempo empleado en la realizacin de la prueba de cristalizacin de saliva se estima

en un mximo de 5 minutos que se distribuyen entre, la toma de muestra desde la
cavidad bucal de la hembra canina domstica su colocacin en un portaobjetos
,
posteriormente se procede a fijar la muestra mediante calor, y la observacin de la
muestra en el microscopio, que comparado con el mtodo para la realizacin de
citologa vaginal que se estima en 15 minutos divididos en la toma, colocacin de la
muestra en el portaobjetos y tincin, observacin en el microscopio; se evidencia la
rapidez de la cristalizacin de saliva en comparacin con citologa vaginal.
El costo de las pruebas diagnsticas realizadas tambin vara ya que la cristalizacin
de la saliva no requiere tincin y solo la utilizacin de un portaobjetos y su
visualizacin en el microscopio.
Las ventajas presentadas por la cristalizacin de saliva, son la rapidez que posee para
determinar un resultado y la mnima manipulacin del paciente al momento de tomar
la muestra lo que abarca el bienestar animal.

1.4 OBJETIVOS
Objetivo General
Identificar el estro en Hembras Caninas Domsticas mediante la observacin de
cristalizacin de saliva.
Objetivos Especficos
Identificar el grado de cristalizacin presente en la saliva de las hembras caninas en
ciclo estral.
Determinar el tiempo ptimo de la ovulacin para realizar Inseminacin Artificial o
monta natural.
Verificar los resultados obtenidos en las pruebas de cristalizacin de saliva comparada
con los obtenidos en las pruebas de citologa vaginal, y proponer la utilizacin de este
mtodo como confiable y rpido para determinar el estro.

CAPITULO II

MARCO TERICO E HIPTESIS

2.1. ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS

Brito Cubillos en el 2009 realiz un estudio en la Universidad del Tolima acerca de la
arborizacin de la saliva de la perra como tcnica auxiliar para el diagnstico del
ciclo estral en el cual sus conclusiones son, que el procedimiento diagnstico es
vlido por cuanto los resultados de la citologa vaginal exfoliativa as lo demuestran.
El protocolo se establece con una toma directa de la boca, una lectura de la placa a los
118 segundos y observacin clara hasta 15 minutos despus de la primera lectura.
Al realizar esta investigacin es posible adentrar ms en la correlacin con niveles de
estrgenos en sangre medidos en laboratorio. El hecho de conocer el ciclo estral de la
perra hace que el diagnstico sea ms certero.(Brito Cubillos, 2009)
En otro estudio realizado en el 2010 por Pardo-Carmona B, Moyano MR, FernndezPalacios R, Prez-Marn CC. del Department of Animal Medicine and Surgery,
University of Cordoba, Campus de Rabanales, describe el mtodo utilizado: Se
utilizaron seis perras beagle con actividad reproductiva normal . Se establecieron
patrones de saliva helecho durante pro-estro y diestro. Se utiliz Citologa vaginal para
determinar el tiempo de apareamiento ptimo, los niveles de progesterona (P4) y los
signos de comportamiento.
Resultados: Los diferentes patrones de cristalizacin puntuaban de 0 a 2. A pesar de
las variaciones en la cristalizacin de la saliva se observaron durante la fase folicular
del ciclo estral en las perras, la prueba no result exacta; la sensibilidad de la prueba
fue del 40,6%, es decir, demasiado baja para discriminar de manera fiable el perodo
frtil, mientras que la especificidad fue del 86,1%.
Significado Clnico: Esta prueba podra ser utilizada para complementar otros mtodos
para determinar el perodo frtil en las hembras, pero su capacidad potencial an no se
ha demostrado.

2.2. CATEGORAS FUNDAMENTALES

2.2.1. Ciclo estral en hembras caninas domsticas

La perra, desde el punto de vista reproductivo, se define como una especie con ciclo
sexual monoestrico de ovulacin espontnea. El intervalo interestro, definido como el
tiempo desde el comienzo de un ciclo estral hasta el inicio del prximo, posee una
duracin variable de entre 5-11 meses.
En este sentido, las perras presentan un intervalo interestro mnimo 120 das que se
corresponde con la fase luteal.
Nuestras perras domsticas suelen presentar 2 ciclos estrales al ao, variando entre 1 y
3 ciclos al ao segn la raza, la edad y el individuo, por lo que pasa gran parte del ao
en reposo sexual.
As, las hembras de raza Rottweiler parecen estar predispuestas a manifestar intervalos
interestro cortos, mientras que las de raza Basenji y Galgos y otros cnidos silvestres
normalmente tienden a mostrar intervalos interestro largos (de 10 a 12 meses).
(Gobello C, De la Sota RL, Goya. 2001)
El ciclo estral de la perra, con una duracin media de 18 das, est constituido por 4
fases (proestro, estro, diestro y anestro). Generalmente el inicio de la fase proestral se
corresponde con el inicio del ciclo reproductivo.
El proestro, fase de incremento de la actividad folicular ovrica que precede al estro,
muestra una duracin media de 6-11 das (rango de 2-3 hasta 25 das segn Bell and
Christie en 1971). Durante esta fase, bajo estimulacin estrognica se producen una
serie de cambios fsicos evidentes tales como la aparicin de una secrecin vulvar
serosanguinolenta procedente del tero, una tumefaccin vulvar y atraccin del macho
como consecuencia de la liberacin de feromonas a travs de la secrecin vaginal,
rectal y urinaria (Goodwin et al., 1979).
En cambio, durante esta fase de proestro, la hembra mantiene una ausencia de
receptividad sexual, reaccionando al cortejo con manifestaciones vocales o reacciones
agresivas o violentas.
Durante el proestro los estrgenos producidos por el folculo ovrico, representan la
hormona predominante, responsable de las modificaciones peculiares de esta fase. El
pico de estrgenos se produce 24-48 horas antes del inicio del estro, niveles que
durante esta fase sufrirn una disminucin progresiva hasta caer abruptamente en el
proestro tardo (Concannon et al., 1975; Olson et al., 1982), estimulando un pico en la
concentracin de hormona luteinizante (LH) y la posterior ovulacin (Wildt et al.,
1979). La concentracin de progesterona, mnima durante toda la fase proestral (<0.51ng/ml), tiende a superar los niveles bsales coincidiendo con el descenso de los
niveles de estrgenos y el pico de LH ovulatoria, consecuencia de la luteinizacin
preovulatoria de las clulas foliculares (Handley, 1975; Wildt et al., 1979).
Las concentraciones de las gonadotropinas (FSH y LH) son reducidas durante el
proestro para incrementar hasta niveles mximos al inicio del estro (Olson et al.,
1982), induciendo la ovulacin.

El estro muestra una duracin media de 5-10 das (rango de 2-20 das segn Bell and
Christie en 1971). Se estima como la fase de receptividad sexual positiva, de tal
manera que se considera como inicio del estro el primer da en el que la hembra acepta
el coito con el macho. Las manifestaciones clnicas se caracterizan por la aceptacin
pasiva o activa del macho, desviando la cola y adoptando una postura de lordosis.
Adems, se registra una disminucin del edema y de la secrecin vulvar.
Los estrgenos alcanzan concentraciones mximas 24-48 horas antes del inicio del
estro, niveles que ejercen una accin "feed-back" positiva sobre el hipotlamo e
hipfisis, induciendo la secrecin en pico LH (de 7 a 50ng/ml), tpico del inicio de la
fase estral. La presencia de una onda de LH alargada, con una duracin de 48-96
horas, induce la ovocitacin en aproximadamente 2 o 3 das tras este pico
preovulatorio de LH (Phemister et al., 1973; Wildt et al., 1978).
Los oocitos son liberados a trompas uterinas en estado inmaduro, como oocitos
primarios, por lo que deben madurar para poder ser fertilizados por el espermatozoide.
Este proceso de maduracin, consistente en la extrusin del primer cuerpo polar y la
culminacin completa de la primera divisin meitica, culminar en 2-3 das tras la
ovulacin, convirtindose as en oocito secundario. Por otra parte, esta fase se
caracteriza por una elevacin de los niveles plasmticos de progesterona
(hiperprogesteronemia), iniciada desde finales del proestro y mantenida durante todo
el periodo estral. La concentracin srica de progesterona aproximadamente 2 das
antes de la ovulacin, coincidiendo con el pico de LH, es de 2 a 2.9ng/ml , mientras
que esta concentracin en el da de la ovulacin es de 4 a 10ng/ml (Wildt et al., 1979;
Jonhston and Root, 1995).
El diestro, periodo de secrecin de progesterona a partir de los cuerpos lteos
formados, se inicia en el momento en el que la hembra muestra un rechazo patente a la
cpula. Tiene una duracin variable en torno a 60-80 das (Holst and Phemister, 1974).
Se caracteriza por la disminucin del tamao y el tono de la vulva y la disminucin del
inters mostrada por el macho.
Tras la ovulacin, la formacin del cuerpo lteo induce la produccin continua de
progesterona, con o sin gestacin, con un pico mximo a los 20-30 das del pico de LH
y una posterior disminucin gradual durante los siguientes 40-60 das. En perras
gestantes, la progesteronemia cae de forma llamativa para iniciar el parto, el cual no
sucede hasta que la progesterona sea inferior a 2ng/ml.
La prolactina est presente y es necesaria durante la fase luteal, incrementndose
mucho ms en respuesta a la cada de la progesterona al final del diestro y
promoviendo el comienzo y mantenimiento de la lactacin.
El anestro, periodo quiescente del ciclo reproductivo de la perra, muestra una duracin
mnima de 7 semanas y mxima 1 ao (Andersen and Wooten, 1959). Clnicamente es
un periodo de inactividad que se caracteriza por la no atraccin del macho y el rechazo

a la cpula, junto a la presencia de una vulva pequea y con ausencia de secrecin.

