DETERMINACIN DE LOS MICROORGANISMOS

DEL SUELO
MARTHA POSADA
SEGUNDO CICLO 2014
1

Annderson Alfonso, Carlos Diaz, 3 Carolina rincn

1

Ingenieria Ambiental, Universidad de La Salle,

Ingeniera Ambiental. Universidad de La Salle
Ingeniera Ambiental, Universidad de La Salle,

Fecha prctica 01/10/2014; Fecha entrega de informe 22/10/2014

RESUMEN
En esta prctica que se realiz en el Laboratorio de Microbiologa de la Universidad De La Salle se
estudi el anlisis microbiolgico del suelos, para poder hacer los respectivos recuentos empleando el
mtodo de placa profunda con diluciones en serie (1:10, 1:100, y 1:1000), usando los medios de cultivo
respectivos para identificar los microorganismos (Agar Sabouraud). De acuerdo a los resultados
obtenidos podremos discutir sobre la poblacin microbiana presente en este suelo teniendo en cuenta los
parmetros fisicoqumicos bsicos. Con el fin de poder establecerse cualquier uso del suelo bien sea con
fines de agricultura o pastoreos de ganados con el fin de poder obtener o un suelo adecuado para dicho
trabaja que se quiera realizar.
Palabras claves: poblacin microbiana; parmetros fisicoqumicos; anlisis microbiano
ABSTRACT
This practice was carried out in the Laboratory of Microbiology of the University De La Salle
microbiological analysis of soils was studied in order to make the respective counts using the method of
deep plate with serial dilutions (1:10, 1: 100, and 1: 1000), using the respective culture media to identify
microorganisms (Sabouraud Agar). According to the obtained results we can discuss this microbial
population in the soil taking into account the basic physicochemical parameters. To any land use purposes
either farming or cattle grazing in order to obtain or a suitable ground for such works make you want to
set.
1

Keywords: microbial population; physicochemical parameters; microbial analysis

INTRODUCCION
El suelo es un ecosistema que contiene una
gran variedad de poblaciones microbianas
cuyos miembros representan muchos tipos
fisiolgicos. Las caractersticas qumicas,
fsicas y biolgicas de un suelo particular, as
como la presencia de crecimiento de plantas
influirn en el nmero y actividades de sus
diversos componentes microbianos. Adems, a
causa de la naturaleza heterognea del suelo
varios tipos fisiolgicos de organismos sern
encontrados en las proximidades cercanas de
uno a otro. La comunidad microbiana en suelos
es importante por su relacin con la fertilidad
del suelo y con los ciclos biogeoqumicos de
los elementos, adems del uso potencial de los
miembros especficos para aplicaciones
ambientales e industriales. Por lo que existe la
necesidad de conocer, enumerar y aislar los
miembros principales y menores de la
comunidad microbiana en suelos.

El suelo es la parte exterior de la corteza

terrestre en donde las rocas se han desintegrado
por efecto del intemperismo, formando una
cubierta en la que vive una microbiota, una
flora y una fauna microbianas que, actuando en
conjunto, transforman materia mineral en
alimento de las plantas, para que puedan ser
utilizadas posteriormente por los animales y los
seres humanos. El suelo est constituido por
una capa ms o menos gruesa de material
fragmentario no consolidado que se conoce con
el nombre de regolita y que se apoya en la
roca subyacente. El suelo, junto con el agua en
forma de lluvia o corrientes, permite el
establecimiento de las actividades forestales,
ganaderas y agrcolas. As, el suelo es el
resultado de la interaccin del clima, la roca
madre, el drenaje, la topografa, los
microorganismos y la vegetacin a lo largo del
tiempo. La calidad del suelo se refiere a su
capacidad para sostener la productividad
vegetal y animal, as como mantener o mejorar
la calidad del aire y agua. Su importancia
radica en su naturaleza no renovable en los
tiempos de vida humana
IMPORTANCIA
DE
LA
VIDA
MICROBIANA EN EL SUELO
Los microorganismos presentes en el suelo
ejecutan una variedad de funciones, algunas de
extrema importancia para la salud del suelo y
las
plantas.
Estas
actividades
son
extremadamente importantes para el normal

