FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE PSICOLOGIA

DOCENTE:
Q.F. KELLY IBAES V.

CURSO:
BIOQUIMICA I PRACTICA

ALUMNO:
LOPEZ LOZANO AN KAREN

CICLO:

TRUJILLO-PERU
2015

DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES, ALBUMINA Y

GLOBULINAS

INTRODUCCION
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente
distribuidos en el organismo y esenciales para la vida. Actan como
elementos estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de
enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin, etc.
La protena ms abundante en plasma es la albmina. Una de sus funciones
ms importantes es la de permitir el transporte de cidos grasos, hormonas
esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son insolubles en
medio acuoso.

La concentracin de albmina en plasma influye notablemente en el

mantenimiento de la presin coloidosmtica, lo que estara relacionado con
su relativamente bajo peso molecular y su gran carga neta.
En condiciones patolgicas como prdidas renales, desnutricin, infecciones
prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en
otras como mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y
hemoconcentraciones de diversos orgenes, se observan hiperproteinemias.

En general, ambas situaciones se ven acompaadas tambin por

hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de albmina son ocasionales y
se relacionan casi siempre con deshidratacin que produce el consecuente
aumento en el contenido proteico del plasma.
Objetivos:

Determinar las concentraciones de protenas plasmticas totales y

fraccionadas en estado normal y casos patolgicos.
Determinar la presencia de protenas en orina en casos patolgicos.

Reactivos y equipos

Solucin biuret
Solucin de acido actico al 2%. Solucin de sulfato de sodio al 22.6
%
Bromo cresolsulfon ftalena
Reactivo EDAT(cu 13mM en NaOH 875mM y alquilaril polieter (AAP)
Suero patrn: solucin de albumina y globulinas en estado nativo.
Espectrofotmetro RA -50, cntrifuga, Bao M. Estufa.
Pipetas, vasos de vidrio, embudos, papel filtro, micro- pipetas.
Agujas, alcohol 70, ligadura, algodn. Tubos de ensayo.

PROCEDIMIENTO
Determinacin de Albumina. Mtodo colorimtrico
Fundamento. La albumina reacciona especficamente con la forma
amoniaco de la Bromo cresosulfon Ftaleina (BCF), en presencia de un
exceso de colorante en medio tamponado a PH 3.9 El aumento de
absorbancia a 625 mn respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la
cantidad de albumina presente en la muestra.

Se realiza a extraccin de la muestra Suero en sangre,

de deja en reposo 10 minutos
para luego ser lleva a la centrifuga

En tres tubos de fotocolrimetrico marcados B S D colocar.

Tubos
Estndar
Muestra (Suero)
reactivo

B
3.5ml

S
10ul
3.5ml

Llevar a bao mara 47c x 10 minutos

Llevar a espectrofotmetro 625 nm o fotocolirimetrico.

D
10ul
3.5ml

DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES

En tres tubos colorimtricos marcados colocar B S D .
Tubos
Agua suero o
patrn
Suero o patrn
Muestra
reactivo

B
50ul

S
-

D
-

3.5

50ul
3.5

3.5ul
3.5

Determinacin cualitativa de protenas en Orina. Coagulacin por el

calor
Muestra de orina filtracin de la orina
Compontes
Orina previamente filtrada
Soemter a ebullicin si aparese
ppdo, enturbameinto, puede
deberse a la presencia de protenas
o fosfatos; aadir..
Solucin de cido actico al 2%

I
5.ML

IV gotas
Filtracin

Se lleva calentar hasta hervir luego se retira

Se agrega reactivo cido actico al 2 % para observar si aprese cambio de

color.

Resultado: No hubo ninguna reaccin

Clculos :
D = 0.290
B = 0.250
S = 6.56
ABL= (0.290 0.250) x 6.56 0.04 x 6.56 = 0.26 g/dl

