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Tubos falcon de 15 y 50 mL
Micropipetas
Balanza
Esptula
Vortex
Espectrofotmetro
REACTIVOS.Etanol
Vitamina C
CAPE
MUESTRA.Jugos
PROCEDIMIENTOS
Procedimiento:
1.- Preparar una solucin de DPPH 300M (6.0 mg de DPPH en 50 mL de
etanol).
2.- Preparar las siguientes concentraciones de las muestras: 140, 70, 35, 17.5
g/mL en etanol.
3.- Mezclar en un tubo eppendorf de 1.5 mL 600l de DPPH 300M y 600l de
las muestras a probar. (Por triplicado). La mezcla que contenga solo DPPH y
etanol (estndar) representar el 100% de absorbancia o 0% de actividad
antioxidante.
NOTA: NO OLVIDE LOS CONTROLES EN SU EXPERIMENTO
4.-Normalizar frente a ETOH 96 %.
5.- Mezclar e incubar por 30 minutos al resguardo de la luz.
6.- Medir la Absorbancia a 517 nm contra un blanco de etanol absoluto
CALCULOS:
Absorbancia de la
muestra
= % de inhibicin de la muestra
SOLUCION
2X (M)
1X (M)
Vol. de stock
3.6 mg /mL
Vol. de etanol
96%
140
70
22.2 l
3577.8 l
70
35
1800 l
1800 l
35
17.5
1800 l
1800 l
17.5
8.75
1800 l
1800 l
RESULTADOS
Nos dieron absorbancias negativas
DISCUSIN DE RESULTADOS
No nos pueden dar absorbancias negativas, el valor mnimo es cero, que indica
que no se absorbi luz, es decir, la luz incidente es igual a la transmitida; y el
valor mximo es 1, donde todo se absorbi, y nada se transmiti.
Actividades
Actividades
1. Genere una revisin bibliogrfica acerca de las principales molculas con
actividad antioxidante que se han trabajado durante los aos 2000-2014
(www.pubmed.com).
Teniendo en cuenta la propiedad de los antioxidantes de inhibir o controlar las
reacciones en cadena de los radicales libres, es de esperarse que esta clase de
molculas sean constante y ampliamente estudiadas, para hacer referencia a
este hecho se revisaron dos artculos el primero publicado en el ao 2010 y el
segundo en el ao 2010, a continuacin podremos ver brevemente de qu trata
cada uno de ellos.
I)
II)
Phenylcoumaran
Benzylic
Ether
Reductase
Prevents
Accumulation of Compounds Formed under Oxidative Conditions
in Poplar Xylem.
Radical libre
Los radicales libres (especies reactivas de oxigeno), son tomos, por lo
general de oxgeno, de una gran inestabilidad, reactividad y actividad biolgica
que actan como oxidantes.
La inestabilidad de los radicales libres se debe a que han perdido uno de sus
electrones e intentan reponerlo tomndolo de otros tomos, buscando
estabilizarse robndole un electrn a molculas estables cercanas.
La molcula agredida se oxida deja de cumplir su funcin y se transforma en
un nuevo radical libre. Se desata una reaccin en cadena donde cada nuevo
radical libre roba un electrn a otra molcula, pudiendo daar las clulas.
CONCLUSIN
Los resultados no fueron los esperados, debido a que las absorbancias nos dieron
negativas.
BIBLIOGRAFA
http://jupiter.utm.mx/~tesis_dig/10150.pdf