OBJETIVOS
Identificar los microorganismos caractersticos
que se encuentran en la muestra de suelo
tomada.
MARCO TEORICO
QUE ES EL SUELO?
2

funcionamiento de las plantas. Sin embargo los

microorganismos pueden ser afectados de
manera drstica por los ambientes qumicos,
fsicos y biolgicos, por factores como el pH, la
fertilidad, la disponibilidad y el contenido de
materia orgnica, contenido de residuos, la
temperatura, la porosidad de los suelos y la
variedad de cultivos. Como resultado todas las
practicas de manejo que afectan estos factores
tambin afectan las actividades microbianas de
una o varias maneras. Cuando el proceso
microbiano es afectado en forma negativa,
generalmente se ven efectos indirectos que
reducen en la salud y el vigor de las plantas.
Cuando se afecta en forma positiva, este se
manifiesta mejorando el vigor de la planta, la
tolerancia al estrs y la resistencia a plagas.
Complejo dinmico el suelo ,caracterizado por
una gran cantidad particular de agua ,elementos
minerales, flora y fauna; los microorganismos
que habitan en el suelo se ha encontrado
actividad metablica ,sus diversas funciones en
el flujo de energa ,asi como el ciclo
nutricional. En este proceso la mayor parte son
los microorganismos ms abundantes y
pequeos. Pueden ser aerobias, anaerobias s o
facultativas. Pueden tolerar pH cido
(acidfilas), pH bsico (basfilas) o pH neutro
(neutrfilas).

Su capacidad de multiplicacin les permite

crear poblaciones muy grandes en un tiempo
muy corto, colonizando rpidamente los
sustratos a degradar. La clase y abundancia de
bacterias presentes en una fraccin de suelo
dependen de los sustratos que la compongan y
de sus condiciones. Los grupos bacterianos que
actan primero sobre los sustratos disponibles
son dominantes hasta que termina su accin y
luego dan oportunidad a que otros grupos
crezcan en el residuo del metabolismo de los
primeros. Por lo tanto hay grupos bacterianos
que permanecen y otros que entran en latencia
hasta que encuentran condiciones favorables
para su crecimiento. Las bacterias tienen
especial importancia en la relacin suelo-planta
y son responsables del incremento o
disminucin en el suministro de nutrientes.

Existen del orden de varios miles de millones

de bacterias por gramo de suelo. La mayor
parte son hetertrofos, siendo comunes los
bacilos esporulados, los actinomicetos que son
los responsables del olor a tierra mojada, y en
la rizosfera (regin donde el suelo y las races
de las plantas entran en contacto) especies de
los gneros Rhizobium y Pseudomonas.
MICROORGANISMOS DEL SUELO
3

Los suelos agrcolas que estn sometidos a la

mecanizacin continua, al monocultivo, al
riego, a la aplicacin de agroqumicos y
fertilizantes de sntesis, a la compactacin y a
las quemas, tienen una flora microbiana muy
baja que afecta su fertilidad.Las bacterias
benficas del suelo son indispensables para
recuperar la estructura perdida por las practicas
agrcolas, para hacer disponibles los nutrientes
que hay en el suelo y para incorporarle la
materia organiza que necesita para mejorar la
fertilidad.
HONGOS DEL SUELO
Conforman una importante fraccin de la
biomasa total microbiana del suelo. Crecen en
forma de red extendindose como micelio hasta
su estado reproductivo donde dan origen a
esporas sexuales o asexuales. Son importantes
degradadores aerobios de material vegetal en
descomposicin en suelos cidos. Producen
enzimas y metabolitos que contribuyen al
ablandamiento y a la transformacin de
sustancias orgnicas. Tambin estas enzimas
forman parte de la actividad de otros
microorganismos.
Son especies que se encuentran en el suelo,
generalmente cerca de la superficie donde
prevalece una condicin aerbica. Los hongos
son los descomponedores de celulosa, lignina y
pectina. La importancia del hongo en el suelo
es que mejora la estructura fsica mediante la
acumulacin de sus micelios(masa de hifas) en
l. Adems los hongos forman unos agregados
que ayudan a retener agua.

