Laboratorio

Respiracin celular
Objetivos
Al finalizar este laboratorio el estudiante podr:
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Entender qu es la respiracin celular, su importancia y los pasos principales de la misma.

Diferenciar entre la respiracin aerbica y la anaerbica.
Diferenciar entre la fermentacin lctica y alcohlica, y conocer sus aplicaciones.
Entender cmo ocurre la fermentacin alcohlica a partir de distintos carbohidratos.
Medir cmo se afecta la tasa de respiracin aerbica.
Conocer cmo se lleva a cabo una titulacin.

INTRODUCCIN

as clulas llevan a cabo diversos procesos para mantener su funcionamiento normal, muchos de
los cuales requieren energa. La respiracin celular es una serie de reacciones mediante las
cuales la clula degrada molculas orgnicas y produce energa. Todas las clulas vivas llevan a
cabo respiracin celular para obtener la energa necesaria para sus funciones. Usualmente se usa
glucosa como materia prima, la cual se metaboliza a bixido de carbono y agua, producindose energa que
se almacena como ATP (trifosfato de adenosina).
C6H12O6

CO2 + H2O + Energa (ATP)

glucosa

bixido
de
carbono

agua

La molcula de ATP est formada por adenina, ribosa y tres grupos fosfatos con enlaces ricos en energa.
Cuando la molcula se hidroliza, el fosfato terminal se separa para formar ADP (difosfato de adenosina) y se
libera energa. El ATP es la fuente de energa que se usa como combustible para llevar a cabo el
metabolismo celular.
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La respiracin celular se divide en pasos y sigue distintas rutas en presencia o ausencia de oxgeno. En
presencia de oxgeno sucede respiracin aerbica y en ausencia de oxgeno sucede respiracin
anaerbica. Ambos procesos comienzan con la gluclisis.
GLUCLISIS

Gluclisis es el primer paso de la respiracin celular y consiste de una serie de reacciones que ocurren
en el citoplasma de la clula y por las cuales, a partir de una molcula de glucosa, se producen dos
molculas de cido pirvico (piruvato). Todos los organismos llevan a cabo la gluclisis. La gluclisis se
divide en dos partes; en la primera la molcula de glucosa se divide en dos molculas de gliceraldehido3-fosfato y en la segunda estas dos molculas se convierten en dos molculas de cido pirvico
(piruvato). Durante la gluclisis se producen dos molculas de ATP.

Gluclisis:
glucosa + 2Pi + 2ADP + 2NAD+ 2 cidos pirvicos + 2ATP + 2NADH + 2H+

En ausencia de oxgeno, luego de la gluclisis se lleva a cabo fermentacin (respiracin celular

anaerbica). Algunas bacterias slo llevan a cabo fermentacin, mientras que la gran mayora de los
organismos (incluidos los humanos) pueden llevar a cabo respiracin celular aerbica y anaerbica.

RESPIRACIN CELULAR AERBICA

La respiracin celular aerbica es el conjunto de reacciones en las cuales el cido pirvico producido
por la gluclisis se transforma en CO2 y H2O, y en el proceso, se producen 32 molculas de ATP.*
En las clulas eucariotas este proceso ocurre en el mitocondrio en dos etapas llamadas el Ciclo de
Krebs (o ciclo de cido ctrico) y la cadena de transporte de electrones1.

Reaccin de transicin:
2 cidos pirvicos + 2 NAD+ + 2 CoA

2 Acetyl CoA + 2 NADH + 2 CO2

Ciclo de Krebs:
Oxaloacetato + acetyl CoA

Citrato + CoA

En el ciclo de Krebs se producen:

4CO2, 6NADH, 2 FADH2 y 2 ATP por cada molcula inicial de glucosa

La reaccin de transicin es la reaccin que conecta la gluclisis con el Ciclo de Krebs.