Desde el punto de vista endocrino, la actividad hormonal contina.
Como en otras especies, la secrecin pulstil de LH ocurre espordicamente a lo largo
del anestro, aprecindose un pico de LH precediendo al proestro y un segundo
precediendo a la ovulacin. La FSH tiende a aumentar durante el anestro, mientras que
la progesterona disminuye hasta niveles bsales (Jeffcoate, 1992).
La concentracin de estrgeno flucta durante todo el anestro como consecuencia de
la existencia de oleadas de desarrollo folicular.
Figura 1. Representacin de los cambios fsicos producidos durante el
proestro y el estro.

Fuente: M. Root, Kustritz Reproduccin Clnica de Caninos y Felinos.

Figura 2. Ilustracin de los cambios hormonales producidos durante el

estro y el proestro.

F
uente: M. Root, Kustritz Reproduccin Clnica de Caninos y Felinos.

Muchos criadores confan en el recuento de los das desde el inicio del proestro, y
creen que las perras ovulan siempre en un nmero determinado de das desde este
evento (aproximadamente 12 das desde el inicio del proestro).
Sin embargo, esto no es cierto y el rango de ovulacin puede variar tanto como que
una perra ovule el da 5 de proestro y otra lo haga el 30. Por lo tanto, el apareamiento
en los das 12 y 14 del ciclo, lo que es comn en la prctica reproductiva, no siempre
culmina en gestacin. A lo expuesto, debemos sumar que en la perra a menudo existe
una pobre correlacin entre los eventos endocrinos y los comportamentales, hecho que
impide usar los signos conductuales para determinar el momento ptimo de cubricin.
Visto el reducido nmero de ciclos estrales manifestados por la perra a lo largo del
ao, se hace necesario el uso de varias evaluaciones clnicas en el manejo reproductivo
de la perra, y poder, a travs de ellas, determinar el momento de ovulacin y el
momento ideal de cubricin.( Root Kustritz MV, 2007)

2.2.2. Caractersticas y composicin de la saliva

La saliva es un lquido transparente y de viscosidad variable, lo cual se atribuye al
cido silico. Es inodora como el agua.
La composicin y pH de la saliva varan en funcin de los estmulos (como el olor o la
visin de la comida). El pH salival normal oscila entre 6,5 y 7.
La composicin de la saliva es similar a la del plasma y se caracteriza por los
siguientes componentes:

Agua: Representa un 99,5 %. Permite que los alimentos se disuelvan y se

pueda percibir su sabor a travs del sentido del gusto.

Iones cloruro: Activan la amilasa salival o ptialina.

Bicarbonato y fosfato: Neutralizan el pH de los alimentos cidos y de la

corrosin bacteriana.

Moco: El contenido de mucina, glicoproteina fundamental de la saliva,

produce la viscosidad necesaria para funciones lubricantes y de formacin del
bolo alimenticio que facilita la deglucin a lo largo del tubo digestivo, sin
daarlo.

Lisozima: Es una sustancia antimicrobiana que destruye las bacterias

contenidas en los alimentos, protegiendo en parte los dientes de la caries y de
las infecciones.

Enzimas: Como la ptialina, que es una amilasa que hidroliza el almidn

parcialmente en la boca, comenzando la digestin de los hidratos de carbono.
La lipasa lingual inicia tambin la digestin de grasas.

Estaterina: Con un extremo amino terminal muy cido, que inhibe la

precipitacin de fosfato clcico al unirse a los cristales de hidroxiapatita.
Adems, tambin tiene funcin antibacteriana y antifngica.

Otras sustancias: La saliva contiene tambin inmunoglobulinas especficas,

transferrina y lactoferrina. En el 2006 investigadores franceses del Instituto
Pasteur identificaron una sustancia en la saliva humana que llamaron
Opiorfina, similar a la encontrada en ratas y vacas, que es hasta seis veces ms
potente que la morfina para calmar el dolor.

Calcio: La saliva est saturada de Ca++, con lo que se evita que los dientes lo
pierdan y ayuda a digerir el alimento.

(Segarra E, Edgar, 2012)

2.2.3. Cristalizacin de saliva

El fenmeno conocido como arborizacin del moco cervical de la mujer fue
descubierto por Papanicolaou en 1946 sirviendo como base importante para el estudio
de este evento en otras especies tales como los bovinos y cerdos.

Esta cristalizacin se presenta despus de que una muestra del moco cervical sin teir
se deja secar en un portaobjetos presentndose un patrn microscpico en forma de
helecho.

Muchos investigadores han relacionado estos hallazgos con los diversos estadios del
ciclo estral encontrando que existe mayor arborizacin durante la fase folicular del
ciclo en comparacin con la fase ltea del mismo alcanzando la mxima cristalizacin
en el principio de la etapa de estro.

Las investigaciones realizadas por grupos internacionales como el Natural Family

Planning (NFP) han sido encaminadas para lograr obtener un mtodo eficaz para
detectar el periodo de fertilidad de las mujeres encontrndose que el nivel de
arborizacin del moco cervical est altamente correlacionado con los niveles sricos
de estrgenos, que como se sabe, son los responsables de la manifestacin de los
signos clnicos de estro en las especies domsticas.

En la reproduccin canina uno de los problemas ms comunes con el que se encuentra

el mdico veterinario as como los propietarios de perras es el poder determinar el
momento preciso para realizar la monta o bien para llevar a cabo la inseminacin
artificial debido a la gran variacin que se presenta en la duracin de las etapas del
ciclo estral logrndose la elaboracin de tcnicas como la de citologa vaginal
exfoliativa para detectar la etapa de estro en la cual ocurre la ovulacin.

10

(Lezama,H.J, 1985)

2.2.3.1 Tipos de Cristalizacin

La arborizacin se ha clasificado en tres tipos de acuerdo al momento de su
presentacin:
Figura 3. Cristal tipo A

(MVZ MPA Carlos

Esquivel Lacroix)

a.- TIPO A: Son helechos abundantes anchos y grandes, se presentan en el mximo

nivel estrognico (principio del estro).
Figura 4. Cristal tipo B.

(MVZ MPA Carlos Esquivel Lacroix)

b.- TIPO B: Son helechos ms delgados que el tipo A que se acomodan de manera
longitudinal se presentan cuando hay descenso de Estrogenos. (mitad del estro).

11

Figura 5. Cristal tipo C.

(MVZ MPA Carlos Esquivel Lacroix)

c.- TIPO C: Son helechos muy pequeos casi fragmentos y se presentan cuando hay
dominancia de progesterona.(final del estro).

Como ya se mencion la arborizacin est ntimamente ligada con el nivel estrognico

que en el caso de la hembra canina alcanza su pico aproximadamente 2 das antes de la
ovulacin lo que hace suponer que el mximo de cristalizacin estar presente en el
periodo ovulatorio.
Estudios realizados para la deteccin de hormonas esteroides han postulado que ms
del 95 % de los estrgenos (E2) circulantes se encuentran unidos a protenas y que
estas molculas son eficientemente secuestradas para su destruccin en el hgado sin
embargo los estrgenos fisiolgicamente libres difunden con facilidad a todos los
lquidos secretados intercelularmente como es el caso de la saliva (lo cual es aplicable
a la mayora de las hormonas esteroides) donde se han encontrado niveles de 2
11pg/ml durante la fase folicular del ciclo menstrual y niveles de .8 8 pg/ml durante
la fase ltea recordando que una de la funciones de los E2 es regular la retencin del
fsforo y sodio adems de provocar la acumulacin de lquido en los tejidos y la
excrecin del potasio lo que resulta en la hiptesis de que la arborizacin de la saliva y
del moco cervical son cristales de sodio, cloro potasio.
(MVZ MPA Carlos Esquivel Lacroix 2006)

12

2.2.3. Citologa vaginal

La citologa vaginal es un mtodo de simple realizacin, orientativa para determinar
en que etapa del ciclo estral se encuentra la perra.
Otras utilidades incluyen la prediccin de la fecha probable de parto, ayuda en la
determinacin de problemas de infertilidad, diagnstico de vaginitis, tumores
vaginales, pimetra y metritis aguda, y orientacin para la utilizacin de
anticonceptivos en el momento adecuado del ciclo. (Hiemstra M, Shaefers-Okkens
AC, Teske E, et al, 2001.).

