ENSAYO DE BIODEGRADACION TIPO MICROCOSMOS

EN SUELOS CONTAMINADOS CON PCBs

Palabras claves: biodegradacin, PCBs, suelos, COP, microcosmos, ensayos,
bioestimulacin, Bioaumentacin.
Existen 187 sustancias qumicas consideradas como txicos para los
organismos vivos. Estas son conocidas con el nombre de Contaminantes
Orgnicos Persistentes (COP). Dentro de estos contaminantes se han
catalogado 12 como los ms toxicos: Aldrin, Dieldrin, Endrin, Mirex, Toxafeno o
Canfecloro, Clordano, Heptacloro, DDT, Hexaclorobenceno (HCB), Dioxinas y
Furanos. Entre este grupo se encuentran los Bifenilos Policlorados (PCB, por
sus siglas en ingls), comnmente llamados askareles, Aroclor, Clorophen,
Pyranol, Interteen e Hyvol, formados por dos anillos bencnicos y por una gran
cantidad de cloro, carbono e hidrgenos en sus molculas (Ruiz. 2005)
Los Bifenilos Policlorados (PCB), son molculas orgnicas cclicas cloradas,
con una familia de ms de 209 compuestos qumicos estructuralmente
relacionados llamados congneres. (Di-marzio. 2009). Varan en un rango
desde livianos y aceitosos fluidos, a pesados, grasosos o cerosas sustancias.
Las propiedades fisicoqumicas de estos compuestos son de gran inters ya
que poseen una baja presin de evaporacin, alto punto de ebullicin, alta
viscosidad, estabilidad trmica, resistencia qumica contra cidos y lcalis,
mnima solubilidad en agua, alta constante dielctrica y una gran resistencia
especfica, de all que en el siglo pasado se los utiliz para muchos fines, como
enfriadores y lubricantes, principalmente para fluidos dielctricos de
condensadores, transformadores y balastros de luces fluorescentes; en
sistemas hidrulicos de equipos de minera como adhesivos y lubricantes; en la
industria de la impresin en tintas, selladores en empaques, pinturas y
barnices, y en el papel calca; en la construccin en guarniciones de frenos y
asfalto, en tuberas de gas, edificios, naves y en la investigacin. (Miller. 2009).
Luego de la realizacin de estudios sobre la incidencia y los problemas que
acarreaban estos productos a largo plazo llevados a cabo en varios pases, se
fueron imponiendo las polticas de restricciones en el uso y la comercializacin
de los mismos y sus derivados, en todos los campos en que se empleaban,
particularmente en los vinculados al uso elctrico.
Muchos estudios alrededor del mundo especialmente en pases
industrializados como Estados Unidos y Canad, han demostrado que estos
compuestos son altamente txicos ante una exposicin directa prolongada y
presentan una variedad de efectos y sntomas adversos a la salud humana
como: clorocne, disfunciones del sistema inmunolgico, insuficiencias
neurolgicas, degeneracin heptica, fototoxicidad, anomalas en la
reproduccin, trastornos del comportamiento y carcinognesis, entre
otros.(USEPA, 2000) Adems de su alto grado de toxicidad, estos compuestos
tiene la capacidad de acumularse en los organismos (en la cadena trfica) y
viajar grandes distancias, generando altos niveles de contaminacin para el
medio ambiente y los seres vivos.

