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PROYECTO DE INVESTIGACIN
ASESOR
LUGAR DE EJECUCIN
DURACIN
}
I.
EL PROBLEMA
II.
JUSTIFICACION
El trabajo a realizar servira de base para poder investigar otras especies vegetales
similares.
4
III.
3.1
OBJETIVOS
Objetivo General.
Caracterizar
fisicoqumicamente
fitoquimicamente
la
hoja
de
3.2
Objetivos especficos.
IV.
4.1 Antecedentes:
MARCO TERICO
5
MURILLO et al., 2007, se evalu la actividad antioxidante de los extractos
etanolicos y acuosos de la corteza y hoja (EC, EH, AC, AH) de Bauhinia kalbreyeri
Harms, midiendo su capacidad de captacin de radicales libres utilizando el mtodo
del 1,1 defenil- 2- picrihidrazil (DPPH), encontrndose una actividad secuestrante del
radical DPPH mayor a 90% a una concentracin de 40 g/ml; y un IC 50 de 18.75 g/ml,
18.42 g/ml, 27 g/ml, 28.30 g/ml respectivamente.
MELCHOR et al., 2002, evalu la actividad antioxidante del t verde (Camellia
sinensis), a diferentes tiempos de blanqueo (15, 30, 45, 60 seg.), obtuvo valores de
83.61%, 86.32%, 83.36% y 85.08% respectivamente todos a la concentracin de 100
g/ml, con un IC50 de 47.59 g/ml, 47.47 g/ml, 47.12 g/ml, 46.39 g/ml
respectivamente.
GAVIRIA et al., 2007, extrajo el pigmento de Attalea butyracea y evalu su
capacidad atrapadora de radicales DPPH, encontrndose un IC50 de 141.4 g/ml.
6
de las grasas y los cambios de color (SIES, 1997). Deben estar presentes en el
organismo en una concentracin suficiente que permita prevenir la acumulacin
de elementos pro-oxidantes (HALLIWELL y GUTTERIDGE, 1985).
B. Radicales libres.
ANDERSON y PHILLIPS (2001) mencionan que cualquier molcula
o tomo que contiene uno o ms electrones desapareados es un radical libre;
por lo tanto, los radicales libres intentaran arrancar un electrn de otra molcula
y en este proceso rompen otras parejas de electrones para conseguir su propio
apareamiento creando as molculas inestables generndose una reaccin en
cadena.
Los procesos de oxidacin producen radicales libres que pueden
interferir en los procesos normales y daar las clulas corporales causando
7
estrs oxidativo. El estrs oxidativo, se define como el desbalance entre la
produccin de radicales libres y la cantidad de antioxidantes presentes en el
ambiente intracelular, (ELEJALDE, 2001 e INOE et al., 2001). Muchas
sustancias txicas son capaces de producir radicales libres y de disminuir
nuestra defensa antioxidante (MURILLO, 2006).
8
obtenidos por algunos investigadores indican que la reaccin con el radical
ABTS+ no se completa hasta pasado 1 minuto (KUSKOSKI et al., 2005).
C. Alimento funcional.
Se podra definir como cualquier alimento en forma natural o
procesada, que adems de sus componentes nutritivo contiene componentes
adicionales que favorecen la salud, capacidad fsica y el estado mental de la
persona (CHASQUIBOL, 2003).
Un alimento funcional es el que tiene una apariencia similar a la de
un alimento convencional, se consume como parte de una dieta normal y
adems de su funcin nutritiva bsica, se ha demostrado que presenta
propiedades fisiolgicamente beneficiosas y/o reduce el riesgo de
enfermedades crnicas (MAZZA, 2000).
V.
HIPOTESIS
contraer
9
En la hoja de Cashahuasca se puede determinar la composicin fisicoqumica,
fitoqumica, determinar la actividad antioxidante de los extractos acuosos y etanlicos
y elaborar una bebida funcional.