Entre los gneros bacterianos ms importantes

agrcolamente por la transformacin de los
compuestos orgnicos e inorgnicos y que
favorecen la nutricin de las plantas estn:
Bacillus,
Pseudomonas,
Azotobacter,
Azospirillum, Beijerinckia, Nitrosomonas,
Nitrobacter,
Clostridium,
Thiobacillus,
Lactobacillus, y Rhyzobium.

Los
hongos metabolizan compuestos carbonados de
muy difcil degradacin como las celulosas, las
hemicelulosas y las ligninas. Tambin degradan
azcares simples, alcoholes, aminocidos y
cidos nucleicos. Pueden ser parsitos o
saprofiticos. Son muy importantes en suelos
con desechos de cosecha. Su crecimiento
ramificado rpido y la intensa actividad
degradadora les permiten mantener un
equilibrio en los ecosistemas del suelo.
Las races de las plantas estn pobladas de
hongos que aprovechan las exudaciones
radiculares
constituidas
por
azcares,
aminocidos, cidos orgnicos, nucletidos,
enzimas, vitaminas y sustancias promotoras de
crecimiento. Los hongos movilizan nutrientes
minerales hacia las races de las plantas,
aumentan la capacidad de retener agua en
sequa, fijan nitrgeno y fsforo y protegen las
races de fitopatgenos por espacio y emitiendo
sustancias que los inhiben. Los hongos son
muy activos en las plantas y prefieren los
azcares que estas segregan por las races.
Tambin toman aminocidos.Algunos hongos
entran en simbiosis con las races llamadas
micorrizas. Son ms activos en suelos arenosos
y pobres en materia orgnica. La simbiosis se
ve favorecida por la pobreza mineral del suelo.

Los gneros de hongos ms importantes

asociados a las races de las plantas son
Aspergillus,
Penicillium,
Rhizopus
y
Trichoderma. El Aspergillus y el Penicillium
movilizan el fsforo y el nitrgeno del suelo. El
Trichoderma sostiene la humedad en las races
en condiciones de sequa.
Algunas
levaduras
son
importantes
fermentadoras de carbohidratos produciendo
alcoholes que son utilizados por otros
microorganismos como fuentes de energa.
Entre los gneros ms importantes estn el
Saccharomyces y el Rhodotorula.
ACTINOMICETOS DEL SUELO
Son bacterias que se parecen a los hongos por
tener micelio areo ramificado. Estn
distribuidos en diversos hbitats, se encuentran
en distintas profundidades y son casi
abundantes como el resto de las bacterias. Son
aerobios y menos sensibles a la sequedad.

Se encuentran en el suelo, las aguas estancadas,

el lodo y los materiales orgnicos en
degradacin. Se nutren de materiales orgnicos.
Degradan desde azcares simples, protenas,
cidos orgnicos hasta substratos muy
complejos compuestos por hemicelulosas,
ligninas, quitinas y parafinas. Por esto son
importantes en el proceso de transformacin
hasta la obtencin del humus en el suelo.
Adems son considerados como los mejores
degradadores del suelo, pues son muy
eficientes produciendo sustancias hmicas.

Algunos actinomicetos producen antibiticos

que regulan los patgenos de las plantas que
estn en el suelo. Al agregar conidias de
actinomicetos en un suelo contaminado con
bacterias y hongos fitopatgenos, crecen
inhibiendo las poblaciones de los patgenos,
regulando los problemas hasta alcanzar un
balance que le permita a las plantas obtener
nutrientes y desarrollarse.

En suelos bien aireados con alto contenido de

materia orgnica alcanzan poblaciones muy
altas. Constituyen del 10 al 50% de la
comunidad microbiana del suelo. Se
desarrollan bien en suelos con pH desde 5 hasta
7. Se reproducen por conidias y estas son
resistentes a condiciones difciles de
temperatura, acidez y humedad. Esto les
permite germinar cuando se restablecen las
condiciones favorables para su desarrollo. En
suelos secos los actinomicetos se comportan
muy bien.

