ProduccindeAntibiticosporsuMecanismodeAccin

FechadeEntrega:
Mircoles25deNoviembredel2015

Maestra:
VictoriaEugeniaHernandezHernandez

Materia:
Microbiologa

Grupo:
2

Equipo:
8

Integrantes:

ManuelBernalMaldonado

RobertoFloresSerrano

TzamnMonroyLopez

A01261123

A01208469

A01208562

ResumenEjecutivo

Losantibiticossonproductosdel metabolismo secundario de muchos delosseres

vivos que habitan en el planeta. Estos pueden actuar de diferentes manera como
antibiticos y es as como se han clasificado hasta el dia de hoy unos inhiben el
crecimiento de la membrana celular, otros actan sobre la pared celular, algunos
msespecficosactuandosobrelareplicacionytranscripciondelRNAyDNA.

Muchos creen que la penicilina fue el descubrimiento ms importante de toda la

historia y puede que se tenga razn ya que gracias a este, es como la medicina
actual ha llegado a donde esta. La penicilina, unodelos antibiticos ms antiguos
usados en la historia de la medicina. Este es generado por la produccin de
metabolitos secundarios en el hongo
Penicillium chrysogenum
como
consecuencia
deunaseriedeprocesoscreadosporambientessintticosenlasindustrias.

Sumecanismo de accin consiste eninhibirla enzimatranspeptidasa,inhibiendola

sntesis de la pared bacteriana y as generando la lisis (destruccin)de labacteria
causado por la enorme presinosmticahacia labacteria.Actualmente, con todas
las familiasdepenicilinas,las2quetienenmayorvalorteraputicosonladeclaseV
yG.

1. Importanciadelproductoanivelindustrialyreaosectordeaplicacin

Los antibiticos en general sonproductos quehan revolucionado elsector mdico,

socialyeconmico en lamayor parte de elmundo. Alo largodelahistoriamuchos
cientficos han realizado investigaciones con el propsito de fabricar antibiticos
que puedan ayudar la humanidad. Las penicilinas son antibiticos derivados de
hongos del gnero
Penicillium,
estosseobtienen dela extraccin de laproduccin
de metabolitos secundarios generados por este hongo en cultivos sumergidos en
medios especiales. En los ltimos aos se ha logrado aislar cido
6aminopenicilnicoagranescalaapartirdeinfusionesfermentadasde
Penicillum,
de esta manera ahora es posible sintetizarunaenormevariedad de compuestos a
base de penicilina. Todas las penicilinas conocidas compartenla misma estructura
bsica,lacuales:cido6aminopenicilnico.

(HongoPenicillium)

(cido6aminopenicilnico)

Las penicilinas tienen un gran impacto en el mbito mdico, que asuvezlas ms

importantessepuedendividirencuatrogruposprincipales,estosson:
Mayor actividadcontramicroorganismosgrampositivos,espiroquetasyotros.
Este grupo es propenso a la hidrlisis a travsde lactamasas y lbilesen
mediocido.
Resistencia relativa a las lactamasas , sin embargo tiene una menor
actividad contra los microorganismos gram positivos y una actividad
completamentenulaantelosgramnegativos.
En este grupo se encuentran los que tiene una actividad relativamente alta
contra los gram positivos y negativos, pero son eliminadas por las
lactamasas .
Tienen una estabilidad relativaen el cido gstrico,estoquiere decir quese
puedesuministrarvaoral.

2.
Nombredelolosmicroorganismosinvolucradosenelprocesoindustrial
indicandolataxonomacorrespondiente

Enlafabricacindepenicilinasintervienenmltiplesmicroorganismos,peroasuvez
depende de qu tipo de penicilina se quiera crear se van a usar distintos
microorganismos. Se pueden emplear diferentes microorganismos derivados de
hongos tanto del gnero
Penicillium
y
Aspergillus.
Sin embargo, en la produccin
industrialdeesteantibiticoseemplea
Penicilliumchrysogenum.