2.2.3.1. Fundamento de la citologa vaginal

El principio de la citologa vaginal exfoliativa se basa en determinar el tipo y cantidad
de clulas de las diferentes etapas del ciclo estral, ya que los cambios hormonales que
sufre la mucosa vaginal durante el ciclo estral se reflejan en la morfologa de sus
clulas epiteliales. Al inicio del ciclo, la clula epitelial est en contacto con la
irrigacin sangunea.
Conforme los niveles de estrgenos se incrementan, el epitelio vaginal se va
engrosando ocasionando que la clula epitelial se vaya separando del aporte sanguneo
dando como resultado una transformacin celular que va de clula parabasal a clula
anucleada o escama. (Wolf, A.M.1994)
2.2.3.2. Toma de muestras
Para tomar muestras para una citologa vaginal se recomienda el uso de guantes.
Se introduce un hisopo estril por la comisura dorsal de los labios vulvares (previa
limpieza de estos). Se debe hacer suavemente hasta atravesar el cingulum (unin
vestbulo-vaginal) para llegar a la porcin caudal de la vagina, en la cual, mediante
movimientos circulares del hisopo, se colectar el material celular. Hecho esto, se
retira el hisopo y se hace un frotis por rodamiento en un portaobjetos (comnmente se
realizan tres frotis lineales), se fija en alcohol al 95 % durante 5 a 10 minutos y se tie
para observarla al microscopio.
Existen tcnicas de tincin como la de Papanicolau, Diff-Quick, Giemsa, Wright y
Shorr que pueden ser utilizadas para teir muestras de citologa vaginal. (Goodman M
2001)

13

Figura 6.Secuencia del correcto hisopado de la vagina en las perras.

Fuente: Feldman, E.C.; Nelson, R. (1991) Ciclo Ovrico y Citologa Vaginal. En

endocrinologa y reproduccin canina y felina

2.2.3.3. Clasificacin de las clulas vaginales

En cuanto al tipo de clulas vaginales estas se clasifican en:
Clula parabasal:
Es una clula de forma oval o redonda con ncleo aparente y pequea cantidad de
citoplasma. Esta clula se desprende de la capa de clulas germinales cercana a los
vasos sanguneos y predomina en el anestro y principios del proestro.
Clula intermedia:
Es una clula grande de bordes irregulares con ncleo ms pequeo o ms grande que
la parabasal pero con mayor cantidad de citoplasma. La presencia de esta clula indica
la etapa anterior a su transformacin a superficial, predomina a la mitad del proestro.
Clula superficial:
Es una clula de bordes angulosos, con ncleo de menor tamao que las anteriores. Es
caracterstica del final del proestro y todo el estro, que es cuando la vagina se
encuentra bajo la influencia del pico estrognico.
Clula anucleada:
Tambin se le conoce como escama, es una clula, sin ncleo, de bordes angulosos e
irregulares que predomina en el estro y marca el final del proceso de descamacin de
la clula parabasal.
(Goodman M 2001)

14

Figura 7. Tipos celulares epiteliales a reconocer durante un hisopado

vaginal.

Fuente: Laboratorio Patolgico San Isidro 2009, Citologa Vaginal.

2.2.3.4. Observacin e interpretacin de los resultados

La interpretacin de los extendidos se realiza de acuerdo al predominio de los distintos
tipos celulares presentes, los cuales pueden ser orientativos de los diferentes
momentos del ciclo estral canino. No obstante, es imprescindible hacer un seguimiento
de la evolucin del cuadro celular a travs del ciclo estral, ya que un preparado aislado
podra resultar compatible con distintos momentos del ciclo estral de la perra.
Proestro:
Duracin: 9 das en promedio. Se observar un nmero variable de eritrocitos junto
con escasas clulas parabasales, numerosas clulas intermedias y escasas clulas
intermedias superficiales. Se puede encontrar neutrfilos en bajo nmero y bacterias
en pequeas o grandes cantidades. El fondo a menudo tiene aspecto sucio debido a la
presencia de secreciones cervicales y vaginales viscosas. En el proestro medio
desaparecen los neutrfilos (estas clulas entran a la luz vaginal a travs del e
pitelio vaginal pero luego ya no pueden atravesar la pared vaginal de mltiples capas
inducida por los estrgenos). Los neutrfilos no deberan ser observados nuevamente
hasta el diestro. El nmero de clulas parabasales e intermedias pequeas disminuye y
son reemplazadas por clulas intermedias grandes e intermedias superficiales. Los
eritrocitos pueden o no estar presentes y el fondo es sucio o claro.

15

En el proestro tardo, ms del 80% de las clulas vaginales son superficiales con
ncleos picnticos o son superficiales anucleadas. (Goodman M 2001)
Figura 8. Imagen citolgica de proestro. Clulas epiteliales parabasales e
intermedias en presencia de eritrocitos y algunos neutrfilos. Las clulas
epiteliales comienzan a formar ngulos a medida que comienza la
queratinizacin.

Fuente: Universidad Nacional del Litoral Facultad de Ciencias Veterinarias, Citologa

Vaginal, 2003.

Estro:
No existen modificaciones que sugieran el pico de LH o de ovulacin o el momento de
la fertilizacin. Las clulas superficiales nucleadas y anucleadas (queratinizadas) o con
ncleo picntico representan ms del 80% y a menudo alcanzan el 100% de las clulas
observadas en le frotis.
No se observan neutrfilos, los eritocitos pueden o no estar presentes y el fondo es
limpio y libre de detritus celulares.
Cuando se realizan frotis seriados durante el estro, un cambio abrupto en el nmero
relativo del tipo de clulas epiteliales marca el comienzo del diestro. (Goodman M
2001)

16

Figura 9. Imagen caracterstica de estro. Las clulas epiteliales

superficiales no presentan ncleo, hay presencia de bacterias y algunas
clulas con ncleo picntico.

Fuente: Universidad Nacional del Litoral Facultad de Ciencias Veterinarias, Citologa

Vaginal, 2003.

Diestro:
Duracin: 56 a 58 das. Durante dicho perodo el nmero de clulas superficiales
disminuye mientras que las clulas parabasales e intermedias se incrementan
marcadamente. Asimismo, en los 7 -10 das iniciales del diestro reaparecen los
neutrfilos en nmero variable.
Es importante reconocer como normal esta aparicin de neutrfilos en los extendidos
de diestro temprano a fin de diferenciarlo de posibles cuadros infecciosos. En algunas
perras pueden no observarse los neutrfilos en frotis del diestro.
A veces pueden encontrarse clulas Metaestrales, que son clulas epiteliales vaginales
con uno o dos neutrfilos en su interior. Puesto que los glbulos rojos pueden
presentarse en extendidos vaginales obtenidos durante principios del diestro, es
imposible diferenciar el proestro del diestro basndose exclusivamente en la citologa
vaginal.
Adems, luego de los primeros das del diestro, la citologa vaginal es similar a la del
anestro con leucocitos y eritrocitos en cantidades escasas y las clulas epiteliales
corresponden a intermedias y parabasales. (Lezama,H.J.)

17

El conocimiento de las caractersticas del ciclo reproductivo canino es de suma

utilidad para:

Determinar el da de mayor fertilidad ya sea para implementar servicio natural

o inseminacin artificial.

Determinar el primer da del diestro y as aproximar la fecha probable de parto.

Aproximar el diagnstico y evaluar las posibilidades teraputicas de las

diversas enfermedades reproductivas.

Realizar un adecuado manejo del ciclo estral, ya sea para prevenir como para
inducir ciclos frtiles.

Figura 10. Diestro. Clulas epiteliales parabasales e intermedias. Las

clulas presentan bordes ms redondeados, ncleo visible, presencia de
eritrocitos y clulas epitelilales con neutrfilos en su interior (clulas
metestrales).