Los gneros de actinomicetos del suelo ms

importantes para la nutricin de las plantas son:
Streptomyces, Nocardia, Micromonospora,
Thermoactinomices, Frankia y Actinomyces.

desarrollo bacteriano y favorece el crecimiento

de hongos y levaduras. El agar es el agente
solidifcante.
Composicin tpica
Contiene normalmente
40 g/L glucosa
10 g/L pluripeptona
15 g/L agar
0,05 g/L [cloranfenicol]
pH 5.6

MEDIO USADO PARA LA IDENTIFICACIN DE

LOS MICROORGANISMOS DEL SUELO

Sabouraud Agar

RESULTADOS.
Primera sesin.
En esta primera parte se tiene una muestra de suelo de
jardn casa, Laura casas se hace una toma de muestra de 10
gr de la suelo.
En una botella de tapa azul se hace una dilucin de
1:10 de agua Peptonada.

Uso
Medio utilizado para el aislamiento,
identificacin y conservacin de hongos
patgenos y saprfitos. Tambin es til para el
cultivo de levaduras
Fundamento
Medio de cultivo recomendado para el
aislamiento y desarrollo de hongos,
particularmente los asociados con infecciones
cutneas (piel, pelo).
En el medio de cultivo, la peptona, la triptena
y la glucosa son los nutrientes para el
desarrollo de microorganismos. El alto
contenido de glucosa, la presencia de
cloranfenicol y el pH acido, inhiben el

Luego se toman tres tubos ensayo y se hacen tres

diluciones consecutivas 1:100 1:1000 1:10000
respectivamente en cada tubo se hace una dilucin de
1 mL.
Se tienen inicialmente 9 placas, se toma una para
hacer una prueba de esterilidad con el medio presente,
luego en las placas restantes se pone 1mL de cada
dilucin pero esta se hace de forma clonada, en dos
placas se aplica 1mL de cada dilucin luego se agrega
una cantidad considerable del medio en cada placa y
cerrarla y ponerlas en las incubadora.
Finalmente se hace la tincin Gram en cada dilucin
para observar en el microscopio.
7

Imagen5:
Tincin Gram dilucin 1:10000
Imagen1:Prueba esteril.muestra diluciones con medio.

.
Segunda sesin
Despus de tener un da en la incubadora se sacan y se
tiene en una temperatura estable las placas y a los 8
das se observa lo siguiente:

Imagen2: Tincion Gram dilucin 1:10

Imagen3: Tincin Gram dilucin 1:100

Imagen6: placas y prueba
esteril despues de 8 dias

Imagen4: Tincin Gram dilucin 1:1000

morado por debajo y blanco por encima, uno gris con

blanco en forma de u, uno amarillo por debajo y
blanco por encima, uno amarillo con negro forma
ovalada, uno amarillo con negro en forma redonda,
Uno verde con amarillo y blanco, uno blanco por
encima y por debajo con filamentos ramificados y
crecimiento radial.
4 levaduras diferentes; una muy grande, una morada
en el centro y las dems con formas variables y tonos
distintos.

Imagen 7: muestra dilucin 1:10 despues 8 dias parte

adelante y atrs.
En estas placas observamos hay 4 hongos diferentes a
simple vista uno gris algodonoso, uno blanco por
encima y al respaldo rosa claro, uno verde oscuro y
unas levaduras que tienen mucoides lisas amarilla por
debajo y brillante por encima, una blanca con bordes
circular no tan brillante.
En estas placas observamos que se reproducen muy
bien los hongos y levaduras estas crecen algunas en
forma radial, otras crecen y se roban los nutrientes y
no dejan que crezca nada alrededor

I
Imagen 9: muestra dilucin 1:1000
despus 8 das parte adelante y atrs
En estas placas observamos 3 hongos a
simple vista uno rosado, uno gris, uno
amarillo de diferentes formas, uno blanco
por encima y por debajo grande, otro
blanco en el centro y caf por debajo.
Levaduras; una amarilla brillante, una
amarilla mate, amarillo brillante en forma
de u, una beige mate pequea. Y muchas
pequeas en formas redondas, brillantes.

Imagen8: muestra dilucin 1:100 despues 8 dias

adelante y atrs.
En estas placas observamos 9 hongos diferentes a
simple vista ya que tienen filamentos ramificados, uno
9

Imagen 10: muestra dilucin 1:1000 despues 8 dias

parte adelante y atrs
En estas placas observamos una levadura redonda
brillante mediana, un hongo pequeo blanco
algodonoso, 2 levaduras pequeas redondas y
brillantes, 2 levaduras pequeas mate, una levadura en
forma de corazn, una levadura mediana brillante, 6
levaduras brillantes pequeas, 2 levaduras pequeas
color mate.

