PRACTICA N 2

CARIOTIPO HUMANO I
INTRODUCCIN
Los cromosomas son las estructuras formadas por la condensacin de la cromatina
durante los procesos de divisin celular. Se tien intensamente con colorantes bsicos
que interaccionan con el DNA. Los cromosomas mitticos humanos cuando estn
duplicados tienen una forma similar a una X. Las cromtidas hermanas se mantienen
unidas por una regin de constriccin primaria llamada centrmero. Su posicin es
variable; si se encuentra en la parte media, los cromosomas son metacntricos; si se
encuentra desplazado hacia un extremo (dando brazos de diferente tamao, p y q),
produce cromosomas submetacntricos; si est cerca del extremo final sern
acrocntricos y si es terminal telocntricos. En el humano existen normalmente
cromosomas de los tres primeros tipos, no existiendo telocntricos, los cuales se observan
en otros organismos, como por ejemplo el ratn.
El cariotipo es el arreglo ordenado de los cromosomas que generalmente se muestra
organizado de acuerdo a su tamao y patrn de bandeo de los mismos en la metafase
mittica. Representa el complemento cromosmico de un individuo de una especie.
El anlisis de las caractersticas de los cromosomas y sus anomalas es el objeto de
estudio de la citogentica humana. Cada cromosoma normal tiene una morfologa y un
tamao constantes.
En la actualidad, el anlisis cromosmico, con una mejora espectacular en su resolucin a
nivel citolgico y genmico, es un procedimiento de importancia creciente en numerosas
reas de la medicina clnica.
Para el anlisis cromosmico sistemtico que se lleva a cabo por motivos clnicos, las
clulas tienen que ser capaces de crecer y dividirse rpidamente. Es posible realizarlo con
una variedad de tejidos, pero el de eleccin es el cultivo de linfocitos de sangre perifrica.
Adems de linfocitos, es posible realizar cultivos (ms laboriosos) de fibroblastos
drmicos, de clulas exfoliadas de mucosas, de clulas fetales presentes en el lquido
amnitico y otras. Se pueden efectuar preparaciones directas (sin cultivo) de clulas de
mdula sea obtenidas por puncin; aunque la calidad de estas preparaciones es menor
que las de los cultivos, tienen la ventaja de ser analizables el mismo da de la toma de la
muestra.
La clasificacin bsica de los cromosomas humanos en metafase fue derivada de
conferencias en Denver (1960), Londres (1963) y Chicago (1966). Se acord numerar los
autosomas en pares del 1 al 22 de acuerdo al tamao decreciente y posicin del

centrmero principalmente. Los 22 pares de autosomas se dividen en 7 grupos (A-G) los

cuales son fcilmente distinguibles con tinciones comunes. Los cromosomas sexuales
fueron designados X e Y.
El bandeo cromosmico contribuye a identificar los cromosomas individuales y las
anomalas estructurales de los cromosomas. Las tcnicas de bandeo incluyen el bandeo de
quinacrina, Giemsa, invertido, C y NOR. El bandeo de alta resolucin, utilizando
cromosomas en profase o en prometafase, aumenta el nmero de bandas observables.

Los grupos que comprende el cariotipo humano son los siguientes:

CROMOSOMAS GRANDES
Grupo A, (cromosomas 1,2 y 3), metacntricos 1 y 3, submetacntrico el 2
Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacntricos
CROMOSOMAS MEDIANOS
Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y adems los cromosomas X), submetacntricos
Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocntricos
CROMOSOMAS PEQUEOS
Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) el 16 metacntrico, el 17 y el 18 submetacntricos
Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacntricos
Grupo G, (cromosomas 21, 22 e Y) acrocntricos

Por acuerdo los cromosomas sexuales X e Y se separan de sus grupos correspondientes y

se colocan juntos aparte al final del cariotipo.

OBJETIVOS
1. Explicar los fundamentos en que se basa la tcnica del cultivo de linfocitos y el
bandeo Giemsa (bandeo G).
2. Reconocer los cromosomas humanos en preparados citolgicos y elaborar un
cariotipo a partir de una fotografa.

MATERIAL Y MTODO
Materiales
Ampliaciones de fotografas de cromosomas humanos en metafase, teidos
con Giemsa (bandeo G).
Goma.
Tijeras.
Regla graduada en milmetros.
Luna de aumento.
Hilo pabilo 0.5 m
Calculadora
Lminas y videos acerca de tcnica de cultivo de linfocitos y cariotipo.

Mtodo
1. Contar los cromosomas de la ampliacin fotogrfica y recortar el contorno de
cada uno de ellos.
2. Medir las longitudes de brazos largos y cortos y la longitud total de los
cromosomas y registrar los datos.
3. Ordenar los cromosomas por tamaos en una tabla, caracterizando los
cromosomas humanos en M: metacntrico, SM submetacntrico y A: acrocntrico;
considerar como referencia los valores medios de las dimensiones de los brazos
del cuadro adjunto.
4. Realizar la identificacin de los pares cromosmicos por su patrn de bandas G
mostrado por modelo adjunto.
5. Representar el cariotipo colocando los cromosomas manteniendo los centrmeros
en una misma lnea, los autosomas en orden decreciente de tamao y los
cromosomas sexuales en el extremo inferior derecho.

METODO PARA EL CARIOGRAMA DE BANDAS G

1.