Fuente: Universidad Nacional del Litoral Facultad de Ciencias Veterinarias, Citologa

Vaginal, 2003.
Anestro:
Se caracteriza por un predominio de clulas parabasales y de clulas intermedias
pequeas.
Si bien pueden hallarse algunos neutrfilos, su nmero es muy inferior al observado
durante el principio del diestro.
Pueden o no verse bacterias y la apariencia del fondo puede ser clara o sucia

18

2.3 HIPTESIS
Ho. La cristalizacin de la saliva no es un mtodo factible y confiable para determinar
el momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras
caninas.
Ha. La cristalizacin de la saliva es un mtodo factible y confiable para determinar el
momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras caninas.

2.4 VARIABLES DE LA HIPTESIS.

Variable dependiente
Presentacin del ciclo estral en la hembra canina.

Variable independiente
Determinacin del grado de la cristalizacin de saliva como mtodo para
determinar el estro en hembras caninas.
Definicin del tipo de clulas observadas en la muestra de citologa vaginal
exfoliativa.

19

2.5 OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES

Variable Dependiente

Tipo de
Variable
Dependiente

Conceptualizacin

Estro
Se estima como la fase de
Estro
en receptividad sexual positiva, de
Hembras
tal manera que se considera
Caninas
como inicio del estro el primer
Domesticas
da en el que la hembra acepta el
coito con el macho. Las
manifestaciones clnicas se
caracterizan por la aceptacin
pasiva o activa del macho,
desviando la cola y adoptando
una postura de lordosis.

Indicadores
Hembras
Caninas
Domsticas
ciclo estral

tems Bsicos
Nmero de Positivos

en Nmero de Negativos

Positivas a estro
Negativas
estro

20

Tcnicas
Observacin
de frotis por
de medio de
microscopia.

Tipo de
variable
Independient
e
Cristalizacin
de saliva

Independient

Conceptualizacin
Cristalizacin de saliva
Este fenmeno se produce
debido a que los estrgenos
(-estradiol)
presentes
durante el proestro se ligan
a fluidos corporales como
las saliva produciendo una
cristalizacin.

Indicadores
Grado
de
cristalizaci
n en saliva
que
es
determinado
por etapa del
ciclo estral

tems Bsicos

TIPO A: Son helechos abundantes anchos y grandes, se Hisopado

presentan en el mximo nivel estrognico (principio del bucal
estro).

TIPO B: Son helechos ms delgados que el tipo A que se

acomodan de manera longitudinal se presentan cuando hay
descenso de Estrgenos. (mitad del estro).

Esta
cristalizacin
se
presenta despus de que una
muestra sin teir se deja
secar en un portaobjetos
presentndose un patrn
microscpico en forma de
helecho.

TIPO C: Son helechos muy pequeos casi fragmentos y se

presentan cuando hay dominancia de progesterona. (final
del estro). Ausencia de cristalizacin se presenta cuando el
animal se encuentra en anestro.

La

CLULAS PARABASALES

citologa

vaginal Valoracin

Tcnicas

21

Hisopado

e
Citologa
vaginal

exfoliativa se basa en
determinar el tipo y
cantidad de clulas de las
diferentes etapas del ciclo
estral, ya que los cambios
hormonales que sufre la
mucosa vaginal durante el
ciclo estral se reflejan en la
morfologa de sus clulas
epiteliales. Al inicio del
ciclo, la clula epitelial est
en contacto con la irrigacin
sangunea.

de
la
cantidad y
morfologa
de
clulas
presentes en
la
mucosa
vaginal

de
la
Las clulas parabasales son las clulas ms pequeas que se mucosa
encuentran de manera rutinaria en un hisopado vaginal. Son vaginal
de forma redondeada con un ncleo grande y una relacin
ncleo: citoplasma alta. Son clulas de tamao uniforme
que se observan en los periodos de proestro temprano,
diestro y anestro.

CLULAS INTERMEDIAS
Son clulas parabasales intermedias con un tamao mayor
(muchas veces el doble) al de las clulas parabasales.
Presentan un aumento en el tamao del citoplasma ms no
del ncleo por lo que la relacin ncleo: citoplasma baja. El
citoplasma puede tornarse de un azul grisceo plido con
ligeras irregularidades por la keratinizacin temprana.
ste proceso se hace ms evidente a medida que pasa el
tiempo y se acerca el periodo estral.
CLULAS SUPERFICIALES
Estas clulas se observaran en el estro, son clulas grandes
con un ncleo pequeo que se ha reducido de tamao y a
medida que siguen madurando lo pierden por completo. El

22

citoplasma es amplio con muchas irregularidades y

dobleces. En su estado ms maduro presentan ausencia total
de ncleo y es el estado ms tardo de las clulas epiteliales
vaginales.

23

CAPITULO III

METODOLOGIA DE LA INVESTIGACION
3.1. ENFOQUE.
El enfoque de la investigacin es predominantemente cualitativa explicativa.
3.2. MODALIDAD
Modalidad de investigacin utilizada ser la investigacin de campo y laboratorio.
3.3. TIPO DE INVESTIGACIN
Investigacin de tipo comparativa.
3.4. UBICACIN DEL ENSAYO
Figura 11. Ubicacin del ensayo

Fuente: Google Earth 2012

El estudio se realizar en dos lugares los cuales comprenden el sector centro norte de
la ciudad, se lo realizar en las instalaciones de la Clnica Veterinaria Vida Animal
del Dr. Cesar lvarez ubicada en el sector de Izamba, cantn Ambato, provincia de
Tungurahua. Se tomaron las muestras de este lugar ya que a la clnica acuden
pacientes de varias zonas del sector norte de la ciudad incluyendo zonas rurales del
sector, con esto se trat de abarcar la mayor cantidad de pacientes con caractersticas
similares pero ubicados en varios sectores de la provincia. La clnica se ubica a una
Latitud de 113'35.13"S , Longitud de 7835'48.77"O y a una altitud de 2610 msnm.
Tambin se realizar en el sector centro de la ciudad en el Hospital Clnico Veterinario
Chile ubicado en las calles Sucre y Guayaquil, propiedad del Dr. Diego Gavilanes

24

hacia la que igualmente acuden pacientes de diversos puntos de la provincia e incluso

pacientes de otras provincias, todo esto se tom en cuenta para poder elegir las sitios
para la toma de muestras de las pacientes hembras caninas que se presenten a la
consulta por motivos relacionados al estudio realizado, la clnica se encuentra ubicada
a una latitud 114'38.56"S y longitud 7837'49.38"O a 2571 msnm.
3.5. CARACTERIZACIN DEL LUGAR

3.5.1 Clima
Clima: templado
Temperatura: 10 a 25 C
Humedad relativa: 78%

3.5.2. Descripcin de recurso animal

Se utilizarn hembras caninas domsticas que acudan a la clnica con motivos
relacionados con la presentacin o diagnstico del estro en el cual se evaluar las
constantes fisiolgicas y estado general, temperatura, frecuencia cardiaca, frecuencia
respiratoria, tiempo de llenado capilar, edad, tambin se determinar su condicin
corporal y se realizar una anamnesis al propietario acerca del padecimiento de
patologas anteriores relacionadas con la reproduccin.
Se considerar a las hembras en buen estado fisiolgico, que no hayan presentado
enfermedades relacionadas con la reproduccin.

3.6. FACTORES DE ESTUDIO

3.6.1. Cristalizacin de Saliva
La saliva es un fluido orgnico complejo producido por las glndulas salivales en la
cavidad bucal, y directamente involucrada en la primera fase de la digestin.
La produccin de saliva est relacionada con el ciclo circadiano, de tal manera que por
la noche se segrega una mnima cantidad de saliva.
La saliva es segregada por las glndulas salivares mayores partida y submaxilar
(80%- 90%) en condiciones estimuladas, mientras que las glndulas sublinguales
producen solo el 5% del total. Las glndulas menores son responsables bsicamente de
la secrecin en reposo y contribuyen al 5% al 10% del total de saliva secretada
(Segarra E., Edgar.2012)

25

3.6.2. Citologa exfoliativa vaginal

La tnica mucosa forma bastantes pliegues (arrugas vaginales, dependiendo la
orientacin de las mismas segn la especie) y en ocasiones llega a cerrar por completo
la luz vaginal.
Posee dos capas:

Epitelio: Su dimetro oscila mucho, promedio 3 cm. En el epitelio, no mucoso,

plano estratificado, existe gran cantidad de glucgeno durante la fase
proliferativa o luteica, producido por clulas eosinfilas, cuya fermentacin,
producida por la flora bacteriana (bacilos de Dderlein), que lo transforma en
cido lctico, confiere el carcter cido a la superficie del epitelio vaginal.
Durante la fase secretora, el grosor de esta capa disminuye considerablemente,
y su citologa tambin cambia, dominando la situacin las clulas basfilas,
junto con leucocitos y diversas bacterias.
Es en esta fase (y no en la anterior) cuando la eyaculacin masculina (a travs
del pene) puede producir con mucho mayores probabilidades el embarazo
(concepcin), pues en la fase anterior la luz vaginal se encuentra cerrada. Es,
de hecho, en la fase secretora cuando se generan ms infecciones (debido a la
ausencia de cido lctico).
Es posible que esta etapa inofensiva ayude a la supervivencia de los
espermatozoides. Adems, los leucocitos de la lmina propia pueden ayudar a
evitar alguna infeccin (es posible que algn microorganismo atraviese el
epitelio vaginal).

