Professional Documents
Culture Documents
Bioqumica
Bioqumica Metablica
y Biologa Molecular
Estructural,
y Clnica
CURSO PARA
PARA LA
LAPREPARACIN
PREPACIN DEL
DEL BIR
FIR
www.academiagofir.com
www.academiabir.com
,
ha
Si te obsequio
e
t
:
r
s
do e
twitte
gusta enos en
IR
u
sg
GoB
ia
adem
c
A
@
2
@AcademiaGoBIR
INDICE
BIOQUMICA ESTRUCTURAL
Bioelementos.................................................................................................................................................... 5
Bioelementos primarios............................................................................................................................. 5
Bioelementos secundarios........................................................................................................................ 6
Oligoelementos o elementos traza .........................................................................................................12
El agua y sus propiedades........................................................................................................................22
glcidos o hidratos de carBono .........................................................................................................25
Monosacridos........................................................................................................................................25
Holsidos.................................................................................................................................................34
Hetersidos (glcido + aglicona).............................................................................................................42
Tcnicas de anlisis de glcidos.............................................................................................................44
Lpidos.................................................................................................................................................................45
Definicin y funcin..................................................................................................................................45
Clasificacin.............................................................................................................................................45
cidos grasos..........................................................................................................................................46
Lpidos saponificables.............................................................................................................................48
Lpidos insaponificables..........................................................................................................................54
Protenas..........................................................................................................................................................62
Definicin y funcin..................................................................................................................................62
Pptidos y enlace peptidico.....................................................................................................................68
Protenas: tipos y niveles estructurales...................................................................................................71
Tcnicas de anlisis de protenas...........................................................................................................79
Clasificacin.............................................................................................................................................82
Glucoprotenas........................................................................................................................................82
Cromoprotenas.......................................................................................................................................90
Hemoprotenas........................................................................................................................................93
Protenas de membrana plasmtica.......................................................................................................96
Transporte a travs de membrana.......................................................................................................98
Tipo de transporte....................................................................................................................................98
Protenas G....................................................................................................................................................100
enzimas ............................................................................................................................................................102
Caractersticas.......................................................................................................................................102
Clasificacin...........................................................................................................................................103
Mecanismo de accin enzimtico.........................................................................................................104
Cintica enzimtica................................................................................................................................106
Actividad enzimtica.............................................................................................................................. 112
Enzimas reguladoras............................................................................................................................. 113
Sern-proteasas..................................................................................................................................... 115
Enzimas de inters clnico..................................................................................................................... 115
Vitaminas..........................................................................................................................................................123
Vitaminas hidrosolubles.........................................................................................................................123
Vitaminas liposolubles...........................................................................................................................133
BIOQUMICA METABLICA
Bioenergtica y metabolismo................................................................................................................136
Bioenergtica.........................................................................................................................................137
Transferencia de grupos fosforilo y ATP................................................................................................138
Etapas en las rutas metablicas ...........................................................................................................140
Metabolismo de la glucosa....................................................................................................................141
Catabolismo de la glucosa: gluclisis....................................................................................................141
Destinos metablicos del piruvato.........................................................................................................147
Ruta alternativa de oxidacin de la glucosa..........................................................................................163
Anabolismo de la glucosa: gluconeognesis........................................................................................165
Metabolismo del glucgeno.................................................................................................................170
Catabolismo del glucgeno: glucogenolisis..........................................................................................170
Biosntesis del glucgeno: glucogenognesis......................................................................................173
Resumen de la glucogenolisis/glucogenognesis................................................................................175
3
@AcademiaGoBIR
BIOQUMICA CLNICA
Fase preanaltica........................................................................................................................................246
Sangre....................................................................................................................................................246
Orina......................................................................................................................................................247
Lquido cefalorraqudeo.........................................................................................................................249
Semen....................................................................................................................................................249
Fase analtica................................................................................................................................................250
Anlisis de sangre..................................................................................................................................250
Anlisis de heces...................................................................................................................................257
Anlisis de orina.....................................................................................................................................258
Anlisis de lquido cefalorraqudeo.......................................................................................................266
Anlisis de lquido sinovial.....................................................................................................................268
Anlisis de lquido seminal....................................................................................................................269
Anlisis de lquido amnitico.................................................................................................................271
Marcadores tumorales...........................................................................................................................272
Bibliografa....................................................................................................................................................275
4
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
BIOQUMICA
ESTRUCTURAL
1. BIOELEMENTOS
Los bioelementos o elementos biogensicos son los elementos qumicos que forman parte de los seres
vivos. Atendiendo a la proporcin en la que se encuentran formando parte de la materia viva, podemos
clasificarlos en 3 tipos:
MACROMINERALES
>100 g/mL
MICROMINERALES
<100 g/mL
BIOELEMENTOS PRIMARIOS
(C, O, H, n, P y S)
Son los elementos ms abundantes de la materia viva, constituyendo ms del 99% de la misma. El C,
O, H y N representan ms del 95%. Estos bioelementos forman las biomolculas y gases estables.
CARBONO Forma enlaces covalentes estables con otros tomos de C, H, N y O. Gracias a sus 4
electrones de valencia tiene la capacidad de formar enlaces dobles y triples, lo que permite alcanzar una
alta complejidad estructural y originar molculas orgnicas diversas.
OXGENO Elemento de bajo peso molecular, pequeo y muy reactivo. Es soluble en agua, y por
tanto, est disponible para la mayor parte de los organismos vivos. Es uno de los gases ms importantes
de la atmsfera. Es el bioelemento primario ms electronegativo.
HIDRGENO Es el elemento ms abundante de los organismos vivos. Forma enlaces covalentes
al compartir el nico electrn que tiene en su capa de valencia. Es uno de los elementos ms importantes
en la estructura de las biomolculas.
NITRGENO Elemento constituyente de los aminocidos, unidades estructurales de las protenas.
FSFORO Los compuestos del fsforo intervienen en procesos esenciales para los seres vivos.
Podemos encontrarlo como fosfato, que es el anin intracelular ms abundante. Se distribuye por igual
entre los compartimentos intracelular y extracelular. Aproximadamente el 85% del fosfato del cuerpo
humano se encuentra en el esqueleto, el 15% en los tejidos blandos y el 0,1% en el plasma sanguneo.
En los tejidos blandos la mayor parte del fosfato es orgnico, formando parte de los cidos nucleicos,
fosfolpidos y fosfoprotenas. En el plasma sanguneo el 55% del fosfato est ionizado, el 10% unido a
protenas y el 35% restante se encuentra formando complejos. Su concentracin plasmtica se regula
principalmente mediante eliminacin renal.
- Funciones:
a) Transcripcin y traduccin celular.
b) Crecimiento celular.
c) Componente de algunas coenzimas, como el NADP, y de los fosfolpidos de las membranas celulares.
d) Constituyente de los nucletidos que componen el DNA y el RNA.
e) Soporte estructural del cuerpo al formar parte de la hidroxiapatita almacenada en el hueso.
5
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Excrecin incrementada:
hiperparatiroidismo, defecto tubular
renal, hipomagnesemia,
Oxgeno
Silicio*
Aluminio
Hierro
% Corteza terrestre
ELEMENTOS
47%
28%
Oxgeno
Carbono
Hidrgeno
Nitrgeno
% Seres vivos
25%
25%
49%
0,27%
, Mg2+ y Cl-)
2+
Representan cerca del 1% restante de la materia viva. Son indispensables para casi todas las clulas,
aunque son requeridos en cantidades muy pequeas. Estos bioelementos, solos o combinados con otros
bioelementos, se encuentran en forma inica en disoluciones acuosas.
SODIO Es el principal catin del lquido extracelular, representando ms del 90% de los cationes
6
@AcademiaGoBIR
Osmolalidad: Es el nmero total de partculas de soluto por unidad de peso de disolucin. Osmolaridad: Es una medida del nmero total de partculas de soluto por
unidad de volumen de disolucin. En soluciones diluidas, como los lquidos corporales se pueden utilizar como sinnimos porque las diferencias son muy pequeas.
P
rdidas extrarrenales de Na+:
Vmitos, diarreas, peritonitis, traumatismos
y quemaduras
Prdidas renales de Na+:
Uso de diurticos
Nefropatas intersticiales
Insuficiencia renal crnica
Hipoaldosteronismo
Hiponatremia por dilucin:
Polidipsia primaria
Enfermedad de SIADH
Hiponatremia con osmolalidad
plasmtica normal:
Pseudohiponatremia: hiperlipemia
e hiperproteinemia
Hiponatremia osmtica: acumulacin
de solutos como glucosa, que provoca
la salida de agua de las clulas
7
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Ingesta de sal
Hipernatremia transitoria
Volumen extracelular
Deteccin por los osmorreceptores
Deteccin por los barorreceptores
ADH
Activacin del sistema
renina-angiotensina
Retencin de agua
Aldosterona
Vasoconstriccin renal
AUMENTO DE LA REABSORCIN
DE SODIO Y AGUA
- Se filtra libremente por el glomrulo y se elimina en un 80-90% por la orina; el resto, por el sudor y las
heces.
- Funciones:
a) Su presencia en el interior de la clula es imprescindible para mantener la osmolalidad y contribuye al
mantenimiento del volumen intracelular y la fuerza inica.
b) Participa en la transmisin nerviosa y neuromuscular.
c) La concentracin intracelular de K+ afecta a las enzimas celulares y al pH.
d) Participa en el transporte activo de nutrientes a travs de la bomba Na+-K+ (la alta concentracin de
potasio intracelular se mantiene gracias a esta bomba).
8
@AcademiaGoBIR
Ingestin deficiente
Prdidas gastrointestinales:
Diarreas
Vmitos
Causas renales:
Alcalosis metablica
Diuresis osmtica
Hiperaldosteronismo
Enfermedades renales tubulares
Pseudohiperpotasemia:
Trombocitosis, leucocitosis o hemlisis
9
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
9%
Calcio en complejo
con aniones
9% (0,2 mmol/L)
41%
50%
Calcio ionizado
50% (1,2 mmol/L)
- El 98-99% del calcio filtrado es reabsorbido. De esta cantidad, un 90% se reabsorbe en el tbulo proximal,
Asa de Henle y porcin inicial del tbulo distal. El 10% restante, por accin de la PTH, se reabsorbe en
la porcin final del tbulo distal y porcion inicial del tbulo colector.
Recuerda
La PTH favorece la reabsorcin de calcio en el tbulo distal y porcin inicial del tbulo colector, a nivel intestinal favorece de manera indirecta (estimula la sntesis de
1,25 dihidroxivitamina D) la absorcin de Ca2+ y en el hueso favorece la resorcin
sea Hipercalcemiante. La CALCITONINA reduce las concentraciones plasmticas de Ca2+ Hipocalcemiante.
CELULARES
- Mineralizacin
- Estabilizacin de membranas
- Excitabilidad y permeabilidad de la
membrana plasmtica
- Transporte de iones a travs de membranas
- Regulacin enzimtica
- Excitacin nerviosa
- Secrecin de hormonas
- Secrecin exocrina
- Neurotransmisin
- Contraccin muscular
10
@AcademiaGoBIR
malabsorcin, ...
Exceso de vitamina D
Hipoalbuminemia
Insuficiencia renal
Hipoparatiroidismo
Diurticos tiazdicos
raquitismo
Hipertiroidismo
Hipomagnesemia
Terapia con anticonvulsivos
- Hipocalcemia Se aumenta la permeabilidad neuronal a los iones sodio. Produce excitacin del
sistema nervioso y tetania.
- Hipercalcemia Deprime la actividad del sistema nervioso y muscular.
- El 70% del magnesio plasmtico circula libre en plasma y el resto, unido principalmente a albmina.
- De la cantidad presente en plasma, el 85-90% se filtra por el glomrulo y se reabsorbe el 25% en el tbulo
proximal, el 65% en el Asa de Henle y menos del 5% en el tbulo distal y colector.
- El 10-15% se excreta por la orina.
- Funciones:
a) Cofactor de todas las reacciones que involucran ATP (Ej. Sntesis de protenas y cidos nucleicos).
b) Cofactor de ms de 300 enzimas.
c) Excitabilidad neuromuscular.
Niveles de magnesio en suero
HIPERMAGNESEMIA
(>2,6
mg/dL)
Figura 4. Distribucin del
calcio.
- Los riones aumentan la excrecin urinaria de magnesio cuando hay hipercalcemia, hipermagnesemia,
disminucin de PTH (la PTH produce un aumento de la reabsorcin tubular de magnesio) y acidosis.
- CLORURO Es el anin extracelular ms abundante. Participa en el mantenimiento de la distribucin
hdrica, de la presin osmtica y en el equilibrio entre aniones y cationes del lquido extracelular. Es el
anin ms abundante en las secreciones gstricas e intestinales. Se reabsorbe pasivamente junto
con el sodio en el tbulo proximal (por atraccin elctrica) y activamente en la rama ascendente del Asa
de Henle.
11
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
(Fe, F, Zn y Cu)
- Esenciales: F, Si, Cr, Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn, Se, I y Mo.
- Posibles esenciales: V, As, B, Ba, Cd, Li, Pb y Sn.
- No esenciales: txicos (Ej. Hg) o no txicos.
Ojo
Atendiendo a su metabolismo:
ELEMENTOS ESENCIALES
Elementos catinicos
Absorcin variable
Control homeosttico a
travs del hgado (va de
eliminacin biliar) y del tracto
gastrointestinal
(va de excrecin fecal)
Elementos aninicos
Absorcin en el intestino
Eliminacin a travs de va
renal
I y Se
Zn, Mn y Cu
Clasificacin de los elementos traza
12
@AcademiaGoBIR
Funcin en la clula
Ceruloplasmina
Citocromo oxidasa
Dopamina hidroxilasa
Lisina hidroxilasa
Superxido dismutasa
Tirosinasa
Delta-aminolevulnico deshidratasa
Los requerimientos diarios de cobre son 2-3 mg. Del cobre procedente de la dieta, se absorbe un 32% a
nivel duodenal. En su absorcin participa una protena llamada metalotionena que tambin est implicada
en la absorcin de otros metales como el zinc, el cadmio y el mercurio.
Al entrar en la sangre el cobre es captado por la albmina del plasma y de aqu se distribuye a las
cuproprotenas del hgado y de otros tejidos. Una vez incorporado a la ceruloplasmina heptica se vierte
a la sangre.
Se excreta principalmente en la bilis al intestino y se elimina por las heces. Debido a que el cobre
plasmtico est en su mayora unido a protenas no se excreta fcilmente.
Dficit de cobre
Causas:
- Dficit de aporte: alimentacin parenteral prolongada o prematuros alimentados con leche de vaca
durante 2 3 meses.
- Dficit de absorcin: fibrosis qustica, enfermedad celiaca, esprue.
- Aumento de prdidas: enteropata con prdida de protenas, sndrome nefrtico,
- Trastornos hereditarios: enfermedad de Menkes, enfermedad de Wilson e hipoceruloplasminemia
familiar.
Sntomas del dficit de cobre Anemia, trastornos neurolgicos con dficit de mielina, trastornos seos
y de la pared de las arterias (debido al dficit en la sntesis de colgeno y elastina), y sntesis disminuida
de melanina.
Exceso de cobre
transporte y almacenamiento intracelular de cobre. Se debe a mutaciones en el gen que codifica para la
protena ATP7A, que es un transportador de cobre. Esta ATPasa se encarga de la conduccin del cobre
13
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Recuerda
b) Zinc
Es el segundo oligoelemento ms abundante del ser humano (el primero es el hierro) y ejerce una
funcin importante como cofactor de mltiples enzimas del metabolismo intermediario.
El zinc desempea un papel fundamental en la sntesis proteica y en la expresin gnica.
- Alcohol deshidrogenasa
- Anhidrasa carbnica
- Carboxipeptidasas
- Fosfatasa alcalina
- Timidina quinasa
- RNA y DNA polimerasas
La cantidad diaria de Zn recomendada es de unos 15 mg/da, cantidad que aumenta durante el embarazo
y la lactancia.
Se absorbe entre un 20-30% del zinc ingerido en el yeyuno y en el duodeno proximal. El zinc se transporta
en el plasma sanguneo unido a albmina (60-70%) y a la 2-macroglobulina (30-40%), con una pequea
cantidad asociada a la transferrina y a los aminocidos libres.
Los tejidos y lquidos ms ricos en Zn son: prstata, semen, hgado, rin, retina, hueso y msculo. El
contenido de Zn de los eritrocitos es 10 veces el del plasma debido a la presencia en los hemates de la
anhidrasa carbnica.
La va principal de excrecin del zinc son las heces. La secrecin pancretica es responsable de un 25%
de la excrecin total.
Dficit de zinc
Causas:
- Dficit de absorcin intestinal: por dietas ricas en cereales y pan no fermentado (los fitatos inhiben la
absorcin de Zn).
- Redistribucin desde el plasma a los tejidos: en la fase aguda del infarto de miocardio, hepatitis,
infecciones y neoplasias malignas.
- Aumento de prdidas gastrointestinales: diarrea y vmitos.
- Prdidas urinarias: ingestin de alcohol y sndrome nefrtico.
- Frmacos: corticosteroides y penicilina.
La deficiencia de Zn afecta a los tejidos con una alta tasa de recambio celular.
14
@AcademiaGoBIR
esqueltica, diarrea, alopecia y dermatitis, disfuncin inmunitaria con predisposicin a las infecciones,
retraso en la cicatrizacin y anomalas del gusto.
Exceso de zinc
Causas:
c) Hierro
Es el oligoelemento ms abundante del cuerpo humano. La importancia fundamental del hierro en
el organismo reside en su capacidad para fijar, transportar y ceder oxgeno, de ah su importancia en la
respiracin. Se encuentra formando parte de:
2,6
0,13
65,0
6,0
0,003
0,520
0,480
0,140
0,1
13,0
12,0
3,6
COMPUESTOS HEMNICOS
- Hemoglobina en sangre
- Mioglobina en msculo
COMPUESTOS NO HEMNICOS
- Transferrina
- Ferritina
- Hemosiderina
- Otros
El hierro de la dieta se encuentra como hierro inorgnico o hierro orgnico (hierro hemnico). La absorcin
se efecta por transporte activo. Se produce principalmente en la primera porcin del duodeno y en el
yeyuno proximal. El hierro se absorbe en estado ferroso. De esta forma, atraviesa la membrana de los
enterocitos y experimenta una oxidacin a su forma frrica por accin de la ceruloplasmina.
El hierro (en estado frrico), ya en el plasma, se combina con la apotransferrina para formar transferrina
15
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Recuerda
Dficit de hierro
Afecta con ms frecuencia a los recin nacidos, nios de corta edad, mujeres embarazadas y durante la
lactancia.
El dficit de hierro lleva al desarrollo de anemia ferropnica (anemia microctica hipocrmica) Escasez
Manifestaciones ms frecuentes: debilidad, palidez, disnea de esfuerzo, apata y anorexia. En los casos
Exceso de hierro
La absorcin excesiva de hierro da lugar a un acmulo excesivo de ferritina y hemosiderina en los
tejidos. Este acmulo puede cursar con lesin tisular, especialmente del hgado, como ocurre en la
HEMOCROMATOSIS.
La hemocromatosis es una enfermedad autosmica recesiva, debida a la mutacin del gen HFE
localizado en el brazo corto del cromosoma 6. En consecuencia se produce un incremento en la
absorcin de hierro a nivel intestinal y un mayor depsito del mismo en los tejidos, especialmente en el
hgado, pncreas y corazn. La mutacin ms frecuente es la C282Y.
Los hallazgos de laboratorio ms frecuentes son: sideremia (concentracin srica de hierro elevada)
e ndice de saturacin de la transferrina aumentado por encima del 50% (en condiciones normales est
saturada del 20-50%); la ferritina est muy aumentada en proporcin al exceso de hierro.
Recuerda
16
@AcademiaGoBIR
El flor se absorbe a nivel intestinal fcilmente y se excreta mayoritariamente por la orina (se elimina un
Los tejidos con mayor concentracin son los dientes y los huesos (en forma de fluoroapatita).
- Funciones:
a) Ayuda a prevenir la CARIES dental debido a que:
- Acta como inhibidor de la actividad enzimtica bacteriana.
- El flor es un componente esencial del esmalte dental; reacciona con la sustancia dental formando un
complejo menos soluble y menos susceptible a la accin disolvente de los cidos orales.
b) Combate los sntomas de la osteoporosis.
c) Incrementa la absorcin intestinal del hierro.
Exceso de flor
Complicaciones a largo plazo: calcificaciones de ligamentos y tendones. La ingestin crnica de flor
tambin produce FLUOROSIS, que se caracteriza por debilidad, prdida de peso, anemia, huesos
quebradizos y dientes moteados (cuando la ingestin tiene lugar durante la poca de formacin del
esmalte).
La ingestin aguda de cantidades txicas, como las que se encuentran en algunos insecticidas, produce:
- Funciones:
- Juega un papel en el metabolismo de los hidratos de carbonos y lpidos. El cromo aumenta los efectos
estimulantes de la insulina.
Dficit de cromo
Produce trastornos de la tolerancia a la glucosa, encefalopata y neuropata.
Exceso de cromo
El cromo se utiliza mucho en las industrias metlicas y de galvanizacin, y en la fabricacin de tintes,
esmaltes y pinturas.
b) Manganeso
Los alimentos con la mayor cantidad de manganeso son: nueces, cereales y otros frutos secos. El t
proporciona una fuente muy importante de manganeso.
La ingesta diaria adecuada de manganeso es del orden de 2,5-5 mg/da.
17
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Los nios con trastornos convulsivos tienen bajas concentraciones de manganeso en sangre.
Los nios con fenilcetonuria o con enfermedad del olor a jarabe de arce presentan bajas concentraciones
de manganeso tisular.
Exceso de manganeso
Los principales derivados txicos del manganeso son los compuestos de xido de manganeso.
c) Cobalto
Es esencial para el ser humano como parte integral de la vitamina B
12
Dficit de cobalto
Los efectos y sntomas de la deficiencia de cobalto se asocian a los que se producen por deficiencia de
vitamina B12.
Recuerda
La vitamina B12 es una vitamina hidrosoluble que participa como coenzima en reacciones de transferencia de grupos metilo y en reordenamientos intramoleculares.
Participa en la degradacin de los cidos grasos de nmero impar de tomos de
carbono. Su dficit origina anemia megaloblstica y alteraciones neurolgicas (degeneracin de la vaina de mielina por alteracin del metabolismo lipdico) Anemia
megaloblstica + alteracin neurolgica: anemia perniciosa.
Exceso de cobalto
La toxicidad por cobalto inorgnico se puede presentar en bebedores de cerveza y en enfermos renales
18
@AcademiaGoBIR
La selenocistena es la forma biolgicamente activa del selenio. Est presente en protenas como:
glutatin peroxidasa, tiroxina-5-desyodasa y selenoprotena P.
- Funciones:
Constituyente de la enzima glutatin peroxidasa, cuya presencia en el hemate protege de lesiones
oxidativas producidas por el perxido de hidrgeno y otros perxidos.
Ojo
Est implicado en el metabolismo de las hormonas tiroideas, como constituyente de la enzima tiroxina5-desyodasa.
Adems, forma parte de la protena del plasma selenoprotena P, que es una protena transportadora de
Es necesario para el crecimiento de los fibroblastos humanos y otras clulas en los cultivos de tejidos.
Dficit de selenio
Puede originar la enfermedad de Keshan Necrosis miocrdica mltiple y reduccin del contenido
srico de selenio.
En los pacientes con alimentacin parenteral se han visto cuadros de disfuncin muscular por dficit de
selenio.
Exceso de selenio
Un signo temprano de intoxicacin por selenio es un aliento a ajo causado por la inhalacin de
dimetilselenuro.
e) Molibdeno
El contenido de molibdeno de los alimentos depende mucho del tipo de suelo en el que se han desarrollado
los productos alimenticios.
La ingestin diaria ptima se estima entre 0,15-0,5 mg/da.
Entre un 25-80% del molibdeno ingerido se absorbe en el estmago y en el intestino.
El rgano con la mayor cantidad de molibdeno es el hgado.
La va principal de eliminacin es renal.
- Funciones:
- Es un constituyente fundamental de 3 enzimas:
XANTINA OXIDASA Enzima que participa en el catabolismo de las bases pricas hasta cido rico.
ALDEHDO OXIDASA Enzima que cataliza la oxidacin de los aldehdos.
SULFITO OXIDASA Cataliza la oxidacin de sulfitos a sulfatos.
f) Nquel
Los requerimientos diarios son de 150 ng/da.
19
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Funciones:
- Facilita la absorcin del in frrico.
- Activa la arginasa heptica.
- Participa en el mantenimiento de las membranas celulares.
g) Silicio
Los requerimientos diarios oscilan entre 5-20 mg/da.
La mayor parte del silicio del organismo est en el tejido conjuntivo.
- Funciones:
- Contribuye a la arquitectura y resistencia del tejido conjuntivo.
- Participa en la calcificacin del hueso (se localiza en la zona de crecimiento activo del hueso, asociado
con glucosaminoglucanos, y afecta a la composicin de la matriz del cartlago).
- Acta como agente entrecruzador de macromolculas como la glucoprotena fosforilada o la osteonectina.
Exceso de silicio
La inhalacin crnica de silicio en forma de slice produce neumopatas.
h) Vanadio
Los requerimientos diarios son inferiores a 10 ng/da.
La mayora del vanadio ingerido (85%) no se absorbe, se excreta en las heces.
- Funciones:
- Es posible que sea necesario para la actividad de la peroxidasa tiroidea.
- Presenta accin mimtica con algunos factores de crecimiento: factor de crecimiento epidrmico o factor
de crecimiento de fibroblastos.
- El vanadio estimula in vitro la proliferacin de clulas seas y la sntesis de colgeno y aumenta la
sntesis de proteoglucanos.
- Funciones:
- Afecta a la conversin de metionina en taurina y poliaminas.
- Est implicado en la metilacin de biomolculas como las histonas.
Efectos txicos:
La exposicin crnica incrementa la frecuencia de carcinoma pulmonar de clulas escamosas y de
cnceres cutneos.
20
@AcademiaGoBIR
b) Boro
Es un elemento traza posiblemente esencial.
- Funciones:
- Forma complejos con compuestos orgnicos que contienen grupos hidroxilo adyacentes y en cis, como
los fosfoinostidos y los glucolpidos de membrana. De este modo mantiene la estabilidad de la membrana
celular.
- Influye en la recepcin hormonal y en la transduccin de seales.
Dficit de boro
Una dieta deficiente puede disminuir las concentraciones sricas de 25-hidroxicolecalciferol, de
ceruloplasmina y de superxido dismutasa eritrocitaria.
- De llama.
- Electrotrmica.
Para la cuantificacin de metales txicos, adems de la absorcin atmica, tambin se puede utilizar:
21
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
1. ESTRUCTURA MOLECULAR
La molcula de agua est formada por 2 tomos de hidrgeno y 1 de oxgeno.
Cada tomo de hidrgeno forma un enlace covalente con el tomo de oxgeno.
El
agua tiene una geometra tetradrica debido a que los orbitales del tomo de oxgeno presentan
hibridacin sp3. El ngulo del enlace H-O-H es de 104,5.
El oxgeno es ms electronegativo que el hidrgeno; los electrones compartidos se sitan ms cerca del
tomo de oxgeno (atrae electrones ms fuertemente). Por tanto, aunque la molcula de agua presenta
carga total neutra, esta distribucin asimtrica de los electrones genera dipolos elctricos lo que hace que
el agua se comporte como una molcula polar.
La atraccin electrosttica entre el tomo de oxgeno de una molcula de agua y el tomo de hidrgeno
Gran
parte de las propiedades del agua derivan de su gran polaridad y de su capacidad para
formar puentes de hidrgeno.
22
@AcademiaGoBIR
Recuerda
Una molcula de agua puede transferir un protn a otra molcula de agua para formar un in hidronio y
reacciones cido-base en disolucin acuosa son muy rpidas: los protones tienen mucha
movilidad y las cargas saltan de una molcula de agua a otra en 10-15 segundos.
El grado de ionizacin del agua viene expresado por la constante de equilibrio, Keq, que define la
composicin de la mezcla final en el equilibrio, independientemente de las cantidades iniciales de reactivos
y productos.
23
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
como la de OH es 10 .
-
-7
A partir del producto inico del agua se defini el pH como el logaritmo negativo de la concentracin de H+.
pH = -log [H+]
Cuando las concentraciones de iones hidrogeniones y de iones hidroxilo son las mismas se dice que el
pH es neutro (=7).
En una disolucin:
- A mayor [H+], menor pH, DISOLUCIN MS CIDA.
- A menor [H+], mayor pH, DISOLUCIN MS BSICA.
24
@AcademiaGoBIR
MONOSACRIDOS
Son los azcares ms simples.
Son slidos incoloros y cristalinos, solubles en agua e insolubles en disolventes no polares.
Son
Los
-A
ldosas: grupo aldehdo.
- Cetosas: grupo cetona.
Aldosas
Nomenclatura: -OSAS: tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.
L o D.
La aldosa ms sencilla es el GLICERALDEHDO.
Cetosas
Nomenclatura: -OSAS: triosas, tetrosas, pentosas, hexosas y heptosas.
L o D.
La cetosa ms sencilla es la DIHIDROXIACETONA.
25
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
26
@AcademiaGoBIR
Recuerda
esteroismeros que son imagnes especulares no superponibles el uno del otro se denominan
ENANTIMEROS, se designan como L o D.
27
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Recuerda
Para representar de forma ms compacta la estructura tridimensional de los azcares se emplea la proyeccin de Fisher Los enlaces horizontales se dirigen
hacia el lector y los verticales, hacia atrs.
28
@AcademiaGoBIR
anomrico:
- Si el -OH est en el lado opuesto del plano respecto al CH2OH: anmero (-OH debajo del plano).
- Si el -OH est en el mismo lado del plano respecto al CH2OH: anmero (-OH por encima del plano).
Ojo
En
Una
mezcla de -D-glucosa y -D-glucosa en el equilibrio est formada por 2/3 de -D-glucosa y 1/3
de -D-glucosa.
29
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Las aldosas de 6 C: PIRANOSAS (ciclo de 6 vrtices): conformacin silla (ms estable) o bote
(menos estable).
- Las cetosas de 6 C y las aldosas de 5 C: FURANOSAS (ciclo de 5 vrtices).
Recuerda
Los anillos saturados de 5 6 C no son planos y se pueden plegar fuera del plano
de formas diferentes originando ismeros conformacionales (molculas con la
misma configuracin estereoqumica y diferente conformacin tridimensional).
Ojo
Conformaciones de la -D-glucopiranosa
30
@AcademiaGoBIR
monosacridos pueden sufrir modificaciones en sus grupos funcionales (grupos hidroxilo, ceto,
aldehdo, hemiacetal o hemicetal) y sto les proporciona nuevas funciones biolgicas.
grupos carbonilos de los cidos aldnicos y urnicos pueden reaccionar con un grupo-OH de la
misma molcula originando un forma ciclada estrica conocida como LACTONA. Ej. Vitamina C o
cido ascrbico.
Ojo
31
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Otra forma reducida de los monosacridos son los desoxiazcares, donde se ha sustituido un grupo
-OH por un -H. El ms importante es la -2-desoxirribosa, presente en los nucletidos.
los azcares fosfato, de gran importancia por su contenido energtico. Adems, uno de los efectos de la
fosforilacin es su retencin en el interior de las clulas.
Ribosa 5-P: intermediario en la ruta de las pentosas fosfato y participa en la sntesis de cidos nucleicos.
Manosa 5-P: marcador de destino lisosomal en las glucoprotenas.
En esta reaccin se produce la transferencia de un grupo fosforilo catalizada por las enzimas quinasas.
d) Formacin de aminoazcares
Los
aminoazcares se generan por sustitucin del grupo -OH del C-2 de un monosacrido por una
amina (-NH2).
32
@AcademiaGoBIR
Otro
Nana
e) Isomerizacin aldosa-cetosa
La transformacin de aldosa en cetosa (Ej. D-glucosa en D-fructosa) implica un desplazamiento
f) Formacin de iminas
Consiste en la reaccin de un aldehdo o una cetona con una amina primaria (Ej. Un aminocido)
para formar una IMINA (CH=N).
La reaccin que tiene lugar es la reaccin de Maillard (glucosilacin no enzimtica de protenas):
se produce entre los grupos amino de las protenas y los azcares reductores al calentar los alimentos.
Tambin se conoce como oscurecimiento no enzimtico.
g) Formacin de furfurales
En medio cido y aplicando calor las pentosas y hexosas sufren deshidratacin, transformndose en
FURFURALES (anhidro-glcidos), que pueden condensarse con otras molculas dando compuestos
coloreados. Cuando se condensan con el naftol se forma un complejo rojo-violeta: reaccin de
Molish.
33
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Azcar
Fuente
Importancia Bioqumica
D-Ribosa
(Aldopentosa)
cidos nucleicos
Elementos estructurales de
los cidos nucleicos y de las
coenzimas como: ATP, NAD+,
NADP+, flavoprotenas.
Los fosfatos de ribosa son
intermediarios de la ruta de
las pentosas fosfato
D-Ribulosa
(Cetopentosa)
D-Arabinosa
(Aldopentosa)
Constituyente de glucoprotenas
D-Xilosa
(Aldopentosa)
Constituyente de glucoprotenas
D-Lixosa
(Aldopentosa)
Msculo cardiaco
Constituyente de la lixoflavina
del msculo cardiaco
L-Xilulosa
(Cetopentosa)
Azcar
Fuente
Importancia
D-Glucosa
(Aldohexosa)
D-Fructosa
(Cetohexosa)
D-Galactosa
(Aldohexosa)
Hidrlisis de la lactosa
D-Manosa
(Aldohexosa)
Constituyente de glucoprotenas
HOLSIDOS
Constituidos por unidades sucesivas de monosacridos.
34
@AcademiaGoBIR
Los
enlaces glucosdicos se hidrolizan con facilidad en presencia de cidos pero son resistentes a la
hidrlisis bsica.