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FOSFORILACIN OXIDATIVA: CADENA DE TRANSPORTE DE

ELECTRONES Y QUIMIOSMOSIS

La fosforilacin oxidativa se divide en dos procesos: la cadena de transporte de electrones y la

quimiosmosis. En la cadena de transporte de electrones, los electrones producidos en gluclisis y
en el ciclo de Krebs pasan a niveles ms bajos de energa. Durante este transporte de electrones las
molculas transportadoras se oxidan y se reducen. El ltimo aceptador de electrones de la cadena es el
oxgeno. Cada tomo de oxgeno recibe adems dos protones (2H+) para formar una molcula de
agua. Durante las reacciones que forman parte de esta cadena de transporte de electrones se libera
energa, que se usa en la quimiosmosis para mover hidrgeno a travs de la membrana del mitocondrio
y proveer la energa que se necesita para formar ATP En la cadena se producen 26 a 28 molculas de
ATP a partir de una molcula inicial de glucosa.
RESPIRACIN CELULAR ANAERBICA

La respiracin celular anaerbica ocurre en ausencia de oxgeno. Este mecanismo no es tan eficiente
como la respiracin aerbica, ya que slo produce 2 molculas de ATP, pero al menos permite
obtener alguna energa a partir del piruvato que se produjo en la gluclisis. Hay dos tipos de respiracin
celular anaerbica: fermentacin lctica y fermentacin alcohlica.

Fermentacin lctica:
cido pirvico + NADH +

H+

cido lctico + NAD+

La fermentacin lctica ocurre en algunas bacterias y gracias a este proceso obtenemos productos de
origen lcteo tales como yogurt, crema agria y quesos. Este proceso sucede tambin en el msculo esqueletal
humano cuando hay deficiencia de oxgeno, como por ejemplo, durante el ejercicio fuerte y continuo. La
acumulacin del cido lctico causa el dolor caracterstico cuando ejercitamos los msculos excesivamente.

Fermentacin alcohlica:
En la fermentacin alcohlica suceden dos reacciones consecutivas:
cido pirvico

acetaldehdo + CO2

acetaldehdo + NADH + H+

etanol + NAD+

Este tipo de fermentacin ocurre en levaduras, ciertos hongos y algunas bacterias, producindose CO2
y alcohol etlico (etanol); ambos productos se usan en la produccin de pan, cerveza y vino.
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DIFERENCIAS ENTRE RE SPIRACIN CELULAR AE RBICA Y ANAERBICA

La diferencia bsica entre la respiracin celular aerbica y la anaerbica (a parte de suceder en presencia
o ausencia de oxgeno) es la cantidad de molculas de ATP que se producen. En la respiracin celular
anaerbica, los hidrgenos (electrones) pasan al piruvato para formar el cido lctico o el etanol,
mientras que en la respiracin celular aerbica los hidrgenos pasan a la cadena de transporte de
electrones para formar ATP. En la respiracin celular aerbica, el piruvato que pasa por el ciclo de
Krebs produce hidrgenos adicionales que tambin pasan a la cadena de transporte de electrones para
formar ATP. Por esta razn, en la respiracin celular aerbica se producen 36 molculas de ATP a
partir de una molcula de glucosa, mientras que en la ruta anaerbica slo se extraen 2 molculas de
ATP a partir de una molcula de glucosa.

EJERCICIO 8.1

RESPIRACIN

CELULAR

ANAERBICA

Favor ver al final documento adicional para los ejercicios que se estn
realizando este semestre.
EJERCICIO 8.2

RESPIRACIN

CELULAR

AERBICA

Favor ver al final documento adicional para los ejercicios que se estn
realizando este semestre.

Ejercicios a realizar este semestre para respiracin celular anaerbica y respiracin celular
aerbica:
A. Fermentacin
Se observar la fermentacin alcohlica por la levadura Saccharomyces cerevisiae y si esta puede usar
diferentes azucares para llevar a cabo la fermentacin.
Prepare la suspensin de levadura por lo menos media hora antes de comenzar el experimento.
Caliente 100 ml de agua hasta que llegue a 38-40C. Saque del hot plate y aada un sobre de
levadura.
Cada mesa representa un grupo:
Grupo 1: har el experimento con glucosa
Grupo 2: har el experimento con sucralosa o sacranina (Same).
Grupo 3: har el experimento con fructosa
Grupo 4: har el experimento con lactosa.
Grupo 5: har el experimento con almidn.
Grupo 6: har el experimento con el control.