(ImagendePenicilliumchrysogenum)

Taxonomade
Penicilliumchrysogenum

Dominio
:Eukarya
Linaje
:Opisthokonta
Reino
:Fungi
Phylum
:Ascomycota
Clase
:Euascomycetes
Orden
:Eurotiales
Familia
:Trichocomaceae
Gnero
:
Penicillium
Especie
:
Penicillium

chrysogenum

3.
Origen(Habitat)

El hongo
Penicillium chrysogenum
se puede encontrar en una gran variedad de
hbitatsloscualesserndesglosadosmsadelante.
El descubrimientode
Penicillium chrysogenum
usadoactualmenteanivelindustrial,
fue en unmeln.Sinembargo,eldescubrimientoprincipaldeestehongofueenuna
cajapetriporAlexanderFlemingenelao1928.
.
Los hbitats en los cuales se han encontrado colonias crecientes de
Penicillium
chrysogenum
sonlossiguientes:
1.
Alimentos
en esta categora se descubri, queen elmeln,lacepaque
mayorproduccindepenicilinatiene,eracapazdedesarrollarse.
2.
Ambientessubtropicalesytemplados
3.
Desperdicios
4.
Enelbosque

4.
Caractersticasmorfolgicas

Penicillium chrysogenum presenta ciertas caractersticas morfolgicas que son

distintivas en este gnero. Este es un hongo filamentoso que en su estructura
presenta conidiforos tabicados de aproximadamente 200 a 300 micrmetros con
paredes lisas. Al final de su estructura, presenta ramificaciones con mtulas y
filides aproximadamente de (8 a 12) y (7 a 12) micrmetros de longitud, estas
ltimasconformadebotella.
Las colonias que desarrollan este hongo, son caractersticas por poseer una
apariencia hmeda, vellosa y aterciopelada de color verdoso. El desarrollo de
estascoloniasescaractersticaporsurpidocrecimiento.

5.
Caractersticasfisiolgicas

Penicillium chrysogenum
es una especie mesoflica, su ptima temperatura de
crecimiento es a los 23C. Su mnima temperatura de crecimiento es de 4Cysu
mxima temperatura es de 37C. Su rango de pH para su desarrollo ronda de 4
hasta un 6. Son estrictamente aerobios por lo que requieren de oxgeno para
desarrollarse. No requieren de luz para su desarrollo ya que nosonfotosintticos.
Utilizan compuestos orgnicos como su fuente de carbono. La quitina es su
compuesto estructural principalen eldesarrollo desuparedcelular.Sonresistentes
aelevadasconcentracionesdeazcar.

6.
Perfil bioqumico y/o serolgico utilizado para su identificacin o
serotipificacion

Para poder realizar un correcto perfil bioqumico de este antibitico, es necesario

conocer su proceso bioqumico. Se conoce a la penicilina como una estructura
anloga del aminocido terminal en las subunidades peptdicas encargadas de
iniciarlasntesisdelaestructurapeptidoglicanaenlasbacterias.

La penicilina resulta de la condensacin de acilo con un anillo betalactmico y 1

anillo de tiazolidina. El anillo betalactmico es de suma importanciaenesta etapa
yaquegracias a esta estructura,esporla cualseleconfierenatributosantibiticos
aestefrmaco.
Una caracterstica esencial en la penicilina, son los grupos qumicos que se
encuentran en su estructura qumica, principalmente en el carbono 3 y 6 ya que
estossonlosprincipalesfactoresparasucorrectaactividadbiolgica.

El caminobiosintticoquesiguela penicilina esuntanto breve.Estecomienzacon

la condensacin de 3 aminocidos formando as un tripptido de LValina,
LCistenayLaminoadpico. Luegodela formacin deltripptido, esteesciclado
demanera tal y suficienteque se genera la IsopenicilinaN.Porltimo,seincorpora
AcylCoAysesustituyelacadenalateraldelaIsopenicilina.

Parala identificacindeestasustanciasepuedeutilizarelmtododeobservaciny
determinacin delamino libreenelanillobetalactmicocausadoporlahidrlisisde
la penicilina. Tambien esta el metodo en el cual se utiliza un espectrofotmetro el
cualayudaradetectarlasreaccionesquesegeneren.