Los PCBs desde su fabricacin en 1929 hasta su prohibicin en 1970 ha

venido impactando nuestro ecosistema a travs de accidentes, derrames
industriales, el mal manejo de transformadores elctricos o aceites dielctricos
contaminados en talleres de mantenimiento, en bodegas de almacenamiento y
en reas de disposicin son la principal causa de contaminacin ambiental.
Para el ao 2001 entra en vigor en Colombia el convenio de Estocolmo firmado
por el Gobierno Nacional y ratificacin mediante la Ley 1196 del 5 de julio del
2008, que busca proteger a los ecosistemas y a la salud humana, de la
presencia de los doce compuestos altamente persistentes en el medio o COPS
en el ambiente.
Para poder cumplir con los acuerdos del convenio y con la asesora del
proyecto CERI realizado con la cooperacin tcnica del gobierno de Canad,
se llevo a cabo el Primer inventario nacional de PCB, donde se identifico que
la principal problemtica del pas en cuanto a la contaminacin ambiental y de
los suelos por PCB, se presentaba por un almacenamiento inadecuado de
equipos elctricos y aceites que contienen PCB como consecuencia de la falta
de informacin de los riesgos asociados a esta prctica. En la mayora de los
casos, ste se realiza a la intemperie, sin sistemas de contencin, sin
elementos para la atencin de emergencias ni sealizacin o identificacin.
(http://www.minambiente.gov.co/documentos/3028_plan_accion_PCB_consulta
.pdf)
Contribuye a esta problemtica, la deficiencia en las normas especficas para el
muestreo y el anlisis de PCB en Colombia, la falta de laboratorios autorizados,
al igual que de un consenso con relacin a los mtodos analticos que puedan
considerarse vlidos, y sus alcances.
Una opcin clave para el tratamiento de esta problemtica medioambiental (en
marco del convenio de Estocolmo) aparte de los tratamientos qumicos y fsicos
que son, entre otras cosas, muy costosos y no garantizan la transformacin y la
no re contaminacin del ambiente, sera el tratamiento biolgico o
biodegradacin donde, por accin de ciertos microorganismos, se presenta la
degradacin o transformacin de la molcula txica de PCB a una molcula
menos daina para el ser humano y el medio ambiente.
La biodegradacin o transformacin es la actividad de un sistema biolgico
sobre alguna sustancia y cuya consecuencia es la modificacin de la estructura
molecular (Ruiz, 2005). El objetivo en la recuperacin de suelos contaminados,
es la disminucin de la concentracin de contaminantes, hasta unos
niveles establecidos por la legislacin vigente que impliquen la ausencia de un
riesgo para la salud humana y el medio ambiente.
Por su naturaleza qumica estable, su carcter xenobitico y a su baja
biodisponibilidad (ya que esta se absorbe fuertemente en el suelo), los PCBs
son difciles de degradar (Arbeli, 2006). Pero estudios recientes han
demostrado que los microorganismos nativos de los sitios donde ocurrieron los
derrames han logrado evolucionar varios mecanismos de degradacin de
compuestos organoclorados, convirtindose entonces, la biodegradacin y la