Cada mesa har solo un experimento:

Procedimiento (Usaremos glucosa como ejemplo para explicar el procedimiento para todas las
soluciones):
Pese 1 gr de glucosa y aada a un vaso con 10 ml de agua y disuelva. Aada 10 ml de la suspensin de
la levadura al vaso (mueva la suspensin de levadura para asegurarse que tenga levadura en su
mezcla). Mueva el vaso de vez en cuando por 5 minutos. (debe observar algn burbujeo en la
mezcla). En este caso, esta mezcla es la que se usara para el grupos 1.
Todas las mesas:
Tenga preparada la pipeta (con una gota de agua con un poco de colorante vegetal) con el pedazo de
tubo. Luego de los 5 minutos aada 3 cc de la mezcla preparada a la jeringuilla (sino tienen la marca, se
llenan partes). Hale para aadir un poco de aire y monte la jeringuilla a la pipeta. Mueva la gota de
agua para que quede en la primera marca de la pipeta. No es necesario poner parafina en la unin. De
hecho puede complicar el experimento ya que resulta difcil ver la unin del tubo con jeringuilla.
Empiece a contar el tiempo. Tome la lectura de donde se encuentra la gota de agua cada dos minutos
por 20 minutos. Dos estudiantes harn este experimento, mientras dos estudiantes montan el segundo
experimento. Cada rayita representa 0.01ml.
Con sus datos para cada experimento, prepare una grfica de los ml de CO2 producido vs. Tiempo
transcurrido.
Compare los resultados de su mesa con los de las dems mesas.
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B. Respiracin celular (se har por grupo/ mesa).

En esta parte veremos como el ejercicio (el aumento en actividad muscular) afecta la tasa de
respiracin celular. La respiracin celular va a ocurrir en las clulas musculares para proveer
energa para contraer los msculos. Esta reaccin requerir oxigeno y produce CO2, el cual
exhalamos.
Prepare la solucin de NaOH: 25 ml de la solucin 0.25M y 75 ml de agua. Esta solucin la usar para
la titulacin de todos los grupos.
Prepare dos vasos con 100 ml de agua c/u. Ponga c/u sobre un papel blanco. Marque uno como
control y el segundo como experimento. A cada vaso aada 6 gotas de fenolftalena.
Aada gota a gota la solucin de NaOH al vaso marcado como control. Cuente cuantas gotas necesita
para que el agua cambie al ms leve tono de rosa (que se mantenga en el agua). No descarte su control.
Sople por 10 segundos a travs de un sorbeto dentro del agua del vaso marcado como experimento.
NO INHALE durante este tiempo. Aada gota a gota la solucin de NaOH, contando hasta que
cambie al ms leve tono rosado.
Repita para los siguientes experimentos (todos con la misma persona que hizo el primer experimento).
Luego de caminar vigorosamente por el saln por 3 minutos.
Luego de hacer jumping jacks por 3 minutos,
Despus de recuperarse del ejercicio anterior (luego de 2 minutos) (para este
experimento tenga otro vaso marcado como experimento con 100 ml y 6 gotas de fenolftalena).
Compare los resultados de su mesa con los de las dems mesas. Prepare una grfica de barras que
muestre los resultados.

LABORATORIO 8: RESPIRACIN CELULAR

PLAN DE ENSEANZA

PARA LOS

INSTRUCTORES

Destrezas que el estudiante adquirir a partir de este laboratorio:

1.
2.
3.
4.
5.
6.

Aplicaciones qumicas en la biologa.

Trabajo individual y grupal.
Tcnicas de laboratorio, como la titulacin, que envuelve conceptos qumicos.
Destrezas de comunicacin escrita.
Se reforzarn los conceptos de investigacin cientfica.
Discusin oral.

Manejo del laboratorio:

Favor ver instrucciones en documento adicional.

Manejo del tiempo:

1. Introduccin ........................................................................ 10 minutos
2. Ejercicio 8.1: Respiracin celular anaerbica
......... 65 minutos
3. Ejercicio 8.2: Respiracin celular aerbica
....... 65 minutos
4. Discusin y prueba corta .......... 20 minutos
5. Recoger el laboratorio ......... 5 minutos