Los
Tambin existen enlaces S-glucosdicos en algunas glucoprotenas en las que hay aminocidos
azufrados.
b) Disacridos
Pueden ser reductores o no reductores. Cuando en la formacin del enlace O-glucosdico participan
los 2 carbonos anomricos, el disacrido pierde su poder reductor: sacarosa y trehalosa.
Ojo
Azcares no reductores:
SACAROSA: -D-Glucosa + -D-Fructosa. Enlace (12)
TREHALOSA: D-Glucosa + D-Glucosa. Enlace (11)
RAFINOSA: Gal+ Glu+ Fru. Enlaces (12) y (16). Trisacrido!
Cuando el disacrido tiene libre uno de los carbonos anomricos el azcar ser reductor.
Los disacridos ms comunes en la naturaleza son los que presentan en su composicin D-glucosa.
Los disacridos ms importantes son:
Lactosa
D-glucosa + D-galactosa. Enlace (14). Es un azcar reductor.
Estructura de la lactosa
La incapacidad para hidrolizar el enlace (14) debido al dficit de la enzima intestinal lactasa origina
la intolerancia a la lactosa, que se caracteriza por diarrea osmtica y flatulencias. La lactosa ingerida
no es hidrolizada en el intestino delgado y pasa al intestino grueso, donde las bacterias la metabolizan
generando productos txicos.
35
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
La
Sm + Sc
UDP-Gal + Glu Lac + UDP
Maltosa
D-glucosa + D-glucosa. Enlace (14). Es un azcar reductor.
Es un intermediario de la hidrlisis del almidn.
Tambin conocido como azcar de malta.
Si la unin entre las molculas de D-glucosa es de tipo (14) el disacrido producido es la celobiosa,
Estructura de la sacarosa
La
sacarosa se llama azcar invertido porque la hidrlisis de la sacarosa origina un fructosa con un
fuerte carcter levorrotatorio e invierte la propiedad dextrorrotatoria de la sacarosa.
a) Homopolisacridos
Pueden ser de reserva (utilizados como combustible biolgico) o estructurales.
36
@AcademiaGoBIR
Estructura de la amilosa
digestin del almidn comienza en la boca con la accin de la -amilasa salival que empieza a
hidrolizar los enlaces glucosdicos. La digestin contina en el intestino delgado, donde la -amilasa
pancretica hidroliza todos los enlaces glucosdicos (14), excepto los cercanos al punto de
ramificacin. Los productos de la -amilasa son la maltosa, el trisacrido maltotriosa y las dextrinas
lmite (oligosacridos que contienen ocho unidades de glucosa con uno o ms puntos de ramificacin
(16)).
La
Glucgeno
Es el polisacrido de reserva ms importante en las clulas animales.
Presenta la misma estructura que la amilopectina pero en clulas animales: polmero de subunidades
Una
37
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Cuando
el glucgeno se utiliza como forma de energa, las unidades de glucosa son eliminadas por
las enzimas degradativas una a una desde el extremo no reductor, actuando de forma simultnea sobre
diferentes ramas y aumentando la velocidad de liberacin de la glucosa.
Recuerda
La amilosa, la amilopectina y el glucgeno son todo polmeros de la -D-glucopiranosa. La amilopectina y el glucgeno son polmeros ramificados, aunque el glucgeno est ms ramificado y es ms compacto que la amilopectina.
Dextranos
Son polisacridos de D-glucosa unidos por enlaces (16), presentes en bacterias y levaduras.
Todos tienen ramificaciones (13) y algunos presentan tambin ramificaciones (12) o (14).
Tienen importancia en la formacin de la placa dental por las bacterias.
La
celulosa se puede encontrar en forma de cadenas extendidas donde cada residuo de glucosa
presenta un giro de 180 con respecto al adyacente en la cadena; se forman puentes de hidrgeno inter
e intramoleculares.
38
@AcademiaGoBIR
Estructura de la celulosa
Los animales carecen de enzimas capaces de hidrolizar los enlaces (14) de la celulosa, por lo que
Es
Recuerda
capacidad de formar geles muy hidratados como la AGAROSA, que es igual que el agar pero
menos sulfatado. Forman una matriz que retiene grandes cantidades de agua. Se utilizan para separar
cidos nucleicos en electroforesis.
Tiene
39
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
bacterianas.
Es
Recuerda
Las cadenas paralelas de NAG y NAM presentan entrecruzamientos formados por cadenas
tetrapeptdicas (L-Ala-D-Glu-L-Lys-D-Ala); estas cadenas tetrapeptdicas estn unidas al NAM.
Los entrecruzamientos peptdicos sueldan entre s las cadenas de polisacrido y forman una
envoltura resistente que rodea toda la clula, evitando que sta se hinche y se lise a causa de la
entrada de agua por smosis.
La LISOZIMA rompe la pared celular bacteriana mediante la hidrlisis del enlace glucosdico (1 4)
entre la NAG y el NAM. La lisozima se encuentra en las lgrimas del ojo, en la clara de huevo y en los
bacterifagos, donde permite que el fago se libere desde la bacteria husped.
40
@AcademiaGoBIR
unidas a las clulas y forman un medio poroso para la difusin de nutrientes y oxgeno).
os GAG son una familia de polmeros lineales compuestos por unidades repetitivas de disacridos.
L
Uno de los 2 monosacridos es siempre N-acetilglucosamina o N-acetilgalactosamina; el otro
monosacrido suele ser un cido urnico, generalmente cido D-glucurnico o L-idurnico.
Algunos
Tipos de glucosaminoglucanos
GAG
Composicin
Funcin
cido hialurnico
Condroitn sulfato
Queratn sulfato
D-Galactosa + NAG-6S
Dermatn sulfato
Piel
Heparn sulfato
HEPARINA es una forma fraccionada del sulfato de heparn producido en los MASTOCITOS y
es un anticoagulante natural: se une a un inhibidor de proteasas, la antitrombina III, potenciando su
accin e inhibiendo la coagulacin. La heparina tiene la densidad de carga negativa ms elevada
entre todas las macromolculas biolgicas conocidas.
El cido hialurnico es el GAG de mayor peso molecular y es el nico GAG no sulfatado.
41
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Estructura de la heparina
Recuerda
Los GAG se unen a una secuencia fija de la protena ncleo a travs de un residuo de Ser localizado
Estructura de un proteoglucano
Algunos proteoglucanos de inters:
- Sindecn: protenas transmembranales que llevan unido heparn sulfato y en algunos casos,
condroitn sulfato.
- Glupicanos: anclados a la membrana a travs de un lpido de membrana fosfatidilinositol.
Contienen heparn sulfato.
proteoglucanos pueden formar agregados como el AGRECN: enormes agrupaciones de
muchas protenas ncleo unidas a una sola molcula de cido hialurnico. Las protenas ncleo, a su
vez, tienen unidas cadenas de queratn sulfato y condroitn sulfato.
Algunos
El
agrecn proporciona consistencia, resistencia y tensin a la matriz del tejido conjuntivo del
cartlago. Est ALTAMENTE HIDRATADO.
42
@AcademiaGoBIR
Las protenas fibrosas de la matriz como el colgeno, la elastina y la fibronectina, se encuentran entrelazadas con los proteoglucanos extracelulares para
proporcionar resistencia y elasticidad.
2. GLUCOPROTENAS
Son protenas que estn unidas de forma covalente a hidratos de carbono (cadenas de
oligosacridos cortas) mediante enlaces de tipo N u O-glucosdico. La composicin de hidratos de
carbono vara del 1 al 70%.
lectinas son protenas presentes en todos los organismos que se unen a glcidos mediante
reconocimiento especfico de una porcin oligosacardica de una glucoprotena o un glucolpido de
membrana Actan en procesos de reconocimiento intracelular, sealizacin y adhesin celular.
Las
43
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Ej. GANGLISIDOS: Lpidos cuyo grupo de cabeza polar es un oligosacrido complejo que
contiene cido silico. LIPOPOLISACRIDOS: Son los componentes principales de la membrana
externa de las bacterias gram negativas.
O LIPASAS.
Recuerda
44
@AcademiaGoBIR
4. LPIDOS
DEFINICIN Y FUNCIN
Los lpidos son un grupo de biomolculas qumicamente diverso que se caracteriza por ser insolubles en
agua y solubles en disolventes apolares, como el ter, el cloroformo o la acetona.
Sus funciones biolgicas son variadas:
ComposiciN
Combustible
Grasas
Componente
estructural
Fosfolpidos,
Funcin
colesterol
esfingolpidos y
Ceras
Aislante
Fosfolpidos,
esfingolpidos
celulares
Aislante
Hormonas
esteroideas,
glicerolpidos, c. grasos y
eicosanoides
cidos
Componentes
Amortiguador
y colesterol
Funciones
especiales
Almacenamiento
y liberacin de energa
de las membranas
elctrico
Funcin
grasos, isoprenoides
Anclaje
en la membrana
Isoprenoides
Cofactor
Retinol
Pigmento
(vitamina A)
para enzimas
de la visin
CLASIFICACIN
Se pueden clasificar atendiendo a su complejidad en:
a) Lpidos saponificables: formados por steres de cidos grasos. En presencia de NaOH o KOH
forman jabones (saponificacin: hidrlisis en presencia de lcali).
- Acilglicridos (monoacilglicridos, diacilglicridos y triacilglicridos).
- Lpidos complejos (fosfoglicridos y esfingolpidos).
- Lipoprotenas.
- Ceras.
45
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
La mayor parte de los cidos grasos de la naturaleza tienen un nmero par de tomos de
carbono y forman una cadena sin ramificaciones. Los cidos grasos poliinsaturados son ms
abundantes que los monoinsaturados.
- Ismeros CIS: los grupos semejantes o idnticos se localizan en el mismo lado del doble enlace.
Presentes en la mayor parte de los cidos grasos naturales.
- Ismeros TRANS: los grupos semejantes o idnticos se encuentran en lados opuestos del doble enlace.
Se producen durante la fermentacin en el rmen de los animales productores de lcteos y carnes, y
durante la hidrogenacin de aceites de pescados y vegetales. Su ingesta est asociada con niveles
elevados de LDL y disminuidos de HDL.
- Longitud de la cadena hidrocarbonada: cuanto ms larga sea la cadena, menor ser la solubilidad en
agua y mayor el punto de fusin.
- Insaturacin: la presencia de insaturaciones tambin afecta al punto de fusin, tanto directamente como
por afectar al grado de empaquetamiento A menor nmero de dobles enlaces, menor solubilidad en
agua y mayor punto de fusin:
1) Los cidos grasos saturados presentan rotacin libre alrededor del enlace C-C, lo que les confiere gran
flexibilidad; sto les permite adoptar una conformacin ms estable cuando se empaquetan.
2) En los cidos grasos insaturados, la presencia de un doble enlace en cis provoca un doblamiento en la
cadena hidrocarbonada, por lo que el empaquetamiento es ms dbil y se necesita menos energa trmica
para desordenar las molculas.
a igual longitud de cadena, los cidos grasos insaturados tienen un punto de fusin menor
que los saturados. Por eso, a temperatura ambiente, los cidos grasos saturados tienen consistencia
slida (crea) mientras que los insaturados tienen consistencia lquida.
As:
El empaquetamiento de los cidos grasos depende, por tanto, de las insaturaciones y tambin, de la
presencia de ramificaciones en las cadenas hidrocarbonadas.
Recuerda
Las longitudes cortas, las ramificaciones y las insaturaciones < punto de fusin, > solubilidad en agua y > fluidez de membrana (la fluidez est determinada en parte por el % de AG insaturados de los fosfolpidos).
46
@AcademiaGoBIR
+
RCOOH
RCOO + H
A pH fisiolgico se encuentran en forma aninica (RCOO-). La carga del grupo carboxlico aporta cierto
carcter hidroflico (cabeza polar) a la molcula mientras que las colas hidrocarbonadas son hidrfobas
(colas apolares). En consecuencia, los cidos grasos se comportan como sustancias anfipticas. En
presencia de agua forman MICELAS (las colas hidrocarbonadas se agrupan juntas hacia el interior y las
cabezas se localizan hacia el exterior en contacto con el agua).
Formacin de micelas
Nombre Sistemtico
Abreviatura
cido cprico
Decanoico
C-10 (10:0)
cido lurico
Dodecanoico
C-12 (12:0)
cido mirstico
Tetradecanoico
C-14 (14:0)
cido palmtico
Hexadecanoico
C-16 (16:0)
cido esterico
Octadecanoico
C-18 (18:0)
cido araqudico
Eicosanoico
C-20 (20:0)
47
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Nombre Sistemtico
Abreviatura
cido palmitoleico
9-cis-hexadecenoico
(16:1) C169
cido oleico
9-cis-octadecenoico
(18:1) C189
9,12-cis-octadecadienoico
9,12,15-cis-octadecatrienoico
cido araquidnico
5,8,11,14-cis-eicosatetraenoico
Los cidos grasos insaturados ms abundantes en el hombre son el cido oleico y el cido linoleico.
Las
dobles enlaces de los cidos grasos poliinsaturados casi nunca son conjugados sino que estn
separados por un grupo metileno (estn en posicin malnica, es decir, siempre distantes 3 C).
2 cidos grasos esenciales son los precursores de los EICOSANOIDES (aunque el precursor
inmediatamente anterior es el cido araquidnico).
Estos
La liberacin del cido araquidnico de la membrana es el paso limitante de la velocidad de sntesis de eicosanoides.
LPIDOS SAPONIFICABLES
1. ACILGLICRIDOS
Son steres de glicerol y cidos grasos. Una molcula de glicerol puede esterificarse con hasta 3
molculas de cidos grasos puesto que tiene 3 grupos hidroxilo.
Segn el nmero de cidos grasos que reaccionan, los acilglicridos pueden ser de 3 tipos:
a) Monoacilglicridos. Cuando el glicerol se esterifica con 1 cido graso. Se libera una molcula de agua.
48
@AcademiaGoBIR
c) Triacilglicridos o triglicridos (TG). steres de una molcula de glicerol con 3 cidos grasos.
Tambin se denominan grasas neutras.
mayora de los triglicridos naturales son mixtos: contienen 2 o ms cidos grasos diferentes.
Los que contienen el mismo tipo de cido graso en las 3 posiciones se llaman triglicridos simples y se
nombran segn el cido graso que contienen. Ej. Tripalmitina, triestearina o triolena.
La
Se almacenan en los adipocitos en formas de gotas de grasa y constituyen una forma de almacenamiento
de energa ms eficaz que los hidratos de carbono: los tomos de carbono de los cidos grasos estn ms
reducidos que los de los azcares, por lo que la oxidacin de los TG proporciona ms del doble de energa
que la de los glcidos.
Recuerda
Los aceites vegetales estn constituidos mayoritariamente por cidos grasos insaturados, de ah su consistencia lquida. El fenmeno de hidrogenacin parcial en
los aceites vegetales convierte gran parte de los enlaces cis en trans; la ingestin de cidos grasos trans favorece la aparicin de enfermedades cardiovasculares, ya que aumenta la concentracin de TG y de colesterol ligado a LDL.
2. CERAS
Son steres de cidos grasos de cadena larga con alcoholes de cadena larga (16-30 C).
Sus puntos de fusin son ms elevados que los de los triglicridos.
Son completamente insolubles en agua (sustancias repelentes del agua).
Sirven como almacn de energa en algunos animales y como cubierta externa impermeable al agua.
49
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- 1 molcula de glicerol.
- 2 cidos grasos esterificando C-1 y C-2 del glicerol. Normalmente, el cido graso en C-1 es saturado y
en C-2, insaturado.
- 1 grupo de cabeza polar unido al C-3 del glicerol a travs de un fosfato mediante enlace fosfodister.
Los fosfoglicridos se nombran segn el alcohol presente en C-3.
Fosfoglicridos
Recuerda
50
@AcademiaGoBIR
Algunos fosfoglicridos presentan una cadena de cido graso unida al glicerol mediante enlace ter
(en vez de ster), como ocurre en los PLASMALGENOS (poseen un enlace ter en el carbono sn-1).
La cadena unida por el enlace ter presenta un doble enlace. Se encuentra de manera abundante en el
msculo cardiaco (la mitad de los fosfolpidos cardiacos son plasmalgenos) y en el cerebro:
- Un tipo de plasmalgeno es el factor activador de plaquetas, que es liberado por los basfilos y estimula
la agregacin plaquetaria, la liberacin de serotonina y presenta un papel importante en la inflamacin y
en la respuesta alrgica.
Adems de la carga negativa del residuo de fosfato, algunos fosfolpidos tienen otra
carga La fosfatidilcolina (lecitina) y la fosfatidiletanolamina (cefalina) tienen una
carga positiva en el tomo de nitrgeno del aminoalcohol por lo que la carga neta
es cero: son fosfolpidos neutros. La fosfatidilserina, el fosfatidilinositol y la cardiolipina tienen carga neta negativa.
51
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
4. ESFINGOLPIDOS
Son
lpidos que poseen un grupo de cabeza polar y dos colas apolares, pero NO TIENEN GLICEROL;
en su lugar tienen un aminoalcohol de cadena larga llamado ESFINGOSINA (18 C) que deriva de la Ser.
Componentes:
Estructura de un esfingolpido
Los diferentes tipos de esfingolpidos difieren en su grupo de cabeza polar:
a) Esfingomielinas
Contienen fosfocolina o fosfoetanolamina, por lo que tambin son fosfolpidos.
Se encuentran en las membranas plasmticas de las clulas animales y son especialmente abundantes
en la vaina de mielina.
b) Glucoesfingolpidos
Poseen
uno o ms azcares conectados al -OH en C-1 de la porcin ceramida (siempre la unin del
grupo polar es igual en todos los esfingolpidos).
NO TIENEN FOSFATO.
Dentro de este grupo tenemos tres clases:
Cerebrsidos
Tienen un nico monosacrido unido a la ceramida. Los cerebrsidos que contienen galactosa se
encuentran en las membranas plasmticas del tejido nervioso, mientras que los que contienen glucosa
se hallan en las membranas plasmticas de tejidos no nerviosos.
52
@AcademiaGoBIR
Algunas de sus funciones son actuar como receptores especficos para funciones fisiolgicas importantes,
o como receptores de determinadas toxinas proteicas de origen bacteriano, como la toxina colrica.
Adems, la porcin glucdica de ciertos esfingolpidos define los grupos sanguneos humanos.
Se nombran como M, D o T atendiendo a si tienen 1, 2 3 residuos de cido silico..
Ojo
Lpidos de membrana
53
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
1. ISOPRENOIDES
Son
Isoprenoides
El isopentenil pirofosfato (IPP) se sintetiza a partir de 2 rutas:
- La ruta del mevalonato (la mayoritaria): la enzima limitante es la hidroximetilglutaril-CoA reductasa (HMGCoA reductasa).
- La ruta de la desoxi-xilulosa-fosfato (GAP/Piruvato): minoritaria, en algunos terpenoides vegetales.
Existen dos grupos fundamentales de isoprenoides: terpenos y esteroides.
a) Terpenos
Estn constituidos por unidades de isopreno (de 2 a 8).
En
su mayora son de origen vegetal, bacteriano o fngico. En los vegetales actan como pigmentos,
hormonas, feromonas y agentes defensivos. Se clasifican de acuerdo al nmero de unidades de isopreno
que contienen.
Tipos de terpenos
El -caroteno es un tetraterpeno precursor de la vitamina A. Las xantfilas son derivados oxigenados
de los carotenos.
Existen
54
@AcademiaGoBIR
derivados complejos de los triterpenos. Derivan de una estructura casi plana con cuatro anillos
fusionados: ciclopentanoperhidrofenantreno. Se diferencian entre ellos por el nmero y posicin de los
dobles enlaces y por los sustituyentes (Ej. Grupos hidroxilo, carbonilo y alquilo).
Tipos de esteroides
Esteroles
Son alcoholes esteroides. Presentan uno o ms grupos hidroxilo y carecen de grupos carbonilo y
carboxilo. El esterol ms importante es el COLESTEROL:
- Presenta un grupo -OH en el C-3; dos metilos esenciales, C-18 (en la posicin C-13) y C-19 (en la
posicin C-10), y una cadena lateral hidrocarbonada ramificada unida al C-17. Posee un doble enlace en
posicin 5-6. Tiene 27 C.
forman en el hgado a partir del colesterol. Actan como detergentes en el intestino, emulsionando
y solubilizando las grasas de la dieta para hacerlas ms accesibles a las lipasas digestivas. Son ms
polares que el colesterol por tener varios grupos -OH. Los cidos biliares primarios formados en el
hgado son el cido clico y el cido quenodesoxiclico; su deshidroxilacin en el C-7 por accin de
los microorganismos de la microbiota intestinal origina los cidos biliares secundarios: cido litoclico y
cido desoxiclico. Se conjugan con aminocidos como glicina o taurina para originar las sales biliares.
55
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
cidos biliares
Hormonas esteroideas
Tipos de hormonas esteroideas
Funcin
Vitamina D (27 C)
56
@AcademiaGoBIR
- Son sintetizados en un 95% por las clulas de Leydig de los testculos y el resto, en la zona reticular de la
corteza suprarrenal (predominan la dehidroepiandrosterona o DHEA y DHEAS).
- La testosterona se transforma por accin de la enzima 5-reductasa en dihidrotestosterona (DHT),
hormona con accin ms potente en los tejidos perifricos y encargada del desarrollo de los caracteres
sexuales secundarios en el varn.
- La testosterona tambin se puede aromatizar a estradiol por una aromatasa (Ej. Cerebro).
- Acciones de la DHT:
1. Desarrollo de los caracteres sexuales secundarios:
- Aparicin de vello facial, pubiano y en otras zonas corporales (trax o espalda).
- Recesin de la lnea del pelo en la regin temporal (aparicin de calvicie).
- Acta sobre el metabolismo lipdico incrementando la actividad de las glndulas sebceas:
taponamiento e infeccin Acn.
57
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
El estriol es el principal estrgeno placentario. Resulta del metabolismo de la estrona y del estradiol en el ovario. La estrona es el estrgeno predominante despus de la menopausia (procede principalmente de la conversin perifrica de la
androstendiona producida en las clulas tecales ovricas o en las glndulas suprarrenales, o del propio estradiol).
- Como vitamina D se engloba a una familia de compuestos formados por accin de la luz sobre los
esteroles insaturados, como el ergosterol y el 7-dehidrocolesterol (epidermis y dermis). Los 2 compuestos
ms importantes con actividad vitamnica son el colecalciferol o vit D3 y el ergocalciferol o vit D2. Los
derivados hidroxilados de la vit D son las formas metablicamente activas.
- La vitamina D3 o colecalciferol deriva del colesterol.
- Tanto la vitamina D3 originada en la piel como las D2 y D3 procedentes de los alimentos pasan a la
circulacin. En el hgado son hidroxiladas por una enzima 25-hidroxilasa localizada en los microsomas
y mitocondrias de los hepatocitos, originndose la 25-hidroxi-vitamina D o calcidiol, metabolito ya activo.
A continuacin, sufren una segunda hidroxilacin en el rin por una 1--hidroxilasa que origina la
1,25-(OH)2-D o calcitriol metabolito 500 a 1.000 veces ms activo que su precursor.
- Funciones:
1) Estimula la absorcin de Ca2+ en el intestino.
58
@AcademiaGoBIR
Estructura de la vitamina D
2. EICOSANOIDES
Son hormonas paracrinas producidas por la mayor parte de las clulas humanas salvo por los
ERITROCITOS. Se sintetizan solo cuando van a ser utilizadas: no se almacenan.
a) Prostaglandinas (PG)
Contienen un anillo ciclopentano con un grupo hidroxilo en C-15. Las prostaglandinas que pertenecen
a la serie E tienen un grupo ceto en C-9 y las que forman parte de la serie F tienen un grupo -OH en la
misma posicin (C-9). El subndice en el nombre de la prostaglandina indica el nmero de dobles enlaces.
Las prostaglandinas de la serie 2 (que derivan del cido araquidnico) son las ms importantes en el ser
humano.
59
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Recuerda
NOMBRE
PGA
Grupos sustituyentes
Grupo ceto en el C-9; enlace doble entre los C-10 y C-11
PGB
PGD
PGE
PGF
PGG
PGH
Grupo OH en el C-15
PGI
(Prostaciclina)
Tipos de prostaglandinas
Las prostaglandinas de la serie 2 se sintetizan por accin del complejo enzimtico PROSTAGLANDINA
Participan en el aumento de las contracciones uterinas del msculo liso durante el parto
(PGE2 y PGF2)
Inhiben la secrecin gstrica (PGE2)
P
revienen la hipertensin, produciendo vasodilatacin (PGE2 y PGI2)
Inhiben la coagulacin y la agregacin plaquetaria (PGI2)
La accin de las prostaglandinas puede diferir en funcin del tejido ya que sus receptores son especficos
de tejido.
60
@AcademiaGoBIR
c) Leucotrienos (LT)
Proceden
del cido araquidnico, pero a partir de una ruta independiente: el cido araquidnico se
transforma en 5-HPETE (hidroxiperoxieicosatetraenoico) por accin de la 5-lipooxigenasa; el 5-HPTE pasa
a LTA4 (posee un epxido), ste a LTC4 (reaccin en la que interviene el glutatin) y posteriormente a LTD4
(contiene glicina y cistena). Por eliminacin de la glicina se forma el LTE4 (contiene cistena).
Poseen 3 dobles enlaces conjugados.
El LTD induce la contraccin de las vas areas del pulmn. Se han identificado los LTC , LTD y LTE
4
4
4
4
como componentes de la sustancia de reaccin lenta de anafilaxia.
cido araquidnico
cido graso
ciclooxigenasa
PGG2
Peroxidasa
Prostaglandina
endoperoxido
E isomerasa
TXA2 sintasa
PGH2
Prostaglandina
endoperoxido
reductasa
PGE2
TXA2
PGF2
TXB2
Sntesis de eicosanoides
61
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
5. PROTENAS
DEFINICIN Y FUNCIN
Son
Funciones:
AMINOCIDOS (AA)
Los aminocidos son cidos aminocarboxlicos que constituyen las unidades estructurales de las
protenas.
Los aminocidos que forman las protenas son enantimeros L. Como excepcin, existen formas D en
Estructura de un -aminocido
Recuerda
Todos los aminacidos, a pH=7, tienen el grupo amino y el grupo carboxilo ionizados.
62
@AcademiaGoBIR
Atendiendo a la polaridad de la cadena lateral, a pH=7, los 20 aminocidos se pueden clasificar en:
- Apolares: Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Trp, Met, Phe y Pro.
- Polares sin carga: Ser, Thr, Cys, Tyr, Asn y Gln.
- Polares con carga negativa (cidos): Glu, Asp.
- Polares con carga positiva (bsicos): Lys, Arg e His.
Aminocidos no polares o apolares. NO tienen cadena lateral ionizable.
Todos poseen cadena lateral aliftica, excepto la Phe y el Trp que son aromticos.
La Ala es el aminocido ms frecuente en las protenas.
La Gly, aunque formalmente es apolar, presenta una cadena lateral muy pequea por lo que no tiene
contribucin real en las interacciones hidrofbicas (algunas clasificaciones lo incluyen como polar sin carga).
Val, Leu e Ile: son aminocidos de cadena lateral ramificada.
La Met tiene un grupo tioter apolar en su cadena lateral.
La Pro es un iminocido (grupo amino secundario) y por tanto, difiere de la estructura general de los
-aa. Tiene una estructura cclica porque la cadena lateral est enlazada de nuevo con el tomo de N
formando un anillo. sto le da una conformacin rgida que reduce la flexibilidad estructural de las regiones
polipeptdicas que contienen este aminocido.
El
Trp presenta un heterociclo aromtico: un anillo indlico. Es el aminocido menos frecuente en las
protenas.
63
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
NO tienen cadena lateral ionizable (salvo la Tyr y la Cys a determinados pHs, pero no a pH
fisiolgico).
La Tyr presenta un grupo fenol. Aunque se incluya dentro del grupo de los aminocidos polares sin carga,
es relativamente apolar (hidrofbico). Su grupo hidroxilo puede formar puentes de hidrgeno y constituye
un grupo funcional importante en algunas enzimas. Se sintetiza a partir de Phe.
La Ser y la Thr presentan en su cadena lateral un alcohol primario y un alcohol secundario, respectivamente.
La Asn y la Gln deben su carcter polar a sus grupos amida.
La Cys presenta un grupo sulfhidrilo, que es apolar, pero puede establecer puentes de hidrgeno dbiles
con nitrgeno e hidrgeno, lo que le da un carcter polar dbil (por lo tanto, est incluido dentro de los
aminocidos polares sin carga).
Recuerda
Aminocidos polares con carga negativa (cidos) y polares con carga positiva (bsicos).
Tienen cadena lateral ionizable.
Aminocidos cidos: son el cido asprtico y el cido glutmico. Presentan un cido carboxlico en su
cadena lateral. Tienen valores de pKa muy bajos. El aminocido ms cido es el cido asprtico.
64
@AcademiaGoBIR
- La His es el aminocido menos bsico de los 3: presenta una cadena lateral ionizable con un pKa prximo
a 6. Por lo tanto, a pH=7, la histidina puede tanto presentar carga positiva como no tener carga. Los
residuos de His facilitan muchas reacciones al comportarse como dadores/aceptores de protones.
- La Arg es el aminocido ms bsico.
Aquellos aminocidos que deben de obtenerse necesariamente a travs de la dieta se les denomina
esenciales. Son: Val, Leu, Ile, Thr, Met, Phe, Trp, Lys e His (la arginina se clasifica como esencial,
aunque solo en el periodo de lactancia).
b) Aminocidos no codificados
AMINOCIDOS NO CODIFICADOS
LOCALIZACIN
Molcula de colgeno
Desmosina
-Carboxiglutmico
2. AMINOCIDOS NO PROTEICOS
Estn presentes en las clulas en forma libre o combinada pero nunca formando parte de las
protenas.
AMINOCIDOS NO PROTEICOS
FUNCIN Y LOCALIZACIN
-alanina
Ornitina y citrulina
cido--aminobutrico (GABA)
Azaserina
Taurina
cido--aminoisobutrico
65
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
aminocidos presentan un grupo amino, con carcter bsico (aceptor de protones), y un grupo
carboxilo, con carcter cido (dador de protones).
Todos
los aminocidos con cadena lateral no ionizable presentan a pH fisiolgico su grupo amino
cargado positivamente y su grupo carboxilo cargado negativamente, es decir, el aminocido se encuentra
en forma de in dipolar elctricamente neutro (forma zwitterion). Son ANFTERAS (se pueden comportar
como cidos o bases).
Cuando los aminocidos presentan cadenas laterales ionizables, el grupo R puede presentar carga en
carga neta es cero. El aminocido en este punto no se desplaza en el campo elctrico (no tiene por qu
ocurrir a pH=7).
Para estos aminocidos sin cadena lateral ionizable el pI es la media aritmtica de los 2 valores de pK
a
(pK1 y pK2).
pKa es una medida de la tendencia de un grupo a ceder un protn: a mayor pKa, menor tendencia a
ceder un protn.
Para definir los valores de pKa y el pI de un aminocido se realiza una curva de titulacin. En general,
sirve para determinar la cantidad de cido o base presentes en una disolucin y en este caso, permite definir
el comportamiento qumico del aminocido en funcin del pH. Es una herramienta til para determinar la
reactividad de las cadenas laterales de los aminocidos.
Para
hacer la curva de titulacin de la glicina se parte de una disolucin del aminocido a la que se va
aadiendo de forma gradual una base fuerte, como el NaOH:
- A pH bajo predomina la forma protonada, cargada positivamente.
- Se sigue aadiendo base y el grupo carboxilo pierde su protn y la carga neta es cero.
- Si el pH sigue aumentando, el grupo amino pierde su protn, por lo que la forma predominante en el
medio presenta carga negativa.
66
@AcademiaGoBIR
pK
a
a
Si el pH es > que el pI: el aminocido tiene carga negativa Migra hacia el nodo (+).
Si el pH es < que el pI: el aminocido tiene carga positiva Migra hacia el ctodo (-).
Recuerda
67
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
forma por una reaccin de condensacin entre el grupo -carboxilo de un aminocido y el grupo
-amino del aminocido contiguo, con eliminacin de una molcula de agua.
El enlace peptdico tiene una estructura plana y rgida debido a la existencia de un fenmeno de
resonancia que hace que el enlace C-N tenga cierto carcter de doble enlace, ligeramente ms corto
que el de una amina simple y por tanto, no permite la rotacin sobre su eje.
enlaces peptdicos son hbridos de resonancia y los seis tomos implicados definen un plano
peptdico.
Los
La limitacin de giro del enlace hace que existan 2 configuraciones posibles: cis y trans, aunque en la
mayor parte de las protenas la configuracin es trans (el hidrgeno del grupo amino y el oxgeno del
grupo carbonilo estn en lados opuestos del plano).
Ejemplo de configuracin cis: en la molcula de colgeno, en los enlaces peptdicos en los que participa
la Pro.
68
@AcademiaGoBIR
Participan 2 enzimas:
-Glutamilcistena
Glutatin
sintetasa
sintetasa
69
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
de los efectos de la oxidacin, eliminando los perxidos de hidrgeno y perxidos orgnicos generados. Ej.
En los hemates, el H2O2 oxida el hierro de la hemoglobina a su forma frrica generando metahemoglobina,
que es incapaz de unir oxgeno. El glutatin evita esta oxidacin reduciendo el H2O2. Esta reaccin est
catalizada por la GLUTATIN PEROXIDASA (enzima que contiene selenio).
2 GSH + H2O2 GSSG + 2 H2O
Participa en la sntesis de leucotrienos
LTC4.
Se comporta como transportador de aminocidos mediante el ciclo del -glutamilo o ciclo de Meister
Este ciclo tiene lugar en el intestino, en los tbulos del rin y en el cerebro, principalmente. Permite el
transporte de aminocidos neutros (principalmente, Cys y Gln) entre clulas como derivados -glutamilo:
70
@AcademiaGoBIR
HORMONAS
ESTRUCTURA
FUNCIN
Insulina
Metabolismo de hidratos de
carbono: hipoglucemiante
Oxitocina y
vasopresina (ADH)
Son sintetizados en el
hipotlamo. La ADH estimula la
reabsorcin de agua a nivel renal.
