Introduccin

La microscopa es una tcnica utilizada para producir imgenes de

estructuras o detalles que no se pueden visualizar a simple vista. Esta tcnica es
empleada

gracias

al

microscopio. Actualmente

existen

varios

tipos

de

microscopios, los cuales han ido evolucionando a travs de la Historia.

En la dcada de 1930 Frits Zernike, despus de varias investigaciones
logr desarrollar el microscopio de contraste de fases, el cual permita observar
clulas vivas y especmenes transparentes sin necesidad de ser coloreados. En el
presente trabajo se podr encontrar informacin sobre la microscopa de contraste
de fases, su utilidad, ventajas y desventajas, entre otras cosas, con el fin de
fortalecer el conocimiento del lector a cerca de dicho tema.

Qu es la Microscopa de Contraste de Fases?

La microscopia de contraste de fases es una tcnica ptica de mejora del
contraste. Permite observar muestras vivas sin que previamente haya que
matarlas, fijarlas y teirlas. As, la dinmica de los procesos biolgicos se
puede observar y grabar con elevado contraste y los pequeos detalles de
la muestra se ven con gran claridad. Se basa en el hecho de que cuando
interfieren ondas
interferencia

que

tienen

constructiva

(con

un

determinado

desfase

se produce

una

mayor amplitud) o destructiva (con menor

amplitud).

Para qu se utiliza?
Se usa principalmente para aumentar el contraste entre las partes claras y
oscuras de especmenes transparentes (Figura 1), tales como las clulas vivas
(por lo general en cultivo), los microorganismos, rodajas de tejido delgadas , los
patrones litogrficos, fibras, dispersiones de ltex, fragmentos de vidrio, y
partculas subcelulares (incluyendo ncleos y otros orgnulos).

Figura 1-.Micrografas de fibras de ltex (A, B y C) con sus respectivas imgenes

con aumento de contraste (a, b y c)

Historia
Frits Zernike (Figura 2), un fsico y matemtico
holands, construy el primer microscopio de contraste de
fase en 1938.
Tom un poco de tiempo antes de que la comunidad
cientfica reconociera el potencial del descubrimiento de
Zernike; gan el Premio Nobel en 1953 y la compaa con
sede

en

Alemania

Zeiss

comenz

fabricar

su

microscopio de contraste de fase durante la Segunda

Guerra Mundial.

Figura 2-. Frits Zernike

Zernike experiment con la velocidad de la trayectoria de la luz dirigida sobre

una muestra; descubri patrones de interferencia que resulta en la imagen que
aparece ms oscuro o ms claro.

l desarroll un sistema que utiliza anillos o anillos, colocados en la lente y

bajo el condensador inferior de un microscopio compuesto, para causar
interferencias en los patrones de luz. Zernike manipulado los anillos y fuente de
luz, en ltima instancia, la reduccin de la longitud de onda de la luz por una fase
de .

En esencia, el enfoque de Zernike y ajustes a la iluminacin cambian la forma

en que usamos los microscopios y ver los especmenes.

Aplicaciones En Biologa
La Microscopa de contraste de fase es particularmente importante en la
biologa, ya que revela muchas estructuras celulares que no son visibles con un
microscopio de campo claro ms simple. Estas estructuras se hicieron visibles
para microscopistas anteriores por tincin. Esta preparacin adicional requerida
que caus la muerte de las clulas. El microscopio de contraste de fase ha
permitido a los bilogos para estudiar las clulas vivas y la forma en que proliferan
a travs de la divisin celular.
Los especmenes que se pueden observar y estudiados incluyen
microorganismos vivos, como los protozoos, los eritrocitos, bacterias, mohos y
espermatozoides, rebanadas delgadas de tejido, patrones litogrficas, fibras,
fragmentos de vidrio y partculas subcelulares tales como los ncleos y organelos.

Figura 3-. Micrografas de algunos microorganismos con contraste de fases

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Ventajas

Las ventajas del microscopio de contraste de fase incluyen:

La capacidad para observar las clulas vivas y, como tal, la capacidad para
examinar las clulas en un estado natural

Observando un organismo vivo en su estado natural y / o el medio ambiente

puede proporcionar mucha ms informacin que las muestras que deben ser
asesinados, fijo o mancha para ver bajo el microscopio

Las imgenes son de alto contraste.

Ideal para el estudio e interpretacin de muestras delgadas

Capacidad de combinar con otros medios de observacin, tales como

fluorescencia

Desventajas

Los anillos o anillos limitan la abertura en cierta medida, lo que disminuye la

resolucin

Este mtodo de observacin no es ideal para los organismos o partculas

gruesas porque pueden aparecer distorsionados

Las imgenes pueden aparecer de color gris o verde, si se utilizan luces

blancas o verdes, respectivamente, lo que resulta en malas fotomicrografa
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Cmo se diferencia el microscopio de contraste de fases de

otros microscopios?
El Microscopio de contraste de fases se diferencia de los otros microscopios
porque contiene:

El Diafragma anular en el Condensador: Este consta de un anillo

transparente con la parte central oscurecida y que forma un cono de luz
hueco como el del microscopio de campo oscuro.(Figura 4)

Placa de Difraccin o Placa de Fase: ubicado dentro del tubo del sistema
de lentes objetivos, la cual consta de un anillo ranurado a manera de disco
(Figura 4).

luz difractada

Figura 4-. Diafragma anular (o anillo del condensador), Anillo de fase

(o placa de fase) y su ubicacin en el microscopio.