Lmina propia: Es el tejido laxo conjuntivo que une el epitelio a las capas
musculares. En su zona profunda existen fibras ms gruesas y vasos de mayor
calibre, dndose as tejido erctil, formando esos vasos las llamadas cavernas
vasculares.
(Feldman, E.C.; Nelson, R. 1991.)

3.6.2.1 Tnica muscular

El msculo liso posee, a su vez, dos estratos diferenciados: uno interno,

compuesto de fibras circulares, y uno externo, ms grueso, compuesto de fibras
longitudinales musculares tambin lisas.

En cuanto al msculo esqueltico, en la parte inferior existe una especie de

esfnter, que cierra la vagina. Se trata de clulas musculares esquelticas del
msculo bulboesponjoso.
(S. Sisson y J. D. Grossman. Robert Getty. 2003)

26

3.7. POBLACION Y MUESTRA

3.7.1. Caractersticas del universo
El universo de esta investigacin lo constituyen las hembras caninas domsticas que
acuden a la consulta en las Clnicas Veterinarias Pets Health y Chile ubicadas en
el sector centro norte de la ciudad respectivamente, hacia ellas acuden hembras
caninas domsticas de diferentes, edades, desde neonatos hasta pacientes geritricos.
3.7.2. Poblacin
De acuerdo con esta investigacin la poblacin est constituida por las hembras
caninas domsticas que acudan a la consulta, por motivos relacionados a la
presentacin de celo, las cuales se estima que se presentan una por semana en cada
clnica obteniendo en un mes cuatro pacientes aproximadamente en cada clnica ya
que la investigacin requiere de un nmero mnimo estimado de pacientes, para que
esta se considere fiable fue planteada para 4 meses, obteniendo 16 hembras caninas en
cada clnica dndonos una poblacin de 32 pacientes.
3.7.3. Muestra
Para calcular la muestra se utilizara la siguiente formula:

(SUREZ, Mario, 2011)

Donde:
n = el tamao de la muestra.
N = tamao de la poblacin.
Desviacin estndar de la poblacin, que suele utilizarse un valor constante de 0,5.
Z = Valor obtenido mediante niveles de confianza. Es un valor constante que, se lo
toma en relacin al 95% de confianza equivale a 1,96
e = Lmite aceptable de error muestral.
320.5 21.962
n=
( 321 )0.052 +0.521.962
n=29.61

27

n=30 animales

Por lo que se aproxima a 30 animales que sern tomados en cuenta para la muestra.

3.8. MATERIAL EXPERIMENTAL

Saliva
Microscopio
Tincin Wright
Agua Destilada
Portaobjetos
3.9. MATERIALES DE CAMPO

Hembras caninas

Hisopos

Guantes

Estetoscopio

Balanza

Termmetro

3.10. MATERIALES DE ESCRITORIO

Computador
Vehculo
Hojas de papel
Cmara fotogrfica
3.11. DATOS A RECOLECTAR
3.11.1 Peso del animal
Se tomarn pesos de las hembras que llegan a la consulta y se determinara si su
condicin corporal es adecuada (C.C 3)

28

3.11.2 Revisin de Signos Vitales

Se evalu si el estado fisiolgico de la perra es adecuado y si presenta alguna
sintomatologa patolgica, para esto se determin la temperatura (38.5 C), frecuencia
respiratoria (10-30 respiraciones por minuto), frecuencia cardaca (80-120 latidos por
minuto), tiempo de llenado capilar (1-2 segundos), condicin corporal escala de 1 a 5,
coloracin de mucosas siendo el normal el color rosa brillante.
3.11.3 Toma de la muestra de saliva
La muestra se tom directamente de la cavidad bucal, en el portaobjetos para luego
realizar la fijacin de la muestra mediante calor y posteriormente ser analizada en el
microscopio.
Figura 12. Proceso realizado para la Visualizacin de la Cristalizacin de
saliva.

Extraccin de la muestra de
saliva desde la cavidad bucal
de la hembra canina domstica
Colocacin de la saliva en el
portaobjetos
Fijacin de la muestra al
portaobjetos a temperatura
ambiente por 60 segundos
Observacin de la muestra al
microscopio

Determinacin del tipo de

cristalizacin observada

La arborizacin se ha clasificado en tres tipos de acuerdo al momento de su

presentacin:
a.- TIPO A: Son helechos abundantes anchos y grandes, se presentan en el mximo
nivel estrognico (principio del estro).

29

b.- TIPO B: Son helechos ms delgados que el tipo A que se acomodan de manera
longitudinal se presentan cuando hay descenso de E2. (mitad del estro).
c.- TIPO C: Son helechos muy pequeos casi fragmentos y se presentan cuando hay
dominancia de progesterona (final del estro).
(MVZ MPA Carlos Esquivel Lacroix)

3.10.4 Toma de Muestra para realizacin de citologa vaginal

Anatoma
Los labios vulvares cubren la fosa ventral del cltoris y el vestbulo dorsal. El vestbulo
se orienta dorsalmente y se extiende desde la vulva hasta el orificio uretral. La vagina
se encuentra craneal al orificio uretral.
Consideraciones previas al procedimiento
La vagina no es estril. Se utiliza un aplicador con punta de algodn, no estril
humedecido con solucin salina o agua corriente.
Procedimiento
Introducimos el hisopo humedecido en el punto ms dorsal de la hendidura vulvar y lo
orintamos hacia arriba en un Angulo de 45 , hacindolo girar entre los dedos de ser
necesario para avanzar ms all de la papila uretral, hacemos rodar el hisopo contra la
superficie vaginal y lo retiramos en un movimiento.
Luego lo hacemos rodar varias veces sobre un porta objetos de vidrio limpio.
Aplicamos sobre esta una tincin triple o azul de metileno nuevo.
Cuidados posteriores y complicaciones
En ocasiones, el algodn se sale de la vara del aplicador, pero se lo puede retirar
fcilmente en forma digital. Ni el sitio exacto de la vagina de donde se retire la
muestra ni el mtodo de tincin alteran los resultados.
(MVZ MPA Carlos Esquivel Lacroix)

30

Figura 13. Procedimiento para la recoleccin de la muestra para la

realizacin de la citologa vaginal.

Introduccin del hisopo

humedecido en el punto mas
dorsal de la hendidura vulvar
Orientar el
dorsal en un

hisopo
ngulo

hacia
de 45

Rodar el hisopo contra la

superficie vaginal
Retirar el hisopo en un
movimiento
Rodar el hisopo sobre un
porta objetos de vidrio

Aplicacin de Tincin

Observacin en el
microscopio

31

CAPITULO IV
RESULTADOS Y DISCUSION

4.1 ANALISIS E INTERPRETACION DE RESULTADOS

A continuacin se describir todos los datos tomados de las pacientes caninas, en ellas
se podr observar que su estado fisiolgico cabe dentro de los parmetros normales,
como son los de temperatura, condicin corporal, peso, frecuencia cardaca, frecuencia
respiratoria, tiempo de llenado capilar, coloracin de mucosas as como tambin su
raza y edad.
Adems se presenta los resultados obtenidos de las pruebas diagnsticas de
cristalizacin de saliva y citologa vaginal realizadas a cada una de ellas, agrupadas de
acuerdo al da en que se realiz la toma de muestra, estas estarn agrupadas en: 1ro,
2do y 3er da de toma de muestra, estas muestras se toman intercalando un da entre
cada una de ellas.
La puntuacin en la cristalizacin de saliva va de, 0 a 2 siendo el 0 igual a la
cristalizacin tipo C que se presenta como helechos fragmentados o ausencia de
cristalizacin, el 1 igual al tipo B que se presenta como helechos delgados que se
acomodan de manera longitudinal y el 2 que es similar al tipo A que se presentan como
helechos abundantes grandes y anchos.
En los resultados de la citologa vaginal el valor de 0 corresponde a presencia
predominante de clulas parabasales, el valor de 1 indica que se presentan clulas
intermedias y el valor de 2 seala presencia de clulas superficiales en la muestra.
Tabla 1.Parmetros fisiolgicos de las pacientes caninas.