VI.
MATERIALES Y MTODOS
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6.1 Lugar de ejecucin.
El presente trabajo se realizar en la Universidad Nacional Agraria de la
Selva, situado en la ciudad de Tingo Mara, provincia de Leoncio Prado, regin
Hunuco, con una temperatura entre 17 C Y 32 C, con 82% de HR. Se
trabajar en los ambientes del Centro de Investigacin para el Desarrollo
Biotecnolgico de la Amazona - CIDBAM, Centro de Investigacion de
Productos Naturales de la Amazonia - CIPNA; Laboratorio de anlisis de
alimentos, Laboratorio de Anlisis Sensorial.
11
Secador cilndrico.
Potencimetro.
Refractmetro.
Lmpara UV.
Campana extractora.
Colormetro.
12
13
Se utilizar pruebas de degustacin utilizando el mtodo
indicado por (UREA, 1999).
b. Caracterizacin fisicoqumica.
14
6.5.3 Preparacin de los extractos acuosos y etanlicos de la hoja.
Se realizara la preparacin de los extracto acuosos y etanlicos,
una vez obtenida la hoja de cashahuasca en el laboratorio, estas fueron
lavadas y separadas de acuerdo a la edad de las hojas (joven, intermedia
vieja), se secara en una estufa con sistema de ventilacin, para ser molidos
con la finalidad de obtener una mejor extraccin.
En el extracto acuoso se proceder a tomar 5 g de cada edad
de las hojas y a cada una de ellas se adicionara 50ml de agua destilada para
someterlo a bao mara a una temperatura de 60C por 15 minutos, se filtrara y
se obtendr una primera concentracin la cual se separada en microtubos para
ser sometido a centrifugacin a una velocidad de 10,000 rpm durante 5 minutos
a una temperatura de 4C. A partir de esta concentracin se prepararon las
dems concentraciones.
En el extracto etanlico se proceder a tomar 5 g de cada edad
de las hojas y a cada una de ellas se adicionara 50ml de etanol al 96% para
dejarlo macerar por un periodo de 48 horas, se filtrara y se obtendr una
primera concentracin la cual se separada en microtubos para ser sometido a
centrifugacin a una velocidad de 10,000 rpm durante 5 minutos a una
temperatura de 4C. A partir de esta concentracin se prepararon las dems
concentraciones.
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diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH) y Capacidad de inhibir el catin 2,2-azinobis
(3-etilbenzotiazoline 6 cido sulfnico) (ABTS +), se evaluara en extracto
acuoso y etanolico (70%), teniendo en cuenta la edad de la planta.
LAVADO
ESCURRIDO
SECADO
MOLIENDA
16
PESADO
CORTADO
AGUA
COCCION
FILTRADO
ENVASADO
SELLADO
ENFRIADO
ALMACENAMIENTO
17
VII.
DISEO EXPERIMENTAL
HOJA
18
T1
T2
T3
Caracterstica
fisicoqumica
Dnde:
HOJA
T1
E1
T2
E2
E1
T3
E2
E1
E2
19
C.A
Dnde:
R1 (ES/A)
R2 (ES/A)
Dnde:
R3 (ES/A)
20
VIII.
ANALISIS ESTADISTICO
Dnde:
21
Y ij
= Medio Poblacional
Ti
= Es el efecto de la i - esimo de tratamiento: diferentes edades de
la hoja.
Eij = Error experimental
Dnde:
Y ij
= Medio Poblacional
Ai
Bj
= Error experimental.
22
8.3. Elaboracin de la bebida funcional.
Los resultados del diseo experimental (Figura 4), para la elaboracin de
la bebida funcional, a travs de la evaluacin sensorial (olor, color y sabor)
mediante el anlisis afectivo medida de grado de satisfaccin (UREA, 1999);
sern analizados con el diseo completo al azar (DCA) con tres repeticiones
(DE MENDIBURU, 2007).
