Seconde 216 Sant 3

2013_2014

Activit S-3.2 : Identification despces chimiques

par Chromatographie sur Couche Mince (CCM)
1RE PARTIE : La chromatographie de colorants alimentaires.
Tom doit analyser la composition de 3 colorants alimentaires (Vert (V), Marron(M), Violet (Vi)) en utilisant le
principe de la chromatographie sur couche mince (CCM) dont le protocole exprimental est donn ci-dessous.
INFO 1 : Principe de la chromatographie :
Une chromatographie permet de savoir si plusieurs espces chimiques sont prsentes dans une substance
liquide et didentifier ces espces.
Pour raliser une chromatographie on utilise un support sur lequel un solvant (ou un mlange de solvants)
migre. Le solvant (ou le mlange de solvants) migrant est appel luant.
Les diffrentes espces chimiques prsentent dans lchantillon dpos sur le support migrent avec lluant
des vitesses diffrentes permettant ainsi de constater leur prsence.
Pour identifier les diffrentes espces chimiques, on place des rfrences et on compare les rapports frontaux.
- Rapport frontal dune espce :
Front de lluant
Lorsque sur un chromatogramme deux tches
ont mme rapport frontal alors ces deux
espces chimiques sont IDENTIQUES

Ligne de dpt
Remarque : La vitesse de migration dpend de la solubilit de lespce chimique dans lluant
INFO 2 : Protocole exprimental pour raliser un chromatographie sur couche mince
Liste du matriel :
- plaque chromatographie (ou papier filtre)
- cuve lution munie dun bouchon
- luant (exemples : mlange dthanol et deau, eau sale,)
- petit pic en bois
- espces sparer et identifier
- espces de rfrences
Protocole :
- Verser une petite quantit dluant dans la cuve chromatographie.
- Fermer la cuve de faon ce que lluant imprgne la cuve.
- Tracer dlicatement au crayon papier une ligne horizontale 1cm du bord de la plaque chromatographie
(ou papier filtre). Cette ligne sappelle la ligne de dpt.
- Placer (au crayon papier) sur la ligne de dpt autant de croix que de dpts raliser et noter les initiales
des substances analyser.
- A laide dun pic dposer sur cette ligne une goutte de chaque substance analyser
- Plonger la plaque dans la cuve lution de faon ce quelle trempe dans lluant sans recouvrir la ligne
de dpt
- Fermer la cuve chromatographie
- Stopper llution lorsque le front de lluant est 2 cm du bord de la plaque : Le niveau atteint par lluant est
appel ligne de front de lluant.
- Sortir la plaque, reprer la ligne de front de lluant. Laisser scher et observer.
Remarque : Lorsque les substances analyser sont incolores il est ncessaire de rvler la plaque chromatographie sous
une lampe ultra violet (UV). Marquer alors au crayon papier les tches obtenues.

Tom a suivi le protocole ci-dessus afin danalyser la composition des 3 colorants alimentaires Vert, Marron et
Violet. Il a pris comme rfrences un colorant Cyan (C), un colorant Magenta (Mag.) et un colorant Jaune (J).

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Voici le schma reprsentant le chromatogramme quil a obtenu :

1) Vous allez interprter le chromatogramme obtenu pour le colorant
vert :
a) Quobserve-t-on pour ce dpt ?
b) Qua permis de faire llution ?
c) Donner la composition du colorant vert, aprs avoir calcul les
diffrents rapports frontaux.
2) Que peut-on dire dune substance si elle se dcompose en plusieurs
tches ?
3) Que peut-on dire dune substance si lon nobserve quune seule
tche ?
4) Que peut-on dire des distances parcourues par chaque colorant, quil
soit pur ou dans un mlange ? Proposer une explication.
5) Conclure quant la composition des 3 colorants analyss en
dterminant, dans chacun des cas les rapports frontaux.
Remarque : voir la vido chromatographie de colorants sur
chimphys.voila.net

2me PARTIE : Prouvons la prsence de cafine !

Le Guronsan, mdicament anti-fatigue a t retir en 2004 de la liste des produits dopants. Sa prsence dans
cette liste tait lie la prsence de cafine dans ce mdicament.
Dans les laboratoires danalyse anti-dopage, on utilise des techniques danalyse. La technique danalyse la plus
simple est la chromatographie sur couche mince.
Tom sait que le coca cola contient galement de la cafine et il a extrait, comme vous lors de la dernire
sance de TP avant les vacances, la cafine du caf.
Sa mission est triple. En utilisant un seul protocole exprimental, il doit :
-prouver la prsence de cafine dans le Guronsan.
- prouver la prsence de cafine dans le coca.
- vrifier qu la sance dernire de TP, lors de lextraction liquide-liquide, il a bien rcupr la cafine du
caf, que lon appellera extrait recueilli.
INFO 1 : La cafine nest pas toxique en faible quantit. Mais le flacon de cafine commerciale
(cafine pure) dont il dispose servant de rfrence, en contient dnormes quantits. Ne surtout
pas la goter ! Ci-contre, voici le pictogramme que lon trouve sur la cafine commerciale.
1) Proposer le protocole que doit raliser Tom permettant de prouver la prsence de cafine dans
ces trois substances (Guronsan (G), coca, extrait recueilli)
INFO 2: Cette fois Tom ralise la chromatographie sur une couche mince de silice dpose sur une plaque
daluminium. Elle est fragile : il ne faut pas dcoller la silice en faisant les dpts et il ne faut mettre les doigts
dessus, on na pas besoin danalyser les traces de doigts !
Par ailleurs les dpts raliss sont incolores Il utilisera donc une lampe UV pour rvler le chromatogramme.
Voici le schma reprsentant le chromatogramme quil a obtenu :

CCM prouvant la
prsence de cafine

1) Calculer les rapports frontaux des tches obtenues.

2) Conclure quant la prsence de cafine dans ces trois substances.
A CONSULTER ABSOLUMENT sur chimphys.voila.net
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Animation CCM

Vido CCM