6
aos

Golden
retriever

35

38,5

93

32

Normal

2
aos
2
aos
10
aos

Schnauz
er

38,3

86

36

Normal

Bobtail

20

38,4

78

28

Normal

Mestizo

39,2

110

44

Normal

Sheila

Chimbi

COLORACI
ON
MUCOSAS

RAZA

TEMP
. C

EDAD

Cakina

CONDICI
ON
CORPOR
AL.

PES
O
kg

NOMBR
E
PACIEN
TE

Perlita

FREC
.
RESP.

TIEMPO
DE
LLENAD
O
CAPILA
R (seg)

FREC
.
CARD
.

32

Ratona

Rebeca

Alberg
ue 1
Darla

Peggi

Cloe

Morita

Minnie

Tisha

Perla
Kuky

Tonka

Lucky

Monky

1 ao
1 ao
3
mese
s
3
aos
4
aos
1 ao
6
mese
s
1 ao
3
mese
1 ao
2
mese
s
3
aos
2
aos
10
mese
s
2
aos
3
aos
3
aos
4
mese
s
2
aos
9
mese
s
3
aos

French
Poodle

38,5

115

48

Normal

Bulldog
ingles

25

38,5

110

45

Normal

Mestizo

39

112

40

Normal

Bulldog
ingles

14

38,7

128

42

Normal

Mestiza

15

38,6

142

48

Normal

Bulldog
Frances

10

38,5

125

36

Normal

Golden
retriver

18

38,8

147

46

Normal

Shih tzu

38,4

138

36

Normal

Pastor
aleman

28

38,8

142

48

Normal

7,8

38,3

148

28

Normal

26

38,9

142

43

Normal

Pitbull

22

38,3

133

38

Normal

Beagle

18

38,8

122

30

Normal

Yorkshire
terrier

38,8

139

46

Normal

French
poodle
Bulldog
ingles

33

Alberg
ue 2

3
aos

Mestizo

18

38,4

118

32

Normal

Loba

2
aos

Akita

32

38,6

122

28

Normal

Yorkshire
terrier

38,3

140

42

Normal

Bulldog
ingles

22

38,9

168

90

Normal

3
aos

San
Bernardo

35

38,3

110

40

Normal

3
aos
2
aos
2
aos
1 ao
4
mese
s
2
aos
3
aos

Pomerani
an

38,8

152

73

Normal

Mestizo

11

38,2

170

96

Normal

Pekines

39,1

166

82

Normal

Husky

19

38,8

150

73

Normal

Tekel

38,2

138

47

Normal

Husky

22

38,8

154

96

Normal

1 ao

Husky

17

38,8

178

88

Normal

Mona

Peggy

Lua
Candy
Alberg
ue 3
Princes
a

Kiara

Chiki
Laica
Lazie

2
aos
3
mese
1 ao
10
mese
s

Todas las pacientes se encuentran dentro del rango normal de constantes fisiolgicas
por lo que sern utilizadas en la investigacin.

Tabla 2. Valores promedio de pacientes utilizadas en la investigacion

EDAD
xx

PESO
kg
xx

TEMP.
C
xx

FREC.
CARD.
xx

34

FREC.
RESP.
xx

TIEMPO DE
LLENADO
CAPILAR
(seg)
xx

CONDICIO
N
CORPORA
L.

xx

2 aos
6 meses

16

38,6

132.5

50

3.1

Los valores promedio obtenidos de las 30 hembras caninas utilizadas son: edad 2aos
con 6 meses, peso 16kg, temperatura 38,6 C, frecuencia cardiaca 132.5 lpm,
frecuencia respiratoria 50 rpm, tiempo de llenado capilar 2 segundos, condicin
corporal 3.1.

Tabla 2. Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva

y citologa vaginal, en la primera toma.

Pacie
nte
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15

Muestra/Da 1
Cristaliza
Cristaliza
Citologa Pacien
cin
cin
Vaginal
te
Saliva
Saliva
2
2
16
0
1
1
17
2
0
0
18
1
1
1
19
1
0
0
20
2
1
1
21
0
0
0
22
0
1
1
23
0
1
2
24
0
1
1
25
0
0
0
26
0
1
1
27
2
1
1
28
2
1
0
29
0
1
1
30
2

Cristalizacin Saliva:

0= No existe cristalizacin

1= Cristalizacin leve

35

Citologa
Vaginal
1
0
1
1
2
0
0
0
0
0
0
1
0
0
1

Citologa Vaginal:

2= Abundante cristalizacin
0= Presencia de clulas parabasales
1=Presencia de clulas intermedias
2=Presencia de clulas epiteliales superficiales

Tabla 3. Prueba de T realizada en la Muestra 1.

Prueba t para medias de dos muestras emparejadas
Variable
1
0,8

Media
Varianza
Observaciones
Coeficiente de correlacin de Pearson
Diferencia hipottica de las medias
Grados de libertad
Estadstico t
P(T<=t) una cola
Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (dos colas)

36

0,579310
34
30
0,596230
05
0
29
1,409362
04
0,084681
05
1,699127
03
0,169362
1
2,045229
64

Variable
2
0,633333
33
0,447126
44
30

Figura 14. Representacin grfica Prueba de T Muestra 1

Valor crtico de t (dos colas)

P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t)de
una
cola
Prueba t para medias
dos
muestras emparejadas Variable 1
Estadstico t
Grados de libertad
Diferencia hipottica de las medias
Coeficiente de correlacin de Pearson

Prueba t para medias de dos muestras emparejadas Variable 2

Observaciones

Varianza
Media

10

15

20

25

30

En la prueba realizada demuestra que la diferencia entre los dos mtodos diagnsticos
no es significativa, ya que el valor Estadstico de T 1,4093 se encuentra dentro del
rango de aceptacin que est dado por el Valor Critico de T que es 2,0452.

Figura 15. Representacin muestra 1.

Zona de
rechazo
Ho

Zona de
rechazo
Ho

1.4
-

37

2.0

Zona de
aceptacin
Ha

En el grfico se puede observar que el valor de 1.40 correspondiente al valor

Estadstico de T se encuentra dentro de la zona de aceptacin que est delimitada por
los valores Crticos de T que son -2.04 y 2.04.
Por lo tanto segn el mtodo estadstico utilizado en este caso se aceptara la Ha que
dice:
La cristalizacin de la saliva es un mtodo factible y confiable para determinar el
momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras caninas.
Este resultado ser tomado en cuenta solo para las muestras tomadas en el primer da
que por lo general corresponde a inicios del proestro en el que se presenta
cristalizaciones de saliva tipo C y B en menor proporcin y en citologa vaginal
podemos observar clulas parabasales caracterizadas por su forma redondeada, ncleo
de gran tamao y citoplasma pequeo, acompaadas de gran cantidad eritrocitos
presentes debido al sangrado.

Tabla 4. Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva

y citologa vaginal, en la segunda toma.

38

Pacie
nte
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15

Cristalizac
in Saliva
0
1
1
0
2
2
2
1
0
1
1
1
0
1
2

Cristalizacin Saliva:

Muestra 2/ Da 3
Citologa
Cristalizaci Citologa
Paciente
Vaginal
n Saliva
Vaginal
2
16
2
2
2
17
1
1
1
18
2
1
1
19
0
0
1
20
2
2
2
21
1
1
2
22
1
2
1
23
1
0
1
24
1
1
2
25
0
0
1
26
0
1
1
27
1
1
2
28
1
1
1
29
1
1
1
30
1
1
0= No existe cristalizacin

1= Cristalizacin leve
2= Abundante cristalizacin
Citologa Vaginal:

0= Presencia de clulas parabasales

1=Presencia de clulas intermedias
2=Presencia de clulas epiteliales superficiales

Tabla 5. Prueba de T realizada en la Muestra 2.

Prueba t para medias de dos
muestras emparejadas
Variable
1
1

Media

39

Variable
2
1,2

Varianza
Observaciones
Coeficiente de correlacin de Pearson
Diferencia hipottica de las medias
Grados de libertad
Estadstico t
P(T<=t) una cola
Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (dos colas)

0,482758
62
30
0,325300
02
0
29
-1,43925
0,080394
1
1,699127
03
0,160788
21
2,045229
64

0,372413
79
30

Figura 16. Representacin grfica Prueba de T Muestra 2

Valor crtico de t (dos colas)

P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t)
una de
cola
Prueba t para
medias
dos muestras emparejadas Variable 1
Estadstico t
Grados de libertad
Diferencia hipottica de las medias
Coeficiente de correlacin de Pearson
Prueba t para medias de dos muestras emparejadas Variable 2
Observaciones
Varianza
Media
-5

40

10

15

20

25

30

En la prueba realizada demuestra que la diferencia entre los dos mtodos diagnsticos
no es significativa, ya que el valor Estadstico de T 1,43925 se encuentra dentro del
rango de aceptacin que est dado por el Valor Critico de T que es 2,0452.
Figura 17. Representacin de muestra 2

Zona de
rechazo
Ho

Zona de
aceptacin Ha

Zona de
rechazo
Ho

1.4
-

2.0

En el grfico se puede observar que el valor de 1.43 correspondiente al valor

Estadstico de T se encuentra dentro de la zona de aceptacin que est delimitada por
los valores Crticos de T que son -2.04 y 2.04, por lo tanto se acepta Ha que dice: La
cristalizacin de la saliva es un mtodo factible y confiable para determinar el
momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras caninas.