Ponga un cuadrado alrededor de los cromosomas G (acrocntricos

pequeos)
La pareja con banda solo en el centrmetro es el 22

El ms pequeo, fuertemente bandeado es el 21

2.

Ponga un tringulo alrededor del grupo F (los metacntricos pequeitos)

El que tiene banda en el centrmetro, es el 19
La pareja ms oscura es la 20

3.

Encuentre los cromosomas E

El 16, es casi centromrico y tiene un centrmero muy oscuro y
frecuentemente una banda dbil ms abajo.
El 17, parece remojado en pintura, el 1/3 distal del brazo largo es oscuro.
El 18, tiene una banda de la cintura y una banda distal en el brazo lago.

4.

Ponga un crculo alrededor de los cromosomas D (acrocntricos grandes)

El que tiene 2 bandas marcadas en la zona distal (frecuentemente se ven
como 1) es el 13.
El 14, tiene 2 bandas, una la cadera y la otra casi en el extremos del brazo.
El 15, tiene 2 bandas, una que a veces no se ve. Tiene una banda marcada
casi en el centro del q, y una banda casi terminal (que no siempre se ve)

5.

Encontrar el grupo A por morfologa (son los ms grandes y

metacntricos)
El 1 se ve as.
El 2, as
El 3 se presenta como imagen en espejo entre los 2 brazos. El brazo ms
corto es el p.

METODO PARA EL CARIOGRAMA D E BANDAS G

6.

Encuentre el grupo B (submetacntricos)

El 4, tiene una banda marcada en la cadera que le da apariencia cuadrada
El 5, tiene una banda oscura en el brazo q que termina abruptamente de modo
que da la apariencia a un dicntrico en algunas preparaciones.

7.

Los dems cromosomas son los sexuales y los del grupo C

El Y, si hay un Y, es un poco ms grande que los Gs, y se colorea ms en el
centrmero y los brazos cortos. Tiene una banda en el banda q, que se extiende
desde 1/3 a 2/3 del cromosoma.
El 6, es el C ms grande y tiene una zona sin colorear caracterstica en el brazo p (y
3 bandas delgadas en q)

El 7, tiene una banda terminal en p, ms oscura que la del #6 y a regin

Centroamrica p no se colora como en este, no hay zona sin coloracin. Hay dos
bandas oscuras en q.
El 8, es el submetacntrico ms grande de los C. es el nico que tiene 2 bandas en
el centro de los brazos p.

El 9, tiene una constriccin secundaria y la vez parece ser 2 cromosomas. Su brazo

corto, es parecido a un 21, y los largos tienen 2 bandas gruesas.

El 11, tiene una banda marcada en p y q, y es meacntrico en comparacin con el

12.
El 12, tiene bandas similares al 11, pero es submetacntrico

El #10, es tambin submetacntrico pero con una banda marcada en la cadera.

El X es casi metacntrico y el tamao intermedio entre 6 y 8

Tiene 3 bandas delicadas. La inferior de q no siempre se ve.

La banda del brazo p y la primera del brazo q son equidistantes.

CARIOTIPO CON BANDEO G

TAREAS A REALIZAR
1. Construir el cariotipo del individuo a quien pertenece la fotografa propuesta.
Anote la frmula cromosmica correspondiente.

FOTOGRAFA DE CROMOSOMAS EN METAFASE

CARIOTIPO HUMANO

13

14

19

20

15

21

22

10

11

16

17

12

18

2. Realizar un dibujo de su observacin microscpica de lminas con cromosomas.

3. En el siguiente texto que se refiere a la tcnica de cultivo de linfocitos para

cariotipo, llenar los espacios vacos con los trminos que crea conveniente.
Para la realizacin del ------------ se necesitan 1-3 mL de sangre heparinizada.
Tras ello, se realiza la siembra de la sangre perifrica (lo antes posible tras su
extraccin, pero puede obtenerse un crecimiento aceptable hasta 2-3 das
despus de la extraccin). El medio de cultivo donde se siembra la sangre es un
medio que lleva suero fetal de ternera enriquecido y protegido con ------------y------------, al que se le aade ------------------ para estimular el crecimiento
y transformacin de los linfocitos T. Despus de 72 horas de cultivo, se
detiene la divisin celular en metafase aadiendo -------------- (inhibe la
formacin del -------- ------------- y la divisin del --------------).
Posteriormente se aade una ---------- -------------- para que las clulas se
hinchen y se lisen, con lo que los ------------ se liberan y permanecen intactos
los centrmeros, tras ello se fijan los cromosomas para que no se separen y
luego se extienden en portaobjetos. Despus se tien con diversas tcnicas y
entonces estn disponibles para el estudio.

CASO CLNICO A RESOLVER

(Gentica Thompson, pgina 270).

1. Explicar la etiologa (tipos de herencia) e indicar la incidencia de la enfermedad en
diferentes poblaciones.
2. Explicar la patognesis de la enfermedad (fallo en la migracin de clulas de la
cresta neural)
3. Sealar las caractersticas fenotpicas e historia natural de la enfermedad.
4. Mencionar forma de control y tratamiento de la enfermedad
5. Explicar los avances en el diagnstico molecular (mutacin) y el riesgo de
recurrencia.
6. Explicar cmo las mutaciones del gen RET pueden producir tambin neoplasias
endocrinas.