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5, 1104-1106, 2008
Artigo
PRODUO DE ETANOL A PARTIR DE TORTA DE MAMONA (Ricinus communis L.) E AVALIAO DA LETALIDADE DA TORTA HIDROLISADA PARA CAMUNDONGOS
Walber Carvalho Melo, Daniele Barreto da Silva e Nei Pereira Jr.*
Departamento de Engenharia Bioqumica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, CP 68542, 21949-900 Rio de Janeiro - RJ,
Brasil
Ldia Maria Melo Santa Anna
Gerncia de Biotecnologia e Tratamentos Ambientais, CENPES/PETROBRAS, Av. Jequitib, 950 , Cidade Universitria, Ilha
do Fundo, 21949-900 Rio de Janeiro - RJ, Brasil
Alexandre Soares dos Santos
Departamento de Cincias Bsicas, Faculdade de Cincias Biolgicas e da Sade, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha
e Mucuri, Rua da Glria, 187, 39100-000 Diamantina - MG, Brasil
Recebido em 17/5/07; aceito em 31/10/07; publicado na web em 15/5/08
ETHANOL PRODUCTION FROM CASTOR BEAN CAKE (Ricinus communis L.) AND EVALUATION OF THE LETHALITY
OF THE CAKE FOR MICE. The castor bean cake is rich in starch (48 0.53%) and bears a problem linked to the occurrence of a
toxic protein (ricin). The chemical hydrolysis (ratio solid:liquid = 1:6; H2SO4= 0.1 mol L-1; 120 C; 40 min) generated a medium
with 27 g L-1 of reducing sugars (hydrolysis efficiency= 32%). The hydrolyzed product was fermented and produced 11 g L-1 of
ethanol (volumetric productivity=1.38 g L-1 h-1 and ethanol yield on substrate consumed=0.45 g g-1). In vivo experiments (DL50)
revealed a reduction of roughly 240 times in the CBC toxicity (2.11 g g-1).
Keywords: castor bean cake; acid hydrolysis; ethanol.
INTRODUO
A pesquisa e o desenvolvimento no setor de combustveis obtidos
de fontes renovveis so responsveis por uma crescente demanda por
biomassas de origem vegetal.1 O uso de sementes de mamona (Ricinus
communis L.) para extrao de leo e emprego na produo de biodiesel
responsvel pela gerao diria de toneladas de um resduo slido
proveniente da prensagem das sementes, a torta de mamona.2 Esse
resduo possui alto teor de protenas e produzido na proporo de 1,2
t por tonelada de leo extrado,3 o que corresponde a 55% do peso
mdio das sementes, valor que pode variar de acordo com o teor de
leo da semente e do processo industrial de extrao do leo. Segundo
algumas projees, espera-se uma produo de at 20000 t anuais de
torta de mamona associada indstria do biodiesel.4 Esse resduo,
embora rico em protenas, no pode ser usado na alimentao animal
e exige cuidados com a manipulao devido toxicidade atribuda a
peptdeos alergnicos presentes nas sementes.5 Por outro lado, a torta
de mamona traz consigo potencial emprego na gerao de bioetanol,
por conta de seu alto teor de amido.6
A cultura da mamona sempre foi considerada uma atividade
de pequenos produtores, especialmente na regio de clima semirido do Brasil. No entanto, algumas aes do governo brasileiro
vm mudando esse cenrio. Atravs de estmulos para a cultura da
mamona no Nordeste do Brasil, o governo pretende criar condies para o desenvolvimento da regio. Nesta parte do Brasil, h
quase 4 milhes de ha com caractersticas edafo-climticas apropriadas, onde se alcanaria o rendimento de at 1,5 t de sementes
por hectare, enquanto a mdia anual de apenas 750 kg.4
O uso da torta de mamona como matria-prima para produo
de bioetanol atende a uma tendncia de integrao dos processos de
obteno de etanol e biodiesel, pois de acordo com estudos em an*e-mail: nei@eq.ufrj.br
damento no CENPES/PETROBRAS sobre o processo de transesterificao do leo de mamona em biodiesel, se forem gerados 160 L
de etanol para cada 1000 kg de torta de mamona produzida com a
prensagem das sementes, o processo de converso qumica do leo
extrado em steres etlicos tornar-se-ia auto-suficiente em relao
demanda de etanol. Ademais, o uso da torta ainda observa as Diretrizes de Poltica de Agroenergia 2006-2011 brasileiras (Ministrios da
Agricultura, das Minas e Energia e da Cincia e Tecnologia; verso
0.01 de 6/10/2006), que demandam por aproveitamento e valorizao dos resduos da indstria do biodiesel, elevando condio de
co-produto o resduo da extrao do leo das sementes de mamona.
Com vistas ao aproveitamento da torta de mamona como fonte de
acares fermentveis para produo de bioetanol e formulao de
tratamento adequado para a destoxificao deste resduo para uso como
matria-prima na indstria de rao, apresentado neste trabalho resultado de fermentabilidade do mosto obtido por sacarificao qumica do amido da torta de mamona e anlises de toxicidade (expressa em
DL50) do resduo slido gerado sob condies pr-estabelecidas.7
PARTE EXPERIMENTAL
Torta de mamona
Esta biomassa foi fornecida pela Petrleo Brasileiro S.A.
(PETROBRAS). O resduo slido triturado, obtido de processos de
produo de biodiesel, passou por secagem durante 24 h sob temperatura de 60 C em estufa.