DISCUSIN
Los tipos de protena en la parte lquida (suero) de una muestra de sangre.
Correspondiente a esto los valores regulares son: Protenas Valores
normales Valores obtenidos Apreciacin Totales 6,0 - 8,4 11,75 Alto
Albminas 3,5 - 5,5 2,90 Bajo Globulinas 2,5 - 3,69 8,85 Muy Alto
Albminas/Globulinas 1,3 1,7 0,328 Muy Bajo Al considerar estos valores
se puede observar que los datos de protenas totales, albumina y globulinas
obtenidos en el laboratorio se encuentran alterados por lo que se puede
inferir que el individuo en cuestin presenta alguna patologa relacionada
con el aumento y la disminucin de los valores de protenas totales en el
plasma.Segn Harper Bioqumica Ilustrada La albmina (69 kDa) es la
protena principal del plasma humano (3,4 a 4,7 g/dL) y constituye
aproximadamente 60% de la protena plasmtica total. Alrededor de 40%
de la albmina est presente en el plasma y el otro 60% existe en el
espacio extracelular. (pg. 614). La importancia de la albmina en la
nutricin se debe a que es una protena que puede ser fcilmente
metabolizada; una de sus funciones importantes es la de servir como
transportadora de diferentes molculas en el torrente sanguneo, tanto
orgnicas como inorgnicas; as como tambin es la principal responsable
de que se mantenga la presin onctica, es decir la presin osmtica
coloide, y al disminuir estos valores ocasiona edemas. Existen patologas o
sntomas que llevan una relacin con un bajo nmero de albmina. Por
ejemplo el plasma de aquellos pacientes que padecen alguna enfermedad
heptica muestra un declive en la relacin albmina-globulinas, es decir,
una relacin de albmina-globulina disminuida, ya que dicha protena es
sintetizada en el hgado. De igual forma hay una sntesis menguada en
forma relativamente temprana en condiciones de malnutricin proteica
como es el kwashiorkor, que es una enfermedad que se produce en nios
por la ausencia de nutrientes, como las protenas en la dieta. Por su parte
podemos destacar que los niveles de las globulinas, tomando en
consideracin los valores obtenidos en la prctica, estn por encima de 3.69
g/dl. Esto suele deberse, fundamentalmente, a un problema de
deshidratacin; esta elevacin de las Globulinas en general se observa en
estados de defensa contra agentes infecciosos. Las consecuencias de un
aumento de las globulinas en sangre puede ocasionar enfermedades como
enfermedad heptica crnica, adems tienen una serie de riesgos como
sangrado excesivo, desmayo o sensacin de mareo, hematoma
(acumulacin de sangre debajo de la piel), infeccin, etc.

CONCLUSIN.
Las protenas se necesitan para la mayora de las funciones normales del
cuerpo, como el mantenimiento, crecimiento, reproduccin, lactacin y
produccin de pelo. El dficit de protena en la dieta reduce las reservas en
sangre, hgado y msculos y predisponen a los animales a padecer una
variedad de enfermedades graves o incluso fatales.
Durante el desarrollo de la prctica realizada se procedi aplicar los
principales mtodos que se usan en el laboratorio para precipitar y separar
protenas, as como mtodos especiales para cuantificarlas y de esa forma
saber en qu cantidades se encuentran presentes en una solucin
determinada, en especial la solucin usada en la experiencia de laboratorio,
el plasma o suero humano a travs del cual se estudiaron sus protenas
ms importantes, la albmina, las globulinas y la relacin que existe entre
ellas. El plasma est constituido por una serie de protenas, como la
Albmina y Globulina que desempean funciones vitales en el organismo.
La purificacin de estas, puede ser lograda mediante la utilizacin de una
serie de tcnicas de separacin, tales como el Salting-Out que es la tcnica
ms comn de precipitar protenas y el mtodo de fotocolormetro de Biuret
con el cual se puede estimar cuantitativamente las protenas totales y
albmina presentes en la muestra. A travs de la separacin de las
protenas, por medio de la curva de calibracin se pudo observar que
durante el experimento realizado, que se obtuvieron valores normales con
respecto a los estndares.

BIBLIOGRAFIA

David, N y M,M (2009) Lehninger Principios de la Bioqumica. 5ta

edicin, (Barcelona) 5ta Edicin, Editorial OMEGA.
Munray, R., Granner, D., Mayes, P., Rodwell, V (1996) Bioqumica de
Harper, (Mxico, D.F) 14ta Edicin. Editorial Manual Moderno.
John W. Baynes y Marek H. Dominiczak (2011) Bioqumica Medica.
(Barcelona) 3era Edicin. Editorial El sevier.
John W. Suttie. (1976). Fundamentos de Bioqumica (Trad. Por Ing.
Jorge R. Estriada) Universidad de Wisconsin.
Enciclopdia Microsoft Encarta 98 (1993-1997) Microsoft
Corporation. Reservados todos los derechos.
Diccionario Mosby Medicina Enfermera y Ciencias de la Salud: quinta
adicin, 2000 Harcourt