Y ij =+T i+ E ij
Dnde:
Y ij
Ti
extracto seleccionado.
Eij = Error experimental
El anlisis estadstico de los datos se realizara mediante el programa
STATGRAPHICS Plus versin 5.1, 2004 Statistical Graphics Corp.
23
IX.
ASPECTOS ADMINISTRATIVOS
A. Cronograma de actividades:
Cuadro
1:
Cronograma
de
actividades
para
la
caracterizar
Meses
ACTIVIDADES
Revisin de Literatura
MAY
JUN
JUL
AGO
SET
OCT
NOV
XX
XX
XX
XX
XX
XX
XX
24
Elaboracin del
proyecto y aprobacin
XX
Obtencin de las
muestras y materiales
XX
XX
Anlisis fsico
qumico, capacidad
antioxidante
Evaluacin de la
bebida funcional y
caracterizacin
Anlisis de datos
XXX XXX
XXX
XX
XX
Correcciones e
imprevistos
Presentacin y
sustentacin
XX
XX
X = Una semana
B. Presupuesto:
Cuadro 2: Presupuesto para la caracterizar fisicoqumicamente de la hoja
de Cashahuasca (Cashahuasca Serjania membranacea Splig), evaluar la capacidad
antioxidante de los extractos acuosos, etanolicos y elaborar una bebida funcional.
N Partida Rubro
1.0
Costo
Total S/.
Costo
Rubro S/.
Costo total
partida S/.
1310.00
Bienes
105.00
60.00
20.00
10.00
5.00
10.00
200.00
100.00
5.00
305.00
25
2.0
250.00
550.00
100.00
3200.00
Servicios
400.00
1500.00
500.00
02,40 Electricidad
300.00
500.00
Sub. total
Imprevistos (10%)451.00
TOTAL
X.
4510.00
4961.00
BIBLIOGRAFIA
Chemists)
International;
Agricultural
Chemicals,
Foods,
26
CHASQUIBOL S., LENGUA C., DELMAS I., RIVERA D., BAZAN D.,
AGUIRRE M., BRAVO A., 2003. Alimentos funcionales o fitoquimicos,
en
D.B.C.A.
Aleatorizacin
20(3): 231.
GAVIRIA M. C., CIFUENTES O., MONSALVE G., ROJANO B., 2007.
Actividad antioxidante de extractos metanolicos de Attalea butyracea, Scie,
27
pigments. In: The chemistry of plant pigments. New York: Academic Press.
KUSKOSKI, M.; ASUERO, A.; TRONCOSO, A.; MANCINI-FILHO, J. y
FETT, R. 2005. Aplicacin de Diversos Mtodos Qumicos para Determinar
Actividad Antioxidante en Pulpa de Frutos. Ciencia y Tecnologa de
Techn. 11(27): 23 p.
MURILLO, E. 2006. Actividad Antioxidante In Vitro de las bebidas de
frutas. Universidad de Panam, Instituto de Alimentacin y Nutricin
(IANUT), Laboratorio Bioqumica y Nutricin. Alfa Editores Tcnicos. p 20 -
27.
PELLIGRINI, N.; RE, R.; YANG, M. y RICE-EVANS, C. 1999. Screening of
Dietary Carotenoids and Carotenoid-Rich Fruit Extracts of Antioxidant
Activities Applying 2,2-Azinobis (3-Ethylenebenzothiazoline-6-sulfonic acid)
28
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391.
RODRGUEZ, P. 2001. Radicales libres en la biomedicina y estrs
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VILLANUEVA, J. 2001. Antiocianina, Acido Ascrbico, Polifenoles Totales y
Actividad Antioxidante en la Cscara de Camu Camu (Myrciaria dubia Mc
Vaugh H.B.K.). Tesis para optar el Ttulo de Ingeniero en Industrias
Alimentara. Tingo Mara- Per. Pg. 47.