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Objetivos
Conocer algunos tipos de siembra, empleados en la microbiologa as
como, aprender a hacer siembra de microorganismos en medio
slido.
Marco terico
Para el presente laboratorio, la base terica que se detalla a continuacin
fue de vital importancia para la mejor comprensin de la prctica.
Lactobacillus acidophilus
Es una bacteria del gnero Lactobacillus. El trmino Lactobacillus es la unin
de un prefijo y una raz: lacto que significa leche y bacillus que quiere decir
en forma de barra o vara. Por otro lado, acidophilus quiere decir con afinidad
por los cidos. Esta bacteria crece, fcilmente, en medios mucho ms cidos
que los ideales para otros microorganismos (pH 4-5 o menores) y crece en
condiciones ptimas a unos 45 C.
Agar
Es una sustancia gelatinosa derivada de algas marinas este medio de
cultivo es un polisacrido sin ramificaciones obtenido de la pared celular de
varias especies de algas rojas de los gneros Gelidium, Euchema y
Gracilaria entre otros actuando como pigmento que da un color
caracterstico a cada una. El agar qumicamente es un polmero de
subunidades de galactosa; en realidad es una mezcla heterognea de dos
clases de polisacridos: agaropectina y agarosa.
El agar nutritivo es usado como medio de cultivo para el crecimiento de
bacterias y hongos, pero no para virus (aunque los virus bacterifagos
crecen frecuentemente en bacterias cultivadas en agar).
Medios selectivos
Los medios de agar selectivos son utilizados para aplicar una presin
selectiva a los organismos que crecen en ellos, por ejemplo para seleccionar
solamente bacterias gram-negativas se usa el agar Mac Conkey, que a su
vez tiene un colorante que indica si la bacteria es fermentadora de lactosa o
no.
Observaciones y discusiones
Siembra en tubos de ensayo por estras
Se procedi a realizar la siembra de las bacterias acidolcticas (lactobacilus)
producto de fermentacin de vegetales. Se tom un asa, la cual se esteriliz
con calor del mechero hasta que estuviese al rojo vivo, posteriormente se
tom la muestra de lactobacilus de un tubo de ensayo sumergiendo en este
el asa de siembra, flameando el tubo para evitar potencial contaminacin.
Se sembr la bacteria en un medio de cultivo MRS de superficie inclinada en
forma estrillada; este procedimiento se repiti dos veces ms.
Siembra en placas por estras
La siembra se realiz en placas que contenan el mismo medio de cultivo
con la diferencia en que estas eran en esta ocasin en placas planas, el
procedimiento de esterilizacin del asa de siembra y toma de la muestra es
el mismo; la diferencia radica en el momento en que se realizar la siembra,
se realizaron los rallados que muestra la gua de laboratorio con la
diferencia que se realizaron cuatro tipos de rallado; obteniendo en el ltimo
un cultivo puro, debido a que las colonias aislada que se tenan en el cuarto
rallado solo pueden proliferarse de un solo tipo de bacterias.
Pasadas 48 horas en cultivo, se observ un crecimiento bacteriano bastante
satisfactorio tanto en los tubos de ensayo como en las placas, debido a
simple vista se apreciaba dicho crecimiento y como la teora lo dice que la
nica manera de observar microorganismos es mediante el gran
crecimiento y proliferacin de los mismos.
Nota: para poder lograr una siembra bacteriana libre de contaminacin o al
realizar cualquier trabajo de microbiologa, se debe tener las manos limpias
y el radio de trabajo en que se realiza la siembra es de aproximadamente 20
cm de la flama para que se pueda mantener el medio de esterilidad tanto
del asa como de la muestra.