La oxitocina induce el parto y
produce la eyeccin de la leche
Leptina
Proteica
Neuropptido Y/
Galanina/Ghrelina
Peptdica
Colecistoquinina/
-MSH
Peptdica
Met-encefalina
y Leu-encefalina
a) Fibrosas
Presentan largas cadenas polipeptdicas dispuestas en hebras u hojas.
Constan de un nico tipo de estructura secundaria y presentan una estructura terciaria sencilla.
Son insolubles en agua.
Cumplen
parte.
funcin estructural: confieren resistencia y flexibilidad a las estructuras de las que forman
b) Globulares
Tienen forma esfrica.
Presentan varios tipos de estructura secundaria en una misma molcula.
Son solubles en agua.
Cumplen una funcin dinmica (enzimas, protenas reguladoras).
71
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
b) Estructura secundaria
Se refiere a la distribucin espacial de los tomos de un segmento especfico de la cadena polipeptdica,
estabiliza por puentes de hidrgeno intracatenarios, que se forman entre un grupo carbonilo de
un enlace peptdico de un residuo n y el amino del enlace peptdico de un residuo de la posicin n+4
(puentes de hidrgeno paralelos al eje de la hlice).
Se
72
@AcademiaGoBIR
- Alternancia de aminocidos L y D.
- Presencia de aminocidos voluminosos de forma contigua o residuos sucesivos con la misma carga.
- Un aminocido cargado positivamente en el extremo aminoterminal.
- Un aminocido cargado negativamente en el extremo carboxiloterminal.
- Interacciones entre grupos R, distantes 3 4 residuos.
Se da tanto en protenas fibrosas (Ej. Queratina) como en globulares.
Lmina
Conformacin ms extendida de la cadena polipeptdica; el esqueleto de la cadena se encuentra en zigzag.
Se establecen puentes de hidrgeno intercatenarios.
Las
- Paralela Cuando las hebras se disponen con la misma orientacin de sus grupos amino y carboxilo
terminales.
- Antiparalela Orientacin amino-carboxilo opuesta. Los puentes de hidrgeno son perpendiculares a
las hebras y ms estables.
73
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Giro
Son
giros o bucles donde la cadena polipeptdica cambia de direccin 180 y estn implicados cuatro
residuos de aminocidos (frecuentemente, Gly y Pro).
Los giros suelen encontrarse conectando los extremos adyacentes de 2 segmentos de hojas
antiparalelas.
Recuerda
Las protenas globulares suelen presentar combinaciones de estructuras secundarias de hlice y lmina que se denominan estructuras supersecundarias,
motivo o plegamiento. Es frecuente encontrar giros sirviendo de nexo entre
ambos tipos de estructura secundaria.
c) Estructura terciaria
define como la disposicin tridimensional global que adoptan todos los tomos de una protena
al plegarse sus estructuras nativas Interacciones entre aminocidos no adyacentes a la cadena
polipeptdica.
Se
El plegamiento de las protenas est dirigido por unas protenas denominadas CHAPERONAS.
Evolutivamente, la estructura terciaria de las protenas est ms conservada que la primaria.
Est estabilizada por:
1. Interacciones hidrofbicas: son interacciones entre las cadenas laterales de aminocidos no polares,
como alanina o valina, que se colocan hacia el interior. Favorecen el plegamiento.
2. Interacciones de Van Der Waals.
3. Puentes de hidrgeno.
4. Enlace inico: puente salino Entre residuos cargados (cidos y bsicos) que quedan hacia el exterior
de la protena.
5. Enlace covalente: puentes disulfuro. Estabiliza la estructura despus del plegamiento. Protege de
los cambios adversos de pH o de concentracin salina.
El
DOMINIO de una protena: regin compacta de la estructura terciaria plegada localmente. Los dominios mltiples son frecuentes en protenas globulares. Esta
regin de la cadena polipeptdica es estable de manera independiente. A menudo
los diferentes dominios tienen funciones distintas.
74
@AcademiaGoBIR
d) Estructura cuaternaria
definida por interacciones no covalentes entre varias cadenas polipeptdicas; cada cadena
polipeptdica se denomina subunidad.
Est
Una protena con mltiples subunidades se denomina MULTIMRICA; cuando al menos 2 de ellas son
idnticas se denomina OLIGOMRICA. Las subunidades idnticas se denominan PROTMEROS. Ej.
Estructura cuaternaria: hemoglobina.
- Consta de 3 cadenas polipeptdicas y, cada una de ellas de manera individual, es una hlice levgira
(con 3,3 aa/vuelta) denominada cadena . Las 3 hlices se enroscan entre s originando una superhlice
dextrgira. A su vez las molculas de tropocolgeno se empaquetan en haces paralelos cabeza con cola
formando una fibra de colgeno.
- Los aminocidos ms frecuentes son: Gly (35%), Pro (21%), 4-OH Pro (21%) y Ala (11%). Carece de Cys.
- Una secuencia frecuente es: Gly-X-Y (donde a menudo X es Pro e Y es 4-OH-Pro).
- La presencia de Gly cada 3 residuos permite que las tres cadenas se enrosquen muy estrechamente.
Se establecen puentes de hidrgeno intercatenarios, en los que participa la Gly.
La presencia de residuos hidroxilados como 4-OH-Pro y 5-OH-Lys contribuye a la estabilidad del
colgeno. Su sntesis est catalizada por la prolil-hidroxilasa y lisil-hidroxilasa respectivamente. Ambas
enzimas requieren vitamina C y hierro en forma ferrosa (Fe2+) como cofactor.
75
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Fases:
1. Traduccin de las cadenas de preprocolgeno en el RER. Sntesis de polipptidos.
2. El preprocolgeno sufre hidroxilacin en residuos de lisina y prolina y glucosilacin en residuos de lisina
(adicin de glucosa y galactosa) formando el procolagno:
- Hidroxilacin: RER.
- O-glucosilacin: aparato de Golgi.
3. Agrupamiento de las 3 cadenas polipeptdicas en el aparato de Golgi formando una triple hlice de
procolgeno.
4. Secrecin de la triple hlice de procolgeno desde el citosol al exterior celular.
5. Eliminacin de las regiones N-terminal y C-terminal ricas en cistena mediante la procolgeno
peptidasa: tropocolgeno (individual) y colgeno.
6. Tres molculas de tropocolgeno se asocian entre s mediante enlace covalente para formar fibrillas de
colgeno que se agregan para formar fibras de colgeno.
7. La primera reaccin en la formacin de entrecruzamientos para estabilizar las fibrillas est catalizada
por la enzima lisil oxidasa (contiene cobre) que convierte los residuos de lisina en el aldehdo allisina.
Otra reaccin cruzada que contribuye a la fortaleza del colgeno es el enlaze cruzado entre 2-OH Lys y un
residuo de allisina, que origina hidroxipiridinio.
Procolgeno y colgeno
76
@AcademiaGoBIR
Los telopptidos son las zonas terminales del colgeno que carecen de estructura
de triple hlice y son esenciales para la formacin de fibrillas en algunos tejidos.
Sntesis de colgeno
b) Tipos de colgeno
TIPOS
TEJIDO
CARACTERSTICAS
Colgeno tipo I
(90% del total)
Poco glcido
<10 OH-Lys por cadena
Colgeno tipo II
Cartlago, discos
intervertebrales y humor
vtreo
10% glcido
>20 OH-Lys por cadena
Poco glcido
Alto contenido en OH-Pro y Lys
Colgeno tipo IV
Colgeno tipo V
Superficies celulares y
citoexoesqueleto
Colgeno tipo VI
77
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
asociaciones como:
- Lisinonorleucina (unin de un derivado aldehdico de la lisina con la cadena lateral de una lisina sin
modificar). Tambin presente en el colgeno.
- Desmosina (unin de cuatro restos de Lys).
5. DESNATURALIZACIN DE PROTENAS
La prdida de la estructura tridimensional que provoca prdida de funcin se denomina
DESNATURALIZACIN (implica prdida de las estructuras secundaria y terciaria, pero no primaria).
No implica rotura de enlaces covalentes.
Se consigue aplicando temperaturas elevadas, valores extremos de pH, disolventes orgnicos miscibles
en agua (alcohol o acetona), solutos (SDS, urea, -mercaptoetanol, cloruro de guanidinio) o detergentes
(rompen las interacciones hidrofbicas).
78
@AcademiaGoBIR
Desnaturalizacin y renaturalizacin
Recuerda
cida: en cido clorhdrico 6M, a 105-110C, durante 24h Degrada Ser, Thr, Tyr y Trp y
convierte Asn y Gln en Asp y Glu.
Hidrlisis bsica: en NaOH o BaOH Destruye Cys, Ser, Thr y Arg.
sulfonado o HPLC.
de los aminocidos. La ninhidrina reducida reacciona con una molcula de ninhidrina no reducida y con el
amoniaco resultante de la desaminacin Complejo de color violeta que absorbe a 570 nm (salvo para
prolina e hidroxiprolina, que dan un complejo amarillo que absorbe a 440 nm).
con el grupo amino libre de un aminocido o de un pptido para dar un dinitrofenilderivado de color amarillo.
Se puede utilizar para establecer la identidad del aminocido terminal de una protena portadora del grupo
amino libre y para conocer el nmero exacto de cadenas de una protena.
Cloruro de Dansilo (derivados del tipo sulfonamida)
separa el aminocido C-terminal cuando ste contiene una cadena lateral aliftica
voluminosa o es aromtico (excepto: Arg, Lys y Pro).
79
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
TIPOS
LOCALIZACIN
Tripsina (Sern-proteasa)
Quimiotripsina (Sern-proteasa)
Pepsina
Bromuro de ciangeno
Met (C)
Hidroxilamina
Asn, Gly
Elastasa
cortos de un polipptido (20-30 aa). Muy til para la identificacin rpida de protenas desconocidas.
de rayos X: permite detectar la distribucin espacial de los tomos de una protena, previa
cristalizacin de la muestra.
Resonancia magntica nuclear: se realiza con las macromolculas en solucin. Es una manifestacin
- A concentraciones elevadas de sales muy solubles (Ej. Sulfato amnico) Disminuyen las interacciones
solubilizantes entre el agua y los grupos de la protena.
- Al aadir un disolvente orgnico como acetona o alcohol Disminuye la constante dielctrica del
disolvente, desplazando las molculas de agua asociadas con la protena.
- Con la presencia de diversos cationes o aniones. Los cationes de uso ms comn son: Zn2+, Cd2+,
Fe3+ Estos iones precipitan protenas de soluciones con un pH superior a su pI, ya que a este pH la
protena est cargada negativamente y se combina con el catin.
80
@AcademiaGoBIR
c) Dilisis
Utilizacin de membranas semipermeables con poros que permiten el paso libre de las molculas
pequeas pero que son una barrera para las protenas y otras macromolculas.
d) Cromatografa
Mtodo fsico de separacin de componentes de una mezcla basado en el principio de retencin selectiva,
permitiendo identificar dichos componentes y determinar las cantidades en las que estn presentes. Implica
el paso de una solucin (fase mvil) a travs de un medio (fase estacionaria).
Diferentes tipos:
- Cromatografa de intercambio inico: separa las molculas segn su carga elctrica. Utiliza resinas de
intercambio inico, que son polianiones o policationes.
- Cromatografa de afinidad: es ms especfica y permite aislar una o varias protenas de una mezcla
compleja. Requiere la fijacin de ligandos mediante unin covalente a la matriz inerte. Estos ligandos
interaccionan de forma especfica, pero no covalente, con las protenas de la disolucin.
- HPLC (Cromatografa lquida de alta resolucin): utiliza presiones elevadas para hacer que las soluciones
pasen rpidamente a travs de la columna.
e) Electroforesis
Consiste en la separacin de las protenas bajo la accin de un campo elctrico atendiendo a la carga y
Se puede utilizar:
- SDS (Dodecilsulfato sdico): proporciona condiciones desnaturalizantes y aporta carga negativa, lo que
hace que las protenas migren exclusivamente en funcin de su masa.
- Isoelectroenfoque: se utiliza para determinar el punto isoelctrico de una protena. Se establece un
gradiente de pH que se distribuye a travs del gel. Cada protena se desplaza, parndose en el punto en
el que el pH coincida con su pI.
- Electroforesis bidimensional: combinacin secuencial del isoelectroenfoque y la electroforesis en SDS.
del cido fosfomolibdotngstico con los grupos fenlicos de la Tyr en una muestra tratada con sulfato de
cobre. Se genera un cromgeno (azul de molibdeno/azul de tungsteno) con absorcin a 750 nm. Gran
sensibilidad.
Mtodo de Biuret: sulfato de cobre en medio alcalino. Formacin de un complejo violeta entre el cobre y los
enlaces peptdicos de las protenas, que absorbe a 540 nm. Este mtodo detecta a partir de tripptidos
(al menos 2 enlaces peptdicos). La intensidad del color es proporcional al nmero de enlaces peptdicos.
c) Mtodos inmunolgicos
Western blot, turbidimetra, nefelometra, ELISA o RIA.
d) Mtodo de Kjeldahl
Mtodo
81
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
CLASIFICACIN
1. SIMPLES U HOLOPROTENAS
Son aquellas que estn constituidas solamente por aminocidos:
- Albmina: protena ms abundante del plasma sanguneo. Su sntesis tiene lugar en el hgado. Es la
principal protena implicada en el mantenimiento de la presin onctica del plasma.
- Globulinas: -globulinas, -globulinas y -globulinas.
- Gluteninas y gliadinas: protenas de almacenamiento del contenido proteico en el grano de trigo maduro,
que se localizan en el endosperma y constituyen casi la mitad del contenido proteico. Las gliadinas y
las gluteninas, as como sus homlogos en cebada y centeno, se denominan PROLAMINAS (ricas en
glutamina y prolina). La gliadina est implicada en la patogenia de la enfermedad celiaca (anticuerpos
antigliadina).
- Protaminas: protenas de bajo peso molecular con alto contenido en arginina. No contienen ni tirosina ni
triptfano. Se unen a la heparina formando complejos que neutralizan su efecto y a los cidos nucleicos de
los espermatozoides. Se utilizan para obtener insulinas retardadas.
- Escleroprotenas: colgeno, elastina y -queratina (presente en el pelo, uas y gran parte de la capa
externa de la piel; es rica en residuos hidrofbicos).
- Histonas: son protenas pequeas de carcter bsico (elevado contenido en arginina y lisina) muy
conservadas evolutivamente, que estn asociadas al DNA contribuyendo a su empaquetamiento.
2. COMPUESTAS O HETEROPROTENAS
Estn constituidas por una parte proteica y una parte no proteica llamada grupo prosttico, que puede
ser orgnico o inorgnico. Segn la naturaleza del grupo prosttico se clasifican en:
GLUCOPROTENAS
Son conjugados de protena y glcidos en los que la parte glucdica es minoritaria, estn ramificados y
La parte proteica est unida covalentemente a los hidratos de carbono mediante enlace O-glucosdico o
N-glucosdico.
La mitad de las protenas de mamferos estn glucosiladas y cerca del 1% de todos los genes codifican
82
@AcademiaGoBIR
1. GLUCOSILACIN DE PROTENAS
Localizacin:
83
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Est catalizada por enzimas glucosiltransferasas que aaden los residuos de azcar a la protena en el
lmen del aparato de Golgi.
- Primero se aade N-acetilglucosamina y luego, otros monosacridos.
- Las protenas O-glucosiladas no contienen ni glucosa ni manosa.
GLUCOPROTENAS O-GLUCOSILADAS
Mucina
Colgeno (OH-Pro e OH-Lys)
Glucoprotenas de los poros nucleares y algunas citoslicas
Glucosaminoglucanos
Las glucoprotenas constituyen un grupo diverso de molculas que se encuentran en las clulas en forma
FUNCIN EN LA CLULA
Protenas transportadoras de cobre y de
hierro, respectivamente
Hormona placentaria
Inmunoglobulinas
Lactoalbmina
(Protena de la leche)
Ribonucleasa
(Protena de origen pancretico)
Avidina
84
@AcademiaGoBIR
- Fibronectina celular: es la principal molcula de adhesin de la matriz extracelular del tejido conjuntivo y
es producida por los fibroblastos. Es esencial en la migracin y diferenciacin celular.
- Fibronectina plasmtica: es sintetizada por los hepatocitos. Participa en la coagulacin sangunea, la
cicatrizacin y la fagocitosis.
3. GLUCOPROTENAS PLASMTICAS
La concentracin de protenas plasmticas oscila entre 6-8 g/dL.
separar e identificar las diferentes fracciones proteicas se puede llevar a cabo una electroforesis
en acetato de celulosa o agarosa a pH=8.6 en una muestra de suero. A este pH las protenas se cargan
negativamente y migran hacia el nodo (+). La protena que migra ms rpidamente es la albmina y las
Para
85
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
a) Prealbmina (o transtirretina)
Esta
fraccin se desplaza hacia el nodo de forma ms rpida que la albmina. La prealbmina srica
generalmente est por debajo del nivel de deteccin de la electroforesis, por lo que se suele cuantificar por
otros mtodos como la nefelometra.
Transporta
Tiene una vida media muy corta y su velocidad de sntesis depende del estado nutricional y de la funcin
Adems, debido a su naturaleza compacta, la prealbmina pasa al LCR ms fcilmente que otras
protenas; la presencia de la banda de prealbmina se utiliza para confirmar la procedencia del lquido.
Recuerda
Los reactantes de fase aguda (RFA) son un grupo de protenas estructural y funcionalmente diferentes, sintetizadas en su mayora por el hepatocito en respuesta a
las citoquinas producidas por el sistema inmunitario especfico. Tienen como finalidad preservar la integridad de los tejidos, limitando el dao tisular. Sus niveles se
modifican en procesos inflamatorios, infecciosos, tumorales, lesiones tisulares causadas por agentes qumicos y fsicos, Su concentracin srica puede aumentar (positivos) o disminuir (negativos).
86
@AcademiaGoBIR
muy pocos casos hay analbuminemia (enfermedad hereditaria rara en la que no hay sntesis de
albmina). Los pacientes presentan con frecuencia edemas.
Es un reactante de fase aguda negativo.
c) 1-Globulinas (2,5-5%)
1- Antitripsina (AAT)
Es el componente principal de la fraccin
-globulinas.
Es
un inhibidor de proteasas (miembro de las serpinas): inhibe la elastasa leucocitaria de los pulmones
y otras proteasas, como la tripsina.
dficit hereditario de AAT es recesivo (cromosoma 14) y se asocia a enfisema pulmonar y cirrosis
heptica (por acumulacin de la protena anmala en el hgado). La mutacin Z (cambio de glutmico por
lisina) es la ms frecuente y la ms grave.
El
-Fetoprotena (AFP)
Es sintetizada por el saco vitelino al comienzo del embarazo y posteriormente por el hgado fetal. Es una
Aumenta de forma fisiolgica en el embarazo, aunque elevaciones muy marcadas sugieren defectos
del tubo neural (anencefalia, espina bfida). Sus niveles estn disminuidos (para la correspondiente
edad gestacional) en el sndrome de Down.
87
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Haptoglobina
Une
2-Macroglobulina
Es la protena no inmunolgica ms grande del plasma.
Es un inhibidor de proteasas (Ej. Inhibe la plasmina).
Su concentracin aumenta en el sndrome nefrtico, ya que al perderse la albmina es la encargada
de mantener la presin onctica del plasma. Debido a su elevado peso molecular no se filtra por el rin.
Tambin se eleva al inicio de la nefropata diabtica.
e) 1-Globulinas
Transferrina
Transporta el hierro en forma frrica desde los tejidos (depsitos de hierro en forma de ferritina) hasta la
mdula sea, donde se sintetiza la hemoglobina.
En condiciones normales el ndice de saturacin de la transferrina es del 30%, aumentando hasta el
100% en condiciones de sobrecarga frrica, como en la hemocromatosis.
La transferrina aumenta en la anemia ferropnica (en respuesta al dficit frrico) y en el embarazo.
Es un reactante de fase aguda negativo.
Hemopexina
Fija el grupo hemo liberado tras la degradacin de la hemoglobina, preservando el hierro corporal.
Disminuye de forma muy marcada en las hemlisis intravasculares.
f) 2-Globulinas
2-Microglobulina
Se sintetiza en la mayor parte de los tejidos y forma parte del MHC-I.
Se filtra libremente en el glomrulo y se reabsorbe casi en su totalidad en los tbulos Su reabsorcin
est disminuida cuando la funcin tubular est daada. Marcador de funcin tubular.
Aumenta
Sjgren, ...
88
@AcademiaGoBIR
g) -Globulinas
Inmunoglobulinas
Son sintetizadas por las clulas plasmticas diferenciadas procedentes de los linfocitos B.
Actan como anticuerpos, reconociendo y unindose a los antgenos extraos al organismo.
Cada molcula de inmunoglobulina est constituida por 2 cadenas pesadas unidas a 2 cadenas ligeras
( o ) por puentes disulfuro. Atendiendo al tipo de cadena pesada existen 5 tipos de inmunoglobulinas.
TIPOS DE INMUNOGLOBULINAS
FUNCIONES/LOCALIZACIN
Inmunoglobulina G
Inmunoglobulina M
Inmunoglobulina A
Inmunoglobulina E
Inmunoglobulina D
(trastorno selectivo que afecta a la proliferacin de un clon de clulas plasmticas productor de un tipo de
inmunoglobulinas):
- Mieloma mltiple:
Es una neoplasia maligna que se caracteriza por la proliferacin de un clon de clulas plasmticas en
la mdula sea, principalmente productor de IgG (paraprotena) o un clon productor de cadenas ligeras
(mieloma de Bence-Jones).
El clon prolifera, invadiendo la mdula sea e interfiriendo con las clulas progenitoras de las distintas
lneas celulares hematolgicas Trombocitopenia, leucopenia y anemia.
Disminuye la sntesis del resto de inmunoglobulinas, lo que conlleva mayor susceptibilidad a infecciones.
Cursa con: prdida de hueso, fracturas, hipercalcemia, alteraciones renales (debido a la precipitacin de
las cadenas ligeras) e hiperproteinemia (a expensas del componente monoclonal).
Los pacientes con mieloma mltiple pueden eliminar cadenas ligeras por la orina protena de BenceJones.
En el frotis sanguneo los hemates aparecen apilados unos sobre otros en ROULEAUX debido al aumento
de la hiperviscosidad sangunea.
En la electroforesis en suero se detecta una banda estrecha localizada en la fraccin Componente o
protena M.
89
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Tanto en el mieloma mltiple como en la macroglobulinemia de Waldestrm, adems del proteinograma, se realiza una inmunofijacin para caracterizar el tipo de
inmunoglobulina monoclonal.
este nombre debido a su capacidad para unirse al polisacrido C de la superficie celular del
pneumococo.
un reactante de fase aguda positivo. Aumenta en infecciones bacterianas y lesiones tisulares con
inflamacin aguda (entre 100-1.000 veces en las primeras 24-48 horas tras el dao celular). No aumenta
de forma sistemtica en las infecciones virales.
Es
ENFERMEDAD
PATRN ELECTROFORTICO
Cirrosis heptica
Sndrome nefrtico
Anemia ferropnica
CROMOPROTENAS
Son protenas conjugadas con un grupo cromforo (sustancia coloreada que contiene un metal):
90
@AcademiaGoBIR
grupo hemo.
Fases de la sntesis:
1) La primera reaccin tiene lugar en la matriz mitocondrial. El succinil-CoA y la glicina se condensan para
dar cido delta-aminolevulnico o ALA, en una reaccin catalizada por la enzima -aminolevulnico sintasa
o ALA sintetasa (requiere piridoxal fosfato como cofactor); sta es la enzima limitante de la ruta.
2) En el citosol, 2 molculas de ALA se condensan para dar porfobilingeno, en una reaccin catalizada por
la ALA deshidratasa o porfobilingeno sintasa (enzima que contiene zinc y es sensible a la inhibicin
por plomo).
3) A continuacin se combinan 4 molculas de porfobilingeno en una reaccin de desaminacin para
dar el primer compuesto tetrapirrlico, el uroporfiringeno III. Intervienen 2 enzimas: uroporfiringeno I
sintasa y uroporfiringeno III cosintasa.
4) Despus tiene lugar una reaccin de descarboxilacin y el compuesto tetrapirrlico se convierte en
coproporfiringeno III. Reaccin catalizada por la uroporfiringeno descarboxilasa.
5) Este compuesto entra de nuevo en la mitocondria y, por descarboxilacin, se convierte en
protoporfiringeno IX. Reaccin catalizada por la enzima coproporfiringeno oxidasa, localizada en la
membrana mitocondrial interna.
6) En la matriz mitocondrial, el protoporfiringeno IX sufre una oxidacin y se genera la protoporfirina IX.
Reaccin catalizada por la protoporfiringeno oxidasa.
7) El Fe2+ se incorpora a la protoporfirina y se sintetiza el grupo hemo. Reaccin catalizada por la
ferroquelatasa, que se localiza en la membrana mitocondrial interna.
8) El hemo se combina con polipptidos para dar hemoprotenas como la mioglobina y la hemoglobina.
Adems acta como retroinhibidor de los primeros pasos de la ruta de biosntesis.
91
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
TIPOS DE PORFIRIAS
ENZIMA AFECTADA
SNTOMAS
Porfiria de Doss
ALA-deshidratasa
Porfiria intermitente
aguda
Uroporfiringeno I sintasa
Porfiria eritropoytica
congnita (enfermedad
de Gnther)
Uroporfiringeno III
cosintasa
Fotosensiblidad cutnea.
Pigmentacin rojiza de la orina,
huesos y dientes. Anemia
Uroporfiringeno
descarboxilasa
Fotosensibilidad cutnea
Coproporfiria hereditaria
Coproporfiringeno
oxidasa
Porfiria variegata
Protoporfiringeno oxidasa
Protoporfiria
eritropoytica
Ferroquelatasa
Fotosensibilidad cutnea
Recuerda
ENFERMEDAD
ORINA
SANGRE
Porfiria intermitente
aguda
U
P, CP y PP NORMAL
Porfiria
eritropoytica
congnita
U
P, CP y PP ELEVADOS
Porfiria cutnea
tarda (+ frecuente
en paises europeos)
U
P, CP y PP NORMAL
Coproporfiria
hereditaria
ALA, PBG y CP
ELEVADOS
UP NORMAL
P, CP y PP NORMAL
U
Porfiria variegata
UP, CP y PP NORMAL
Protoporfiria
eritropoytica
ALA, PBG, UP y CP
NORMAL
UP y CP NORMAL
PP ELEVADO
92
@AcademiaGoBIR
HEMOPROTENAS
Su grupo prosttico es la ferroprotoporfirina.
1. HEMOGLOBINA
Es una protena globular de forma esfrica. Forma parte de los eritrocitos, donde su funcin principal es
transportar oxgeno desde los pulmones a los tejidos del cuerpo.
Es una protena tetramrica en la que cada una de las cadenas polipeptdicas presenta un grupo
prosttico HEMO 4 lugares de unin al O2.
El tomo de Fe2+ est en el centro, combinado con 4 anillos pirrlicos (de la protoporfirina IX) a travs de
La
cadena consta de 141 aminocidos y est codificada por el cromosoma 16 (la cadena tambin
est codificada por este cromosoma) y el resto de las cadenas (, , y ) tienen 146 aminocidos y estn
codificadas por el cromosoma 11.
93
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
HEMOGLOBINAS
CARACTERSTICAS
HbA (22)
HbA2 (22)
HbF (22)
H
b Portland (2 2)
Hb Gower I (2 2)
Hb Gower II (2 2)
- En la hemoglobina (y tambin en la mioglobina) el oxgeno se une a la histidina distal E7 (His 64) y al Fe2+.
El hierro se une por su quinta posicin de coordinacin a la histidina His F8 o His 93, presente en posicin
axial.
La unin de la hemoglobina con el oxgeno es cooperativa La unin de la primera molcula de O a la
2
hemoglobina aumenta la afinidad de los dems lugares de unin por el O2 Unin alostrica.
Recuerda
en el medio (PO2).
2
Si la PO2 del medio es elevada (como sucede en los alveolos) las molculas de Hb se saturan.
La
- Cuando la afinidad por el O2 aumenta, la curva de disociacin se desplaza hacia la izquierda y la P50
disminuye.
- Por el contrario, cuando la afinidad disminuye, la curva se desplaza hacia la derecha y la P50 aumenta.
Curvas de disociacin de la Hb y de la Mb
94
@AcademiaGoBIR
- Elevacin de la temperatura.
- Disminucin del pH del medio (efecto Bohr).
- Aumento de la concentracin de CO2 del medio.
- Presencia del 2,3 BPG (2,3-bisfosfoglicerato, intermediario de la gluclisis). Es un efector alostrico de
la hemoglobina.
Ojo
El CO se une a la hemoglobina con una afinidad unas 250 veces superior a la del
oxgeno.
a) Hemoglobinopatas
Hemoglobinopatas estructurales
Se deben a mutaciones puntuales en los genes que codifican para las cadenas de la globina. Ej.
Hemoglobina S o anemia falciforme Mutacin puntual en el gen que codifica para la cadena de la
globina (cromosoma 11), con cambio de glutmico por valina. Es autosmica recesiva.
Talasemias
Defectos genticos que originan una disminucin en la sntesis de alguna de las cadenas de la globina.
2. MIOGLOBINA
una protena de unin a oxgeno ms simple, que est presente sobre todo en el tejido muscular
(msculo esqueltico y cardiaco) de la mayor parte de los mamferos.
Es
Est constituida por una nica cadena polipeptdica de 153 aminocidos unida a un grupo hemo. Consta
Estructura de la mioglobina
mioglobina presenta una curva de disociacin de TIPO HIPERBLICO y su afinidad por el oxgeno
no se ve afectada ni por la variacin del pH ni del CO2 dentro de los lmites fisiolgicos.
La
muy baja (2,8 mm Hg), lo que implica que tiene una afinidad elevada por
50
el oxgeno; sta es una caracterstica adecuada para una protena que debe extraer oxgeno de la sangre.
La mioglobina tiene una afinidad por el oxgeno superior a la hemoglobina.
95
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
pudindose detectar en sangre a las 2-3 horas del infarto agudo de miocardio. Es el marcador ms precoz
de necrosis miocrdica.
Recuerda
una clase de protenas que contienen un grupo hemo unido fuertemente al componente proteico.
El tomo de hierro del citocromo que participa en la cadena de transporte electrnico mitocondrial sufre
reacciones de oxido-reduccin. Ej. Citocromo P450.
b) Catalasa
Es
una enzima que descompone el H2O2 en agua ms oxgeno. Est constituida por cuatro tomos de
hierro en estado oxidado. Enzima caracterstica de los peroxisomas.
c) Peroxidasa
Elimina el H
Es
impermeable a la mayora de los solutos polares o cargados, pero es permeable a los compuestos
apolares.
Todas
las membranas plasmticas biolgicas poseen la misma estructura general: protenas y lpidos
polares Modelo de membrana en mosaico fluido: la membrana es una bicapa lipdica fluida y
asimtrica que posee protenas ancladas a ella mediante interacciones hidrofbicas.
96
@AcademiaGoBIR
b) Asimetra
La composicin lipdica a cada lado de la bicapa es diferente puesto que cada lado de la membrana est
c) Permeabilidad selectiva
d) Capacidad para rehacerse
Cuando las bicapas lipdicas se rompen espontneamente se vuelven a recomponer.
- Protenas integrales: estn firmemente unidas a la bicapa lipdica y la atraviesan. Solo se pueden liberar
por accin de agentes que interfieran con las interacciones hidrofbicas, como detergentes, disolventes
orgnicos o agentes desnaturalizantes.
- Protenas perifricas: se encuentran dbilmente unidas a la cara externa o interna de la membrana, sin
atravesarla. A travs de interacciones electrostticas y puentes de hidrgeno se asocian con los dominios
hidroflicos de las protenas integrales y con los grupos de las cabezas polares de los lpidos de membrana.
Se pueden liberar mediante tratamientos suaves, como un cambio de pH o exposiciones a soluciones
salinas concentradas.
- Protenas anfitrpicas: se encuentran tanto en el citosol como asociadas a la membrana. Su afinidad
por las membranas deriva de sus interacciones no covalentes con una protena o lpido de membrana, o a
la presencia de uno o ms lpidos unidos covalentemente a la protena anfitrpica. Esta asociacin con la
membrana es reversible y est regulada (Ej. La fosforilacin o la unin de un ligando pueden producir un
cambio conformacional en la protena que da lugar a la exposicin de un sitio de unin a membrana que
previamente era inaccesible).
97
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
TIPOS DE TRANSPORTE
1. TRANSPORTE PASIVO
Las molculas atraviesan la membrana a favor de gradiente de concentracin o de carga elctrica por lo
Los gases, como el O y el CO y las molculas apolares y polares sin carga de pequeo tamao, como
2
2,
el agua o el glicerol, atraviesan las membranas por difusin simple.
Difusin facilitada
Se basa en el desplazamiento de los solutos a travs de las membranas a favor de gradiente por medio
de un transportador (une el sustrato de forma no covalente y reversible).
Se diferencia de la difusin simple en que la velocidad de difusin no est limitada por la concentracin del
soluto a ambos lados de la membrana sino por los cambios de conformacin de la protena transportadora.
b) Tipos de transportadores
Protenas transportadoras o carrier:
- Alta estereoespecificidad.
- Saturables.
- Sufren un cambio conformacional cuando el sustrato se une.
- Disminuyen la energa de activacin necesaria para que se produzca el transporte del soluto de un lado
a otro de la membrana.
- Ej. Transportador de glucosa de los hepatocitos o del eritrocito.
