PROGRAMA DE LICENCIATURA EN BIOLOGA

CROMATOGRAFIA EN PAPEL
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL

Determinar la composicin de
una mezcla problema por
medio de la cromatografa en
papel.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Establecer y desarrollar un
manejo correcto de la tcnica
instrumental de la
cromatografa en papel.

MARCO TERICO
Cromatografa
La cromatografa en papel es
un mtodo fsico de separacin
de mezclas homogneas, ya
sean lquidas o slidas. En el
proceso de cromatografa se
encuentran dos fases distintas:
La fase estacionaria y la fase
mvil. La primer fase est
constituida por un papel filtro,
en el cual se sitan pequeas
gotas de la solucin a separar
y la segunda fase est
compuesto por el disolvente
que es funciona como fase
mvil
y
asciende
por
capilaridad en el papel.
El proceso cromatgrafo da
como consecuencia de los
continuos procesos de sorcin
y desorcin producidos por el
movimiento
de
los
componentes de la mezcla,

cuando son arrastrados por la

fase mvil a lo largo del papel
filtro, como consecuencia se
produce la separacin del
compuesto
debido
a
la
diferencia en las constantes de
distribucin
de
los
componentes de la mezcla
generada
entre
la
fase
estacionaria y la fase mvil. Al
resultado final, es decir, la
distribucin
final
de
los
constituyentes de la mezcla se
le denomina cromatograma.
Si los compuestos tienen color,
en el cromatograma podrn
ser visibles una serie de
manchas
ubicadas
en
diferentes posiciones a lo largo
del papel. En el caso de que
los
compuestos
sean
incoloros, es necesario realizar
un procedimiento adicional que
de color a los componentes,
para poder localizarlos.
El valor Rf de una sustancia.
Una vez se ha realizado el
montaje para la cromatografa
y transcurrido un tiempo en el
experimento, el solvente ha
recorrido una distancia L
centmetros, el soluto se ha
esparcido en una zona difusa,
y
cada
uno
de
sus
componentes
se
ha
desplazado una distancia D
centmetros.
La
distancia
mxima recorrida por el
solvente se denomina frente
del solvente y se usa como
referencia para expresar las
distancias recorridas por las
distintas sustancias en una

cromatografia.
Se
ha
encontrado que la distancia
relativa D/L, es una constante
que se encuentra dada bajo
condiciones constante y de
forma independiente a la
cantidad del soluto. El smbolo
para designar la distancia
relativa es el valor Rf ; el valor
mximo que puede tener Rf
corresponde a 1,por lo que se
suele expresar como un
decimal,menor
a
uno
o
tambin como porcentaje.
Rf= D/L
Donde D es la distancia
recorrida por el soluto y L es
la distancia recorrida por el
solvente.
El proceso cromatgrafo da como
consecuencia de los continuos
procesos de sorcion y desorcin
producidos por el movimiento de los
componentes de la mezcla, cuando
son arrastrados por la fase mvil a lo
largo
del
papel
filtro,
como
consecuencia
se
produce
la
separacin del compuesto debido a la
diferencia en las constantes de
distribucin de los componentes de la
mezcla generada entre la fase
estacionaria y la fase mvil. Al
resultado final, es decir, la distribucin
final de los constituyentes de la
mezcla
se
le
denomina
cromatograma.
PARTE EXPERIMENTAL
Materiales
Un frasco de vidrio

Un vidrio de reloj
Una probeta de 10ml
Una pipeta de pasteur
Una tira de papel de filtro
Reactivos
Indofenol azul
Amarillo de alizarina
Sudn rojo
Fenolftalena
Tartrazina
Mezcla Problema
n-Pentanol
Etanol absoluto
NH4OH 2N (4 mL conc. + 26 mL
agua)