41

Tabla 6. Resultados de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de saliva y citologa

vaginal, en la tercera toma.

Pacie
nte
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15

Muestra 3/ Da 5
Cristaliza Citolog
Cristaliza
Pacien
cin
a
cin de
te
Saliva
Vaginal
saliva
0
1
16
2
1
2
17
2
1
2
18
1
2
2
19
2
1
2
20
2
2
2
21
2
1
0
22
1
1
2
23
2
1
1
24
1
1
2
25
2
2
2
26
2
2
2
27
1
2
2
28
1
2
2
29
1
0
2
30
2

Cristalizacin Saliva:

Citologa Vaginal:

Citolog
a
vaginal
2
2
2
2
1
2
2
1
2
2
2
2
2
2
2

0= No existe cristalizacin

1= Cristalizacin leve
2= Abundante cristalizacin
0= Presencia de clulas parabasales
1=Presencia de clulas intermedias
2=Presencia de clulas epiteliales superficiales

Tabla 7. Prueba de T realizada en la Muestra 3.

Prueba t para medias de dos
muestras emparejadas

Media
Varianza
Observaciones
Coeficiente de correlacin de Pearson

42

Variable
1
1,433333
33
0,391954
02
30
0,181990
6

Variable
2
1,8
0,234482
76
30

Diferencia hipottica de las medias

Grados de libertad
Estadstico t

0
29
2,795558
0
0,004547
95
1,699127
03
0,009095
9
2,045229
64

P(T<=t) una cola

Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (dos colas)

Figura 18. Representacin grfica Prueba de T Muestra 3

Valor crtico de t (dos colas)

P(T<=t) dos colas
Valor crtico de t (una cola)
P(T<=t)
una de
cola
Prueba t para
medias
dos muestras emparejadas Variable 1
Estadstico t
Grados de libertad
Diferencia hipottica de las medias
Coeficiente de correlacin de Pearson

Prueba t para medias de dos muestras emparejadas Variable 2

Observaciones
Varianza
Media

-5

10

15

20

25

30

En la prueba realizada se demuestra que la diferencia entre los dos mtodos

diagnsticos es significativa, ya que el valor Estadstico de T -2,7955580 no se
encuentra dentro del rango de aceptacin que est dado por el Valor Critico de T que
es 2,0452.

43

Figura 19. Representacin muestra 3.

Zona de
rechazo
Ho

Zona de
aceptacin
Ha

Zona de
rechazo
Ho

En el grfico
se puede observar que el valor de -2.79 correspondiente al valor
Estadstico de T se encuentra dentro fuera de la zona de aceptacin que est delimitada
por los valores-Crticos de T que son -2.04 y 2.04.
0
2.0

44

Por lo tanto se rechazara Ha y se acepta Ho que dice, la cristalizacin de la saliva no

es un mtodo factible y confiable para determinar el momento ptimo para realizar la
monta o inseminacin artificial en hembras caninas.

4.2 VERIFICACION DE LA HIPOTESIS

Mediante la observacin de resultados obtenidos en las pruebas de T de Student

realizadas en los tres das de toma de muestras se determina que la Cristalizacin de la
Saliva resulta confiable para en 1er y 2do da, aceptando la Ha que dice:
La cristalizacin de la saliva es un mtodo factible y confiable para determinar el
momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras caninas.
El 3er da de toma de muestras se rechaza Ha y se acepta Ho que manifiesta la
cristalizacin de la saliva no es un mtodo factible y confiable para determinar el
momento ptimo para realizar la monta o inseminacin artificial en hembras caninas.

CAPITULO V

45

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

5.1 CONCLUSIONES

Las constantes fisiolgicas obtenidas de las 30 pacientes se encuentran dentro

de lo normal presentando en promedio los siguientes valores:
Edad promedio 2 aos 6 meses esto quiere decir que en general las pacientes
que acuden a consulta ya han presentado ciclos estrales con anterioridad, peso
16 kg lo que vara de acuerdo al tamao de cada paciente, temperatura 38,6 C
demostrando estar dentro del rango normal, frecuencia cardiaca 132.5 lpm, esta
se presenta levemente elevada debido al estrs provocado por la manipulacin,
frecuencia respiratoria 50 rpm tambin elevada ya que las pacientes no se
encuentran completamente en reposo, el tiempo de llenado capilar es de 2
segundos descartndose hipovolemia, deshidratacin, y otros problemas de
diverso ndole, condicin corporal de 3.1 esta fue evaluada en una escala de 1 a
5, y coloracin normal de las mucosas presentando todas las pacientes una
coloracin rosa brillante considerada normal.

Segn los resultados obtenidos de las pruebas diagnsticas de cristalizacin de

saliva, se concluye que este mtodo se aproxima en fiabilidad a la citologa
vaginal exfoliativa en la Muestra realizada el 1er da, la Prueba de t demuestra
que no se observa una diferencia significativa entre los dos mtodos
diagnsticos ya que el Valor Estadstico de t 1.4093 se encuentra dentro del
rango de aceptacin que est dado por el Valor Crtico de t que es 2,0452.
En la Muestra realizada el 2do da se obtiene como resultado de la Prueba de t
que no existe diferencia entre las dos variables en estudio, presentando un
Valor Estadstico de t 1.43925 y un Valor Crtico de t 2.0452 lo que significa
que la cristalizacin de saliva se asemeja a la prueba de citologa vaginal.
El 3er da de toma de Muestras, realizando la Prueba de t se obtiene que existe
diferencia entre las dos variables en estudio obteniendo un Valor Estadstico de
t 2,7955 y el Valor Critico de t 2.0452 por lo que se demuestra que existe
diferencia entre el mtodo de cristalizacin de saliva y la prueba de citologa
vaginal da de muestra se observa.

Se identific el grado de cristalizacin presente en la saliva de las hembras

caninas durante el inicio del proestro caracterizado por cristalizaciones en
forma de helechos similares al Tipo C que son fragmentados y pequeos, en la

46

fase intermedia se pudo observar cristales Tipo B caracterizados por su tamao

y por no ser tan abundantes y ramificados, mientras que en la fase final del
proestro e inicios del estro se pudo observar cristales Tipo A que se presentan
en forma de helechos anchos, grandes y abundantes.

Se determin que los resultados obtenidos en las muestras 1 y 2 de

cristalizacin de saliva poseen similitud con las muestras realizadas con el
mtodo de citologa vaginal, mientras que la muestra 3 no guarda una
considerable relacin con la prueba de citologa vaginal, por lo cual la prueba
de cristalizacin de saliva posee una efectividad comprobada de 2/3 (66,6%)
por lo que se la puede considerar como una alternativa confiable para la
determinacin del estro.

5.2 RECOMENDACIONES

Utilizar el mtodo de cristalizacin de saliva como un mtodo auxiliar y

complementario con el que se puede obtener un gran porcentaje de
aproximacin hacia nuestro objetivo, que es determinar la fase reproductiva en
que se encuentra nuestro paciente y poder aproximarse con seguridad hacia el
perodo frtil.

Motivar a profesionales en el rea a utilizar este mtodo en su prctica diaria

ya que no conlleva gran inversin de tiempo y dinero por lo que se puede
realizar rpidamente y obtener un resultado diagnostico aceptable en instantes.

Realizar una ficha clnica con parmetros reproductivos especialmente en

hembras y motivar al propietario a observar el comportamiento de su mascota
en sus diferentes etapas reproductivas y as poder llevar un control ms preciso
en cuanto a etapa del ciclo estral se encuentra el paciente.

Elaborar una gua en la que se describa el proceso de toma de muestras y la

interpretacin de los resultados obtenidos con el mtodo de Cristalizacin de
Saliva.