Canales:
Un tipo especial de canal inico son los IONFOROS: son compuestos liposolubles que
pueden difundir a travs de la membrana formando un poro que permite el transporte del in,
o bien, son mviles y se desplazan a travs de la membrana. Muchos son antibiticos. Ej.
Gramicidina A, polipptido que se disuelve en la membrana y adopta una estructura helicoidal abierta permitiendo el paso de iones K+ y Na+, o valinomicina, pptido cclico que transporta el in K+ difundiendo a travs de la membrana, sintetizado por Streptomyces.
98
@AcademiaGoBIR
- Transporte activo primario: acoplado directamente a la hidrlisis del ATP (reaccin exergnica).
- Transporte activo secundario: el transportador acopla una reaccin no favorable (endergnica) a otra
reaccin espontnea o a favor de gradiente. Ej. Cotransporte antiporte Na+-H+ en los tbulos renales
proximales; cotransporte simporte Na+-glucosa en los enterocitos (el gradiente de Na+ necesario para esta
entrada conjunta se mantiene gracias a la ATPasa Na+-K+).
cotransporte antiparalelo, expulsa 3 Na+ y introduce 2 K+), H+-K+-ATPasa (clulas parietales del estmago,
antiporte).
Recuerda
ATPasas tipo F
Permiten el paso de protones en contra de gradiente impulsado por la hidrlisis del ATP.
La
reaccin en la que participan es reversible de forma que un gradiente de protones tambin puede
suministrar la energa para impulsar la sntesis de ATP (ATP sintasas).
ATPasas tipo V
Son transportadoras de protones y se asocian a las membranas de las vesculas responsables de la
acidificacin de los compartimentos intracelulares (lisosomas, endosomas, )
Transportadores ABC
Son transportadores dependientes de ATP que bombean aminocidos, pptidos, protenas, iones
metlicos, lpidos y sales biliares fuera de la clula.
Ej. Transportadores multifrmacos (MDR1), bombean ciertos frmacos fuera de la clula y son
responsables de la resistencia de algunos tumores a determinados agentes quimioterpicos.
Recuerda
Todos los transportadores ABC tienen dos dominios de unin de nucletidos (NBD)
y dos dominios transmembrana.
99
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
7. PROTENAS G
Pertenecen a la superfamilia de protenas con actividad de GTPasa. Son protenas de unin a nucletidos
- G Presenta actividad GTPasa. Tras su unin al GTP, lo hidroliza y lo transforma en GDP (estado
inactivo). Presenta un residuo de cido mirstico asociado al extremo carboxilo terminal. Puede transmitir
seales excitadoras o inhibidoras. Elevada especificidad.
- G Interaccionan con la subunidad G y permiten la interaccin con el receptor activado. Presentan un
lpido isoprenoide unido covalentemente al extremo carboxilo terminal de la protena. Este dmero es ms
inespecfico y puede interaccionar con muchos tipos de subunidad .
Recuerda
1. TIPOS
G
Inhibe la adenilato ciclasa, disminuyendo las concentraciones de AMPc. Ej. Adrenalina, a travs de
la unin a receptores 2-adrenrgicos; somatostatina, por su unin al receptor que origina la activacin de
la protena Gi.
i
subunidad de Gs. Esta ADP-ribosilacin bloquea la actividad GTPasa por lo que la protena G es activa
de modo permanente. Ej. Toxina colrica.
Fosforilacin: se produce sobre la subunidad .
la protena G por GTP. El complejo GTP-protena G se disocia del receptor y se une a una enzima o efector
modificando su actividad.
Ojo
La fosforilacin en el extremo carboxilo terminal del receptor (localizado intracelularmente) inhibe la activacin de las protenas G.
100
@AcademiaGoBIR
El
receptor fosforila residuos de tirosina propios estimulando su actividad tirosina quinasa sobre otras
protenas.
101
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
8. ENZIMAS
Son biocatalizadores, aumentan la velocidad de una reaccin qumica sin alterar el equilibrio de la
misma.
CARACTERSTICAS
Todas las enzimas son protenas (salvo un grupo de molculas de RNA cataltico: RIBOZIMAS).
Actan disminuyendo la energa libre de activacin.
Pueden llegar a acelerar la velocidad de una reaccin entre 5 y 17 rdenes de magnitud.
Presentan especificidad de reaccin y de sustrato y son muy eficientes.
No se alteran de forma permanente durante la reaccin enzimtica.
La actividad cataltica de una enzima depende de su estado conformacional: si una enzima se
desnaturaliza o se disocia en sus subunidades, su actividad cataltica suele desaparecer Las estructuras
primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria de una protena son esenciales para su actividad cataltica.
Algunas enzimas requieren para su actividad un componente qumico adicional llamado COFACTOR, si
es uno o varios iones inorgnicos, o COENZIMA, si es una molcula orgnica (actan como transportadores
transitorios de grupos funcionales especficos, la mayora son derivados de vitaminas). Si stos se unen
covalentemente a la enzima se denominan GRUPO PROSTTICO.
La enzima completa, junto con la coenzima y/o iones metlicos, recibe el nombre de HOLOENZIMA. La
Activacin de la enzima
Algunos cofactores enzimticos
COFACTOR
Cu
2+
ENZIMA
Citocromo oxidasa, lisil-oxidasa
Fe2+ o Fe3+
K
Piruvato quinasa
Mg2+
Mn2+
Mo
Ni2+
Ureasa
Se
Glutatin peroxidasa
Calcio
Calmodulina
Zn2+
102
@AcademiaGoBIR
Cualquier enzima que cataliza reacciones en las que se transfieren fosfatos (quinasas o fosfatasas) es dependiente de Mg2+, las deshidrogenasas NAD dependientes utilizan el Zn2+ como cofactor y las hidrolasas son dependientes de Mn2+.
COENZIMA
GRUPOS QUMICOS
TRANSFERIDOS
PRECURSOR
EN LA DIETA
B
iocitina
C
O2
Biotina
C
oenzima A
G
rupos acilo
cido pantotnico
-desoxiadenosilcobalamina
5
(coenzima B12)
Vitamina B12
F
lavin adenina
dinucletido (FAD)
Electrones
Riboflavina
(Vitamina B2)
L
ipoato
No se requiere
en la dieta
icotinamida adenina
N
dinucletido (NAD)
cido nicotnico
(Niacina)
iridoxal fosfato
P
Grupos amino
Piridoxina
(Vitamina B6)
T
etrahidrofolato
Grupos monocarbonados
Folato
T
iamina pirofosfato
Aldehdos
Tiamina
(Vitamina B1)
CLASIFICACIN
Existe un sistema internacional para la nomenclatura y clasificacin de las enzimas creado por la Enzyme
Commission (EC) de la IUBMB (International Union of Biochemistry and Molecular Biology). Este sistema
las clasifica en funcin del tipo de reaccin catalizada:
TIPO 1: OXIDORREDUCTASAS
Transferencia de electrones: catalizan reacciones de oxidacin y reduccin. El principal agente oxidante
es el O2. En los sistemas biolgicos, el FAD+ y el NAD+, participan en numerosas reacciones de xidoreduccin.
TIPO 2: TRANSFERASAS
un grupo qumico de una molcula a otra. Las quinasas son un grupo de transferasas que
catalizan la transferencia de un grupo fosfato desde un nuclesido trifosfato a otra molcula.
Transfieren
TIPO 3: HIDROLASAS
Catalizan reacciones de hidrlisis Transferencia de grupos funcionales al agua.
103
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
grupos.
trifosfato.
TIPO 5: ISOMERASAS
Catalizan
la transferencia de grupos o dobles enlaces dentro de una misma molcula dando lugar a
formas isomricas. Si se cambia la posicin de un grupo fosfato la enzima se llama mutasa.
CLASE
SUBCLASE
O
xidorreductasas
T
ransferasas
H
idrolasas
L
iasas
I somerasas
L
igasas
Sintetasas y carboxilasas
G 0 = - RTln
[P]
[S]
En una reaccin qumica espontnea (exergnica) la energa basal del sustrato es mayor que la del
producto, por lo que G es menor que cero.
La presencia de una enzima no modifica la G y no altera el equilibrio entre productos y sustratos, pero
Las enzimas presentan un sitio de unin al sustrato denominado centro o sitio activo con el que
interacciona el sustrato y forma un complejo binario estabilizado por interacciones no covalentes: complejo
enzima-sustrato (ES). Esta unin enzima-sustrato es altamente especfica.
E+S
ES
EP
104
@AcademiaGoBIR
E +P
Para
que se produzca la transformacin de sustrato en producto es necesario pasar por una situacin
intermedia de nivel energtico superior, que supone la distorsin de enlaces y la orientacin de grupos
funcionales: el estado de transicin. Este estado es inestable y transitorio.
Aunque la reaccin sea espontnea se ha de superar una barrera energtica conocida como energa
de activacin, que es la energa necesaria para alcanzar el estado de transicin y marca la velocidad de
la reaccin:
energia de activacin viene definida como la cantidad de energa que se requiere para convertir
un mol de molculas de sustrato desde el estado basal (forma estable de baja energa de la molcula) al
estado de transicin.
La
Recuerda
Cuando en una reaccin existen varios pasos, la velocidad global viene determinada por el paso (o pasos) cuya energa de activacin es ms elevada; este paso se
denomina paso limitante de la velocidad.
105
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
lugar activo de la enzima se ajusta al sustrato de la misma manera que una cerradura a una llave.
Explica la especificidad ES, pero no cmo se produce la reaccin de forma eficiente. Da una visin rgida
de la enzima y no puede explicar el efecto de ligandos alostricos.
La formacin del complejo ES es tan estable que cualquier transformacin posterior hara que se
perdieran interacciones, dando lugar a una situacin menos estable y no se formara el producto.
Los enlaces inicos, los puentes de hidrgeno y las interacciones hidrofbicas contribuyen a la unin del
CINTICA ENZIMTICA
La cintica enzimtica estudia la velocidad de una reaccin y el modo en que sta cambia en respuesta
a parmetros experimentales.
Las reacciones qumicas se pueden clasificar segn su comportamiento cintico en reacciones de primer
- Reacciones de primer orden: son reacciones del tipo A B en las que la velocidad depende nicamente
de un sustrato y por lo tanto, la velocidad es directamente proporcional a la concentracin del
sustrato.
V= k [A]
k = Constante de velocidad. Expresada en unidades de tiempo-1 (s-1).
106
@AcademiaGoBIR
1. Primera etapa: lineal A bajas concentraciones de sustrato la reaccin se comporta como si fuera de
primer orden. La velocidad solo depende de la concentracin de sustrato.
2. Segunda etapa: curvilnea A concentraciones de sustrato intermedias, los aumentos de la
concentracin de sustrato conducen a menores aumentos en la velocidad de la reaccin.
3. Tercera etapa A partir de determinadas concentraciones de sustrato, aunque se sigan aumentando
esas concentraciones, la velocidad no vara (se alcanza una velocidad constante). La reaccin sigue una
cintica de orden cero.
Recuerda
1. CINTICA DE MICHAELIS-MENTEN
La representacin grfica del transcurso de reaccin enzimtica monosustrato muestra una curva
hiperblica (descrita por Michaelis y Menten).
K1
E+ S
K2
K -1
ES E + P
K -1
Vmax= K2 [Et]
107
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Km=
K-1 + K2
K1
V0 =
Vmax [S]
Km + [S]
ECUACIN DE MICHAELIS-MENTEN
- Representa una medida de la afinidad de la enzima por el sustrato: a mayor Km, menor afinidad (solo
cuando K2 es limitante de la velocidad, K2<<<<K-1, as un valor elevado de Km significa que K-1 > K1).
V
Kcat = Tiene unidades de s-1. Describe la velocidad limitante de cualquier reaccin enzimtica en
condiciones de saturacin. Cuando la reaccin enzimtica tiene mltiples pasos, la K2 de la ecuacin se
sustituye por Kcat, que incorpora las constantes de velocidad de todas las reacciones entre ES y E+P.
Efecto de la concentracin de sustrato sobre la V0 de una reaccin catalizada por una enzima
Km
Vo Vmax [S]
1
Vmax
/Vmax.
108
@AcademiaGoBIR
max
b) Ecuacin de Eadie-Hofstee
Pendiente = -K
max.
/Km.
max
c) Ecuacin de Hanes-Woolf
Pendiente = 1/V
max
/Vmax.
3. REACCIONES MULTISUSTRATO
La mayora de las reacciones bioqumicas catalizadas por enzimas comportan la reaccin de dos o ms
109
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
4. INHIBICIN ENZIMTICA
Los inhibidores enzimticos son molculas que interfieren en las reacciones enzimticas hacindolas
ms lentas o detenindolas.
a) Inhibicin reversible
Son molculas que se unen a la enzima mediante interacciones no covalentes.
Alteran los parmetros cinticos.
Clases:
Inhibicin competitiva (Km , Vmax =) El sustrato y el inhibidor compiten por unirse al sitio activo de la
enzima. Mientras el inhibidor ocupe el sitio activo impide la fijacin del sustrato a la enzima. Normalmente
este tipo de inhibidores presentan estructuras similares al sustrato. La inhibicin puede revertirse
aumentando la concentracin de sustrato.
Recuerda
Inhibicin acompetitiva (Vmax, Km ) El inhibidor se fija a un sitio distinto del que se fija el sustrato en
el sitio activo y se une exclusivamente al complejo ES.
Inhibicin no competitiva (Vmax , Km =) El inhibidor se fija a un sitio distinto al centro activo y se une
tanto a la E como al complejo ES.
110
@AcademiaGoBIR
, Km , puede
b) Inhibicin irreversible
Los inhibidores irreversibles se unen de manera covalente modificando grupos funcionales de la enzima
esenciales para su actividad, o bien forman una asociacin no covalente muy estable.
Inactivadores suicidas Compuestos poco reactivos hasta que se unen al sitio activo de una
enzima especfica, convirtiendo el centro activo en afuncional.
Ej.
NOMBRE
MECANISMO DE ACCIN
Cianuro
Diisopropil-fluorofosfato
(DFP)
Sarn y fisostigmina
Como el DFP
Paratin
N-Tosil-LFenilalaninaclorometilcetona
(TPCK)
Penicilina
111
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Concentracin de enzima: cuando la enzima est saturada por el sustrato, la velocidad es directamente
proporcional a la concentracin de enzima e independiente de la concentracin de sustrato.
- Concentracin de sustrato: la V0 de una reaccin es directamente proporcional a la [S] (a [E] cte) hasta
alcanzar la Vmax. En bioqumica las reacciones enzimticas se estudian bajo condiciones de saturacin
de sustrato. El agotamiento de sustrato puede dar resultados falsamente bajos en sueros con elevada
actividad enzimtica.
- Temperatura: el aumento de la temperatura conduce a un aumento de la velocidad de la reaccin dentro
de un intervalo determinado. Fuera de ese intervalo, la enzima pierde actividad. Existe una temperatura
ptima caracterstica de cada enzima.
- pH: las enzimas tienen un pH ptimo o un intervalo de pH en el que su actividad es mxima; a valores
superiores o inferiores la actividad disminuye, ya que los cambios en el pH alteran el estado de ionizacin
de las cadenas laterales de los aminocidos, afectando as a la afinidad de la enzima por el sustrato.
Tambin se puede alterar la etapa de transformacin del sustrato en producto si se modifican los residuos
catalticos.
Recuerda
b) Compartimentalizacin
La separacin fsica de enzimas, sustratos y molculas reguladoras en diferentes regiones o
compartimentos celulares permite a las clulas utilizar eficazmente los recursos energticos disponibles.
Presente
- Excepciones: enzimas activadas por fosforilacin. Ej. Glucgeno fosforilasa, fosforilasa b quinasa y
triglicrido lipasa.
Metilacin.
112
@AcademiaGoBIR
Espectroscopa de absorcin molecular: determina la concentracin de un compuesto en disolucin midiendo su absorbancia en la regin del ultravioleta-visible.
A > absorbancia > concentracin (ley de Lambert-Beer). A veces es necesario acoplar varias reacciones para tener un compuesto que absorba.
reaccin se inicia por la adicin del sustrato y se desarrolla durante un tiempo dado. Al final de este
periodo de tiempo la reaccin se detiene y se mide la cantidad de producto formado.
No permite comprobar la linealidad de la reaccin durante toda la prueba (es decir, no permite comprobar
b) Mtodos cinticos
Implican la medida continua del cambio de concentracin en funcin del tiempo.
Permiten comprobar la cintica de orden cero.
Son
ms rpidos y menos sensibles a las interferencias externas (como el color o la turbidez) que los
mtodos de punto final.
Recuerda
La causa ms frecuente de desviacin de la linealidad se produce cuando la cantidad de enzima es tan elevada que el sustrato se agota pronto y se produce una
disminucin brusca de la actividad enzimtica.
ENZIMAS REGULADORAS
Son enzimas oligomricas, suelen presentar varias subunidades y en algunos casos, el sitio o los sitios
113
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
1. ENZIMAS ALOSTRICAS
Presentan otras conformaciones inducidas por la unin de moduladores (pueden ser moduladores
activadores o inhibidores):
1. Interacciones homotrpicas: cuando el sustrato y el modulador son idnticos (la misma molcula).
2. Interacciones heterotrpicas: cuando el modulador es una molcula diferente del sustrato.
La cintica de las enzimas alostricas presenta un modelo de CURVA SIGMOIDEA Pequeos cambios
114
@AcademiaGoBIR
SERN-PROTEASAS
Estas enzimas se diferencian entre s porque cada una corta preferentemente una cadena polipeptdica
Todas las sern-proteasas poseen alrededor del centro activo un residuo de aspartato, uno de histidina y
otro de serina (trada cataltica).
Adems
todas poseen un bolsillo hidrofbico cerca del residuo de Ser del centro activo (en la sern-
1. QUIMIOTRIPSINA
Es una sern-proteasa que cataliza la rotura hidroltica de enlaces peptdicos formando un intermediario
acil-covalente transitorio.
Acta especficamente sobre los enlaces peptdicos adyacentes a residuos de aminocidos aromticos
bolsillo hidrofbico es ancho y el centro activo es hidrofbico, capaz de acomodar cadenas laterales
de aminocidos aromticos.
mayora de las enzimas que se detectan en los lquidos corporales no se forman en stos sino que
se liberan a partir de las clulas. Algunas enzimas se forman especficamente para ser liberadas a la
circulacin donde ejercen su funcin. Ej. Los factores de la coagulacin.
En
general la actividad de la mayora de las enzimas en sangre u otros lquidos corporales es baja.
Cuando se produce un dao tisular o celular Deterioro de la membrana celular Liberacin de
enzimas al torrente circulatorio
Isoenzimas Son variantes estructurales de una misma enzima con idntica actividad cataltica
pero distinta localizacin (tisular o celular). Presentan propiedades fsicas diferentes como la movilidad
electrofortica o resistencia a la inactivacin qumica y diferencias cuantitativas en las propiedades
catalticas.
- Las isoenzimas, en general, se originan debido a la existencia de ms de un locus gnico que codifica la
estructura de la enzima.
115
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Presenta diferentes isoenzimas en: hgado, hueso, intestino, placenta (durante el embarazo) y
leucocitos.
AUMENTOS PATOLGICOS
Hipofosfatasia congnita
Enfermedad heptica
Colestasis obstructiva (mayores
aumentos)
Intraheptica: cirrosis biliar primaria,
colangitis esclerosante.
Extraheptica: clculos, tumores de la va
biliar
Hipotiroidismo en nios
Dficit de vitamina C (escorbuto)
Enfermedad celiaca
Intoxicacin por vitamina D
La elevacin de la isoenzima placentaria fuera del embarazo es signo de enfermedad neoplsica intestinal
b) Fosfatasa cida
Cataliza la hidrlisis de steres fosfato a pH cido.
Est localizada en los lisosomas.
Se
encuentra en numerosos tejidos: hgado, glbulos rojos, mdula sea y plaquetas, pero los niveles
ms elevados se encuentran en la prstata.
Existe una isoforma resistente al tartrato que es muy til en el diagnstico de tricoleucemia y
ocasionalmente, en otras enfermedades linfoproliferativas.
Se
116
@AcademiaGoBIR
Adems
Es
117
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
f) Lactato deshidrogenasa
Cataliza la oxidacin reversible de lactato a piruvato.
Est localizada en el citosol.
Es un indicador de destruccin celular sensible pero poco especfico.
Existen cinco isoenzimas con distribucin tisular diferentes, constituidas por 4 subunidades de 2 tipos: H y M.
- LDH-1 (H4): procede en un 60% del msculo cardiaco y en menor proporcin de los eritrocitos.
- LDH-2 (H3M1): msculo cardiaco, eritrocitos y sistema reticuloendotelial.
- LDH-3 (H2M2): pulmones.
- LDH-4 (H1M3): riones, placenta y pncreas.
- LDH-5 (M4): hgado y msculo esqueltico.
En el suero de personas sanas la isoenzima predominante es la LDH-2.
Las
118
@AcademiaGoBIR
Los hemates presentan una concentracin 60 veces superior a la del suero por lo que la hemlisis
produce un aumento significativo de los niveles sanguneos de LDH.
g) Creatina quinasa, CK
Cataliza la fosforilacin reversible de la creatina utilizando el fosfato del ATP, para poder almacenar
energa en forma de fosfato de creatina.
Se encuentra en el citosol y en la mitocondria.
Es un dmero compuesto por 2 subunidades, M y B, cuya proporcin vara segn el tejido, dando lugar
a 3 isoenzimas:
119
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
h) Amilasa
Es una enzima que hidroliza los enlaces glucosdicos (14) del almidn originando maltosa y
maltotriosa. Es una metaloenzima que necesita calcio para su actividad No se puede determinar en
plasma con anticoagulantes quelantes de calcio.
i) Lipasa
Es una enzima que cataliza la hidrlisis de los triglicridos y steres de glicerol en cidos grasos.
Es producida principalmente por el pncreas y segregada al interior del duodeno para ejercer su accin.
Enfermedades pancreticas:
Pancreatitis aguda: se produce una elevacin de la lipasa srica a las 24- 48 horas (un poco
despus que los de la amilasa) y permanece elevada durante 5-7 das. La elevacin supone de
5 a 10 veces los valores normales. Es til para el diagnstico de pancreatitis aguda ms tarda y presenta
mayor sensibilidad y especificidad en el diagnstico de pancreatitis aguda que la amilasa
Otras enfermedades pancreticas: pancreatitis aguda inducida por frmacos, pancreatitis
crnicas
120
@AcademiaGoBIR
Sus aumentos van paralelos a los de la fosfatasa alcalina pero no se elevan con la enfermedad sea.
b) Aldolasa
La aldolasa es una enzima glucoltica que cataliza la escisin de fructosa 1,6-bisfosfato en
gliceraldehdo-P y dihidroxiacetona-P.
Se localiza en el citosol.
Presenta especial importancia en aquellos tejidos en los que la gluclisis es una va principal de obtencin
c) Acetilcolinesterasa o colinesterasa
Es una enzima que hidroliza la acetilcolina a acetato + colina.
Su origen en la sangre son los hemates y en el tejido se encuentra en SNC.
Resulta inhibida por los pesticidas organofosforados.
Las troponinas cardiacas son ms sensibles a la lesin muscular y ms especficas de lesin miocrdica
que la CK-MB.
Son marcadores precoces de infarto agudo de miocardio Se elevan a las 3-4 horas de la lesin
miocrdica, alcanzando un mximo a las 14 horas y se normalizan a los 7-10 das (TnI) o a los 10-14
das (TnT).
La
determinacin de sus niveles resulta til en la evaluacin de los pacientes con angina inestable,
deteccin de revascularizacin asociada con recanalizacin coronaria y en el clculo del tamao del infarto
de miocardio.
b) Mioglobina
mioglobina es una protena de pequeo tamao presente en las clulas musculares esquelticas
y cardiacas.
La
6 veces el lmite superior de normalidad) y retorna a sus valores normales a las 24 horas.
121
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
122
@AcademiaGoBIR
9. VITAMINAS
Son molculas orgnicas, presentes en los alimentos naturales, que el ser humano no puede sintetizar en
cantidades suficientes o en su totalidad y que se requieren en pequeas cantidades para el mantenimiento
de las funciones metablicas de la mayor parte de las clulas.
VITAMINAS HIDROSOLUBLES
Son solubles en agua.
No se almacenan, salvo la cobalamina, y se excretan por la orina Rara vez hay toxicidad.
Se deben ingerir con regularidad.
Son precursores esenciales de coenzimas y todas, excepto el cido ascrbico y la biotina, deben ser
metablicamente convertidas en formas activas.
Casi todas son miembros del complejo B.
tiamina presenta en su estructura un anillo de pirimidina y un anillo de tiazol unidos por un puente
metileno.
alimentos con mayor contenido en tiamina son: los cereales, la levadura, la carne de cerdo magra,
el corazn y el rin.
Su forma activa es el difosfato de tiamina, tambin llamado pirofosfato de tiamina (TPP), que acta de
coenzima.
Deficiencia: puede deberse a causas dietticas, alcoholismo o errores congnitos del metabolismo. 3
patologas:
1. Beri-beri: cuadro causado por dietas ricas en carbohidratos y pobres en tiamina. Ej. Arroz. Los sntomas
son: neuropata perifrica, agotamiento y anorexia, que producen degeneracin cardiovascular, neurolgica
y muscular.
2. Sndrome de Wernicke-Korsakoff: cuadro de encefalopata asociado a una disminucin de la actividad
transcetolasa. Es frecuente su aparicin en alcohlicos, ya que la ingesta de alcohol produce una menor
ingestin, absorcin y depsito de tiamina, as como un aumento en su metabolismo. Tambin se ha
asociado con alteraciones genticas de la actividad transcetolasa y el grado de desnutricin.
3. Polineuritis alcohlica: polineuropata sensitiva asociada al consumo de alcohol.
123
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
(FAD). El FMN se forma por fosforilacin dependiente de ATP a partir de la rivoflavina. El FAD se forma por
una reaccin de fosforilacin adicional a partir del FMN.
- Xantina oxidasa
Catabolismo de purinas.
- Aldehdo deshidrogenasa
- Succinato deshidrogenasa
Ciclo de Krebs.
- Acil-CoA deshidrogenasa
- Dihidrolipoil deshidrogenasa
Ciclo de Krebs.
- NADH deshidrogenasa
124
@AcademiaGoBIR
Arrivoflavinosis: muy poco frecuente. En personas desnutridas o alcohlicos y asociado con una baja
ingesta de leche, huevos o carne. Sntomas poco especficos, que afectan principalmente al sistema
ocular: hipersensibilidad a la luz, lagrimeo, prdida de agudeza visual, opacidad corneal, Tambin
puede haber afectacin mucocutnea en forma de dermatitis seborreica y a debilidad muscular.
cabo esta sntesis cuando se han satisfecho todas las necesidades corporales de triptfano. Por lo tanto,
la mayora de los individuos requieren fuentes dietticas tanto de triptfano como de niacina.
Las principales fuentes alimentarias de niacina son: hgado, carne roja, cereales y pescado.
Las coenzimas activas del cido nicotnico y la nicotinamida son: el dinucletido de nicotinamida y adenina
Son coenzimas de enzimas deshidrogenasas (en gluclisis, ciclo de Krebs y oxidacin de cidos
grasos) Ej. Lactato deshidrogenasa, malato deshidrogenasa, gliceraldehdo 3-P deshidrogenasa, isocitrato
deshidrogenasa, ...
Deficiencia:
125
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
La CoA acta como transportador de grupos acilo en forma de enlaces tioster (a travs del grupo
Estructura de la CoA
Recuerda
126
@AcademiaGoBIR
piridoxina se halla predominantemente en los vegetales. Las fuentes de vitamina B6 son: levadura, germen
de trigo, legumbres, avena y patata.
Las 3 formas fosforiladas son: piridoxina 5-P, piridoxamina 5-P y piridoxal 5-P o fosfato de piridoxal
(PLP), que es la forma fisiolgicamente activa de la vitamina, la que predomina en plasma y acta como
coenzima en las reacciones metablicas.
El cido 4-piridxico es el principal catabolito excretado por la orina.
Acta como transportador de grupos aminos. Participa como coenzima en diferentes reacciones del
El PLP forma bases de Schiff Formacin de un intermediario entre el grupo aldehdo del PLP y el grupo -amino de un residuo especfico de lisina en el centro
activo de la enzima Reacciones de transaminacin y descarboxilacin de aminocidos.
en posicin 4.
ENZIMA
REACCIN CATALIZADA
FUNCIN BIOQUMICA
Piruvato carboxilasa
Piruvato Oxalacetato
Gluconeognesis, lipognesis
Acetil-CoA carboxilasa
Acetil-CoA Malonil-CoA
Propionil-CoA carboxilasa
Propionil-CoA MetilMalonil-CoA
3-Metilcrotonil-CoA carboxilasa
Metilcrotonil-CoA
3-Metilglutaconil-CoA
Catabolismo de la leucina
127
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Estructura de la cobalamina
La
128
@AcademiaGoBIR
La cobalamina se absorbe en el leon y para ello necesita unirse al factor intrnseco (secretado por las clulas parietales de la mucosa gstrica). Para su transporte a los tejidos debe
unirse a la transcobalamina II.
- Anemia perniciosa: anemia megaloblstica + neuropata. Se puede producir por dficit de FI o por dficit
en la absorcin de vitamina B12:
Anemia megaloblstica Debido a una sntesis defectuosa de DNA la mdula sea se hace
megaloblstica. Los granulocitos desarrollan ncleos multilobulados.
Neuropata Acumulacin de lpidos anmalos en la vaina de mielina.
puente metileno, que a su vez se une por enlace amida a un residuo de cido glutmico.
129
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Ojo
130
@AcademiaGoBIR
Deficiencia: se puede deber a una alimentacin escasa, que es frecuente en ancianos y alcohlicos, o
a un sndrome de malabsorcin.
- Anemia megaloblstica.
- Defectos del tubo neural durante el desarrollo embrionario.
- Alteraciones cardiovasculares Las concentraciones elevadas de homocistena en sangre se asocian
con enfermedad vascular ya que este aminocido est implicado en oclusin vascular y trombognesis.
131
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Deficiencia:
VITAMINA
COENZIMA
FUNCIN
DEFICIENCIA
TPP
(Pirofosfato de tiamina)
Transportador de grupos
aldehdo activados:
- Descarboxilacin
oxidativa de
-cetocidos
- Reaccin de la
transcetolasa
Beri-beri
Sndrome de WernickeKorsakoff
Polineuritis alcohlica
FAD y FMN
Grupos prostticos
en reacciones de
oxidoreduccin.
Cadena respiratoria
Arrivoflavinosis
Niacina
(Vitamina B3)
NAD y NADP
Coenzimas de enzimas
deshidrogenasas
cido pantotnico
(Vitamina B5)
CoA
Transportador de
grupos acilo en forma
de enlaces tioster
Pelagra (las 3 D)
Asociadas:
Enf. Hartnup
Sndrome carcinoide
Piridoxina
(Vitamina B6)
PLP
(Fosfato de piridoxal)
Transportador de
grupos amino
Rara
Biotina
(Vitamina B8)
Biotina
Coenzima en reacciones
de carboxilacin
Rara
Transferencia de
grupos metilo
Reagrupamientos
moleculares
Anemia perniciosa
Homocisteinemia/
Homocistinuria
Aciduria metilmalnica
Anemia megaloblstica
Defectos del cierre
del tubo neural
Alteraciones
cardiovasculares
Escorbuto
Tiamina
(Vitamina B1)
Rivoflavina
(Vitamina B2)
Cobalamina
(Vitamina B12)
Metilcobalamina
Desoxiadenosilcobalamina
cido flico
THF (Tetrahidrofolato)
Transportador
de fragmentos
monocarbonados
cido ascrbico
(Vitamina C)
cido ascrbico
132
@AcademiaGoBIR
Rara
No se excretan por la orina y tienden a almacenarse en el organismo (lo que puede originar toxicidad).
1. VITAMINA A (RETINOL)
La vitamina A es un compuesto poliisoprenoide que contiene un anillo ciclohexenilo.
Retinol (vitamina A)
La vitamina A se encuentra en forma de provitamina en las plantas, como -caroteno (constituido por 2
Sus principales fuentes son: hgado, queso, leche, huevos, pescado y frutas. Un 90% de la vitamina A de
la dieta se encuentra en forma de steres de retinol.
Son
a) Ciclo visual:
- La vitamina A, en su forma 11-cis-retinal, se asocia reversiblemente con la protena visual opsina para
formar la rodopsina Pigmento visual localizado en los bastones que participan en la visin nocturna.
- Cuando la rodopsina se expone a la luz se disocia en retinal todo-trans (reaccin de isomerizacin) y
opsina. Esto viene acompaado de una disminucin de la conductancia a los iones sodio en la membrana
del bastn, la membrana se hiperpolariza y disminuye la liberacin de glutamato (neurotransmisor
inhibidor), lo que provoca que el bastn se excite. De esta manera la retina se adapta a la luz en oscuridad.
Ciclo visual
b) El cido retinoico participa en la promocin del crecimiento y en la diferenciacin de los tejidos. Tambin
es intermediario en la sntesis de glucoprotenas.
Deficiencia:
2. VITAMINA D
Es una prohormona esteroide (secoesteroide).
La provitamina D se encuentra en 2 formas:
133
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Estructura de la vitamina D
El colecalciferol se produce en la piel por radiacin UV del 7-dehidrocolesterol, un metabolito normal del
colesterol. Tambin pueden obtenerse las formas D2 y D3 a travs de la dieta.
Las mejores fuentes de vitamina D
Las
mejores fuentes de vitamina D3 son: el pescado de agua salada (salmn, sardinas y arenques), el
hgado y la yema de huevo.
La vitamina D se absorbe en el intestino delgado y circula en sangre unida a una globulina especfica. En
Funciones:
a) Favorece la absorcin intestinal de calcio y fosfato: aumenta la expresin de una protena fijadora de
calcio en las clulas epiteliales intestinales, la calbindina.
3. VITAMINA E (TOCOFEROL)
Es un isoprenoide sustituido de 6-hidroxicromanos.