Esta imagen muestra las placas 15 dias despues de la

siembra y como podemos observar las levaduras y
hongos aumentaron su tamao.
Despus se eligen algunas muestras de cada
dilucin y se observan as:

Esta placa es estril y como observamos a los ocho

das no creci nada como se esperaba, esto quiere
decir que lo que creci en las otras placas era lo que
traa la muestra de suelo escogida.

Imagen11: moho negro muestra Dilucin 1:10 despus

de 8 das de crecimiento este moho se observa en la
imagen 7 anteriormente mencionada. En esta imagen
se observan estructuras redondas podra ser un
aspergillus.
10

Imagen 14: moho amarillo muestra dilucin 1:100

despues 8 dias crecimiento este podra ser un

Imagen 12: moho rosado muestra dilucin 1:10

despus 8 das de crecimiento. Este moho se observa
en la imagen 7 anteriormente mencionada. En esta
imagen observamos muchas clasmidosporas

Imagen 15: moho morado muestra dilucin 1:100

despus 8 das crecimiento. Este moho lo podemos
observar en la imagen 8. En este observamos micelios
no tabicados.

Imagen 13: Levadura blanca muestra dilucin 1:10

despus de 15 das de crecimiento. Esta levadura se
observa en la imagen 7 anteriormente mencionada. La
imagen no nos brinda mayor informacin para saber
que tipo de levadura es.

11

Imagen 16: levadura muestra dilucin 1:100 despus

15 das crecimiento. En esta imagen observamos
pseudomicelios de levadura.

Imagen 19: moho amarillo muestra dilucin 1:1000

despus 15 das crecimiento se observan hifas y
ramificaciones excesivas.

Imagen 17: moho rosado muestra dilucin 1:1000

despus de 8 das crecimiento En este observamos
micelios no tabicados.

Imagen 20: moho negro dilucin 1:1000 despues 15

dias crecimiento se observan ramificaciones excesivas.
Al observar estos mohos y levaduras en el
microscopio fue muy difcil reconocer de que genero
eran cada uno, debido al estado en que se encuentran
los microscopios y falta de practica para reconocer
cada uno de ellos.
Pudimos observar algunas estructuras como
pseudomicelios,
clasmidosporas,
micelios
no
tabicados.
Observamos a simple vista la diferencia entre un moho
y una levadura debido a que los mohos son
filamentosos ya que poseen un micelio mientras que

Imagen18: levadura amarilla muestra dilucin 1:10000

despus de 8 das de crecimiento. En esta imagen no
logramos identificar qu tipo de levadura es.

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las levaduras no poseen micelios, los mohos tienen

colores diversos y son algodonosos pueden crecer
algunos en forma radial, las levaduras son
generalmente incoloras y lisas de forma redonda u
ovalada.
Entre mayor dilucin observamos que los hongos no
crecen, sobreviven las levaduras.
CONCLUSIONES
Debido a las fallas en los microscopios no logramos
observar perfectamente los hogos y levaduras
presentes en el suelo.
Se pudo evidenciar que en las placas 1:10 a la hora de
ver los cultivos estos tuvieron una mayor reproduccin
o crecimiento gracias a que la muestra estaba ms
concentrada o menos diluida y haba una mayor
concentracin de hongos gracias a que en el medio que
se realiz el cultivo en un medio que tiene todas las
condiciones favorables para dicha reproduccin.
Se observ a la hora de hacer la comparacin entre las
diferentes placas que los hongos predominaron en la
reproduccin en todas las placas gracias a que estos
son organismos ms duros y con unas cualidades y
caractersticas muy diferentes que le favorece a la hora
de reproducirse en cualquier medio y entorno a
comparacin de las bacterias.
En las diferentes placas ambos microrganismos,
hongos y bacterias se reprodujeron de una forma
adecuada teniendo en cuanta su medio y entorno con
diversas caractersticas de reproduccin de cada uno

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