7.
Materialescrudosutilizadocomofuentedenutrientes

Parallevaracabolaproduccindelapenicilinaesnecesarioqueelmediodondese
va a introducir tenga ciertos nutrientes, el medio comnmente requiere de fuentes
de carbohidratos como lo es la glucosa, melaza de remolacha o la lactosa. El
nitrgeno, que tambin esrequerido en elfermentador, es suministradopor el licor
del maz fermentado semillas de algodn, cacahuetes, linaza e incluso harina de
soyasonalgunasdelasalternativasbastanteeficacesparaque elmedioobtengael
nitrgeno necesario para el correcto crecimiento del microorganismo deseado, en
este caso
penicillium.
Enalgunasocasionesseagotalafuentede dondeseobtiene
el nitrgeno al final del proceso de la fermentacin por loque se debereemplazar.
Tambin es necesario el carbonato de calcio o fosfatos que son aadidos de
manera de buffers. Los compuestos que contienen sulfuro en ocasiones son
agregados para que el rendimiento de la produccin de la penicilina tenga un
aumento ya que esta tiene sulfuro. En la actualidad en este proceso de
fermentacin, de la penicilina, se le aade las fuentes de carbohidratos de maner
aperidica o intermitente, pero esto depende tambin de que fuente de
carbohidratos se estn utilizando, hayalgunoscompuestos quenonecesitan llevar
a cabo este proceso, de ser aadidos intermitentemente y otros cuantos
compuestos si requieren de esta forma de introducir los carbohidratos. Se usa la
adicin, de manera automtica,deH2SO4 oNaOHparaqueelpHdel medioseael
ptimo,esdecir,entre6.7y7.4.

8.
Tipodefermentacinyfermentadorutilizado

El tipo de fermentacin utilizado para obtener la penicilina es fermentacin

sumergida. El inculo utilizado proviene de uncultivo madre delhongo,el cualse
realiz a partir de esporas liofilizadas, este medio de cultivo (compuesto
principalmente deuncaldodemaiz ,lactosaycompuestosinorgnicos)representa
aproximadamenteel10%delcultivototal.
Despus de que el pH se haya ajustado entre 4.5 y 5, el medio de cultivo se
transfiere al fermentador, su introduccin debe ser en condiciones estriles, as
como con apoyo de aire a presin. Mientras ocurre el crecimiento, la temperatura
debemantenerse entre23 y 25Caproximadamente, y el medio esesterilizadocon
vapor a presin. El crecimiento del hongo aerobio se ve beneficiado por el aire
esterilizado usado, la agitacin hace que la distribucin sea de manera ms
uniformeentodoelmedio.
6

Elprocesoocurre enintervalosquepuedenvariarentre3y6horas,despusdeque
hayan transcurrido entre 50 y 90 horas, la velocidad del crecimiento del hongova
reduciendo, lo cual significa que el mismo se ha desarrollado al100 por ciento.El
producto obtenido seenfra a temperaturabaja(5C), debido a quela penicilina es
inestable a temperatura ambiente. Por ltimo, se separa el micelio en un tambor
rotatorio.

El tipo de fermentacin usada es detipo cultivocontinuo,el cual es descrito como

un sistema abiertoquese adiciona constantementeel mediodecultivo frescopara
los microorganismos, a cierta velocidad y se extrae el caldo de fermentacin, es
decir, elmedio de cultivoconmicroorganismosymetabolitos.Asselogramantener
enel reactor unapoblacin establedemicroorganismosencondicionesestables.El
propsitodetener cultivo continuo esel hechodemantener a losmicroorganismos
enla fase exponencial. Para queel cultivocontinuo puedatener unamejoreficacia
es necesario que el proceso se encuentre en estado estacionario, es decir, que
ciertos factores permanezcan constantes a travsdel tiempo,comoel volumendel
cultivo, concentracin celular, concentracin de metabolitos y las condiciones
fisicoqumicas que requiere el microorganismo quesevaautilizar, como resultado
dedicha estabilidad, el proceso de fermentacinsepuede mantenerdurantelargos
periodos de tiempo, siempre y cuando el sistema se mantenga libres de
contaminantes.

Los fermentadores usados para la produccin de penicilina, pueden llegar a tener

unacapacidadentre 20y115mil litros. Estos fermentadores vienenequipadoscon
un agitador vertical, serpentinas que tienen como funcin mantener una
temperatura alrededor de los 25 grados centgrados (aunque en ciertas etapas la
temperatura debe variar para que el proceso seaeficaz), ascomounsistemade
inyeccindeaireesterilizado.