El -D-tocoferol es el ms abundante y el de mayor actividad biolgica.
134
@AcademiaGoBIR
a) Protege frente a la peroxidacin de los cidos grasos poliinsaturados de las membranas plasmticas.
b) La vitamina E es un antioxidante natural (relevante para la membrana del eritrocito).
Deficiencia:
4. VITAMINA K
Son NAFTOQUINONAS con poliisoprenoides sustituidos.
Existen varias formas de vitamina K:
de protrombina, equimosis y hematuria. Neonatos con este dficit vitamnico desarrollan la enfermedad
hemorrgica del recin nacido.
VITAMINA
Vitamina A
(RETINOL)
Vitamina D
(CALCITRIOL)
FUNCIN
Ciclo visual: forma parte del
pigmento rodopsina localizado
en los bastones
Crecimiento y diferenciacin
de tejidos
Favorece la absorcin
intestinal de calcio y fosfato
Promueve la resorcin sea
Estimula la reabsorcin renal
de calcio y fosfato
DEFICIENCIA
Ceguera nocturna
Osteomalacia en adultos
Raquitismo en nios
Vitamina E
(-TOCOFEROL)
Antioxidante natural:
Protege de la peroxidacin de
los cidos grasos poliinsaturados
Protege a la membrana del
hemate de la oxidacin
Anemia hemoltica,
trombocitosis y edema
Vitamina K
(NAFTOQUINONAS)
Carboxilacin de restos de
glutmico en factores de
coagulacin II, VII, IX y X
Hemorragias
gastrointestinales
135
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
BIOQUMICA METABLICA
1. BIOENERGTICA Y METABOLISMO
metabolismo es la suma de todas las transformaciones qumicas que se producen en una clula u
organismo. Est formado por una serie de reacciones catalizadas enzimticamente que constituyen las
rutas metablicas.
El
Metabolismo intermediario Es el conjunto de vas metablicas centrales que sirven para la sntesis,
degradacin y conversin de metabolitos de bajo peso molecular. No incluye la biosntesis de los cidos
nucleicos y protenas a partir de sus precursores monomricos.
a) Catabolismo Fase degradativa en la que los nutrientes orgnicos (glcidos, lpidos y protenas)
se convierten en productos ms pequeos y sencillos (cido lctico, CO2 y NH3). Las rutas catablicas
liberan energa, parte de la cual se conserva mediante la formacin de ATP y transportadores electrnicos
reducidos (NADH, NADPH y FADH2). El resto se pierde en forma de calor. Son rutas convergentes
(formacin de un producto comn, CO2 y H2O).
presentan enzimas comunes y alguna de las enzimas diferente. stas representan los sitios de regulacin
especfica independiente. Adems transcurren en compartimentos celulares diferentes. Ej. Catabolismo
de cidos grasos en la mitocondria y sntesis de cidos grasos en el citoplasma.
- Control cintico segn disponibilidad de sustrato: cuando la concentracin intracelular de sustrato est
prxima o por debajo de la Km, la velocidad de la reaccin depende fuertemente de la concentracin de
sustrato.
- Regulacin alostrica: por un intermediario metablico o coenzima que refleja el estado metablico
interno de la clula. Ej. El exceso de ATP inhibe alostricamente las rutas catablicas.
- Regulacin hormonal o por factores de crecimiento.
- Compartimentalizacin celular.
136
@AcademiaGoBIR
b) Segunda ley
En todos los procesos naturales aumenta la entropa del Universo; o lo que es lo mismo, si un proceso se
produce espontneamente la entropa total de un sistema (grado de desorden) debe aumentar.
c) Tercera ley
Solo las sustancias puras, cristalinas y perfectamente ordenadas tienen entropa nula en el cero absoluto
de temperatura; o lo que es lo mismo, ningn sistema puede enfriarse hasta el cero absoluto.
En los sistemas biolgicos, en condiciones de presin y temperatura constantes, hay una ecuacin que
combina las 2 primeras leyes y describe los cambios de energa que tienen lugar en una reaccin qumica:
G = H TS
Parmetros
G: Variacin de la energa libre de Gibbs, G. Expresa la cantidad de energa disponible para realizar
- G < 0 Reaccin exergnica: ocurre de manera espontnea, con prdida de energa libre.
- G > 0 Reaccin endergnica: no ocurre espontneamente. El sistema gana energa libre.
H: Variacin de la entalpa, H. Es el contenido calrico del sistema de reaccin. Refleja el nmero y la
- H < 0 Reaccin exotrmica: libera calor (el contenido calrico de los productos es menor que el de
los reactivos).
- H > 0 Reaccin endotrmica: absorben calor del entorno. Al aumentar la temperatura se favorece la
aparicin de productos.
S:
T: Temperatura absoluta.
137
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Durante el crecimiento y divisin de las clulas, el orden interno celular se compensa con el
desorden que se genera en su entorno. Los organismos vivos conservan su orden interno
tomando de su entorno energa libre en forma de nutrientes y devolviendo a su entorno una
cantidad igual de energa en forma de calor y entropa.
composicin de un sistema de reaccin tiende a cambiar hasta que se alcanza el equlibrio. Las
concentraciones de reactivos y productos en el equilibrio definen la constante de equilibrio, Keq Relacin
entre las concentraciones molares (mol/L) de reactivos y de productos.
La
Keq =
[Productos]eq
[Reactivos]eq
Variacin
de energa libre de Gibbs estndar (G): Es la fuerza propulsora del sistema hacia el
equilibrio en condiciones estndar (T=25C, P=1 atm, pH=7 y concentraciones iniciales de reactivos y
productos=1M). Indica en qu direccin y hasta qu punto transcurre una determinada reaccin para
alcanzar el equilibrio en las condiciones ya mencionadas.
G = G + RT ln Keq
G = - RT ln Keq
Por tanto, la G de una reaccin qumica es una forma matemtica alternativa de expresar su constante
de equilibrio.
Go
A [1M]
>1
Negativa
1,0
Cero
Se encuentra en el equilibrio
<1
Positiva
Ojo
el ser humano el ATP es el principal transportador de energa libre de las reacciones exergnicas a
las reacciones endergnicas.
El ATP presenta 3 fosfatos cargados negativamente unidos por 2 enlaces anhdrido fosfrico. La alta
energa de estos enlaces hacen del ATP un transportador eficiente de energa.
El ATP presenta una gran repulsin de carga en su molcula por lo que tiende a liberar esa tensin:
138
@AcademiaGoBIR
Existen
GO (kJ/mol)
GO (Kcal/mol)
Fosfoenolpiruvato (PEP)
- 61,9
- 14,8
1,3 Bisfosfoglicerato
( fosfoglicerato + Pi)
- 49,3
- 11,8
Fosfocreatina
- 43,0
- 10,3
- 32,8
- 7,8
- 30,5
- 7,3
- 45,6
- 10,9
- 14,2
- 3,4
PPi ( 2 Pi)
- 19,2
- 4,0
Glucosa 1-P
- 20,9
- 5,0
Fructosa 6-P
- 15,9
- 3,8
Glucosa 6-P
- 13,8
- 3,3
Glicerol 1-P
- 9,2
- 2,2
Acetil-CoA
- 31,4
- 7,5
En
la escala de potencial de transferencia de grupo, debido a esta posicin intermedia, el ATP puede
transportar energa desde compuestos fosfato de alta energa producidos por el catabolismo a compuestos
tales como la glucosa, convirtindolas en especies ms reactivas.
139
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
En las reacciones de hidrlisis con variaciones de energa libre muy negativas, los productos son ms estables que los reactivos por varias razones:
a) En los reactivos, la tensin de enlace debida a la repulsin electrosttica queda
liberada por la separacin de carga.
b) Los productos estn estabilizados por ionizacin (ATP, acilfosfatos y tiosteres), por
isomerizacin (tautomerizacin) o por resonancia Ej. La creatina liberada a partir de la
fosfocreatina.
2. ANABOLISMO
a) Etapa 1. Implica tambin al ciclo de Krebs, que suministra molculas para las reacciones biosintticas
(el ciclo de Krebs es un nexo de unin entre el catabolismo y el anabolismo).
b) Etapa 2. Supone la transformacin de los metabolitos del ciclo de Krebs en monmeros.
c) Etapa 3. Comprende la biosntesis de macromolculas a partir de sus monmeros.
140
@AcademiaGoBIR
2. METABOLISMO DE LA GLUCOSA
CATABOLISMO DE LA GLUCOSA: GLUCLISIS
Tambin denominada Ruta de Embden-Meyerhof-Parnas.
Ruta degradativa de la glucosa, principal molcula energtica del organismo.
en una serie de reacciones enzimticas que tienen lugar en el citosol de todas las clulas
eucariotas para rendir, a partir de una molcula de glucosa, 2 molculas de piruvato.
Consiste
1. FASES DE LA GLUCLISIS
FASE PREPARATORIA
a) Fosforilacin de la glucosa a glucosa 6-P. HEXOQUINASA
Reaccin IRREVERSIBLE con consumo de ATP.
141
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- No solo cataliza la fosforilacin de la glucosa sino tambin de otras hexosas. Requiere Mg2+ para su
actividad.
- Presenta diferentes isoenzimas, una de ellas es la GLUCOQUINASA, que est localizada exclusivamente
en el hepatocito y solo fosforila glucosa.
y dihidroxiacetona-P (DHAP).
los pasos de liberacin de energa, en los que parte de esta energa obtenida se conserva en
forma de ATP y NADH.
El yodoacetato y metales pesados, como el plomo o el mercurio, inhiben de forma irreversible la enzima.
Recuerda
activo. Es necesaria la presencia del compuesto 2,3-BPG para iniciar el ciclo cataltico y es continuamente
regenerado por ese ciclo.
142
@AcademiaGoBIR
3. REGULACIN DE LA GLUCLISIS
Se
realiza principalmente sobre las enzimas reguladoras de la gluclisis, que son las que catalizan las
reacciones irreversibles:
- Hexoquinasa.
- Fosfofructoquinasa-1.
- Piruvato quinasa.
a) Hexoquinasa
Enzima
b) Fosfofructoquinasa-1 (PFK-1)
Control primario de la gluclisis.
Etapa que compromete el paso de la glucosa a travs de la gluclisis.
Sometida a regulacin alostrica:
143
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
En la gluconeognesis la reaccin equivalente a sta pero en sentido inverso (conversin de fructosa 1,6-bisfosfato en fructosa 6-P) es la catalizada por la fructosa
bisfosfatasa-1 (FBPasa-1). Es inhibida alostricamente por el AMP. La fructosa
2,6-bisfosfato tiene el efecto contrario sobre la FBPasa-1: reduce la afinidad por
sus sustratos disminuyendo as la gluconeognesis.
Regulacin de la gluclisis
- Se libera la hormona insulina Activacin de una protena fosfatasa Aumento de la PFK-2 Aumento
de las concentraciones de fructosa 2,6-bisfosfato Inhibicin de la gluconeognesis y estimulacin de la
gluclisis.
c) Piruvato quinasa
Existen, al menos, 3 isoenzimas. Presentan diferente distribucin tisular y responden a distintos
moduladores.
isoenzima heptica (forma L) est sujeta a una regulacin adicional por fosforilacin. Cuando hay
144
@AcademiaGoBIR
los eritrocitos el paso catalizado por la fosfoglicerato quinasa se desva por un proceso que disipa
en forma de calor la energa del 1,3 BFG. En este ciclo, una enzima adicional, la BISFOSFOGLICERATO
MUTASA, cataliza la conversin del 1,3 BFG a 2,3 BFG. El 2,3 BPG es convertido, a su vez, en
3-fosfoglicerato por la 2,3 BFG fosfatasa.
De esta forma no hay produccin neta de ATP, lo que es ventajoso para el eritrocito. Permite que
contine la gluclisis an cuando la necesidad de ATP sea mnima. El hemate tiene elevadas cantidades
de 2,3 BPG.
Recuerda
Ciclo de Rapoport-Luebering
145
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
fosforilados.
a) Fructosa
Est presente como azcar libre en muchas frutas y se obtiene tambin de la hidrlisis de la sacarosa.
En el msculo y en el rin, la fructosa se fosforila a fructosa 6-P por accin de la hexoquinasa y se
incorpora a la gluclisis.
En el hgado, la fructosa se fosforila originando fructosa 1-P por accin de la fructoquinasa.
Posteriormente, una aldolasa escinde la fructosa 1-P en DHAP y gliceraldehdo.
b) Galactosa
Procede principalmente de la hidrlisis del disacrido lactosa.
En el hgado se fosforila a galactosa 1-P, por accin de la galactoquinasa.
La
galactosa 1-P se transforma en glucosa 1-P en una reaccin de epimerizacin en la que participa el
UDP. Finalmente se genera glucosa 6-P, que se incorpora a la gluclisis.
c) Manosa
Procede de la digestin de diversos polisacridos y glucoprotenas presentes en los alimentos.
Se fosforila a manosa 6-P por accin de la hexoquinasa; posteriormente, en una reaccin de isomerizacin,
se transforma en fructosa 6-P para incorporarse a la gluclisis.
146
@AcademiaGoBIR
TRANSPORTADOR
LOCALIZACIN
FUNCIN
GLUT 1
Ubicuo
GLUT 2
Membrana plasmtica de
hepatocitos, islotes
pancreticos, rin e intestino
GLUT 3
Membrana plasmtica de
las neuronas cerebrales
GLUT 4
Vesculas intracelulares
en clulas del msculo
esqueltico, msculo cardiaco
y tejido adiposo
Captacin de glucosa
estimulada por insulina. Las
vesculas se desplazan a la
membrana plasmtica en
respuesta a la insulina
GLUT 5
Transporte de fructosa
SGLT1
Absorcin de glucosa
SGLT2
Tbulos renales
Absorcin de glucosa
*Los transportadores GLUT transportan por mecanismo de difusin facilitada; los SGLT por transporte activo secundario.
Tambin
Piruvato + NADH + H+
Lactato + NAD+
LDH
147
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
CO2
Piruvato
NADH+H+
Acetaldehdo
Piruvato descarboxilasa
TPP y Mg2+
NAD+
Etanol
Alcohol dh
Zn2+
La enzima alcohol deshidrogenasa en los mamferos cataliza la metabolizacin del etanol, la reaccin en
Recuerda
2. EN CONDICIONES AEROBIAS
piruvato se oxida a acetato (acetil-CoA), ste entra en el ciclo del cido ctrico o ciclo de Krebs y
se oxida a CO2 y H2O. El NADH formado por la deshidrogenacin del gliceraldehdo 3-P en la gluclisis se
reoxida finalmente a NAD+ mediante el paso final de sus electrones al O2 en el proceso de la respiracin
mitocondrial.
El
148
@AcademiaGoBIR
distintos.
ENZIMA
GRUPO PROSTTICO
O COENZIMA
REACCIN
CATALIZADA
TPP
Descarboxilacin (eliminacin
del tomo de carbono del
piruvato). Produce
acetaldehdo
Lipoato
E3. Dihidrolipoil dh
FAD
Regeneracin de la forma
oxidada del lipoato
E1. Piruvato dh
Recuerda
149
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
b) Ciclo de Krebs, ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo del cido ctrico
Es una ruta metablica que forma parte del proceso de respiracin celular de los organismos aerobios.
En
el ciclo de Krebs tiene lugar la oxidacin de acetil-CoA procedente de los monosacridos, cidos
grasos y aminocidos hasta producir CO2 y energa qumica en forma de poder reductor. Este poder
reductor pasa a la cadena de transporte electrnico y a la fosforilacin oxidativa para generar ATP.
Tiene lugar en la MATRIZ MITOCONDRIAL de las clulas eucariotas. Todas las enzimas estn localizadas
en la matriz mitocondrial, salvo la succinato deshidrogenasa que est fuertemente unida a la membrana
mitocondrial interna.
150
@AcademiaGoBIR
- El grupo acetilo de 2 C del acetil-CoA entra en el ciclo al reaccionar con el compuesto de 4 C, oxalacetato
(OAA).
- El OAA luego se regenera de forma que pueda reaccionar con otra molcula de acetil-CoA.
Enzimas del ciclo de Krebs
ENZIMA
CITRATO SINTASA
Irreversible
REACCIN CATALIZADA
Condensacin del acetil-CoA con el OAA para dar
ACONITASA
ISOCITRATO DH
Irreversible
COMPLEJO -CETOGLUTARATO DH
Irreversible
SUCCINATO DH
L- MALATO DH
Recuerda
Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2 H2O 2 CO2 + 3 NADH + 3 H+ + FADH2 + GTP + CoA-SH
El
151
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
GTP representa energticamente lo mismo que el ATP y se puede transformar en ATP mediante la
siguiente reaccin catalizada por la nuclesido difosfato quinasa:
GTP + ADP
GDP + ATP
Teniendo en cuenta la reaccin de la piruvato deshidrogenasa y que cada molcula de glucosa genera 2
de piruvato, la ecuacin para el catabolismo de la glucosa a travs de la gluclisis y del ciclo de Krebs
es la siguiente:
Glucosa + 2 H2O + 10 NAD+ + 2 FAD + 4 ADP + 4 Pi 6 CO2 + 10 NADH + 6 H+ + 2 FADH2 + 4 ATP
Recuerda
1 GTP = 1 ATP
A medida que los intermediarios del ciclo de Krebs son retirados para servir como precursores
biosintticos se reponen mediante reacciones anaplerticas. De esta manera las concentraciones de
los intermediarios del ciclo de Krebs permanecen prcticamente constantes.
REACCIN
Piruvato + HCO3- + ATP
PEP + CO2 + GDP
PEP + HCO3-
ENZIMA
OAA + ADP + Pi
OAA + GTP
OAA + Pi
Malato + NAD(P)+
TEJIDOS/ ORGANISMOS
Piruvato
carboxilasa
Hgado, rin
PEP
carboxiquinasa
Corazn,
msculo esqueltico
PEP carboxilasa
Plantas superiores,
levaduras y bacterias
Enzima mlico
Eucariotas y bacterias
La
152
@AcademiaGoBIR
El
- CITRATO Sntesis de cidos grasos. Transporta las unidades acetilo desde la mitocondria al citosol.
- -CETOGLUTARATO Sntesis de aminocidos.
- SUCCINIL-CoA Precursor de las porfirinas que se utilizan en la sntesis del grupo hemo y de los
citocromos.
- OXALACETATO Se convierte en glucosa en la gluconeognesis. Tambin participa en la sntesis de
aminocidos, como el aspartato.
Regulacin del ciclo de Krebs
Existen 3 factores que regulan la velocidad del flujo a travs del ciclo:
1. Disponibilidad de sustratos.
2. Inhibicin por los productos acumulados.
3. Retroinhibicin alostrica.
Disponibilidad de sustratos
El aumento de OAA y acetil-CoA estimula fuertemente la formacin de citrato y por consiguiente, el ciclo
de Krebs.
La disponibilidad de acetil-CoA depende de la accin del complejo piruvato deshidrogenasa, mientras que
la disponibilidad de OAA depende de la piruvato carboxilasa.
153
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
El Ca2+ es un activador alostrico de la isocitrato deshidrogenasa y de la -cetoglutarato deshidrogenasa Seal para la contraccin y aumento de la demanda de
ATP.
que solo se metaboliza a piruvato la glucosa necesaria para suministrar al ciclo de Krebs los grupos acetilo
del acetil-CoA.
Ciclo del glioxilato: una variante anablica del ciclo de Krebs
Los vertebrados no son capaces de sintetizar glcidos a partir de cidos grasos o acetato.
Sin
154
@AcademiaGoBIR
una ruta cclica que convierte 2 unidades acetilo en forma de acetil-CoA en succinato (4 C). Utiliza
alguna de las enzimas del ciclo de Krebs pero evita las reacciones en las que se produce prdida de
carbonos.
155
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Estructura de la mitocondria
proceso comienza con la entrada de electrones en la cadena respiratoria. Estos electrones llegan
en forma de equivalentes de reduccin procedentes del metabolismo aerobio del piruvato. La cadena
respiratoria est formada por distintos transportadores localizados en la membrana mitocondrial interna
que actan secuencialmente y estn situados en orden creciente de afinidad electrnica; su potencial
de reduccin aumenta de forma gradual (a mayor potencial de reduccin, mayor es la tendencia a atraer
electrones).
Los
equivalentes de reduccin ceden sus electrones a la cadena respiratoria hasta el aceptor final, que
es el O2, y se reduce para dar agua.
Adems
del NADH y de las flavoprotenas, en la cadena respiratoria hay otros 3 tipos de molculas
transportadoras de electrones:
1. Ubiquinona o coenzima Q Es una benzoquinona liposoluble que contiene una cadena lateral
isoprenoide. Debido a su hidrofobicidad y a su pequeo tamao puede difundir libremente a travs de
la bicapa lipdica de la membrana mitocondrial interna y puede hacer de lanzadera de equivalentes de
reduccin. Transporta tanto electrones como protones, lo que le confiere un papel central en el acoplamiento
del flujo electrnico al movimiento de protones. Puede aceptar 1 2 electrones.
2. Citocromos Son protenas con un grupo prosttico hemo. Las mitocondrias tienen 3 tipos de
citocromos, que se distinguen por diferencias en su espectro de absorcin de luz (a, b y c). Los grupos
hemo de los citocromos a y b estn unidos de forma no covalente a sus protenas asociadas, mientras que
en los citocromos c estn unidos de forma covalente a travs de residuos Cys.
156
@AcademiaGoBIR
157
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Por tanto, por cada par de electrones donados por el NADH a cada tomo de O2 se tranfieren un total
de 10 H+ al espacio intermembrana.
Resumen de los componentes de la cadena transportadora de electrones
COMPLEJO
SUBUNIDADES COFACTORES
PROTEICAS
I: NADH-Ubiquinona oxidorreductasa
43
1 FMN
6 centros Fe-S
1 FAD
3 centros Fe-S
1 citocromo b
Dmero con 11
subunidades
diferentes
2 citocromos b
2 centros Fe-S
1 citocromo c1
13
2 iones cobre
1 citocromo a
1 citocromo a3
Recuerda
Fosforilacin oxidativa
Es el proceso por el cual la energa generada por la cadena de transporte electrnico impulsa la
sntesis de ATP mediante la fosforilacin del ADP, catalizado por la ATP sintasa (Complejo V) Teora
quimiosmtica del acoplamiento .
158
@AcademiaGoBIR
- Al pasar los electrones a travs de la cadena respiratoria se transportan H+ desde la matriz (en contra de
gradiente) y se liberan en el espacio intermembrana. Como consecuencia se crea un potencial elctrico
y un gradiente de H+ a travs de la membrana interna. Este gradiente electroqumico de H+ se denomina
fuerza protn-motriz.
- Los H+ que se encuentran en exceso en el espacio intermembrana pueden volver a la matriz a favor de
gradiente de concentracin mediante la ATP sintasa. De esta forma se produce la sntesis de ATP.
Modelo quimiosmtico
El transporte electrnico provoca que los complejos I, III y IV muevan H+ a travs de la membrana
mitocondrial interna desde la matriz al espacio intermembrana. Por tanto, el NADH + H+ da lugar a una
mayor transferencia de H+ que el FADH2, lo que conduce a una mayor obtencin de ATP.
interna.
Cataliza la formacin de ATP a partir de ADP + Pi acoplado al flujo de protones desde el espacio
intermembrana a la matriz.
159
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- F1: protena perifrica de membrana, soluble en agua. Tiene 9 subunidades de 5 tipos distintos
(33). Cada una de las 3 subunidades tiene un sitio cataltico para la sntesis del ATP a partir de ADP
+ Pi. La fraccin F1 aislada cataliza la hidrlisis del ATP (reaccin inversa).
- Fo: protena integral de membrana, insoluble en agua. Est compuesto por 3 subunidades, a, b y c.
Contiene un canal para los protones. Es sensible a oligomicina.
- Tallo Fo-F1: constituido por las subunidades y de F1 que actan de eje central. Se sujetan al anillo que
forman las subunidades c de Fo.
La entrada de 3 H+ desde el espacio intermembrana impulsa un movimiento rotatorio de 120 de Fo. Este
giro es aprovechado por F1 para sintetizar una molcula de ATP a partir de ADP + Pi. Se necesita otro H+
ms para la entrada del Pi en la matriz mitocondrial.
Por tanto:
- Por cada par de e- que es transportado desde el NADH a travs de la cadena respiratoria hasta el O2 se
bombean 10 H+ desde la matriz al espacio intermembrana. Se necesitan 4 H+ para impulsar la sntesis de
ATP 10/4 = 2,5. Este valor se denomina razn P/O: nmero de molculas de ATP sintetizadas por cada
par de electrones transportados a travs de la cadena respiratoria.
- Por cada par de e- que es transportado desde el FADH2 a travs de la cadena respiratoria hasta el O2 se
bombean 6 H+ desde la matriz al espacio intermembrana (ya que el FADH2 se incorpora a la cadena en el
complejo II) y se necesitan 4H+ para impulsar la sntesis de ATP. Razn P/O= 6/4 = 1,5 molculas de ATP.
La fuerza protn-motriz tambin sirve para impulsar otros procesos celulares. La membrana mitocondrial
interna es impermeable a las especies cargadas pero hay 2 sistemas especficos que transportan el ADP
+ Pi citoslico a la matriz y el ATP generado al citosol:
1. Nucletido de adenina translocasa Translocasa integral de la membrana interna. Une ADP en el
espacio intermembrana y lo intercambia con una molcula de ATP, que es transportada simultneamente
hacia el exterior. Es un cotransportador antiparalelo. Es inhibida especficamente por atractilsido
(glucsido txico).
Lanzaderas de NADH + H+
El
NADH generado por la gluclisis en el citosol debe regenerarse a NAD+ en la cadena respiratoria
mitocondrial para que la gluclisis pueda seguir funcionando.
160
@AcademiaGoBIR
Una vez dentro de la mitocondria, los electrones son transferidos a la cadena transportadora de electrones
Existen 2 tipos de lanzaderas: la lanzadera del aspartato-malato y la lanzadera del glicerol 3-P.
161
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
con estos inhibidores, junto con la medida del potencial de reduccin, ha permitido determinar el orden
correcto de cada uno de los componentes de la cadena.
Agentes que interfieren con la fosforilacin oxidativa Y EL TRANSPORTE ELECTRNICO
TIPO DE INTERFERENCIA
Inhibicin de la transferencia
electrnica
Inhibicin de la ATPsintasa
D
esacoplamiento
de la fosforilacin y
el transporte electrnico
COMPUESTO
Cianuro y CO: inhiben la citocromo oxidasa
Oligomicina: inhibe Fo
2,4-dinitrofenol (2,4 DNP): transportador de H+
hidrofbico. Difunde a travs de la membrana
mitocondrial interna y tansporta los H+, disipando el
gradiente de protones
Valinomicina: ionforo de K+. Sustancia liposoluble
que une y transporta K+ a travs de la membrana
mitocondrial interna. La mitocondria utiliza la energa
generada en el transporte electrnico para acumular
los cationes monovalentes en vez de producir ATP
Termogenina: forma poros conductores de H+ en la
membrana mitocondrial interna del tejido adiposo marrn
- El NADH citoslico ha de ser transportado a la mitocondria para la regeneracin del NAD+. Atendiendo
al tipo de lanzadera implicada se obtiene en su transporte 1,5 ATP 2,5 ATP. Por lo tanto, el rendimiento
aerbico total en la oxidacin de 1 mol de glucosa a 6 CO2 rinde:
162
@AcademiaGoBIR
REACCIN
SE GENERAN
ATPs
Glucosa 2 Piruvato
2 ATP + 2 NADHcitoslico
3 5 ATPs
2 NADH
5 ATP
2 Acetil-CoA 4 CO2
20 ATP
La ATP sintasa se inhibe cuando las concentraciones de ATP son altas y se activa cuando se elevan las
- Generacin de poder reductor en el citosol en forma de NADPH + H+, que es utilizado en rutas
biosintticas o para prevenir lesiones oxidativas en algunas clulas. Ej. Eritrocitos.
- Obtencin de monosacridos intermediarios con una longitud entre 3-7 C. Ej. La ribosa 5-P, necesaria
para la sntesis de nucletidos, cidos nucleicos y cofactores enzimticos; la eritrosa 4-P, importante para
la sntesis de aminocidos aromticos.
163
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Fase no oxidativa
En
otros tejidos tiene lugar primero una reaccin de epimerizacin a partir de la ribulosa 5-fosfato para
generar xilulosa 5-P, catalizada por la ribosa 5-P epimerasa.
Despus
tienen lugar una serie de reorganizaciones moleculares entre los diferentes monosacridos:
isomerizaciones, epimerizaciones y transferencias de fragmentos de 2 3 C mediante enzimas
TRANSALDOLASAS Y TRANSCETOLASAS:
- Transcetolasas: catalizan la transferencia de fragmentos de 2 C desde una cetosa a una aldosa.
Siempre utiliza la misma cetosa, xilulosa 5-P, y siempre uno de sus productos es el G3P. Es una enzima
dependiente de TPP.
- Transaldolasas: catalizan la transferencia de 3 C desde una cetosa a una aldosa. Utiliza la cadena lateral
de una Lys para formar una base de Schiff con el grupo carbonilo de la cetosa. El aldehdo aceptor se
convierte en alcohol.
REACCIN
Xilulosa 5-P + Ribosa 5-P
PRODUCTO
ENZIMA
TRANSALDOLASA
TRANSCETOLASA
Las reacciones de la fase no oxidativa de la ruta son fcilmente reversibles, permitiendo la interconversin
de los monosacridos.
En la fase no oxidativa seis pentosas fosfato se convierten en cinco hexosas fosfato.
164
@AcademiaGoBIR
ciclos sucesivos dan lugar a la oxidacin completa de la glucosa 6-P a CO2 y agua, con la mxima
generacin de equivalentes reductores.
Recuerda
alostrica:
otro lado, el UDP-glucuronato se reduce a L-gulonato, que es el precursor del cido ascrbico en
aquellos animales capaces de sintetizarla. El ser humano es incapaz de sintetizar cido ascrbico ya que
carecen de la enzima L-gulonolactona oxidasa.
Por
El gulonato se puede oxidar hasta L-xilulosa, que a su vez se puede reducir a xilitol (reaccin
dependiente de NADPH).
Posteriormente se transforma en D-xilulosa 5-P, que se incorpora a la va de las pentosas fosfato.
piruvato, glicerol, propionato, ciertos aminocidos (Ej. Alanina y glutamina) e intermediarios del ciclo de
Krebs de 4, 5 y 6 C.
Este proceso es importante para que la glucosa est disponible para muchos tejidos, especialmente:
cerebro, sistema nervioso, mdula renal, tejidos embrionarios, testculos y eritrocitos Utilizan glucosa
como principal combustible.
165
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
gluconeognesis y la gluclisis no son rutas idnticas, aunque comparten varios pasos 7 de las
10 reacciones enzimticas de la gluconeognesis son la inversa de las reacciones glucolticas. Hay 3
reacciones gluconeognicas irreversibles.
Malato + NAD+
PEP carboxiquinasa
- Reaccin impulsada por la hidrlisis del GTP que transforma el OAA en fosfoenolpiruvato. Es una reaccin
dependiente de Mg2+. Es reversible en las condiciones intracelulares. Presenta 2 isoenzimas: una de
localizacin mitocondrial y otra citoslica.
Oxalacetato + GTP
Ojo
166
@AcademiaGoBIR
2. REGULACIN DE LA GLUCONEOGNESIS
Las 3 enzimas reguladoras de la gluconeognesis estn sometidas a modulacin alostrica:
- Piruvato carboxilasa:
Activada por: acetil-CoA (indica disponibilidad de cidos grasos como combustible).
Inhibida por: ADP.
- Fructosa 1,6-bisfosfatasa:
Activada por: citrato.
Inhibida por: AMP y fructosa 2,6-bisfosfato.
- Glucosa 6-fosfatasa:
Activada por: glucosa 6-P.
3. SUSTRATOS GLUCONEOGNICOS
a) Lactato
Precursor gluconeognico cuantitativamente ms importante.
167
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Ciclo de Cori
b) Glicerol
El catabolismo lipdico produce cidos grasos y glicerol. Los cidos grasos se degradan a acetil-CoA y el
acetil-CoA en los animales no se puede utilizar para sintetizar hidratos de carbono. El glicerol es transportado
al hgado donde se transforma primero en glicerol 3-P por la glicerol quinasa y posteriormente, en DHAP
por la glicerol fosfato deshidrogenasa, incorporndose a la gluconeognesis.
c) Aminocidos
Durante
GRUPO DE ENTRADA
AMINOCIDOS
PIRUVATO
Alanina
Cistena
Glicina
Serina
Treonina
Triptfano*
-CETOGLUTARATO
Arginina
Glutamato
Glutamina
Histidina
Prolina
SUCCINIL-CoA
Isoleucina*
Metionina
Treonina
Valina
FUMARATO
Fenilalanina*
Tirosina*
OXALACETATO
Asparagina
Aspartato
168
@AcademiaGoBIR
Ciclo de la glucosa-alanina: el msculo en ejercicio produce piruvato y ste, por transaminacin, se convierte en alanina. La alanina es transportada al hgado donde se convierte por
transaminacin en piruvato. El ciclo de la glucosa alanina tiene varios objetivos:
- Reciclado de -cetocidos entre el msculo y el hgado.
- Mecanismo de transporte de NH4+ al hgado para ser eliminado en el ciclo de la urea.
Ciclo de la glucosa-alanina
d) Propionato
El propionil-CoA se genera a partir de la degradacin de algunos aminocidos o de la oxidacin de cidos
169
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Se almacena en forma de grnulos en el citosol de los hepatocitos (representa hasta el 10% de su peso)
y en las clulas del msculo esqueltico (1-2% de su peso).
El hgado almacena glucgeno con la finalidad de mantener los niveles de glucosa sangunea.
El msculo esqueltico utiliza las reservas de glucgeno para cubrir sus necesidades energticas.
Ej. En ejercicio intenso.