biorremediacin en un mecanismo eficaz de tratamiento de estos desechos y

sobre todo una barrera para impedir la acumulacin ambiental.
La biodegradacin de compuestos, como el PCB se puede realizar a travs de
diversas rutas metablicas bajo condiciones aerbicas y anaerbicas. En la
degradacin anaerobia se da una remocin de los cloros tambin denominada
declorinacin, exponiendo la molcula y hacindola ms vulnerable, mientras
que en la degradacin aerbica se da la ruptura del anillo de carbonos y la
consecuente destruccin de la molcula
La fase experimental del estudio se llevar a cabo en un microcosmos
elaborado en beaker de 250 ml. Se realizar un muestreo aleatorio
estratificado, la muestra ser tomada a tres distintas profundidades en el perfil
del suelo contaminado. Antes de empezar los ensayos de biodegradacin se
deber tamizar, secar y hacer pruebas fsico qumicas al suelo contaminado a
tratar. Se evaluaran parmetros como: humedad, pH, disponibilidad de agua,
granulometra, nitrgeno total, materia orgnica, concentracin de PCB y
fosfato. Los resultados de dicha caracterizacin fisicoqumicas sern utilizados
para simular las condiciones naturales del suelo.
Simultneamente se aislar la microflora nativa del suelo para ser utilizada en
un mtodo llamado Bioaumentacin. Este buscar incrementar drsticamente
la masa microbiana de la muestra de suelo contaminado mediante la adicin de
microorganismos presentes en el suelo pero seleccionados para aumentar la
eficiencia y eficacia de la degradacin (Gmez, 2009). Los parmetros de
seleccin sern definidos mediante un recuento de la concentracin de
bacterias hetertrofas totales y degradadoras encontradas en la muestra
tomada. Los consorcios microbianos ms adecuados con base a tolerancia a
sales y sustancias inhibidoras y tambin a la capacidad de degradacin ante el
PCB sern reinoculados en fases posteriores.
Luego de la caracterizacin del suelo a degradar y del aislamiento de los
microorganismos nativos, se proceder a realizar el ensayo de biodegradacin
a escala de laboratorio, en suelos contaminados con PCB.
Este se conducir en 3 beaker y se harn por triplicado. El primer beaker
sellado, con suelos contaminados ms Formaldehido que actuar como un
inhibidor de microorganismos (este ser el control abitico) (Vias 2006), el
segundo beaker ser utilizado para el mtodo de bioaumentacin, donde el
suelo ser inoculado con microorganismos nativos extrados de la muestra
inicial de suelo (previamente bioaumentados) y sern aadidos tambin
nutrientes para acelerar estos procesos y por ltimo el tercer beaker solo con
suelo ms nutrientes (bien llamado bioestimulacin, en donde lo que se
pretende es acelerar el proceso de biodegradacin natural proporcionando
nutrientes a la muestra contaminada)
En el segundo beaker, que contendr los microorganismos bioaumentados, se
monitorear la degradacin aerobia y anaerobia de los microorganismos. En la
fase anaerobia, que ser la primera en realizarse, se tendr en cuenta la
agitacin mecnica (cada 45 das para favorecer la degradacin) y la inyeccin
de gases en una proporcin 80/20 de N2 y CO2.Esto fase tendr una duracin

de 3 meses. La segunda fase que es la degradacin aerobia se agitar dos

veces por semana para propiciar el ambiente de los microorganismos.
Los 3 beaker se les monitorearn porcentaje de degradacin de PCB cada 30,
60, 90, y 300 das por medio de cromatografas de gases. En estas tambin
se har recuento de microorganismos hetertrofos y esto nos indicar los
porcentajes de degradacin en el suelo.
Los objetivos del plan de trabajo presentados son:
Determinar el porcentaje de degradacin de los PCB`s en suelos
contaminados
Evaluar la capacidad biodegradadora de un consorcio microbiano nativo
en suelos contaminados con PCBs
Identificar que tcnica de biodegradacin es la ms eficaz en los
procesos de biodegradacin de suelos contaminados con PCBs .
Disear un protocolo con los resultados obtenidos en el ensayo en base
a la tcnica ms eficaz en la biodegradacin que pueda ser til en
procesos de biorremediacin in situ en suelos contaminados con PCBs
en la regin Caribe.
El estudio experimental se realizar en diez meses (10) donde se incluyen el
aislamiento de los microorganismos, mantenimientos de las cepas y monitoreo
de los ensayos. Luego se proceder a la tabulacin de datos, anlisis de
resultados y por ltimo el diseo de un protocolo de biodegradacin; estas
ltimas actividades tendrn una duracin de 2 meses.
La contribucin que se har a la lnea de investigacin de Microbiologa y
Biotecnologa (IMB) sera la creacin (de acuerdo a los resultados de
degradacin derivados de las 3 tcnicas estudiadas en el ensayo) de un
protocolo eficaz, limpio y nuevo de biodegradacin in situ de suelos
contaminados con PCB, que en nuestra regin muy poco se han aplicado, ya
que los protocolos usados actualmente se limitan a tratamientos qumicos y
fsicos que son poco amigables con el medio ambiente. Adems se brindar la
oportunidad de probar, en trabajo de campo, el protocolo planteado en estudios
posteriores de biorremediacin abriendo nuevos campos de estudio y de
actuacin de futuros estudiantes e investigadores vinculados al grupo IMB.
Este ensayo y sus resultados estn unidos al macroproyecto de degradacin
de PCB que est financiado por una de las principales empresas de energa
elctrica de la Regin Caribe.
Tutor

Aracely Garca Cuan

C.C 32.656.500
Lder del grupo de investigacin IMB
Universidad Libre Seccional Barranquilla.