9.
Diagramadeflujodelprocesoydescripcindecadapaso

El
siguiente
diagrama,
muestra
el
diagrama
del
proceso industrial
de la penicilina.
Este sedividiren
distintas etapas
generales
dependiendo de
qu procesos se
lleven a cabo y al
finalseenlista una
serie de pasos
generales
para
englobar
el

proceso.

Etapa1: Enesta etapa seincluyenlos alimentosautilizaryelmedioelcualconsta

delicor de maz. Por lo general, se introducenlosalimentosqueconstadelactosa,
cidos, bases y dems nutrientes al esterilizador para despus ser bombeados al
fermentador.

Etapa2:Seintroducealhongo,enestecaso
Penicilliumchrysogenum
,aunsalvado
y las esporas generadas enel salvado se transfierenauntanque quesedenomina
tanquecan
.

Etapa3: Enesta etapaesdondelaproduccindepenicilinatomavisibilidadyaque,

despus de la inoculacin del fermentador con el medio del tanque semillero, se
aereaelfermentadorconaireestrilyesaqudondelaproduccintomapie.

Etapa4: Seretira elmicelio pormedio defiltraciones y se obtienedetalmanera,la

penicilinapura.

Paso1:
Preparacindelinculoempleado
Paso2:
Esterilizacinypreparacindelmedioenelquesevaagenerarelproceso.
Paso3:
Colocacindelinculoenelmedio
Paso 4:
Dado que el proceso es aerobio forzosamente, debe de introducirse aire
estrilalmedioalmomentodelaincubacin.
Paso5:
Extraccinderesiduosgeneradosporlaincubacin
Paso6:
Purificacin

10.
Metodosdeextracciony/opurificacindelproductoobtenido

En la actualidad, la extraccin con solventes es la base para la separacion y

purificacion de la penicilina. En el siguiente diagrama, el cual forma parte de el
diagrama que se coloc
anteriormente, se pueden ver
los diferentes mtodos por los
cuales se obtiene penicilina
pura, ya sea Penicilina G o
PenicilinaV.

El proceso comienza al transferir el producto generado en la fermentacin a un

tanque de sedimentacin, el cual contiene un pH alcalino que facilita la
desintegracin de la penicilina y enel cualsedejar queeste reposeysedimente.
Al trminode esteproceso, seenfraaunos5a10CyseregulaelpHaun6para
ayudaraconservarlapenicilina.
Una vez concluidos los pasos anteriores, se procede a la extraccin del solvente.
Este proceso esposibleyaquelascaractersticasqumicasdelapenicilina,facilitan
esteprocesoalsercidosmonobsicoscarboxlicos.
Como se puede observar en eldiagrama,el siguiente pasoser el tratamientocon
carbono ya que este ayuda a remover las impurezas del solvente. Una vez
concluidoel tratamiento concarbono, se empleaun buffer de fosfato al2%ypHde
9

7.5 para la extraccin del solvente que contiene la penicilina. A esta mezcla de
bufferconpenicilina,seleaadencidosmineralesparaacidificarladenuevo.
Finalmente lapenicilina es extrada conundisolventeorgnico. Elproductodeesta
extraccin es utilizado para repetir los pasos anteriores de tal manera que, en el
ltimo proceso, se utilizamenosymenosdisolvente orgnico.Estoayuda a que la
penicilina se concentre an ms con cada ciclo. Se busca que tenga una
concentracinde100vecesalaprimeraextraccin.

Una vez que se llega a la concentracin que se busca, el siguiente paso es

transformarel producto cido,auna salde tal maneraque puedasermsestable.
Algunosdelosprocesosporloscualessepuedehacerestosonlossiguientes:

CristalizacinmediantelaadicindeNa+oK+
Precipitacindelapenicilinaconlaayudadetrietilamina
Reaccinconcarbonatodecalcioparaproduccindesaldecalcio
Enesteltimo,lapenicilinaseobtienefiltrando,liofilizadoosecandola
saldecalcioobtenida.

Bibliografa
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