Espectroscopia de absoro e fluorescncia

Yago da Silva Santos

Lucas Dadalt

1. Resumo.

Nesse experimento observamos e analisamos qualitativamente um equipamento de

espectroscopia de fluorescncia e analisamos os resultados de um equipamento de
espectroscopia de absoro.
2. Procedimento experimental

2.2 Espectrmetro de absoro.

Colocamos no equipamento de espectroscopia de absoro amostras de acridina laranja e azul

de metileno com concentraes diferentes, cinco delas. Alm dos dois compostos colocamos
tambm duas misturas dos mesmos com concentraes desconhecidas e tambm agua tnica.
A nico parmetro que mudamos no equipamento para cada composto era o comprimento de
onda. Foi realizada a varredura de cada composto e os dados foram salvos em uma pen drive
em formato .xlsx.
2.3 Espectroscopia de fluorescncia.

Realizamos a excitao e a leitura da emisso de uma amostra de acridina laranja, agua tnica
e azul de metileno. Isso foi feito em um equipamento que muito antigo, por isso os nicos
resultados que temos so fotos dos espectros que so plotados na tela dele.
3. Resultados

3.1 Espectroscopia de absoro.

3.1.1 Acridina Laranja.

Os dados das leituras de absoro das amostras esto na planilha que segue junto com esse
relatrio pois so muito extensos. As leituras das vrias concentraes de acridina laranja
segue no grfico a seguir.

Acridina Laranja

0,9
0,8
0,7

0,4

Absorbancia

0,6
0,5

0,3

0,2

0,1
400
406
412
418
424
430
436
442
448
454
460
466
472
478
484
490
496
502
508
514
520
526
532
538
544
550

Comprimento de onda [nm]

Grfico 1 - Absoro das Acridinas Laranjas.

Agora construmos uma tabela com o valor mximo de absoro para cada concentrao que
no caso da acridina laranja est no comprimento de onda de 490 nm.
Acridina Laranja
Soluo Concentrao [mol/L] Absorbancia Mxima
1
3,14E-05
0,959
2
2,80E-05
0,886
3
1,78E-06
0,476
4
1,26E-05
0,384
5
6,76E-06
0,216
Tabela 1- picos de absoro da al

Com esses dados construmos o seguinte o grfico a seguir onde sua regresso linear nos d o
valor da absortividade molar do composto.

Absorbncia Mxima

1,200

Absorbncia

1,000
0,800
0,600
0,400
0,200
0,000
0,00E+00

5,00E-06

1,00E-05

1,50E-05

2,00E-05

Concentrao [mol/L)

2,50E-05

3,00E-05

3,50E-05

Tabela 2 - absorbncia mxima x concentrao

Nesse caso o valor da absortividade foi de 2,21E+04 [L Mol^-1 cm^-1].

3.1.2 Azul de Metileno.

O mesmo foi feito para o azul de metileno. Segue o grfico com a leitura das diferentes
concentraes.

1,600

Azul de Metileno

1,400
1,000

0,800

0,600

0,400

0,200

0,000

400,00
414,00
428,00
442,00
456,00
470,00
484,00
498,00
512,00
526,00
540,00
554,00
568,00
582,00
596,00
610,00
624,00
638,00
652,00
666,00
680,00
694,00
708,00
722,00
736,00
750,00

Absorbancia

1,200

Comprimento de onda [nm]

Grfico 2 - espectro de absoro do azul de metileno

Azul de Metileno
Soluo Concentrao [mol/L] Absorbncia Mxima
1
1,57E-05
1,343
2
1,10E-05
0,811

3
4
5

9,08E-06
6,10E-06
3,27E-06

0,595
0,435
0,226

Tabela 3 - picos de absoro do azul de metileno

Absorbncia Mxima

1,600
1,400

Absorbncia

1,200
1,000
0,800
0,600
0,400
0,200

0,000
0,00E+00 2,00E-06 4,00E-06 6,00E-06 8,00E-06 1,00E-05 1,20E-05 1,40E-05 1,60E-05 1,80E-05

Concentrao [mol/L)
Grfico 3

A absortividade molar do azul de metileno encontrada foi 8,89E+04 [L Mol^-1 cm^-1].

3.1.3 Misturas.

Para as misturas temos o grfico:

1,6
1,4

Absorbancia

1,2
1

0,8

Mistura 1

0,6

Mistura 2

0,4
0,2
400
414
428
442
456
470
484
498
512
526
540
554
568
582
596
610
624
638
652
666
680
694
708
722
736

Comprimento de onda [nm]

Grfico 4

Como existem dos componentes na mistura temos dois picos no espectro, anotamos em uma
tabela a absorbncia em cada um dos picos.

Absorbncia
Comp. de onda

Mistura 1
Pico 1
1,549
491

Pico 2
0,766
664

Mistura 2
Pico 1
Absorbncia
0,092
Comp. de onda
491

Tabela 4

Pico 2
0,214
664

Pelos comprimentos de ondas j sabemos quais so os picos de cada componente daa mistura
e usando a lei de Lambert-Berr calculamos a concentrao de cada uma nas duas misturas.

(Lei de Lambert-Berr)

Onde A a absorbncia psilon a absortividade molar b a distncia que no nosso caso de um

cm e c a concentrao.

Mistura 1
Mistura 2

Acridina Laranja
Absorbncia
Absortividade
1,549
2,21E+04
0,092
2,21E+04

Concentrao
7,02E-05
4,17E-06

Mistura 1
Mistura 2

Azul de Metileno
Absorbncia
Absortividade
0,766
8,89E+04
0,214
8,89E+04

Concentrao
8,62E-06
2,41E-06

3.2 Espectroscopia de fluorescncia.

Tabela 5

No conseguimos salvar nenhum dado desse experimento por isso essa parte apenas
qualitativa e tivemos a seguinte concluso.

Pela Lei de Stokes e sabendo que a emisso de luz se d pela excitao de eltrons nas
molculas dos compostos, temos que a luz emitida ter (na maioria das vezes) um
comprimento de onda maior que a luz absorvida, envolvendo assim o resultado da absoro
de energia radiante e emisso de parte desta energia na forma de luz de baixa energia.
4. Concluso.

Nesse experimento conseguimos trabalhar bem com os dados obtidos do equipamento de

espectroscopia de absoro, usamos a lei de Lambert-Berr, que a mais importante quando
estamos falando do assunto, para calcular a absortividade e a concentrao de substancias.
Alm de conseguir intender o conceito da espectroscopia de fluorescncia, embora no
trabalhamos com dados nesse assunto.