Anlise do teor de amido da torta de mamona
O percentual de amido presente na biomassa foi determinado,
em base seca, de acordo com a metodologia enzimticocolorimetrca para determinao de amido em gros que contm
amilose e amilopectina.8,9 Amostra com 1,0 g de massa foram submetidas, em triplicata hidrlise enzimtica e o teor de amido foi
calculado com base na quantificao da glicose liberada.
Obteno do hidrolisado cido
A hidrlise qumica em triplicata foi realizada em frascos cnicos
de 250 mL contendo 10,0 g de torta de mamona seca e soluo de
H2SO 4 0,25 mol L -1 (relao slido-lquido 1:6) . O processo
hidroltico transcorreu durante 40 min a 1212 C em autoclave de
4000 W (Fabbe-Primar, Brasil). Essas condies experimentais so
decorrentes de estudos de hidrlise da torta com uso de metodologia
multivariada, onde foram avaliados os efeitos de tempo, temperatura, razo slido/lquido e concentrao de cido.7
Anlise de toxicidade (DL50 %) da torta de mamona e do
resduo slido aps a hidrlise
As anlises da toxicidade por determinao da DL50, tanto para a
torta in natura quanto para o resduo slido derivado do processo
hidroltico, foram realizadas em camundongos Suos brancos SW55. Os resduos slidos avaliados foram triturados em gral de vidro.
Massas correspondentes a 5,0000 0,0050 g de cada amostra foram
transferidas quantitativamente para frascos de erlenmeyer com auxlio de 80 mL de soluo salina estril pH 6,5-7,2. Aps processo
de dissoluo em ultra-som, por 30 min, as suspenses foram
mantidas em repouso, por uma noite, sob refrigerao a 4 C para
decantao dos slidos. O sobrenadante de cada frasco foi filtrado
individualmente atravs de papel de filtro Whatman n 1 e os filtrados, recolhidos em frascos erlenmeyers com tampa. Aos slidos decantados foram adicionados mais 20 mL de soluo salina,
centrifugados 2 vezes em centrfuga analtica por 15 min a 1300 rpm
e recolhidos os sobrenadantes obtidos, aps filtrao, em seus respectivos frascos. O pH dos filtrados, quando necessrio, foi corrigido para a faixa de 6,5 a 7,2. As amostras filtradas foram diludas (101
, 10-2, 10-3 e 10-4), novamente filtradas em filtro Millipore RC 25
0,45 e inoculadas em volumes de 0,2 mL por via intra-peritoneal
em lotes de 10 animais. As mortes dos animais foram registradas
nos perodos de 48 e 96 h. O nmero total de animais utilizados no
foi de 210 camundongos com peso mdio de 20 g, dos quais 10
foram utilizados para controle. Aps o perodo de observao, a DL50
foi calculada conforme o Mtodo de Reed e Muench.10
Processo fermentativo
Como mosto, foi usada a frao solvel obtida aps a etapa
hidroltica. O mosto teve o pH corrigido para 5,0 com uso de
hidrxido de clcio hidratado. As fermentaes foram realizadas
em biorreator instrumentado modelo Biostat (B.Braun Biotech
International) com volume nominal de 2,0 L. O sistema no aerado
foi mantido sob agitao de 100 rpm durante 8 h a 33 C. Como
agente fermentador foi utilizada a levedura Saccharomyces
cerevisiae a uma concentrao de 10 g L-1.
Mtodos analticos
Para realizao das anlises do processo fermentativo, foram
amostradas alquotas de 1,0 mL em intervalos de 1 h. As amostras
foram centrifugadas a 10.000 rpm durante 5 min. O sobrenadante
seguiu para a quantificao de acares e etanol. A biomassa
centrifugada foi ressuspensa ao volume original com gua destilada e quantificada atravs da leitura de absorbncia em espectrofotmetro (Spectrumlab modelo 22PC) a 570 nm com posterior
1105
1106
Melo et al.
Quim. Nova
Analitos
Diluio
Tempo de reteno
Glicerol
Frutose
Glicose
Maltose
Etanol
Sacarose
HMF
Total
Concentrao (g/L)
18,32
16,2
10,38
10,05
15,57
9,98
28,5
-
0
9,05
13,46
0
0
5,49
0,51
28,51
HMF hidroxi-metilfurfural
Animais
Mortos
10-4
10-3
10-2
10-1
No
Diluda
0
0
0
0
0
Resultados Acumulados
Animais
Totais
Vivos
50
40
30
20
10
50
40
30
20
10
Mortalidade
(%)
0
0
0
0
0
A torta de mamona, alm de mostrar-se apta como matriaprima para produo de etanol, sofreu um efeito colateral atravs
do processamento hidroltico, sob condies cidas, que a tornou
isenta de letalidade quando testada em camundongos. Esse resultado indica a possibilidade do uso do resduo slido obtido pstratamento hidroltico como matria-prima para o fabrico de raes. Essas informaes permitem propor um modelo industrial
onde estejam integrados processos de extrao de leo de mamona,
esterificao etlica com o lcool produzido a partir do resduo da
extrao do leo de mamona e a destinao do resduo slido do
processo de sacarificao qumica da torta de mamona para o fabrico de rao.
AGRADECIMENTOS
0
0
8
18
28
Resultados Acumulados
Animais
Totais
Vivos
22
12
2
0
0
22
12
10
18
28
Mortalidade
(%)
0
0
80
100
100