Es una reserva de energa a corto plazo, tanto aerobia como anaerobia, y la proporciona de forma
rpida.
el hgado, la glucogenolisis tiene lugar en periodos de ayuno con la finalidad de liberar glucosa a la
sangre y mantener la glucemia, as como de permitir que los tejidos que dependen de glucosa puedan
utilizarla.
En
el msculo, el catabolismo del glucgeno ocurre cuando se realiza un ejercicio intenso que requiera
un mayor gasto energtico.
- Fosforolisis: ruptura secuencial de unidades de glucosa de los extremos no reductores del polisacrido.
Es llevada a cabo por la glucgeno fosforilasa que, utilizando fsforo inorgnico, rompe los enlaces
(14) y elimina el residuo de glucosa terminal en forma de glucosa 1-P. La glucgeno fosforilasa se
detiene cuando quedan cuatro residuos de glucosa para llegar al punto de ramificacin (aqu la molcula
ya no se denomina glucgeno sino dextrina lmite).
Recuerda
170
@AcademiaGoBIR
La glucosa 1-P se convierte en glucosa 6-P por accin de la fosfoglucomutasa en una reaccin
reversible.
Ojo
1. REGULACIN DE LA GLUCOGENOLISIS
a) Regulacin de la glucgeno fosforilasa
171
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Tanto
en el msculo como en el hgado: cuando el msculo est en reposo o los niveles de glucosa
sangunea vuelven a la normalidad, se activa una fosfoprotena fosfatasa 1 (PP1) o fosforilasa a
fosfatasa, que elimina los grupos fosforilo de la glucgeno fosforilasa a, y la convierte en su forma ms
inactiva, glucgeno fosforilasa b.
Regulacin alostrica
Msculo:
- El Ca2+ (seal de contraccin muscular) se une a la fosforilasa b quinasa a travs de su subunidad (la
calmodulina) y la activa Se transforma la glucgeno fosforilasa b en glucgeno fosforilasa a y se activa
la glucogenolisis.
- El AMP se une tambin a la fosforilasa b quinasa y la activa.
- El ATP inactiva la fosforilasa b quinasa Se inhibe la glucogenolisis.
Hgado:
- La glucosa inhibe la glucgeno fosforilasa a y activa la fosfoprotena fosfatasa 1 (PP1) Ocurre cuando
los niveles de glucosa sangunea vuelven a la normalidad.
- La insulina tambin activa la PP1 e inhibe la glucogenolisis.
172
@AcademiaGoBIR
Recuerda
- Hormonas: la insulina activa la gluclisis y la glucogenognesis e inhibe la gluconeognesis y la glucogenolisis. La adrenalina, en el msculo, estimula la glucogenolisis e inhibe la glucogenognesis, y en el hgado, activa la glucogenolisis.
- Receptores para hormonas: el hgado tiene receptores para insulina, glucagn y
adrenalina (receptores y -adrenrgicos) mientras que el msculo tiene principalmente receptores para la adrenalina (-adrenrgicos) e insulina (carece de receptores para el glucagn).
biosntesis de glucgeno tiene lugar tras una comida rica en hidratos de carbono, puesto que habr
mucha cantidad de glucosa sangunea disponible.
173
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
enlaces (14).
La
formar los enlaces (16) que se encuentran en los puntos de ramificacin se requiere de una
enzima ramificante amilo (14) a (16) transglucosilasa. Esta enzima transfiere un fragmento
terminal de 6 7 residuos de glucosa desde el extremo no reductor de una rama de glucgeno de, al
menos, 11 residuos al grupo hidroxilo situado en la posicin 6 de un residuo de glucosa en un punto interior
de dicha rama.
Se requieren 2 ATPs por molcula de glucosa incorporada.
Fosfo/desfosforilacin
Se encuentra en el hgado y en el msculo esqueltico bajo 2 formas:
glucgeno sintasa puede ser fosforilada por, al menos, 11 quinasas diferentes, entre ellas la PKA
(activada por glucagn y adrenalina) y la glucgeno sintasa quinasa 3 (GSK3), que es la quinasa
reguladora ms importante en la inactivacin de la glucgeno sintasa.
La glucgeno sintasa tambin est sometida a regulacin alostrica tanto en el hgado como en el
msculo: la glucosa 6-P es un activador alostrico de la glucgeno sintasa.
Recuerda
174
@AcademiaGoBIR
RESUMEN DE LA GLUCOGENOLISIS/GLUCOGENOGNESIS
1. GLUCAGN
Hormona
sintetizada por las clulas de los islotes de Langerhans del pncreas. Es hiperglucemiante.
Activa la gluconeognesis a partir de lactato y aminocidos y activa la glucogenolisis. Presenta receptores
en el hgado y no presenta receptores en el msculo esqueltico.
2. ADRENALINA
Hormona
3. INSULINA
Hormona proteica liberada por las clulas de los islotes de Langerhans pancreticos. Es hipoglucemiante.
Activa la gluclisis y la glucogenognesis e inhibe la gluconeognesis y la glucogenolisis:
175
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
fallo del pncreas para producir insulina o a la resistencia de los tejidos a la accin de la misma.
Una
piruvato quinasa es una de las enzimas reguladoras de la gluclisis y cataliza el paso de PEP a
piruvato con generacin de ATP. Es codificada por un gen localizado en el brazo largo del cromosoma 1.
Su dficit se asocia con anemia hemoltica grave debido a que en los eritrocitos, carentes de
mitocondrias, la ruta glucoltica es la principal va para la obtencin de energa.
gluconeognesis catalizando la reaccin inversa. Es codificada por un gen presente en el cromosoma 19.
Su dficit causa anemia hemoltica entre moderada y grave. El bazo aumenta de tamao y los pacientes
176
@AcademiaGoBIR
Presenta una elevada prevalencia, especialmente en frica y Asia, zonas donde la malaria es
endmica. El crecimiento de Plasmodium falciparum est inhibido en personas con dficit de glucosa 6-P
deshidrogenasa, ya que el parsito no soporta el estrs oxidativo que genera el dficit enzimtico. Por este
motivo la seleccin natural mantiene el dficit de glucosa 6-P.
El dficit de glucosa 6-P deshidrogenasa limita la regeneracin de NADPH, esencial para proteger a las
clulas del dao oxidativo. Los pacientes con deficiencia sufren un fenmeno de peroxidacin lipdica que
lleva a la rotura de la membrana eritrocitaria Anemia hemoltica.
La
mayor parte de los pacientes son asintomticos y solo manifiestan los sntomas ante determinados
factores desencadenantes, como tratamientos con algunos frmacos (Ej. cido nalidxico, nitrofurantona,
primaquina o sulfametoxazol) o la ingesta de habas, favismo (contienen divicina que es oxidante).
2. SNDROME DE WERNICKE-KORSAKOFF
Est causado por un dficit grave de tiamina o vitamina B
Se
Las mutaciones en el gen que codifica para la transcetolasa originan una enzima con una afinidad muy
disminuida por el pirofosfato de tiamina (TPP), lo que agrava el dficit de tiamina Disminucin de la
velocidad de la ruta de las pentosas fosfato.
Sntomas: confusin mental, prdida de memoria y parlisis parcial, entre otros.
galactosa es una hexosa que se encuentra habitualmente formando parte del disacrido lactosa,
principal azcar de la leche. El metabolismo de la galactosa transcurre a travs de su conversin en
glucosa.
La
a) Deficiencia de galactoquinasa
Cataliza
177
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
a este dficit enzimtico, la galactosa sigue una de las rutas alternativas transformndose en
galactitol en tejidos como el cristalino. Esto conlleva el acmulo de lquido en el interior del cristalino debido
al alto potencial osmtico del galactitol CATARATAS.
Adems, la generacin de galactitol implica la oxidacin del NADPH necesario para mantener el glutatin,
y otras protenas del cristalino, en estado reducido; este fenmeno potencia an ms la aparicin de
cataratas.
Metabolismo de la galactosa
alteracin heptica (ictericia), renal y neurolgica (la galactosa es necesaria para la sntesis
de ganglisidos y cerebrsidos).
- Benigna: solo se ve afectada la epimerasa de los eritrocitos y leucocitos, siendo normal la actividad en el
hgado.
- Severa: ms grave y similar en sintomatologa al dficit de galactosa 1-P uridil transferasa.
Metabolismo de la fructosa
Aunque la fructosa se absorbe ms lentamente que la glucosa, se capta y se metaboliza ms rpidamente
178
@AcademiaGoBIR
b) Intolerancia a la fructosa
Alteracin autosmica recesiva.
Se produce como consecuencia del dficit de aldolasa B. Los pacientes son asintomticos si no ingieren
fructosa o sacarosa.
El acmulo de fructosa 1-P conduce a hipoglucemia ya que la fructosa 1-P inhibe la gluconeognesis y
la glucogenolisis.
Adems, se produce una deficiencia de ATP y secuestro de fosfato inorgnico. Se produce hiperamonemia
El piruvato no puede convertirse en OAA con lo que disminuye la velocidad del ciclo de Krebs y el piruvato
rganos ms afectados por las alteraciones enzimticas del metabolismo del glucgeno son el
hgado y el msculo esqueltico.
(debido a la incapacidad del hgado para liberar glucosa). Tambin es frecuente la aparicin de acidosis
lctica, hipertrigliceridemia e hipercolesterolemia. Los sntomas suelen aparecer de forma temprana (entre
el mes y el ao de vida).
Si la deficiencia afecta a una enzima muscular, los sntomas estn relacionados con la incapacidad de
suministrar energa a la contraccin muscular. Los signos clnicos son ms leves y solo se hacen evidentes
tras un ejercicio muscular intenso.
Todas presentan herencia autosmica recesiva, salvo un subtipo de glucogenosis tipo IX y el dficit
179
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
TIPO/ENFERMEDAD
Ia: Enfermedad
de Von Gierke
II: Enfermedad
de Pompe
III: Enfermedad
de Cori/Forbes
IV: E
nfermedad
de Andersen
ENZIMA AFECTADA
RGANO
SNTOMAS
Hipoglucemia grave
Acidosis lctica
Hiperuricemia
Hipertrigliceridemia
Hepatomegalia
Fallo renal
Glucosa 6-fosfatasa
Hgado
-Glucosidasa lisosomal
A
cmulo de glucgeno
en vesculas en los
lisosomas
Todos
Forma infantil:
Especialmente: - Muerte a los 2 aos
Msculo
- Fallo cardiaco
esqueltico
Forma juvenil:
Msculo cardiaco - Dificultad para caminar
- Parada
cardiorrespiratoria
Forma adulta:
- Miopata
Enzima desramificante
Hgado
Msculo
esqueltico
Msculo cardiaco
Hgado
Enzima ramificante
Musculo
esqueltico
A
cmulo de glucgeno
anormal con cadenas
cortas
Hepatomegala
Miopata
Muerte antes de los
3 aos
Hepatomegalia
Cirrosis
Hipertensin portal
Esplenomegalia
V: Enfermedad
de Mc Ardle
Glucgeno fosforilasa
muscular
Msculo
esqueltico
Intolerancia al ejercicio
Debilidad muscular
Aumento de CK
Mioglobinuria
Fallo renal
VI: E
nfermedad
de Hers
Glucgeno fosforilasa
heptica
Hgado
Hepatomegalia
VII: E
nfermedad
de Tarui
PFK-1 muscular
y en eritrocitos
Msculo,
eritrocitos
Similar a tipo V
T
ambin anemia
hemoltica
VIII y IX
Fosforilasa quinasa
Hgado, msculo
y leucocitos
Hepatomegalia
XI: Enfermedad
de Fanconi-Bickel
Transportador
de glucosa GLUT2
Hgado
Hepatomegalia
Raquitismo
Disfuncin renal
*Recientemente se ha descrito la glucogenosis tipo 0 Se debe al dficit de glucgeno sintasa y afecta al hgado
180
@AcademiaGoBIR
y ceguera.
Se caracteriza por episodios tipo ictus que se pueden manifestar como vmitos, cefaleas o alteraciones
visuales.
Es frecuente la prdida neurosensorial y la aparicin de diabetes mellitus tipo II (sto se debe a que el
aumento en la concentracin de ATP celular es un factor estimulador de la liberacin de insulina por las
clulas del pncreas).
181
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Clasificacin de mucopolisacaridosis
ENFERMEDAD
I: Sndrome
de Hurler
(la ms grave)
ENZIMA AFECTADA
METABOLITO URINARIO
Y SNTOMAS
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
- Sntomas:
Opacidad corneal
Cifosis lumbar
Retraso en el crecimiento
Retraso mental
Muerte en la adolescencia
-L-iduronidasa
II: S
ndrome
de Hunter
Iduronato sulfatasa
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
- Sntomas:
Prdida de audicin
Retraso mental y del crecimiento
Facies tosca
Muerte en la adolescencia
III: Sndrome
de San Filippo
(la + frecuente)
- Metabolitos:
Heparn sulfato
- Sntomas:
Deterioro mental progresivo
Muerte en la edad adulta
IV: S
ndrome
de Morquio
Tipo A: Galactosamina-6-sulfatasa
Tipo B: -Galactosidasa
- Metabolitos:
Queratn sulfato
- Sntomas:
Alteraciones esquelticas
Arilsulfatasa B
- Metabolitos:
Dermatn sulfato
- Sntomas:
Corta estatura
Facies tosca
Opacidad corneal
Alteracin cardiaca
-Glucuronidasa
- Metabolitos:
Dermatn sulfato y heparn sulfato
- Sntomas:
Hepatoesplenomegalia
Alteraciones esquelticas
Anomalas cardiacas
Muerte en infancia y adolescencia
VI: S
ndrome de
Marouteaux-Lamy
182
@AcademiaGoBIR
Se heredan de forma autosmica recesiva, excepto la enfermedad de Hunter que presenta herencia
ligada al cromosoma X.
183
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
7. METABOLISMO LIPDICO
METABOLISMO DE LAS LIPOPROTENAS
Los lpidos se caracterizan por ser molculas insolubles en agua y solubles en disolventes no polares.
El
catabolismo lipdico supone una fuente de energa muy importante para muchos tejidos ya que la
oxidacin de los cidos grasos genera casi el doble de energa que la oxidacin de los hidratos de carbono.
Adems,
algunos lpidos como los fosfolpidos cumplen una funcin estructural ya que forman parte de
la membrana plasmtica.
triglicridos.
Debido
a su carcter hidrofbico, los lpidos han de ser transportados en sangre formando parte de
LIPOPROTENAS. Las lipoprotenas son agregados esfricos que contienen lpidos hidrofbicos en el
ncleo (triglicridos y steres de colesterol) y fosfolpidos, colesterol libre y apolipoprotenas en el exterior.
a partculas lipdicas y tienen como funcin el transporte de triglicridos, colesterol, steres de colesterol y
fosfolpidos entre los distintos rganos.
1. TIPOS DE LIPOPROTENAS
Existen
diferentes tipos de lipoprotenas, cada una de las cuales desempea funciones concretas en el
transporte de lpidos.
Dado
que los lpidos tiene una densidad mucho menor que las protenas, el contenido lipdico de una
clase determinada de lipoprotena est inversamente relacionado con su densidad.
184
@AcademiaGoBIR
QM
VLDL
IDL
LDL
HDL
Caractersticas fsico-qumicas
Electroforesis
Densidad (g/mL)
Dimetro
Pre-
0,95-1,006
30-90
Origen
<0,95
90-100
Pre- y
1,006-1,019
25-30
1,019-1,063
20-25
1,063-1,210
7-20
1-2,5
85-90
1-3
5-10
50-60
5-10
15-20
30
7-9
20-25
6-10
7-10
40-55
3-4
3-4
3-5
10-15
22-24
35-42
12-20
6-9
<1
15-20
22-26
15-22
25-35
<1
<1
<1
<1
Composicin en apoprotenas
A, B-48, C, E
B-100, C, D, E B-100, C, D, E
B-100
A, C, D, E
a) Mediante ultracentrifugacin, las lipoprotenas que aparecen en el fondo son las HDL ya que son las de
mayor densidad y las que aparecen en forma de una banda en la superficie son los quilomicrones porque
presentan la densidad ms baja.
b) Mediante electroforesis, aparecen en el punto de aplicacin los quilomicrones, que son las lipoprotenas
de mayor tamao y por tanto, las que migran ms lentamente.
triglicridos ingeridos con la dieta son emulsionados en el intestino delgado por accin de las sales
biliares y forman micelas mixtas de cidos biliares y triglicridos. Esto favorece la accin de enzimas lipasas
hidrosolubles como la lipasa pancretica, que convierte los triglicridos en monoglicridos, diglicridos,
cidos grasos libres y glicerol.
Estos
Estos triglicridos forman complejos con el colesterol de la dieta, los fosfolpidos y la apolipoprotena B-48
185
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
de la circulacin para entrar principalmente en el msculo y en el tejido adiposo. Esta lipoprotena lipasa
(LPL) hidroliza los triglicridos a cidos grasos y monoglicridos en la superficie interna del capilar de los
tejidos diana.
Al ser hidrolizados por la LPL se pierde la apo C-II, con lo que disminuye la afinidad de los QM por la LPL,
y sta se inactiva.
Los quilomicrones que han perdido los triglicridos pero que tienen todava colesterol y apolipoprotenas
La partcula resultante de la interaccin de la lipoprotena lipasa con las VLDL se llama IDL. Posteriormente
las IDL ceden a las HDL componentes de su superficie, como fosfolpidos y colesterol no esterificado.
Adems, incorporan el colesterol esterificado de las HDL.
- Ser eliminadas directamente del plasma al ser reconocida la apo E por receptores hepticos.
- Evolucionar a LDL por prdida de triglicridos y de apo E que se transfieren a las HDL.
clulas de los tejidos perifricos que poseen receptores para la apo B-100 y las del hgado que
poseen receptores de apo E y apo B-100, endocitan las LDL y las degradan en los macrfagos.
Las
186
@AcademiaGoBIR
hgado.
Las LDL constituyen el sistema de transporte de colesterol desde el hgado a los tejidos
perifricos.
Recuerda
Las VLDL son las lipoprotenas encargadas de transportar los triglicridos de origen
endgeno y se sintetizan en el hgado. Las LDL se sintetizan en el plasma.
- Inhibe la HMG-CoA sintetasa (enzima limitante en la sntesis de colesterol) y suprime la transcripcin del
gen de esta enzima.
- Inhibe la sntesis de receptores de LDL.
- Activa la acil-CoA-colesterol-aciltransferasa (ACAT) Enzima intracelular que cataliza la sntesis de
steres de colesterol a partir de colesterol y un acil-CoA de cadena larga.
Finalmente el colesterol es eliminado por va biliar, incorporado a las membranas celulares o se emplea
en la sntesis de hormonas. Por esta va se degradan las 2/3 partes de las LDL circulantes.
Va independiente del receptor de las LDL
Cuando los niveles plasmticos de LDL son elevados, las LDL se filtran a travs del endotelio de la pared
Despus
187
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
unos receptores de eliminacin o receptores scavenger (este receptor no est sometido a regulacin
por los niveles intracelulares de colesterol) que internalizan las LDL oxidadas Dan lugar a clulas
espumosas.
Estas clulas espumosas tienen un efecto quimiotctico, hacen que migren ms leucocitos a esta zona
Por lo tanto, elevadas concentraciones de LDL se asocian con un mayor riesgo aterognico.
Recuerda
Las LDL son las lipoprotenas que presentan mayor contenido de colesterol.
Las HDL nacientes son ricas en protenas. Estn formadas por una doble capa de lpidos y rodeadas por
Las HDL nacientes alcanzan los depsitos tisulares de colesterol y lo extraen; este colesterol es
esterificado por la lecitin-colesterol-acil-transferasa (LCAT) presente en la superficie de las HDL. La
LCAT tambin acta sobre los quilomicrones y VLDL residuales.
) Relacin inversa
con la aterosclerosis coronaria. Estas HDL maduras son captadas por el hgado y metabolizadas
liberando el colesterol.
188
@AcademiaGoBIR
ORIGEN
FUNCIN
QM
VLDL
IDL
LDL
Intestinal
Heptico
Plasmtico
Plasmtico
Transportan
los TG exgenos
desde el intestino
a los tejidos
perifricos
Transportan los
TG endgenos
a los tejidos
perifricos
Proceden de las
VLDL. Tras la
hidrlisis de los
TG endgenos
en los capilares,
son captadas
por el hgado o
evolucionan a LDL
Transportan el
colesterol a los
tejidos perifricos
189
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
HDL
Heptico
e intestinal
Eliminan el exceso
de colesterol
de los tejidos y
lo devuelven al
hgado para su
metabolismo y
excrecin
Apo B-48
LIPOPROTENA
ASOCIADA
FUNCIN
Quilomicrones
Transporte/
eliminacin de
colesterol
Apo B-100
Apo E
Quilomicrones
VLDL
IDL
HDL
VLDL
IDL
LDL
Se une al
receptor de LDL
Desencadena
la eliminacin
por el hgado
de VLDL, IDL y
quilomicrones
remanentes
Apo A-I
Apo C-II
HDL
Quilomicrones
VLDL
HDL
Activador
de la LCAT
Activador de
la lipoprotena
lipasa
Intestinal
Heptico
Heptico
Intestinal
Ligando para el
receptor
heptico
ORIGEN
Intestinal
Hgado y otros
tejidos como
intestino
Heptico
5. OTRAS LIPOPROTENAS
Lipoprotena
X: es una lipoprotena anormal de composicin variable. Presenta una parte proteica con
albmina y varias apolipoprotenas (A, C y E), y una parte lipdica que puede contener cidos biliares. Su
aparicin es un signo especfico de colestasis.
Lipoprotena (a): presenta una homologa estructural con el plasmingeno, por lo que compite con l por
su unin al endotelio e inhibe la fibrinolisis. Su elevacin (>30 mg/dL) se asocia con riesgo gentico de
cardiopata isqumica.
6. LIPLISIS
Los lpidos neutros se almacenan en los adipocitos (y en clulas sintetizadoras de hormonas esteroideas
en la corteza suprarrenal, ovario y testculos) en forma de gotitas lipdicas.
Cuando
existe una necesidad de aporte energtico, estas grasas se movilizan y se transportan a otros
tejidos, como msculo esqueltico o corazn.
El estmulo para la liplisis son el glucagn y la adrenalina: activacin de la adenilato ciclasa + AMPc
+ PKA Activacin por fosforilacin de la triglicrido lipasa o lipasa sensible a la accin hormonal
Hidrlisis de los triglicridos a cidos grasos y glicerol.
Los cidos grasos liberados salen de los adipocitos y son transportados en el torrente circulatorio unidos
a la albmina (hasta 10 cidos grasos por molcula de protena) Transporte al interior de los tejidos.
El glicerol liberado es fosforilado por la glicerol quinasa y el glicerol 3-P resultante se oxida a DHAP, que
190
@AcademiaGoBIR
CATABOLISMO DE LPIDOS
La oxidacin de los cidos grasos hasta acetil-CoA es un mecanismo de produccin de energa que cubre
el 80% de las necesidades energticas en el hgado y el corazn en circunstancias fisiolgicas.
El acetil-CoA generado en este proceso catablico entra en el ciclo de Krebs y se oxida por completo a
CO2 suministrando una carga energtica mayor.
Se lleva a cabo en la matriz mitocondrial, por lo que se requiere que los cidos grasos localizados en el
(14 C) y a los acil-CoA, es necesario que el cido graso se active transformndose en el derivado acil
graso-CoA para poder ser transportado al interior de la matriz por un sistema de transporte especfico.
Los
cidos grasos que presentan 12 C o menos entran en la mitocondria sin ayuda de transportadores
especficos.
- Formacin de un enlace tioster entre el grupo carboxilo del cido graso y el grupo tiol de la coenzima A
para generar un acil graso-CoA.
- Esta reaccin lleva acoplada la hidrlisis del ATP.
- La enzima est localizada en la membrana mitocondrial externa.
191
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Los cidos grasos se unen transitoriamente al grupo hidroxilo de la carnitina para formar acil-carnitina
mediante la accin de la enzima carnitina acil-transferasa I de la membrana externa.
- Este derivado acil-carnitina puede atravesar la membrana mitocondrial externa y penetrar en la matriz
mediante difusin facilitada por el transportador de acil-carnitina/carnitina de la membrana interna.
- Posteriormente, la carnitina acil-transferasa II localizada en la cara interna de la membrana mitocondrial
interna regenera el acil graso-CoA y libera la carnitina libre en el interior de la matriz.
proceso consta de cuatro pasos que se repiten consecutivamente hasta que toda la molcula de
acil-CoA ha sido degradada a acetil-CoA, y ste entra en el ciclo de Krebs. Fases:
192
@AcademiaGoBIR
8 molculas de acetil-CoA.
N de vueltas = (n/2)-1
N acetil-CoA = n/2
Palmitoil-CoA + 7 CoA + 7 FAD + 7 NAD+ + 7 H2O 8 acetil-CoA + 7 FADH2 + 7 NADH + 7 H+
(7 FADH2 x 1,5) + (7 NADH x 2,5) = 28 molculas de ATP a partir de palmitoil-CoA
Los 8 acetil-CoA generados entran en el ciclo de Krebs y se obtienen equivalentes de reduccin que van
193
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
ENZIMA
SE GENERAN
ATPs
Acil-CoA deshidrogenasa
7 FADH2
10,5
-Hidroxiacil-CoA deshidrogenasa
7 NADH
17,5
Isocitrato deshidrogenasa
8 NADH
20
-Cetoglutarato deshidrogenasa
8 NADH
20
Succinil-CoA sintetasa
8 GTP
Succinato deshidrogenasa
8 FADH2
12
Malato deshidrogenasa
8 NADH
20
TOTAL
108
Ojo
doble enlaces de los cidos grasos insaturados se encuentran en configuracin cis y la enoil-CoA
hidratasa no puede actuar sobre ellos. Por lo tanto, es necesario un enzima adicional ms, una isomerasa,
que transforme el cis-3-enoil-CoA en trans-3-enoil-CoA. Si el cido graso es poliinsaturado, es necesario
la accin de una segunda enzima, una reductasa (NADPH dependiente).
Los
En
la oxidacin de los cidos grasos insaturados se rinde 1,5 ATPs menos por cada doble enlace. Si el
cido graso es monoinsaturado, como el acido palmitoleico, rendir 1,5 ATPs menos porque el primer paso
de oxidacin por la acil-CoA deshidrogenasa no se da.
194
@AcademiaGoBIR
oxidan a travs de la misma ruta que los cidos grasos saturados de nmero par de tomos de
carbono, pero el sustrato del ltimo paso es un acil graso-CoA de 5 C, que al oxidarse da acetil-CoA (2 C)
y propionil-CoA (3 C).
El acetil-CoA entra en el ciclo de Krebs y el propionil-CoA entra en otra ruta enzimtica donde se
transforma en succinil-CoA antes de entrar en el ciclo de Krebs.
195
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
REACCIN
PRODUCTO
ENZIMA
D-Metilmalonil-CoA
Propionil-CoA-carboxilasa
L-Metilmalonil-CoA
Metilmalonil-CoA-epimerasa
Succinil-CoA
Metilmalonil-CoA-mutasa
Ojo
e) -Oxidacin peroxisomal
Tiene lugar en los peroxisomas (orgnulos similares a los glioxisomas de las clulas vegetales).
La
enzima acil-CoA deshidrogenasa no transfiere los electrones a la cadena respiratoria sino que los
transfiere directamente al O2, que se reduce a H2O2.
Mediante esta ruta se pueden oxidar los primeros carbonos de los cidos grasos de cadena muy larga o
Esta ruta no lleva acoplada la generacin de energa en forma de ATP pero produce calor.
196
@AcademiaGoBIR
un diterpeno componente de la clorofila), porque no se puede oxidar en su carbono debido al grupo metilo
presente en su C-3.
La oxidacin en el carbono origina el cido pristnico que se puede catabolizar mediante la -oxidacin.
La capacidad de oxidar este cido es muy importante ya que hay grandes cantidades de este cido en la
lugar en el retculo endoplsmico del hgado y del rin. Utiliza como sustrato cidos grasos
de 10 12 C.
Tiene
La
primera reaccin es la hidroxilacin del carbono por accin de una oxidasa de funcin mixta. A
continuacin actan la alcohol deshidrogenasa y la aldehdo deshidrogenasa.
Una vez los grupos acilo han entrado en la mitocondria siguen necesariamente el proceso de oxidacin
hasta acetil-CoA.
La sntesis de cuerpos cetnicos ocurre cuando hay un exceso de unidades acetilo porque se han
oxidado grandes cantidades de grasa (la velocidad de la -oxidacin supera a la velocidad del ciclo de
Krebs) y est limitada la disponibilidad de glucosa (ayuno o diabetes).
Estos compuestos se distribuyen a diferentes tejidos como corazn y msculo esqueltico, favoreciendo
que la glucosa sea utilizada por los tejidos que dependen ms de ella, como el cerebro (no consume cidos
grasos) o los glbulos rojos.
La sntesis de cuerpos cetnicos tiene lugar en la matriz mitocondrial de los hepatocitos. El hgado
sintetiza cuerpos cetnicos pero no los utiliza, los exporta.
Fases:
197
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Ojo
198
@AcademiaGoBIR
ANABOLISMO DE LPIDOS
1. BIOSNTESIS DE CIDOS GRASOS
Los lpidos constituyen la principal forma de energa almacenada en el organismo. La glucosa ingerida
en exceso se convierte en cidos grasos y stos, a su vez, en triglicridos que se almacenan en el tejido
adiposo.
La sntesis de cidos grasos tiene lugar en el citosol.
Participa una molcula de acetil-CoA iniciadora y un intermediario de 3 C, el malonil-CoA.
Para que tenga lugar la sntesis de cidos grasos es necesario:
1) Poder reductor en el citosol celular (NADPH). Este poder reductor en los hepatocitos y los adipocitos
procede de la ruta de las pentosas fosfato y de la enzima mlica.
Recuerda
Produccin de NADPH
199
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- El citrato se sintetiza a partir de acetil-CoA y OAA por accin de la citrato sintasa. Una vez transportado
al citosol se regenera de nuevo el acetil-CoA por accin de la citrato liasa.
El resto de cidos grasos se sintetizan a partir del cido palmtico por la accin de desaturasas (introducen
El proceso de sntesis tiene lugar mediante ciclos con una secuencia repetida de 4 etapas. Primero utiliza
una molcula de acetil-CoA iniciadora o cebadora y el resto de los tomos de carbono proceden del acetilCoA va malonil-CoA.
Se necesitan 7 ciclos para sintetizar el cido palmtico. En el primero se sintetiza un cido graso de 4 C
200
@AcademiaGoBIR
Los C-15 y C-16 del palmitato proceden del acetil-CoA y el resto de carbonos de la
cadena proceden del malonil-CoA.
Dentro de los dominios de la cido graso sintasa cabe destacar la presencia de la protena transportadora
de grupos acilo (ACP), que presenta un grupo -SH y un grupo prosttico 4-fosfopantetena. Este
dominio acta como brazo flexible que une la cadena de cido graso creciente al complejo cido graso
sintasa y tambin transfiere los intermediarios de un sitio activo al siguiente. Adems es el sitio de entrada
de los grupos malonilo.
201
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
se ha sintetizado el cido palmtico se libera del complejo multienzimtico por accin de una
tioesterasa.
El ser humano carece de desaturasas que introduzcan dobles enlaces ms all del
C-9.
202
@AcademiaGoBIR
FASES
Sntesis
de malonil-CoA
A PARTIR DE
SE GENERAN
7 Malonil-CoA + 7 ADP + 7 Pi + 7 H+
Actuacin de la cido
Acetil-CoA + 7 Malonil-CoA + 14 NADPH + 14 H+ Palmitato + 7 CO2 + 8 CoA + 14 NADP+ + 6 H2O
graso sintasa
(7 ciclos)
Balance global
Adems,
de ATP.
ingestin de cidos grasos poliinsaturados suprime la expresin de genes que codifican enzimas
lipognicas en el hgado.
203
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
originan mediante la esterificacin secuencial de una molcula de glicerol 3-P con 3 molculas de
acil-CoA:
- El glicerol 3-P procede de la DHAP en el tejido adiposo y de la fosforilacin del glicerol por accin de la
glicerol 3-quinasa en el hgado y en el rin.
- Los acil-CoA se forman a partir de las acil-CoA sintetasas.
Glicerol
La ruta hacia los triglicridos implica la eliminacin hidroltica del fosfato por accin de la cido fosfatdico
3. BIOSNTESIS DE FOSFOGLICRIDOS
Son los fosfolpidos ms abundantes. Su sntesis tiene lugar en el retculo endoplsmico liso.
Los primeros pasos son idnticos a la sntesis de triglicridos: 2 grupos acilo graso se esterifican con el
C-1 y C-2 del glicerol 3-P para dar cido fosfatdico.
A continuacin, el cido fosfatdico se activa utilizando CDP (nucletido difosfato) CDP-diacilglicerol.
Otra estrategia es la unin del CDP al hidroxilo del grupo de cabeza sin formar previamente CDPdiacilglicerol.
204
@AcademiaGoBIR
fosfatidilinositol, tanto en bacterias como en clulas eucariotas, se sintetiza por condensacin del
CDP-diacilglicerol con el inositol.
El
fosfatidilglicerol, tanto en bacterias como en eucariotas, se sintetiza por la condensacin del CDPdiacilglicerol con glicerol 3-P para dar fosfatidilglicerol 3-P con posterior rotura del enlace monoster fosfato.
La cardiolipina:
205
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
c) Sntesis de plasmalgenos
Tiene lugar en los peroxisomas.
Se forman a partir de la 1-acildihidroxiacetona 3-P con posterior entrada de un cido graso esterificado y
un alcohol de cadena larga con formacin de un enlace ter. El doble enlace es introducido por una oxidasa
de funcin mixta.
4. BIOSNTESIS DE ESFINGOLPIDOS
Las primeras reacciones ocurren en el retculo endoplsmico y la unin de los grupos de cabeza polar
en el aparato de Golgi.