47

CAPITULO VI
PROPUESTA

6.1 TEMA
GUIA PARA LA OBTENCION E INTERPRETACION DE MUESTRAS
MEDIANTE LA OBSERVACION DE LA CRISTALIZACION DE SALIVA COMO
METODO DIAGNOSTICO DE ESTRO.
6.2 OBJETIVOS
6.2.1 Objetivo General
Utilizar la gua para la obtencin e interpretacin de muestras mediante la
observacin de la cristalizacin de saliva en la prctica diaria como mtodo
auxiliar y confiable para determinar el momento ptimo para realizar la monta
o inseminacin artificial.
6.2.2 Objetivos Especficos
Determinar mediante la gua la etapa del ciclo estral en que se encuentran las
pacientes, que pueden ser, anestro, proestro, estro y diestro.

Establecer el grado de cristalizacin de la saliva presente utilizando la gua en

el momento en que se evala las muestras en el microscopio y establecer la
etapa del ciclo estral.
6.3 JUSTIFICACIN
La utilizacin del mtodo de cristalizacin de saliva es muy importante ya que con
este mtodo se puede tener una idea de en qu etapa de ciclo estral se encuentra el
paciente y por lo tanto podramos acercarnos a determinar el momento ptimo para
realizar la inseminacin artificial.
Otras pruebas utilizadas en la clnica diaria como pueden ser anlisis sanguneos y la
citologa vaginal exfoliativa son ms fiables pero requieren tambin de un cierto grado
de tiempo y dinero por parte del propietario, pero no por eso deben dejar de ser

48

utilizadas, mientras que la cristalizacin no requiere de mucho tiempo y materiales

especiales para su ejecucin por lo que se recomienda su utilizacin como mtodo
rpido y orientativo al momento de determinar el estro.
6.4 MANEJO TECNICO
Toma de Muestras
Extraccin de la muestra de la saliva
Utilizando un guante de examinacin se procede a recolectar saliva de la cavidad bucal
utilizando en dedo ndice tratar de extraer la mayor cantidad posible de saliva que se
encuentra bajo la lengua y a nivel de las encas de los molares 2 y 3, se debe tener
cuidado de obtener una muestra limpia sin residuos de alimento.

Manejo de la Muestra
Colocacin de la muestra en el portaobjetos
Ya recolectada la muestra de saliva colocarla sobre un portaobjetos, tratando de
ubicarla en varios sitios, ya realizado esto se procede a dejarla a temperatura ambiente
durante dos minutos, luego se procede a observarla en el microscopio con el lente de
4x. La muestra podr ser observada hasta 20 minutos luego de su extraccin pasado
este tiempo se volver difusa y se necesitara una nueva muestra.

49

Interpretacin
Observacin de la muestra en el Microscopio
Se procede a observar todas las improntas realizadas en el portaobjetos y se tomara en
cuenta la que mayor visibilidad presente, a continuacin se observan muestras
obtenidas en el estudio.
Paciente: Peggy, Raza; Bulldog Ingles, Edad: 1 ao 10 meses
Cristalizacin de saliva Muestra 1

Se puede observar presencia de cristalizacin de tipo A caracterizada por cristales

con forma de helechos pequeos y poco ramificados presentes a inicio del
proestro.
Paciente: Cloe, Raza: Bulldog francs, Edad: 1 ao 3 meses
Cristalizacin de saliva Muestra 2

50

Se observa cristalizacin de tipo B caracterizada por helechos ms abundantes que

el tipo A presentes en la mitad del proestro
Paciente: Minnie, Raza: Shih tzu, Edad: 3 aos
Cristalizacin de saliva Muestra 3

En esta muestra se observa cristalizaciones de tipo C con forma de helechos grandes,

anchos y con varias ramificaciones, estos se presentan durante el estro.
En las muestras que son tomadas en etapas de diestro y anestro no se observa
cristalizacin al observarla al microscopio se pueden presentar cristalizaciones muy
fragmentadas y delgadas.

51

ANEXOS

52

Instalaciones de las Clnicas que formaron parte del estudio

Materiales utilizados en la investigacin:

Guantes de examinacin

Microscopio

Portaobjetos

Tincin de Wright y Agua Destilada

Hisopos
Toma de Constantes Fisiolgicas:

Frecuencia Cardaca

Temperatura

Tiempo de llenado capilar

Peso
Proceso para la Toma de Muestra para Citologa Vaginal

Limpieza de la vulva

Introduccin de hisopo en ngulo de 45

Colocacin de la Muestra en el portaobjetos rodando el hisopo en la placa.

Colocacin de 2ml de Tincin de Wright

Agregamos 2ml de agua destilada

Observacin de brillo metlico sobre la muestra

Secado de la Muestra

Observacin de la muestra en el microscopio

Toma de Muestra para la observacin de la Cristalizacin de Saliva

Toma de la muestra de saliva directamente de la cavidad bucal del paciente

Colocacin de la muestra en el portaobjetos

Observacin en el microscopio

Placas obtenidas de las 30 pacientes que formaron parte de la investigacin

BIBLIOGRAFIA
Brito, C. 2009, Arborizacin de la saliva de la perra como tcnica auxiliar para
el diagnstico del ciclo estral. Ibagu Tolima.
Gobello, C. De la Sota, RL. Goya.2001 A review of canine pseudocyesis. La
Plata, Argentina.
Goodwin, 1979. Sex pheromone in the dog: Vol. 203 no. 4380. pp. 559-561.

Concannon, 1975 Reproduction in Domestic Animal.

Feldman, E.C.; Nelson, R. 1991 Ciclo Ovrico y Citologa Vaginal. En

endocrinologa y reproduccin canina y felina

 Laboratorio Patolgico San Isidro 2009, Citologa Vaginal.

UNL Universidad Nacional del Litoral Facultad de Ciencias Veterinarias,
2003.Citologa Vaginal.
Segarra, E. 2012 Fisiologa de los aparatos y sistemas. Universidad de Cuenca.
S. Sisson y J. D. Grossman. Robert Getty. 2003.Anatoma de los Animales
Domsticos.
Caldern, A.1988 Fundamentos sobre urologa clnica en perros y gatos.
UNAM, Mxico.
Gourley, I.1980 Tratamiento de la piometra de la perra sin ovariohisterectoma.
En: Bojrab, M.J.: Medicina y Ciruga en especies pequeas. CECSA. Mxico,
D.F. P.267-270.
Grooters, A.1996Enfermedades de ovarios y tero. En: Birchard, S.J. y
Sherding, R.G.: Manual Clnico de Pequeas Especies. p1061-1075. Mc.
Graw-Hill Interamericana.Mxico, D.F.
Pardo-Carmona B, Moyano MR,2009 Fernndez-Palacios R, Prez-Marn CC.
del Department of Animal Medicine and Surgery, University of Cordoba,
Campus de Rabanales

Olson et al.1982 Adaptability and Cohesion Evaluation Scales. Minnesota

Science, University of Minnesota.
Wild et al.,1979 Antibodies in patients with various types of cancer: assay,
identification and characterization.

Handley,1975 The Pathogenesis of Urinary Tract Infections.

Bell and Christie.1971 Endocrinology of the oestrous cycle in the

bitch.

Phemister et al.,1973 The Ovarian Cycle of the Bitch - Biology of

Reproduction.

Jhonson and Root, 1995. Normalization of raised sodium absorption

and raised calcium-mediated chloride secretion by adenovirus-

mediated expression of cystic fibrosis transmembrane conductance

regulator in primary human cystic fibrosis airway epithelial cells.

Holst and Phemister,1974. Onset of diestrus in the beagle bitch: Definition and
significance.
Andresen and Wooten,1959.Genetic and reproduccin of animals.

Jeffcoate,1992. Concentrations of luteinizing hormone and oestradiol

in plasma and response to injection of gonadotrophin-releasing
hormone analogue at selected stages of anoestrus in domestic
bitches.

Simes A. Lopes, 2012 Cuidados Reproductivos.

Universidad de Crdoba, 2006 Reproduccin animal.

Hiemstra M, Shaefers-Okkens AC, Teske E, et al. 2001.

Feldman, E.C.; Nelson, R. 1991. Ciclo ovrico y citologa vaginal. En:

Endocrinologa y Reproduccin canina y felina. Editorial Inter-Mdica.
Buenos Aires. Argentina.
Lezama,H.J. 1985 Estacionalidad reproductiva de la perra en la Ciudad de
Mxico. Tesis de licenciatura. Fac. Med. Vet. Zoot., Universidad Nacional
Autnoma de Mxico. Mxico D.F.
Wolf, A.M.1994 Infertilidad en la gata. En: Kirk,R.W.: Teraputica Veterinaria
de Pequeos Animales.Mc. Graw-Hill Interamericana. Madrid, Espaa.
Goodman M. 2001 Ovulation timing concepts and
controversies.Vet.Clin.North.Am. 219.