Leonel Messi

Universidad de Barcelona
FACULD DE SALUD
LICENCIATURA DE QUIMICA BIOLOGICA
BACTERIOLOGIA
REPORTE NO. 3
DEMOSTRACION DE CAPSULA BACTERIANA
INTRODUCCION
La cpsula bacteriana es una capa de material viscoso o mucoide. El tamao de
estas cpsulas est influenciado por el medio en el que crece la bacteria. En
algunos casos el grosor de la cpsula es slo una fraccin del dimetro de la
clula, en otros casos la cpsula es mucho mayor que la clula. Las cpsulas
bacterianas son importantes tanto para la bacteria como para otros organismos. A
las bacterias les proporcionan una cubierta protectora y adems sirven de
reservorio de alimento almacenado. Tienen propiedad Antifagocitaria: dificulta o
impide la fagocitosis, lo cual potencia su virulencia ya que favorece la
multiplicacin y facilita la invasin.
Las cpsulas de ciertas bacterias productoras de enfermedades aumentan la
capacidad infectiva de las bacterias. Si la bacteria pierde totalmente su cpsula,
puede perder su virulencia y por lo tanto su capacidad de producir enfermedad.
Sin embargo las cpsulas tiene diversas propiedades como: Induce la produccin
de anticuerpos protectores (esto es til en la produccin de algunas vacunas) y
permite la diferenciacin de tipos serolgicos dentro de la misma especie.
Algunos ejemplos de bacterias productoras de cpsulas son: neumococos,
Klebsiella., aunque tambin puede estar presente en bacterias Gram positivas y
Gram negativas

MATERIALES Y REACTIVOS

Portaobjetos

Muestras bacterianas

Microscopios

Aceite de inmersin

Soporte de Tinciones

Goteros

Gradillas para tincin

Agua destilada

Colorantes para Tincin

Tinta china

Fucsina

Solucin salina

Cristal Violeta

Klebsiella pneumoniae

TCNICA DE NOVELLI MODIFICADA

Algunas bacterias son capaces de formar por fuera de la pared celular, una
envoltura polimrica llamada cpsula que las protege de la fagocitosis e interviene
en fenmenos de adherencia a diversos sustratos. Pueden encontrarse cpsulas
de variada composicin qumica: polmeros de glucosa y cido glucurnico
(Streptococcus), polmeros de cido D-glutmico (Bacillus anthracis) y polmeros
mixtos de protenas y carbohidratos (Bacillus megaterium).

RESULTADOS
Las cpsulas pueden observarse como un halo alrededor de las bacterias cuando
se realizan tinciones negativas con tinta china pero pueden
colorearse
especficamente. La tcnica de Novelli, utiliza un colorante especfico para las
cpsulas glucdicas que es el Azul Alcin. Para teir la bacteria se utiliza fucsina.
Se vern bacterias teidas de rojo rodeadas de la zona capsular azul.

TCNICA CON TINTA CHINA EN FRESCO

La sustancia utilizada para la tincin negativa es un material opaco que no tiene
afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente rodea las clulas, tal
como la tinta china (que es una suspensin de partculas de carbono coloidal) o la
nigrosina (un colorante negro insoluble en agua). La tincin negativa es un modo
satisfactorio de aumentar el contraste de las clulas en la microscopia ptica, pero
su mxima utilidad est en revelar la presencia de cpsulas alrededor de las
clulas bacterianas.

RESULTADOS
La tinta china o Nigrosina permite observar clulas levaduriformes capsuladas
(Cryptococcus), sobre todo en LCR. Los polisacridos capsulares rechazan la tinta
china y la cpsula aparece como un halo claro alrededor de los microorganismos.
Azul de metileno de Loeffler puede agregarse a las preparaciones en fresco de
heces para observar la presencia de leucocitos.

OBJETIVO 100 X
ESCASAMENTE
EN
SE
LOGRA
OBSERVAR
LA
CAPSULA,
SE
MUESTRA EN COLOR PALIDO Y
TAMAO DIMINUTO.

MX. FROTE FRESCO

Imagen. 1
OBJETIVO 100 X
SE
OBSERVA
UN
HALO
TRANSPARENTOSO ALREDEDOR DE
LA BACTERIA.
MX. FRESCO SOLUCION SALINA

Imagen. 2

OBJETIVO 100 X
EN
ESTA
IMAGEN
PUEDE
IDENTIFICARSE LA CAPSULA DE
COLOR BLANCO EN CADA UNA DE
LAS BACTERIAS.
MX. FROTE FRESCO
Imagen. 3

OBJETIVO 100 X
EN ESTA IMAGEN SE OBSERVA UN
CONTRASTE DE COLOR OBSCURO
PERO
MUESTRA
UN
HALO
TRANSPARENTE
Y
BRILLANTE
ALREDEDOR DE LA BACTERIA.
MX. FROTE FIJO (tincin china)
Imagen. 4

DISCUSIN DE RESULTADOS

En la prctica de laboratorio se realiz la tcnica de tincin Novelli moidificada y

tincin con tinta china con muestras proporcionadas, luego de observar, estudiar
e identificar la imagen tomada en laboratorio una vez realizadas las tinciones se
logr establecer la presencia de un halo alrededor de las bacterias estudiadas, en
la imagen No. 1 se pueden observar estructuras de color transparente con
apariencia brillante aunque en apariencia tiene una coloracin azulada por el tipo
de colorante, en la imagen No. 2 puede observarse lejanamente estructuras
ovaladas transparentes, en la imagen No. 3 se observa en tamao regular de color
blanco la capsula de la bacteria, en la imagen No. 4 se puede observar de buena
forma el halo formado en todo el contorno de la bacteria esta tiene un contraste de
aspecto brillante.

CONCLUSIONES

Microscpicamente, la tincin con tinta china se utiliza para una fcil

visualizacin de la cpsula en el lquido cefalorraqudeo. Las partculas de
pigmento de tinta no se introducen en la cpsula que rodea la clula de
levadura esfrica, resultando en una zona de aclaramiento o "halo"
alrededor de las clulas, haciendo ms fcil su identificacin.

En las tinciones negativas se utilizan sustancias que no penetran en la

clula y por lo tanto se tie el fondo quedando los microorganismos
incoloros. Normalmente el tamao de las bacterias observadas por esta
tcnica es mayor que el real y no debe utilizarse para la medicin de
microorganismos.Los agentes ms utilizados son la nigrosina y la tinta
china y los microorganismos quedan incluidos en el colorante que forma
una capa relativamente gruesa.

Con las tinciones negativas pueden observarse morfologa y agrupacin as

como tambin estructuras extracelulares como la cpsula.

BIBLIOGRAFIA
Salle, A. J. 1967. Principales Fundamentos de la Bacteriologa. Mc Graw-Hill. N. Y.
Tincin de la capsula bacteriana. 2013. Laboratorio #3. Facultad de ciencias de la
salud.
http://www.unavarra.es/genmic/microclinica/practicas.pdf