Biosntesis de esfingolpidos
206
@AcademiaGoBIR
5. BIOSNTESIS DE COLESTEROL
El colesterol es un lpido constituido por 27 C, procedentes del acetato. Las 2 fuentes principales son: la
La sntesis de colesterol tiene lugar en el citosol y en el retculo endoplsmico liso, principalmente del
207
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
sntesis de colesterol est regulada por su concentracin intracelular (que a su vez depende de la
velocidad con la que el colesterol entra en las clulas procedente del torrente circulatorio) y por el glucagn
y la insulina.
El paso limitante de la sntesis de colesterol es la reaccin catalizada por la HMG-CoA-reductasa:
- Niveles altos de colesterol intracelular Inhiben la transcripcin del RNAm que codifica para la HMGCoA reductasa.
- Control hormonal Modificacin covalente:
La HMG-CoA fosforilada Inactiva. Ej. Glucagn.
La HMG-CoA desfosforilada Activa. Ej. Insulina.
Recuerda Concentraciones intracelulares elevadas de colesterol activan la ACAT que cataliza
la esterificacin del colesterol para su almacenamiento e inhibe la sntesis de
receptores de LDL en el hepatocito.
- Las estatinas son similares al mevalonato y son inhibidores competitivos de la HMG-CoA reductasa.
208
@AcademiaGoBIR
La
b) cidos biliares
Son derivados esteroideos con propiedades detergentes que emulsionan los lpidos en el intestino
facilitando la absorcin de las grasas.
Se sintetizan en el hgado, se almacenan en la vescula biliar formando la bilis (contienen sales biliares,
Los cidos biliares primarios ms importantes son el clico y el quenodesoxiclico y se conjugan con
La
sntesis de cidos biliares implica una serie de hidroxilaciones catalizadas por oxidasas de funcin
mixta P450 microsomales. La etapa limitante del proceso es la primera reaccin, que implica la conversin
del colesterol en 7--hidrocolesterol, catalizada por la enzima 7--hidroxilasa.
Las sales biliares se segregan al intestino delgado superior donde ejercen su accin y posteriormente se
reabsorben en el leon mediante cotransporte con Na+. Vuelven de nuevo al hgado (98-99%) a travs de
la vena porta para reutilizarse (circulacin enteroheptica).
Las
molculas de sales biliares se reciclan unas 18 veces antes de ser finalmente eliminadas con las
heces.
209
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Recuerda
210
@AcademiaGoBIR
Hipertrigliceridemia
Valores bajos
de LDL y HDL
Hepatoesplenomegalia
Xantomas
Quilomicrones
Defecto
Dficit de LPL
Tipo IIa
Hipercolesterolemia familiar
Hipercolesterolemia
Xantomas
Riesgo de aterosclerosis y
enfermedad coronaria
LDL
Transporte reducido o
defectuoso del receptor
desde el retculo
endoplsmico al Golgi
Unin anmala de las LDL
por el receptor
Internalizacin anmala de
las LDL por el receptor
Herencia autosmica
dominante
1/500 portadores
Tipo IIb
Hiperlipemia familiar combinada
Hipercolesterolemia
Xantomas
Riesgo de aterosclerosis y
enfermedad coronaria
LDL y VLDL
Herencia autosmica
dominante
Tipo III
Disbetalipoproteinemia familiar
Enfermedad de la beta ancha
Deficiencia en apo E
Hipercolesterolemia
Xantomas
Muy aterognica
QM,VLDL y IDL
(-VLDL)
Alteracin en la sntesis de
apo E (generalmente est
presente en 3 isoformas: E2,
E3 y E4)
Solo tienen apo E-2, y sta no
interacciona con el receptor E
Herencia autosmica
recesiva
Hipertrigliceridemia
Aumento de colesterol a
expensas de las VLDL.
Riesgo moderado de
coroniopata. Se relaciona con
obesidad y diabetes tipo II
VLDL
Tipo V
Hiperlipemia mixta familiar
Hipertrigliceridemia
LDL y HDL bajas
Frecuente en alcohlicos
QM y VLDL
Hiperalfalipoproteinemia familiar
En apariencia beneficioso
para la salud y longevidad
HDL
Herencia autosmica
dominante
Tipo IV
Hipertrigliceridemia familiar
ES LA + FRECUENTE
211
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Sobreproduccin de VLDL
Herencia autosmica
dominante
de transferencia de triglicridos.
en un gen que codifica para la protena transportadora ABC1 que facilita la transferencia de
colesterol hacia las HDL Acmulo de steres de colesterol en diversos rganos y deficiencia de HDL.
Disminucin severa o dficit de apo A-I.
Hepatomegalia.
Recuerda
Hipoglucemia hipocetsica
Fallo heptico con hiperamonemia
212
@AcademiaGoBIR
el cido fitnico.
Se acumulan grandes cantidades de cido fitnico en los tejidos causando: retinitis pigmentaria,
neuropata perifrica, ataxia cerebelosa y sordera de tipo nervioso.
dipalmitoil-lecitina es sintetizada por los neumocitos tipo II y acta en los alveolos pulmonares como
agente tensioactivo evitando el colapso de los alveolos al final de la espiracin.
La deficiencia de dipalmitoil-lecitina da lugar a distrs respiratorio y es frecuente en prematuros.
2. SNDROME DE ZELLWEGER
Enfermedad autosmica recesiva.
Se debe a mutaciones en genes que codifican protenas encargadas del ensamblaje de los peroxisomas
y protenas de membrana.
Presenta elevaciones de cidos grasos de cadena muy larga en plasma y deficiencia de plasmalgenos.
Es
una enfermedad que suele ser letal en el primer ao de vida: hipotona, debilidad, caractersticas
faciales dismrficas, hepatomegalia, alteraciones renales, convulsiones y muerte.
un conjunto de enfermedades congnitas que se caracterizan por el dficit de una de las enzimas
de degradacin lisosomal.
Todas se transmiten de forma autosmica recesiva excepto la enfermedad de Fabry, que est ligada
al cromosoma X.
Se caracterizan por manifestaciones en sistema nervioso central y sistmicas.
213
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
ENFERMEDAD
ENZIMA DEFICITARIA
METABOLITO ACUMULADO
Gangliosidosis GM1,
generalizada o de Landing
GM1--galactosidasa
Ganglisido GM1
Enfermedad de Tay-Sachs
N-Acetilhexosaminidasa A
Ganglisido GM2
Enfermedad de Sandhoff
N-Acetilhexosaminidasas A y B
Enfermedad de Fabry
-Galactosidasa
Trihexosilceramida
Enfermedad de Gaucher
-Glucosidasa o
glucosilceramidasa
Glucosilceramida
Enfermedad de Niemann-Pick
Esfingomielinasa
Esfingomielina
Enfermedad de Farber o
lipogranulomatosis
Ceramidasa
Ceramida
Enfermedad de Krabbe o
leucodistrofia de clulas
globoides
-Galactosidasa o
galactosilceramidasa
Galactosilceramida
Leucodistrofia metacromtica
o enfermedad de Scholtz
Arilsulfatasa A
3-Sulfogalactosilceramida
Recuerda
OBESIDAD
Aumento en la cantidad de grasa corporal que condiciona un aumento del peso. Se considera que existe
Tipos
Aparece cuando existe un desequilibrio entre la ingesta y el consumo de caloras y supone un riesgo para
la vida, ya que incrementa las probabilidades de padecer diabetes tipo II, infartos o embolias derivadas de
la hipertensin, la hipercolesterolemia y la resistencia a la insulina.
214
@AcademiaGoBIR
- Insulina: acta sobre sus receptores hipotalmicos para inhibir el apetito. La leptina hace que las clulas
del hgado y del msculo sean ms sensibles a la accin de la insulina.
- Adiponectina: hormona peptdica (224 aminocidos) producida por el tejido adiposo que acta sobre sus
receptores en el hipotlamo, estimulando la ingesta y reduciendo el gasto calrico.
- Grelina: hormona peptdica (28 aminocidos) sintetizada en el estmago que estimula el apetito actuando
sobre sus receptores localizados en hipfisis, hipotlamo, msculo cardiaco y tejido adiposo.
Uno de los tratamientos para la obesidad es el ORLISTAT Es un derivado hidrogenado de la
lipostatina producida por Streptomyces toxitrycine. Acta como un inhibidor potente y especfico de las
lipasas enteropancreticas responsables de la hidrlisis de los triglicridos. El mecanismo de inhibicin
consiste en la acilacin irreversible de la lipasa por reaccin entre el centro activo de la enzima y un
grupo betalactona presente en el frmaco. El orlistat reduce la absorcin de las grasas procedentes de
la dieta hasta en un 30%.
215
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
9. METABOLISMO DE AMINOCIDOS
CATABOLISMO DE AMINOCIDOS
Los aminocidos experimentan degradacin oxidativa en las siguientes circunstancias:
a) Recambio proteico Sntesis y degradacin normal de las protenas celulares. Si los aminocidos
liberados durante este proceso de recambio no son necesarios para la sntesis de nuevas protenas
experimentan un proceso degradativo. Puede tener lugar en:
- Lisosomas Orgnulos que contienen un pH=5,5 y diversas enzimas hidrolticas y proteolticas
especializadas. En los lisosomas este catabolismo sucede mediante:
- Autofagia Pequeas reas del citosol se rodean de membrana procedente del retculo endoplsmico
y capturan las protenas intracelulares. Ej. Protenas de membrana o ribosomales.
- Heterofagia Degradacin de protenas extracelulares capturadas por endocitosis. Ej. LDL.
- Citosol Se produce a travs de protenas dependientes de calcio como la calpana, o a travs de
un complejo multienzimtico denominado proteasoma, con actividad proteasa que reconoce protenas
marcadas para su degradacin. Este marcaje depende de la protena ubiquitina y requiere energa en
forma de ATP. Esta degradacin la sufren las protenas citoslicas y nucleares.
b) Dieta rica en protenas que exceda las necesidades corporales El excedente se cataboliza, los
aminocidos no se pueden almacenar.
c) Inanicin o diabetes mellitus No hay disponibilidad de glcidos, se degradan aminocidos para
obtener energa.
El proceso de degradacin de los aminocidos implica:
1. Eliminacin del grupo amino Los aminocidos se metabolizan en el hgado El grupo amino se
transforma en amoniaco, que es muy txico, especialmente para el cerebro:
- Una parte del amoniaco se recicla y se utiliza para la sntesis de aminocidos, nucletidos u otras aminas.
- El exceso se convierte en urea para su excrecin.
2. Eliminacin del esqueleto carbonado Puede procesarse hasta la oxidacin total en el ciclo de Krebs o
puede utilizarse para la sntesis de hidratos de carbono dependiendo de los 7 productos metablicos que
se originen en su degradacin. Segn el metabolito que generan, los aminocidos pueden ser:
- Si generan acetil-CoA o acetoacetil-CoA Aminocidos cetognicos.
- Si generan piruvato, -cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato u OAA Aminocidos gluconeognicos.
216
@AcademiaGoBIR
El glutamato acta como aceptor de los grupos amino de los aminocidos y como dador de grupos amino
para las rutas biosintticas o para rutas de excrecin que conducen a la eliminacin de los productos
nitrogenados de desecho.
las transaminasas tienen como grupo prosttico fosfato de piridoxal y catalizan reacciones
reversibles actuando mediante un mecanismo de reaccin bimolecular ping-pong.
Todas
Reaccin de transaminacin
b) Desaminacin oxidativa
El glutamato generado en las reacciones de transaminacin es transportado desde el citosol a la matriz
mitocondrial, donde se elimina el grupo amino en forma de in amonio mediante desaminacin oxidativa.
Est catalizada por la enzima L-glutamato deshidrogenasa. Es la nica enzima que puede utilizar tanto
mayor parte del amoniaco (en forma de amonio) se genera por desaminacin oxidativa tanto en el
hgado como en los tejidos extrahepticos, pero existen otros procesos que liberan amoniaco como:
a) Accin de aminocido oxidasas dependientes de FMN en el hgado y en el rin.
217
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
El
La glutamina posee 2 tomos de nitrgeno en vez de 1, lo que le convierte en una molcula idnea para
Se forma por combinacin con glutamato (por accin de la glutamina sintetasa, que requiere ATP).
Es transportada al hgado, rin e intestino, donde libera el nitrgeno amdico en forma de in amonio por
El NH
+
4
del intestino y del rin se transporta al hgado donde se elimina en forma de urea.
Ciclo de la glucosa-alanina
La alanina tambin juega un papel importante en el transporte de los grupos amino al hgado de forma no
txica. Se produce en el msculo y otros tejidos, como la mucosa intestinal, donde el glutamato generado
por transaminacin transfiere su grupo -amino al piruvato por accin de la enzima ALT. La alanina
sintetizada pasa a la sangre y es transportada al hgado. Una vez all, se da la reaccin inversa y se forma
glutamato y piruvato:
218
@AcademiaGoBIR
Segn la va metablica existente para la eliminacin del nitrgeno, los organismos se clasifican en:
citosol.
219
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
220
@AcademiaGoBIR
Ciclo de la urea
- Dietas ricas en protenas: el esqueleto carbonado de los aminocidos es utilizado como combustible y el
grupo amino se cataboliza hacia la produccin de urea.
- Inanicin: la degradacin proteica muscular suministra gran parte de la energa metablica.
Regulacin enzimtica
La carbamil-P sintetasa I est sometida a regulacin alostrica:
esqueleto carbonado de los aminocidos se cataboliza para originar 7 productos principales que se
pueden oxidar completamente a CO2 y H2O o desviar hacia la gluconeognesis o la cetognesis.
Se clasifican en:
- Glucognicos: producen piruvato o compuestos intermediarios del ciclo de Krebs. Todos terminan
transformndose en OAA y llevando a la sntesis de glucosa Alanina, valina, glicina, metionina, cistena,
serina, asprtico, asparagina, arginina, glutamina, histidina y prolina.
221
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
catabolismo de los aminocidos se da en el hgado salvo para los aminocidos de cadena lateral
ramificada (Ile, Leu y Val), que se degradan principalmente en msculo, tejido adiposo, rin y cerebro por
el complejo -cetocido de cadena ramificada deshidrogenasa, mediante descarboxilacin oxidativa.
El
BIOSNTESIS DE AMINOCIDOS
Todos los aminocidos se sintetizan a partir de intermediarios de la gluclisis, del ciclo de Krebs o de la
ruta de las pentosas fosfato.
Aminocidos no esenciales: no necesitan ser aportados con la dieta porque el ser humano es capaz de
Aminocidos esenciales: deben obtenerse necesariamente con la dieta ya que el ser humano es incapaz
de sintetizarlos.
222
@AcademiaGoBIR
AMINOCIDOS
NO ESENCIALES
Fenilalanina
Histidina
Isoleucina
Leucina
Lisina
Metionina
Treonina
Triptfano
Valina
Arginina*
Alanina
Asparagina
Aspartato
Glutamato
Serina
Cisteina
Glicina
Glutamina
Prolina
Tirosina
Recuerda CALIDAD PROTEICA: capacidad que tienen los aminocidos de una protena de
la dieta para satisfacer los requerimientos nutricionales del organismo.
1. FAMILIAS DE AMINOCIDOS
a) Familia del -cetoglutarato
Glutamato
En los animales se sintetiza por:
223
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
con el NH4+ para dar glutamina y consume ATP. El intermediario es el -glutamil-P. Esta enzima est
constituida por 12 subunidades idnticas y en algunos organismos, como en ciertas bacterias, su regulacin
es muy compleja Regulacin alostrica y por modificacin covalente:
- La enzima se inhibe por alanina, glicina y por, al menos, 6 productos finales del metabolismo de la
glutamina. Los efectos de cada uno de los inhibidores son aditivos, de modo que la totalidad de los
inhibidores en su conjunto inactivan la enzima.
- La adenililacin (incorporacin de AMP) del centro activo de la enzima hace que se incremente la
sensibilidad a los inhibidores alostricos. Esta adenililacin est cataliza por la adenililtransferasa.
Funciones de la glutamina:
- Donador de grupos amino en diversas reacciones de biosntesis Dador de nitrgeno para la sntesis
de histidina, triptfano y asparagina, sntesis de aminoazcares, nucletidos y glucoprotenas.
- Transporte del NH4+ a travs del torrente circulatorio de forma no txica.
- Fuente de energa importante en algunos tejidos como hgado y rin En el intestino delgado el 55%
del carbono de la glutamina se oxida a CO2.
Prolina
Es un derivado cclico del glutamato que para su sntesis consume 1 ATP y 2 NAD(P)H. Se forma primero
un intermediario -glutamil-P, que se reduce a glutamato -semialdehdo y se cicla espontneamente para
dar prolina.
prolina tambin se puede sintetizar a partir de la arginina obtenida de la dieta o de las protenas
tisulares La arginasa convierte la arginina en ornitina y urea La ornitina se convierte en glutamato
-semialdehdo Sntesis de prolina.
La
224
@AcademiaGoBIR
Serina
Es un aminocido de 3 C que se sintetiza a partir del 3-fosfoglicerato en una ruta que incluye
deshidrogenacin (utiliza NAD+), transaminacin e hidrlisis por una fosfatasa (paso irreversible de la ruta).
Es precursora de:
- Glicina y cistena.
- Etanolamina, esfingosina y colina.
- Betana (trimetilglicina): compuesto donador de grupos metilo. La colina tambin es precursora en su ruta
de sntesis.
Glicina
un aminocido de 2 C que se sintetiza principalmente a partir de la serina por accin de la serina
hidroximetiltransferasa (cofactores: tetrahidrofolato y piridoxal fosfato).
Es
- Glutatin.
- Purinas y porfirinas (glicina + succinil-CoA).
- Sales biliares.
- cido hiprico o hipurato Benzoilglicina.
225
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
los mamferos se sintetiza a partir de 2 aminocidos: metionina y serina. La Met aporta el tomo de
azufre y la Ser, el esqueleto carbonado.
- Glutatin.
- Taurina.
- Cistina (dos cistenas oxidadas unidas a travs de un puente disulfuro).
226
@AcademiaGoBIR
forma a partir de oxalacetato en una reaccin de transaminacin catalizada por la AST o GOT. La
reaccin es reversible.
Es precursor de:
sintetiza mediante una reaccin de amidacin del aspartato, utilizando glutamina como donador de
NH4+.
La trimetil-Lys es precursora de la carnitina (los grupos metilo son aportados por la S-adenosilmetionina).
Isoleucina y valina
La
isoleucina se sintetiza a partir de treonina y piruvato a travs del intermediario -cetobutirato que
deriva de la treonina. Las rutas de biosntesis de isoleucina y valina son paralelas, comparten 4 enzimas y
comienzan con la condensacin de 2 molculas de piruvato.
Leucina
Alanina
Se
sintetiza mediante una reaccin de transaminacin con el glutamato a partir de piruvato, catalizada
por la ALT o GPT.
Recuerda
227
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Es precursor de:
los animales, la tirosina se produce a partir de la fenilalanina por accin de la enzima fenilalanina
hidroxilasa que requiere como cofactor tetrahidrobiopterina.
En
e) Familia de la ribosa-5-P
Sntesis de histidina
Histidina
Requiere 3 precursores:
- PRPP (5-fosforribosil-1-pirofosfato) Aporta 5 C.
- ATP Su anillo purnico aporta 1 N y 1 C.
- Glutamina Aporta 1 N.
Es precursora de:
- Histamina Descarboxilacin de la histidina. Potente vasodilatador liberado durante la reaccin alrgica.
Recuerda
El
La regulacin alostrica puede ser muy compleja, de tal manera que varios productos acten como
moduladores negativos y sus efectos sean sumatorios Inhibicin concertada. Ej. Regulacin de la
glutamina sintetasa.
228
@AcademiaGoBIR
Los aminocidos que pasan el filtrado glomerular se reabsorben casi en su totalidad. La prdida de esta
1. CISTINURIA
Es una enfermedad autosmica recesiva, causada por una alteracin en el transporte de aminocidos
dibsicos. Se caracteriza por el aumento de la excrecin renal de cistina, arginina, lisina u ornitina. Puede
ocasionar litiasis renal debido a la formacin de cristales hexagonales de cistina en las vas urinarias.
2. IMINOGLICINURIA
Se origina por una alteracin en el transporte de glicina, prolina e hidroxiprolina.
Es asintomtica (error congnito benigno).
3. ENFERMEDAD DE HARTNUP
Es un trastorno autosmico recesivo causado por una alteracin en el transporte de aminocidos
neutros en el tracto intestinal y renal.
- La fenilalanina acumulada se transforma por otras vas secundarias en metabolitos como el cido
fenilpirvico y otros compuestos txicos para el cerebro; adems, la propia Phe en sangre interfiere en el
transporte de otros aminocidos al cerebro Retraso mental grave en los nios.
229
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Dficit de melanina: pelo rubio y ojos azules. Dficit de pigmentacin en la sustancia gris del encfalo.
- Dficit de neurotransmisores.
La
fenilcetonuria es una enfermedad incluida dentro de los programas de deteccin precoz o cribado
neonatal con el fin de poder instaurar un tratamiento temprano y evitar el dao cerebral.
Diagnstico:
- Diettico: restringir el aporte de Phe con la dieta. Preferentemente, dietas pobres en protenas y
suplementos de Tyr.
Ojo
Otras causas de hiperfenilalaninemia incluyen el dficit en el cofactor tetrahidrobiopterina por alteracin en la sntesis de la enzima que cataliza su regeneracin.
Consecuencias graves: este cofactor es necesario para la sntesis de noradrenalina y serotonina.
2. TIROSINEMIA
Se debe al dficit de alguna de las enzimas implicadas en el metabolismo de la tirosina.
a) Tirosinemia tipo I
Enfermedad autosmica recesiva. Se debe al dficit de la fumarilacetoacetasa o fumarilacetoacetato
Enfermedad
3. ALCAPTONURIA
Enfermedad autosmica recesiva cuyo gen est localizado en el cromosoma 3.
Se
Se
4. ALBINISMO OCULOCUTNEO
Trastorno autosmico recesivo debido al dficit de la enzima tirosinasa, necesaria para la formacin de
melanina a partir de tirosina.
Falta de pigmentacin en piel, pelo, iris y fondo de ojo disminucin de la agudeza visual y nistagmo.
230
@AcademiaGoBIR
Sntomas:
- Alteraciones esquelticas debido a la falta de puentes disulfuro entre las protenas: osteoporosis,
escoliosis, pectus excavatum y aracnodactilia Similar al sndrome de Marfan.
- Luxacin del cristalino.
- Alteraciones neurolgicas: retraso mental y ataques epilpticos.
Diagnstico:
- Dietas pobres en metionina con suplementos de cistena. Algunos pacientes responden a suplementos
de piridoxina.
231
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
produce acumulacin de cidos, originando acidurias y acidemias orgnicas, y suelen cursar con
hiperamonemia, por inhibicin de la carbamil-P sintetasa I.
El
catabolismo de estos 3 aminocidos origina 3 -cetocidos, que son descarboxilados por el mismo
complejo enzimtico Complejo de la -cetocido de cadena ramificada deshidrogenasa.
Esta
Los
productos acumulados son neurotxicos para el recin nacido Rechazo al alimento, vmitos,
letargia e incluso coma.
2. ACIDEMIA METILMALNICA
Es una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit de metilmalonil-CoA mutasa que
cataliza el paso de metilmalonil-CoA a succinil-CoA. Es dependiente de vitB12.
muscular y coma.
3. ACIDEMIA PROPINICA
autosmica recesiva que se debe al dficit de propionil-CoA carboxilasa, que cataliza el
paso de propionil-CoA a metilmalonil-CoA en el catabolismo de los aminocidos Ile, Val, Thr y Met.
Enfermedad
Esto causa la acumulacin de cido propinico y otros compuestos txicos derivados de ste.
Sntomas:
4. ACIDEMIA ISOVALRICA
Es una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit de la enzima isovaleril-CoA
deshidrogenasa, implicada en el metabolismo de la leucina.
232
@AcademiaGoBIR
2. HISTIDINEMIA
Alteracin
deficiencias de las enzimas del ciclo de la urea producen intolerancia a las protenas debido a la
acumulacin de amonaco en el organismo Hiperamonemia Encefalopata, apnea y letargia.
Herencia autosmica recesiva, excepto el dficit de ornitina transcarbamilasa, que est ligada al
cromosoma X.
hiperamonemia transitoria del recin nacido se manifiesta dentro de las primeras 24 horas de
vida y se caracteriza por niveles de amonio en sangre hasta 2 veces el valor normal. Cursa con alcalosis
respiratoria.
La
233
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
FAMILIA
AMINOCIDO
A LA QUE PERTENECE
PRECURSOR DE
-cetoglutarato
Glutamina
-cetoglutarato
Prolina
-cetoglutarato
Arginina
-cetoglutarato
xido ntrico
Espermina y espermidina
Creatina
Serina
3-Fosfoglicerato
Glicina
3-Fosfoglicerato
Creatina
Glutatin
Purinas y porfirinas
Sales biliares
cido hiprico
Cistena
3-Fosfoglicerato
Glutatin
Taurina
Cistina
Aspartato
Oxalacetato-piruvato
Triptfano
Fosfoenolpiruvato
Neurotransmisores: serotonina
NAD+ y NADP+
cido nicotnico
Tirosina
Fosfoenolpiruvato
Histidina
Ribosa 5-P
Histamina (vasodilatador)
Glutamato
234
@AcademiaGoBIR
ENFERMEDAD
DEFECTO ASOCIADO
PROCESO ALTERADO
Cistinuria
Iminoglicinuria
Enfermedad de
Hartnup
Fenilcetonuria
Tirosinemia
Alteracin en el catabolismo
de la tirosina
Alcaptonuria
Defecto en el catabolismo de la
tirosina
Albinismo
Dficit en la formacin de
melanina a partir de tirosina
Homocistinuria
Alteracin en la ruta de
biosntesis de cistena
Enfermedad
del jarabe de arce
en la orina
Dficit en el catabolismo
de aminocidos ramificados Ile,
Val y Leu
Acidemia
metilmalnica
Acidemia
propinica
Acidemia
isovalrica
Hiperamonemias
* Todas son autosmicas recesivas salvo el dficit de ornitina transcarbamilasa que est ligado al cromosoma X
235
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
1. VA DE SNTESIS DE NOVO
Ruta de sntesis de nucletidos a partir de los precursores metablicos: aminocidos, ribosa 5-P, CO
C-2 y C-8
N-3 y N-9
Proceden de la glicina.
236
@AcademiaGoBIR
y NH3.
- Una parte comn, donde a partir del PRPP se forma el ribonucletido intermediario IMP.
- Una parte ramificada, en la que a partir del IMP se obtienen los nucletidos AMP y GMP.
Parte comn:
2) A continuacin se suceden 10 reacciones enzimticas en las que se incorporan distintos tomos hasta
originar el primer intermediario con un anillo purnico completo: IMP. Participan:
- N-formil-THF: donador de tomos de carbono.
- Glicina (primer aminocido precursor), glutamina y aspartato.
- Se necesitan 6 molculas de ATP.
Durante este conjunto de reacciones tiene lugar una reaccin especial: una carboxilacin en la formacin
del segundo anillo de purina, que tiene como particularidad que es independiente de biotina.
3) El IMP es el precursor del AMP y del GMP en 2 rutas diferentes:
- IMP AMP (adenilato o adenosina 5-monofosfato). IMP deshidrogenasa y GMP sintetasa.
- IMP GMP (guanilato o guanosina 5-monofosfato). Adenilosuccinato sintetasa y adenilosuccinato
liasa.
Recuerda
237
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
azcar ribosa-5-P.
Las
El paso limitante de la ruta biosinttica es la primera reaccin catalizada por la aspartato transcarbamilasa
Despus se forma el oroato y se aade la ribosa 5-P para formar el orotidilato (OMP), que por
descarboxilacin forma UMP (complejo UMP sintasa). A partir del UMP se sintetiza el UTP por fosforilacin.
El UTP se transforma en CTP por accin de la citidilato sintetasa que consume ATP.
Las
3 primeras reacciones de la va estn catalizadas por 3 enzimas que forman parte de un complejo
multienzimtico denominado CAD.
238
@AcademiaGoBIR
Esta enzima presenta 2 mecanismos de accin utilizando los cofactores proteicos tiorredoxina o
glutarredoxina:
- Tiorredoxina: los electrones para la reduccin de los ribonucletidos proceden del NADPH; stos
son transportados a la ribonucletido reductasa por la tiorredoxina, cuyos grupos sulfhidrilo se oxidan
a puentes disulfuro. La tiorredoxina se vuelve a reducir con NADPH por la tiorredoxina reductasa. La
tiorredoxina reducida es utilizada por la ribonucletido reductasa para reducir los ribonuclosidos difosfato
a desoxirribonuclesidos difosfato.
- Glutarredoxina: el glutatin tiene la capacidad de reducir la glutarredoxina, la cual transfiere el poder
reductor a la ribonucletido reductasa.
reaccin de conversin de dUMP a dTMP est catalizada por la TIMIDILATO SINTASA, que utiliza
el N5,N10-metilentetrahidrofolato como donador de una unidad de carbono y un par de electrones para
metilar el dUMP. En esta reaccin el tetrahidrofolato se oxida a dihidrofolato.
La
La regeneracin del N5, N10- metilentetrahidrofolato tiene lugar por accin de las enzimas dihidrofolato
239
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
Biosntesis de dTMP
2. VAS DE RECUPERACIN
Son rutas ms sencillas que las de novo que permiten reciclar bases nitrogenadas originadas en
el catabolismo de los cidos nucleicos y sintetizar nucletidos. Estas bases nitrogenadas pueden
catabolizarse a cido rico tambin.
Algunas clulas como los linfocitos utilizan estas vas de recuperacin como fuente principal de
nucletidos.
Algunos
parsitos como los tripanosomas africanos carecen de ruta para la biosntesis de novo de
nucletidos y son sensibles a agentes que interfieran con las rutas de recuperacin.
240
@AcademiaGoBIR
2.
ATP.
241
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
regulacin se lleva a cabo mediante la unin de las molculas efectoras a 2 tipos de sitios en la
subunidad R1:
- Lugares de actividad: Se activan por ATP y se inhiben por dATP.
- Lugares de especificidad de sustrato: Ej.
1. dTTP Activa la reduccin del GDP e inhibe la de UDP o CDP
2. dGTP Activa la reduccin de ADP e inhibe la de UDP o CDP
Regulacin de la actividad de la ribonucletido reductasa
LUGAR
DE ACTIVIDAD
LUGAR
DE ESPECIFICIDAD
ATP
ATP
ATP
dATP
ATP o dATP
CDP, UDP
dTTP
GDP
dGTP
ADP
Cualquier efector
Recuerda
ACTIVA
LA REDUCCIN DE
INHIBE LA
REDUCCIN DE
CDP, UDP
CDP, UDP
ADP, GDP, CDP y UDP
La sntesis de nuclesidos trifosfato a partir de nuclesidos difosfato est catalizada por la nuclesido
disfosfato quinasa:
CATABOLISMO DE NUCLETIDOS
Los cidos nucleicos degradados proceden de 2 fuentes:
- Intracelular Recambio de RNAm inestables, rutas de reparacin del DNA o muerte celular.
- Extracelular Digestin de los cidos nucleicos ingeridos con la dieta. Va principal.
Los cidos nucleicos ingeridos:
242
@AcademiaGoBIR
Recuerda
+
4
Malonato Malonil-CoA.
243
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
2. GOTA
Es
una enfermedad debida al depsito de urato monosdico y cristales de cido rico en los tejidos,
especialmente en las articulaciones, originando la artritis gotosa aguda. La gota se puede deber a un
exceso de purinas con la alimentacin o a alteraciones genticas.
Recuerda
La gota se trata con el frmaco alopurinol, anlogo estructural de la hipoxantina que inhibe
la enzima xantina oxidasa, inhibiendo la transformacin de las purinas en cido rico. El
alopurinol es transformado por la xantina oxidasa en oxipurinol (aloxantina) que permanece
fuertemente unido al sitio activo de la enzima, inactivndola.
una forma de gota debido a que en ausencia de la enzima HGPRT aumentan los niveles de
PRPP, lo que conduce a un incremento de la sntesis de novo de purinas, mayor catabolismo y aumento
de los niveles de cido rico.
gota.
ligada al cromosoma X que tambin se asocia con una sobreproduccin de cido rico y
3. XANTINURIA HEREDITARIA
una enfermedad autosmica recesiva que se debe al dficit hereditario de la xantina oxidasa o
xantina deshidrogenasa. Esta enzima cataliza la degradacin de la hipoxantina y la xantina a cido rico.
Es
Se caracteriza por una concentracin muy baja o indetectable de cido rico en sangre y en orina y por
un exceso de xantina en orina, lo que provoca urolitiasis.
244
@AcademiaGoBIR
Inmunidad celular y
humoral defectuosas Infecciones crnicas recurrentes por virus, hongos, protozoos y bacterias.
de nucletidos de pirimidina.
245
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
BIOQUMICA CLNICA
1. FASE PREANALTICA
SANGRE
La obtencin de sangre para su anlisis se puede llevar a cabo mediante su extraccin de venas, arterias
y capilares. Para la mayor parte de las determinaciones en el laboratorio se extrae sangre venosa ya que
es ms fcil su obtencin.
Algunas determinaciones analticas presentan variaciones segn se trate de sangre venosa o arterial. En
algunos casos interesa extraer sangre arterial. Ej. Gasometra.
vitaminas, ...
El suero es el plasma sin fibringeno y otras protenas de la coagulacin. Se obtiene dejando coagular
b) Anticoagulantes
Cuando la muestra a analizar es plasma o sangre total, se utilizan los siguientes anticoagulantes:
ANTICOAGULANTE/ADITIVO
UTILIZACIN
Rojo
Ninguno
Bioqumica en suero
Serologa
Banco de sangre
Rojo/Gris
Bioqumica en suero
Verde
Heparina de litio
Bioqumica en plasma
Morado/Violeta
EDTA
Recuento hematlogico
Azul claro
Citrato (1:9)
Estudios de coagulacin
Gris
Fluoruro/Oxalato
Medida de glucosa
Amarillo
Hemocultivos
Naranja
Trombina
Bioqumica de urgencia
Negro
Citrato (1:4)
Velocidad de sedimentacin
globular
246
@AcademiaGoBIR
c) Tipos de puncin
Puncin venosa
Se suele llevar a cabo en la vena mediana cubital debido a su grosor, y tambin en la vena ceflica.
Puncin arterial
Son ms complicadas que las venosas debido a la mayor presin sangunea de las arterias.
Se suele llevar a cabo en la arteria radial del brazo o en la femoral principalmente.
Se realizan con jeringas de vidrio heparinizadas. La heparina de litio es el anticoagulante utilizado.
Puncin cutnea
Es especialmente importante en nios, ancianos, pacientes obesos y diabticos.
En los nios se realiza en el taln y en los adultos en el dedo pulgar.
La
eleccin de sangre capilar frente a la venosa no suele presentar diferencias clnicas relevantes,
aunque es un aspecto a tener en cuenta en la interpretacin del resultado. Ej. La concentracin capilar de
glucosa es del 10-30% superior a la venosa.
b) Determinacin de pH y gases
Colocar en hielo y llevar rpidamente al laboratorio.
ORINA
1. OBTENCIN DE LAS MUESTRAS
Es
importante que la recogida de la orina se efecte adecuadamente, ya que condiciona los resultados
obtenidos.
a) Contenedores
Limpios y secos (y en determinados casos, han de ser estriles).
Los
contenedores para el anlisis sistemtico presentan tapn de rosca, boca ancha y redonda y una
capacidad entre 50-100 mL.
Estn elaborados con material transparente que permita ver el interior (excepto para la determinacin de
sustancias fotosensibles en cuyo caso deben ser opacos). Ej. Bilirrubina, urobilingeno, catecolaminas,
porfirinas.
Para la recogida de orina de 24 horas el volumen de los recipientes ha de ser entre 2-5 L.
de una miccin Cualquier hora del da. Se utiliza para anlisis cualitativos, anlisis sistemtico
de la orina. El recipiente utilizado para su procesamiento en el laboratorio es un tubo cnico con una
capacidad de 10-12 mL.
Orina de primera hora de la maana Est indicada para estudiar la proteinuria y la capacidad de
concentracin del rin. Es la forma de recogida para pacientes ambulatorios que acuden a revisin.
247
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
cetonuria.
Orina de 24 horas Se desecha la orina de primera hora de la maana y se recoge toda la orina durante
Orina de media miccin para cultivo microbiolgico Se desechan la primera y ltima porcin de la
miccin. Precisa condiciones de recogida ms higinicas que las anteriores.
orina debe analizarse en los 30 minutos siguientes a su recogida para evitar las alteraciones en
su composicin y el crecimiento de bacterias. Si no es posible, se recomienda refrigerar la muestra. Se
conserva bien entre 6-8 horas.
CONSERVANTE
CARACTERSTICAS
Tolueno
Formaldehdo o formol
Timol
Aceite de parafina
cido brico
cido clorhdrico
Carbonato sdico
d) Extraccin de la muestra
Miccin espontnea.
Cateterismo vesical (sondaje) Personas que presentan dificultades en la miccin.
Puncin suprapbica En nios, cuando se sospecha de la presencia de microorganismos extraos o
cuando la muestra disponible no rene las condiciones ptimas para ser analizada.
248
@AcademiaGoBIR
H2O.
Volumen normal obtenido 7-15 mL, que se recogen en 3 tubos estriles (1-3 mL /tubo).
En
caso de puncin hemorrgica solo el primer recipiente presenta una coloracin rojiza, pero en caso
de que ya existiera una hemorragia antigua los 3 recipientes estarn hemticos.
SEMEN
1. OBTENCIN DE LA MUESTRA
Es necesario guardar abstinencia sexual entre 2-7 das antes de la obtencin de la muestra.
Se
obtiene por masturbacin y se recoge en un recipiente limpio de plstico con boca ancha, que no
contenga ninguna sustancia que pueda tener efectos txicos sobre los espermatozoides.
Es importante no perder la primera porcin del eyaculado, que es la que mayor concentracin
espermtica tiene.
El semen debe ser llevado rpidamente al laboratorio tras su obtencin y ser analizado al cabo de una
hora.
- Fsico: observacin del aspecto macroscpico y medicin del volumen con un tubo graduado.
- Microscpico: se determina la concentracin y motilidad espermtica por observacin microscpica con
la cmara de Makler. Tambin se realiza el test de vitalidad de los espermatozoides inmviles tindolos
con eosina (si estn muertos la eosina atraviesa la membrana plasmtica daada del espermatozoide y
se tien de color rosa).
- Bioqumico: fosfatasa cida, cido ctrico, fructosa,
249
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
2. FASE ANALTICA
ANLISIS DE SANGRE
1. PRUEBAS BIOQUMICAS EN SANGRE
a) Mtodos de determinacin de protenas
La suma de las concentraciones de todas las protenas presentes en el plasma se conoce como protenas
MTODO
Biuret
CARACTERSTICAS
Mtodo qumico colorimtrico que se basa en la
formacin de un complejo coloreado en presencia de
cobre y sales, en medio bsico
La intensidad del color es proporcional al nmero de
enlaces peptdicos
Automatizacin. Es el ms utilizado
Lowry
Mtodo colorimtrico
Poco utilizado (ms en orina)
Gran sensibilidad, pero poca especificidad
Mtodos refractomtricos
Absorcin en el UV
Kjeldahl
Para
reabsorcin tubular es funcin del flujo renal La cifra de urea sangunea aumenta cuando hay
disminucin del flujo sanguneo (uremia prerrenal: deshidratacin, shock hipovolmico) o en disfuncin
renal (insuficiencia renal).
Los niveles de urea plasmtica varan en funcin de la edad y el sexo aunque oscilan normalmente entre
12-54 mg/dL.
250
@AcademiaGoBIR
del hecho de que tradicionalmente la urea se determinaba a partir del nitrgeno contenido en el amoniaco,
formado por accin de la ureasa.
Urea (mg) = Nitrgeno ureico (BUN) x 2,14
Otro mtodo de determinacin de la urea tanto en sangre como en orina es el mtodo de BerthelotSearcy: mtodo colorimtrico basado tambin en la accin de la ureasa.
- Niveles de referencia: 3-7 mg/dL (aunque vara con el sexo y con la edad).
Mtodos de determinacin de cido rico en sangre
MTODO
cido fosfotngstico
Uricasa
CARACTERSTICAS
Oxidacin del cido rico en medio alcalino por el cido
fosfotngstico, que se reduce a azul de tungsteno. Colorimtrico a 700nm
Mtodo colorimtrico que implica la oxidacin del cido rico
a alantona por la enzima peroxidasa
Medida de la absorbancia a 570 nm
Muy utilizado
HPLC
Determinacin de creatinina
La creatinina es el anhdrido de la creatina.
La creatinina excretada es filtrada en su mayora en el glomrulo y solo una pequea porcin es secretada
en los tbulos. Se elimina mayoritariamente por va renal y en una pequea cantidad con las heces Buen
indicador de funcin renal, especialmente de funcin glomerular.
251
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
presencia es proporcional a los niveles de glucosa en sangre y nos permite conocer los valores de
glucemia de un paciente durante los tres meses previos a la determinacin (ya que la vida media de la Hb
son 120 das). Control del paciente diabtico.
MTODO
CARACTERSTICAS
Mtodo de la orto-toluidina
(Basado en el poder reductor
de la glucosa)
Mtodo de la hexoquinasa
(Mtodo enzimtico)
252
@AcademiaGoBIR
LPIDO/LIPOPROTENA
MTODO
Colesterol y TG totales
Anlisis enzimticos
U
ltracentrifugacin y posterior precipitacin
U
ltracentrifugacin secuencial o en gradiente de densidad
E
lectroforesis
Recuerda
Estas determinaciones requieren un ayuno mnimo de 12 horas y mantener el estilo de vida habitual durante las 2-3 semanas previas al anlisis (tipos de dieta especialmente).
- La degradacin del grupo hemo forma biliverdina, que se transforma en bilirrubina Bilirrubina no
conjugada (indirecta).
- En el hgado, la bilirrubina no conjugada se conjuga con cido glucurnico para dar lugar a la bilirrubina
conjugada (directa).
- La concentracin normal de bilirrubina en plasma vara entre 0,3-1 mg/dL. Por encima de 2,5 mg/dL
aparece ictericia.
- La ictericia es la coloracin amarillenta de los tejidos corporales debido a la elevacin anormal de los
niveles de bilirrubina en sangre. En el recin nacido existe una ictericia fisiolgica debido a que, por la
inmadurez del hgado, no es capaz de conjugarla.
253
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
TIPOS DE ICTERICIA
CARACTERSTICAS
ICTERICIA
PREHEPTICA
O HEMOLTICA
A
umenta la bilirrubina no conjugada
O
rina no colrica (no bilis)
U
robilingeno en orina elevado
H
eces pleiocrmicas (aumento de color)
D
atos de hemlisis: anemia, reticulocitosis, aumento
de LDH y descenso de haptoglobina
ICTERICIA
HEPTICA O
HEPATOCELULAR
A
umenta tanto la bilirrubina conjugada como la no
conjugada
C
oluria y bilirrubinuria
U
robilingeno en orina variable
H
eces normales o hipoclicas
S
e debe a la incapacidad de los hepatocitos para captar,
conjugar y eliminar la bilirrubina
ICTERICIA
POSTHEPTICA
O OBSTRUCTIVA
A
umento de la bilirrubina conjugada
C
oluria y bilirrubinuria
U
robilingeno disminuido en orina
H
eces hipoclicas o aclicas
Recuerda
La muestra utilizada suele ser sangre arterial en jeringa heparinizada con heparina de litio.
El pH se determina mediante un electrodo in selectivo Electrodo de vidrio que contiene el electrodo
El pO
Recuerda
- Potenciometra Se basa en la medida del potencial elctrico entre los 2 electrodos de una
clula electroqumica.
- Amperometra Se basa en la medida de la intensidad de la corriente que pasa por una clula
electroqumica cuando se aplica un potencial constante entre los electrodos.
254
@AcademiaGoBIR
En
diferencia se debe a una serie de sustancias con carga negativa en la sangre como protenas
plasmticas, sulfatos, fosfatos y lactato, que habitualmente no se miden.
Al conjunto de estas sustancias aninicas que equilibran las cargas positivas y las negativas y que no se
- Aumenta: acidosis metablica, cetoacidosis diabtica (pH <7,25 o bicarbonato plasmtico <16 mEq/L).
- Disminuye: mieloma mltiple (por aumento de las gammaglobulinas que tienen carga positiva).
3. PRUEBAS DE HEMATIMETRA
Consiste en el anlisis de las clulas sanguneas y permite detectar alteraciones cuantitativas y
cualitativas en estas clulas:
a) Eritrocitos
Son las clulas ms abundantes de la sangre. Son discos bicncavos con una vida media de 120 das.
PARMETRO
MUJER VARN
4,2-5,4
4,7-6,1
Hemoglobina (g/dL)
12-16
14-18
Hematocrito (%)
Porcentaje del volumen total de la sangre
constituido por los hematies
37-47%
42-52%
85-97
85-97
27-31
27-31
31-35
31-35
10-14
10-14
ndice de reticulocitos
Reticulocitos (%) x Hematocrito paciente
Hematocrito normal
<1
<1
12
b) Leucocitos
255
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
CLULA
PORCENTAJE (%)
NEUTRFILOS
55-75
2,5- 7,5
LINFOCITOS
17-45
1,5- 4,5
MONOCITOS
2-8
0,2- 0,8
EOSINFILOS
1-4
0,05- 0,5
BASFILOS
0,2-1,2
0,01-0,15
c) Plaquetas
Son discos finos de 2-4 m que carecen de ncleo. Son fragmentos de megacarocitos. Sus valores
normales oscilan entre 130-400 x 109/L.
Esta
tincin es positiva para: los neutrfilos, el 20-30% de los linfocitos normales, las plaquetas y los
megacariocitos.
c) Tincin de la peroxidasa
Esta enzima est presente en el citoplasma de casi todos los leucocitos. Solo los linfocitos carecen de ella.
g) Tincin de la -glucuronidasa
Esta enzima es una hidrolasa lisosomal.
Positiva: macrfagos, clulas plasmticas y linfocitos T.
Positividad dbil o negativa: monocitos y neutrfilos.
h) Tincin de esterasas
-Naftil-Acetato o -Naftil-Butirato Negativa para neutrfilos.
Naftol AS-D cloroacetato esterasa Positiva para neutrfilos.
256
@AcademiaGoBIR
PARMETRO
Tiempo de
protrombina
(TP)
MTODO
Mtodo de Quick
Mide el tiempo que tarda en aparecer el
cogulo de fibrina aadiendo al plasma
tromboplastina y calcio
En la actualidad se recomienda utlizar el
INR (cociente normalizado internacional)
INR=(TP del paciente/TP control) ISI*
*ISI: ndice de sensibilidad internacional
Tiempo de
tromboplastina
parcial activada
(APTT)
Mide
el tiempo que tarda en formarse la
UTILIDAD
Se
utiliza para evaluar el
Mide
la capacidad coagulante
de los factores I, II,V,VII y X
Se
utiliza para el control de la
terapia con anticoagulantes
orales dicumarnicos
Se
utiliza para evaluar las
Permite
detectar hemofilias A y
B APTT prolongado
Se
utiliza para controlar el
tratamiento con heparina
Fibringeno
Factor de coagulacin y
reactante de fase aguda por lo que
estar aumentado en:
Reacciones inflamatorias
Traumatismos
Infecciones
E
s un producto de degradacin
Dmero D
de la fibrina
Est
aumentado en la
coagulacin intravascular
diseminada (CID) y en procesos
tromboemblicos como la
trombosis venosa profunda
ANLISIS DE HECES
El anlisis de las heces permite detectar alteraciones del proceso digestivo por:
257
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
- Sin teir Para cualquier tipo de resto de digestin, aunque encaminada al estudio de protenas.
- Tincin con Sudn III Se destacan los restos de grasas en las heces.
- Tincin con lugol doble Se destacan los hidratos de carbono.
Estructuras microscpicas en las heces
ESTRUCTURAS
OBSERVADAS
APARIENCIA
SIGNIFICACIN CLNICA
FIBRAS
MUSCULARES
Fibras musculares
mal digeridas: forma
rectangular, estriaciones.
Aparecen en la insuficiencia
gstrica/pancretica
FIBRAS
CONJUNTIVAS
Aparecen en la insuficiencia
gstrica
GRASAS
NEUTRAS
ALMIDN
Alteracin en la digestin de
grasas
Enfermedad celiaca
Trnsito intestinal acelerado
Pueden aparecer en forma
de grnulos, masas amorfas
o clulas que contengan
en su interior grnulos
de almidn en diferentes
estados de digestin
Aparecen en el trnsito
intestinal acelerado,
ingestin excesiva de
fculas o insuficiencia de
amilasa pancretica
ANLISIS DE ORINA
1. EXAMEN MACROSCPICO
a) Color
El color normal de la orina es amarillo claro/mbar por la presencia de un pigmento denominado
urocromo.
El color de la orina puede variar desde incoloro a casi negro atendiendo a las diferentes patologas
responsables de dicha coloracin y a la ingesta diettica o de frmacos.
258
@AcademiaGoBIR
COLOR
Incoloro/Amarillo claro
Amarillo oscuro
Anaranjado
Amarillo verdoso/Amarillo-marrn
Verde
Rosa
Roja
Marrn
Negra
CAUSA
Consumo reciente de lquido, poliuria, diabetes
inspida o diabetes mellitus
Muestra concentrada
Presencia de bilirrubina y ciertos antibiticos
(fenazopiridina, nitrofurantona, ...)
Ictericia; bilirrubina oxidada a biliverdina
Infeccin por Pseudomonas
Eritrocitos
Hemoglobina/Mioglobina/Porfirinas; hemlisis
intravascular, dao muscular o porfiria
Eritrocitos oxidados a metahemoglobina
Metahemoglobina, cido homogentsico
(alcaptonuria), melanina (melanoma maligno),
derivados del fenol, metildopa o levodopa
b) Olor
La orina recin emitida tiene un olor suave y caracterstico debido a la presencia de cidos voltiles.
A medida que va transcurriendo el tiempo, el olor de la orina se torna amoniacal debido a la descomposicin
de la urea.
Olores patolgicos:
c) Turbidez
La orina recin emitida es limpia y transparente.
La presencia de turbidez en la orina puede ser:
d) Volumen
Diuresis normal 800-2.000 mL/24h; aunque suele oscilar entre 1.200-1.500 mL/24h.
En el caso de los nios, el volumen excretado es proporcionalmente ms elevado que en los adultos.
La diuresis depende de distintos factores como: ingesta de lquidos, temperatura, sudoracin,
- Poliuria (eliminacin de un volumen de orina superior al normal, >3.000 mL/24h) Diabetes mellitus o
diabetes inspida.
- Oliguria (eliminacin de un volumen de orina inferior al normal, <400mL/24h) Deshidratacin, isquemia
renal, insuficiencia renal crnica.
- Anuria (falta de eliminacin de la orina) Insuficiencia renal aguda o crnica.
e) Densidad
Hace referencia a la capacidad de los riones para concentrar la orina.
Densidad normal 1,010-1,030 g/L.
259
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
2. EXAMEN BIOQUMICO
a) Determinacin semicuantitativa de los componentes bioqumicos
El
examen de los componentes qumicos de la orina se realiza mediante el uso de tiras reactivas
Qumica seca.
Las tiras reactivas constan de almohadillas impregnadas en sustancias qumicas e indicadores adheridos
a una tira plstica. Cuando la almohadilla toma contacto con la orina tiene lugar una reaccin qumica que
provoca en el indicador un viraje de color. Este color se compara con una escala cromtica aportada por
el fabricante.
Componentes bioqumicos detectados en la tira reactiva de orina
COMPONENTE VALORES
QUMICO
NORMALES
pH
4,5-8
GLUCOSA
NO HAY
CUERPOS
CETNICOS
NO HAY
MTODO
DE DETECCIN
Indicador : Rojo
de metilo- Azul de
bromotimol
APLICACIN
CLNICA
Orinas cidas:
Dieta con alto contenido proteico
Diabetes mellitus
Diarrea
Ciertos medicamentos
Orinas alcalinas
Dieta vegetariana
Muestras almacenadas
Infecciones por bacterias productoras
de ureasa
Hiperventilacin
Vmitos
Acidosis tubular renal
Glucosa oxidasa
Glucosuria
Diabetes mellitus
Acromegalia
Sndrome de Cushing
Hipertiroidismo
Embarazo
Nitroprusiato
(No detecta
-hidroxibutirato)
Cetonuria
Diabetes mellitus
Ayuno prolongado
HEMOGLOBINA
NO HAY
Ortotoluidina
y perxido orgnico
Hemoglobinuria
Anemia hemoltica
Traumatismo
Enfermedad renal
Infecciones
LEUCOCITOS
NO HAY
Esterasa leucocitaria
Piuria
Infecciones
BILIRRUBINA
NO HAY
Diazorreaccin
Bilirrubinuria
Enfermedad heptica
Enfermedad obstructiva biliar
UROBILINGENO
0,5-4 mg/da
Diazorreaccion:
prueba de Erlich
NO HAY
Amina aromtica
con diazonio
Positivo en:
Infecciones bacterianas por bacterias
capaces de reducir los nitratos a nitritos.
Ej. Enterobacterias
NITRITOS
260
@AcademiaGoBIR
presencia de protenas en orina es un indicador del estado del rin y puede reflejar cierta lesin a
nivel renal (enfermedad glomerular).
La determinacin es ms compleja que en las muestras sanguneas debido a la cantidad de sustancias
MTODO
CARACTERSTICAS
Biuret
Escasa sensibilidad
Sujeto a interferencias
Lowry
Bastante utilizado
Mtodos turbidimtricos
c) Deteccin de la microalbuminuria
Excrecin
de pequeas cantidades de albmina en orina por encima de los valores normales pero que
no son detectadas con las pruebas rutinarias de determinacin de protenas en orina.
o turbidimetra.
Los lugares principales de sntesis de catecolaminas son el SNC, las clulas cromafines de la mdula
suprarrenal y las neuronas simpticas postganglionares. La mdula suprarrenal sinteriza un 80% de
adrenalina y un 20% de noradrenalina.
Las determinaciones ms importantes en el laboratorio son:
261
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
El
f) Deteccin de porfirinas
Deteccin cualitativa:
- Test de Hoesch: reactivo de Ehrlichs Detecta la presencia de porfobilingeno. Pigmento rojo que
absorbe a 552 nm.
HPLC con detector de fluorescencia.
Utilidad clnica: diagnstico de porfirias.
a) Tipos de clulas
Hemates
Son clulas de forma bicncava y con un tamao que oscila entre 4 y 7 m.
Se encuentran en cantidad muy reducida en la orina normal (1-2/campo).
Utilidad clnica:
Hematuria renal
- Hematuria glomerular: glomerulonefritis. Es frecuente la aparicin de hemates dismrficos (proceden
de la sangre que circula por el glomrulo: hemates deformados, con muescas).
- Hematuria parenquimatosa no glomerular: tumores malignos y quistes renales, infarto renal, nefropata
poliqustica, tuberculosis o diabetes mellitus.
Hematuria extrarrenal
- Nefrolitiasis, cistitis hemorrgicas, hipertensin arterial, trombopenias.
Ojo
Los hemates al microscopio se pueden confundir con levaduras o con cristales de oxalato
clcico monohidratado.
Leucocitos
Son
clulas redondeadas, de tamao algo mayor que los hemates (8-15 m) y con un ncleo variable
en tamao y forma.
No se suelen encontrar en el sedimento de una persona sana; lo normal es 0-5 leucocitos/campo.
El tipo de leucocito predominante en la orina es el leucocito polimorfonuclear neutrfilo.
Utilidad clnica: la presencia de piuria en la orina puede indicar:
262
@AcademiaGoBIR
Son las clulas que conforman el epitelio monoestratificado que tapiza los tbulos renales; tambin se
llama epitelio columnar o cbico.
Son clulas algo mayores que los leucocitos, redondeadas o algo ovaladas, con ncleo grande y redondo
localizado en el centro o algo desplazado hacia un lado.
Utilidad clnica: es indicativa de patologa tubular. Tambin pueden aparecer en enfermedades vricas
Cilindros
Se originan a partir de las protenas (la matriz es la mucoproteina Tamm-Horsfall, segregada a la
orina por las clulas epiteliales de la rama ascendente del asa de Henle) de los tbulos de las nefronas;
representan moldes de las nefronas.
Los cilindros se originan por el espesamiento de las protenas y su precipitacin. Se clasifican en funcin
de:
263
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
CARACTERSTICAS
SIGNIFICACIN CLNICA
Cilindros
hialinos
Cilindros
granulosos
Cilindros
creos
Cilindros
epiteliales
Aparecen en la necrosis
tubular isqumica o txica
Cilindros
eritrocitarios
Glomerulonefritis aguda o
crnica
Lupus eritematoso
sistmico
Cilindros
leucocitarios
Aparecen principalmente
en pielonefritis
Cristales
Son productos finales del metabolismo que se excretan a nivel urinario.
La deteccin de cristales en orina posee significacin diagnstica en muy pocos casos.
El tipo y el nmero de cristales dependen del pH y de la temperatura de la orina:
1. Uratos amorfos
- Orinas cidas.
- Precipitado rojo-pardusco en forma de polvo de ladrillo.
- Aparecen en episodios febriles y en la gota.
264
@AcademiaGoBIR
265
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
lquido cefalorraqudeo es un lquido transparente (agua de roca) que baa el encfalo y la mdula
espinal circulando por el espacio subaracnoideo de las meninges, los ventrculos cerebrales y el canal
medular.
Se produce en los plexos coroideos de los dos ventrculos laterales y del tercer y cuarto ventrculo. Estos
plexos forman el LCR a travs del plasma por mecanismos de filtracin selectiva y secrecin por transporte
activo. El LCR es reabsorbido por la sangre a travs de las vellosidades aracnoideas.
El volumen total de LCR en las vellosidades aracnoideas es aproximadamente de 150 mL.
Funciones:
1. EXAMEN MACROSCPICO
CARACTERSTICAS
TURBIDEZ
VISCOSIDAD
COLOR
APARIENCIA NORMAL
AUSENCIA DE TURBIDEZ
POCO VISCOSO
INCOLORO.
("agua de roca")
266
@AcademiaGoBIR
SIGNIFICACIN CLNICA
La
b) Lactato
La concentracin de lactato en LCR es independiente de su concentracin plasmtica y refleja el
metabolismo cerebral anaerobio debido a hipoxia.
Utilidad clnica: aumenta en infarto cerebral, edema, traumatismos o meningitis.
d) Prealbmina
La concentracin relativa de prealbmina es mayor en el LCR que en el plasma.
Utilidad
otorraquia.
clnica: confirma el origen cefalorraqudeo del lquido, como en los casos de rinorraquia u
e) Transferrina desializada
Procede de la transferrina plasmtica, que en el SNC pierde sus residuos de cido silico, presentando
una migracin electrofortica diferente (banda Tau).
Tiene la misma utilidad que la prealbmina.
3. EXAMEN MICROSCPICO
El LCR tiene un escaso nmero de clulas que son, fundamentalmente, leucocitos mononucleares.
En neonatos es normal la aparicin de hasta 20-30 clulas/L. En el adulto, hasta 5-10 clulas/L.
a) Hemates
La cifra de hemates tiene escaso valor y se suele utilizar para corregir la cifra de leucocitos (1 leucocito/700
hemates) y para corregir la concentracin de protena (restar 1 mg de protena por cada 1.000 hemates).
b) Leucocitos
Predominio
Predominio de neutrfilos: meningitis bacterianas, durante el comienzo de las meningitis virales o en las
hemorragias cerebrales.
267
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
PATOLOGA
ASPECTO
PROTEINAS
(mg/dL)
GLUCOSA
CLULAS
Meningitis
vrica
Claro o
ligeramente
turbio
30-100
NORMAL
5-300 MN
(24-36h predominio
de PMN)
Meningitis
tuberculosa
Claro
50-300
<45
100-600 MN
Meningitis
fngicas
Ligeramente
turbio
50-300
<45
40-400 PMN
Hemorragia
subaracnoidea
Xantocrmico
Aumentadas
Normal o
aumentada
25-1.000
MN
a travs de los capilares sinoviales. A este lquido se le aaden algunas sustancias como protenas y cido
hialurnico segregado por las clulas B de la membrana sinovial.
Funciones:
1. EXAMEN MACROSCPICO
Viscosidad:
COLOR/ASPECTO
PATOLOGA
Pardo-rojizo
(Sangre en la muestra)
Amarillo verdoso
Procesos spticos
Turbidez
2. EXAMEN BIOQUMICO
a) Glucosa
268
@AcademiaGoBIR
En procesos inflamatorios y spticos, sus niveles se elevan, reflejo del aumento de la permeabilidad
vascular.
c) 2-Microglobulina
3. EXAMEN MICROSCPICO
a) Tipos de clulas
Un
lquido sinovial normal contiene de 10-200 clulas/L, siendo leucocitos prcticamente su totalidad,
con predominio de linfocitos.
Clasificacin patolgica de los lquidos sinoviales atendiendo al tipo celular
TIPOS
ASPECTO
DE LQUIDO
RECUENTO
CELULAR
PATOLOGA
Amarillo claro
200-2.000 leucocitos/L
<25% PMN
A
rtropatas
postraumticas
Osteocondritis
Artrosis
Inflamatorios
Turbio
2.000-100.000 leucocitos/L
>50% PMN
Pueden aparecer cristales
Gota
Pseudogota
Enfermedades del
tejido conjuntivo
Spticos
Turbio
>100.000 leucocitos/L
>75% PMN
Artritis infecciosa
FORMA
PATOLOGA
Mecnico
no inflamatorio
d) Anlisis de cristales
CRISTALES
Urato monosdico
Agujas, bastones
GOTA
Pirofosfato clcico
Alargados, romboides
PSEUDOGOTA
Hidroxiapatita
Microagregados esfricos
ARTRITIS
Colesterol
Cuadrangular, rectangular
ARTRITIS REUMATOIDE
(ocasionalmente)
Su
estudio se realiza con microscopio de luz polarizada y permite realizar el diagnstico de artropatas
por microcristales.
269
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
1. EXAMEN MACROSCPICO
Examen fsico del semen
PARMETROS
NORMAL
PATOLGiCO
1,5-7 mL
Hiperespermia >7
Hipospermia <1,5
Tiempo de
licuacin
5-15 minutos
Viscosidad
Blanquecino opalescente
Volumen
Color
Ligeramente alcalino
7,2-7,8
pH
pH >7,8: inflamacin de
las glndulas prostticas
(prostatitis, epididimitis)
2. EXAMEN BIOQUMICO
Principales marcadores bioqumicos del semen
RGANO
PARMETRO BIOQUMICO
cido ctrico
Fosfatasa cida
Zinc
Prstata
Vesiculas Seminales
Fructosa
Epiddimo
Carnitina libre
270
@AcademiaGoBIR
DEFINICIN
Concentracin espermtica
>15 millones spz/mL
>39 millones de spz en el eyaculado total
Oligozoospermia
Astenozoospermia
Teratozoospermia
Criptozoospermia
Azoospermia
- Se obtiene por puncin abdominal mediante una tcnica llamada amniocentesis. Se extraen unos 10-20
mL.
La
amniocentesis se realiza habitualmente entre las semanas 14-16 de gestacin. Para estudios de
madurez fetal es recomendable realizarla en la semana 35.
una medida de la madurez pulmonar fetal establecida mediante la determinacin de los fosfolpidos
del lquido amnitico. La lecitina es el principal componente del surfactante pulmonar; si no existe suficiente
surfactante los alveolos se colapsan durante la espiracin. Esto puede producir en los pulmones inmaduros
el sndrome del distrs respiratorio (RDS), que es una complicacin frecuente en los recin nacidos
prematuros. En los pulmones fetales inmaduros la concentracin de esfingomielina es mayor que la de
lecitina. Un cociente L/E >2 indica madurez fetal.
Fosfatidilglicerol
Es un buen indicador de la madurez pulmonar ya que se sintetiza casi por completo en las clulas
alveolares del pulmn maduro. Representa el 10% de los fosfolpidos del surfactante pulmonar.
271
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
f) Alteraciones anatmicas
Defectos del cierre del tubo neural: anencefalia y espina bfida.
Estos defectos cursan con elevacin de alfafetoprotena (AFP) y acetilcolinesterasa en suero materno y
lquido amnitico.
Recuerda
MARCADORES TUMORALES
Definicin: amplio espectro de molculas de caractersticas muy variables, producidas o inducidas por
la clula neoplsica, que reflejan su crecimiento y/o actividad, y permiten conocer la presencia, evolucin
o respuesta teraputica de un tumor maligno.
Esta definicin no implica que los marcadores tumorales sean especficos de cncer ya que la mayora
de ellos son sintetizados tambin por las clulas sanas, de ah que se establezcan valores normales.
La especificidad de los marcadores tumorales, por tanto, no est en su presencia sino en la concentracin
Utilidad clnica: carcinoma hepatocelular, tumores testiculares (no seminomas) y neoplasias del seno
endodrmico.
- Tambin pueden aumentar sus niveles en otras patologas, como diversas enfermedades hepticas y
hepatobiliares, en la ataxia-telangiectasia y en la tirosinemia hereditaria.
funcin es preservar la secrecin de progesterona y la secrecin del cuerpo lteo durante las fases
iniciales del embarazo.
Est constituida por dos subunidades: la subunidad es especfica y presenta actividad biolgica.
La sntesis de -HCG comienza a partir del octavo das tras la ovulacin y presenta un pico mximo a las
272
@AcademiaGoBIR
una glucoprotena presente en las estructuras derivadas de los conductos de Mller (trompa de
Falopio, endocrvix y fondo vaginal) y mesotelios (pleura, pericardio y peritoneo).
Utilidad clnica: carcinomas ovricos, aunque tambin aumenta en el carcinoma de endometrio o en las
neoplasias pulmonares.
- Tambin pueden aumentar sus niveles en hepatopatas, insuficiencia renal y en los derrames serosos.
Es
un marcador de sensibilidad y especificidad variable: en los estadios iniciales del tumor sus niveles
sricos son indistinguibles de los de pacientes sanos: sin embargo, en los estadios avanzados de la
enfermedad las concentraciones de este marcador permiten asegurar que se trata de un tumor maligno.
- Tambin pueden aumentar sus niveles en hepatopatas, insuficiencia renal y en enfermedad de Crohn.
Es un marcador de sensibilidad y especificidad variable.
Utilidad clnica: neoplasias ovricas, especialmente en los tumores no mucinosos. Se puede elevar en
PSA es una enzima perteneciente a las calicrenas glandulares y es una sern-proteasa que acta
fluidificando el lquido seminal. Es sintetizado por la glndula prosttica.
Es considerado como un marcador tumoral especfico de la prstata, aunque tambin est presente
en concentraciones bajas en estructuras glandulares de tejido principalmente neoplsico y en quistes
mamarios, leche o lquido amnitico.
Se consideran normales concentraciones <4ng/mL.
273
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039
k) HER 2/NEU
Es un oncogn localizado en el cromosoma 17, que codifica una protena transmembrana perteneciente
l) Calcitonina
clnica: diagnstico y seguimiento del cncer medular de tiroides. Tambin aumentan sus
niveles de forma discreta en algunos tumores neuroendrocrinos (cncer de pulmn de clulas pequeas).
m) Tiroglobulina
Es una glucoprotena dimrica. Es la protena predominante en el tiroides y almacena el 80% del yodo
del organismo.
Utilidad
clnica: seguimiento del cncer diferenciado de tiroides. Utilidad para la deteccin de masa
tumoral residual despus de una ciruga.
Tambin
274
@AcademiaGoBIR
275
Paseo de la Habana 9-11, Madrid. 911 610 039