UNIVERSIDAD POLITECNICA SALESIANA

CARRERA DE INGENIERIA EN BIOTECNOLOGA DE LOS

RECURSOS NATURALES
Laboratorio de: Escriba aqu el nombre de la ctedra relacionada.
Prctica No:

VISUALIZACIN DE CROMOSOMAS EN LAS CELULAS

VEGETALES DE LA CEBOLLA
ngel Mogrovejo 1, Maxi Adriel 2, Christian Yunga3

Objetivos:
Principal:
Observar e identificar los cromosomas en las clulas vegetales
presentes en la raz de la cebolla
Especficos:

Ganar habilidad para hacer cortes de tejido y hacer la coloracin.

Agudizar la observacin para diferenciar las formas y estructura de las
clulas vegetales y su funcin.

Marco terico:
Ciclo Celular
El ciclo celular transcurre en la etapa de interface durante la cual la
clula duplica su tamao y el contenido cromosmico, a esta etapa, la
clula est ocupada en la actividad metablica preparndose para la
mitosis (Ver figura 1)

Fuente: http://goo.gl/41qFz8
Fig. 1 ciclo celular
G1: Etapa de diferenciacin celular
S: Etapa de sntesis del ADN
G2: Etapa de rectificacin

La mitosis es el proceso clave de la divisin celular. En ella, el material

gentico previamente duplicado se organiza en cromosomas y se

reparte equitativamente a las dos clulas hijas en formacin. La raz de

la cebolla es un buen material para observar este proceso, puesto que
en el meristemo apical las clulas se dividen a gran velocidad, lo que
aumenta la probabilidad de detectar clulas en mitosis. 1
Los cromosomas, como la mayora de los componentes celulares, son
invisibles al microscopio si no les aplicamos una tincin especfica.
La mitosis es un proceso dinmico, secuencial y continuo, pero para
facilitar la experimentacin y el anlisis este proceso se divide en 4
etapas: profase, metafase, anafase y telofase. 2
PROFASE
La clula parece ms esfrica y el citoplasma ms viscoso. (Ver figura
2)Al comienzo de la profase los cordones de cromatina se enrollan
lentamente y se condensan, aparecen los cromosomas.

Fuente: http://nubr.co/rXDHpT
Fig. 2 Profase

METAFASE
Cada cromosoma se une a dos fibras del huso, provenientes cada una de
un polo, y se alinean en el plano ecuatorial, es decir, en el centro de la
clula. (Ver figura 3)

Fuente: http://nubr.co/0deUfj
Fig. 3. Metafase

ANAFASE

Mientras se ha ido formando el huso acromtico, los cromosomas se han

dividido en dos mitades o cromtidas, las dos cromtidas se separan,
arrastradas por los filamentos tractores del huso acromtico y se dirigen
a los dos polos de la clula, convertidos ya en cromosomas hijos. (Ver
figura 4)

Fuente: http://nubr.co/6x0myx
Fig. 4 Anafase

TELOFASE
Los cromosomas se sitan en cada polo, las fibras del huso se dispersan
por el citoplasma, se inicia la formacin de las envolturas nucleares que
rodearn a los dos ncleos hijos. Los cromosomas se tornan difusos,
pues se empiezan a desenrollar. Aparece un nuclolo en cada polo, se
inicia la citocinesis (divisin del citoplasma por la mitad), se forman dos
clulas hijas. (Ver figura 5)

Fuente: http://nubr.co/avhFwu
Fig. 5 Telofase

CITOCINESIS
Etapa de la divisin celular que consiste en la divisin del citoplasma. El
proceso visible de la citocinesis suele empezar en la telofase de la
mitosis y por lo general divide la clula en dos partes ms o menos
iguales. La citocinesis difiere en ciertos aspectos en clulas animales y
vegetales. (Ver figura 6)

Fuente: http://nubr.co/G6B92p
Fig.6 Citocinesis

La orcena, colorante morado que

usaremos en este caso, est
compuesta en realidad de dos componentes, que se aaden
en
momentos diferentes. La orcena A reblandece las membranas celulares
y la orcena B completa el proceso de tincin del material cromosmico
al adherirse a estas estructuras. [3]
Materiales
Portaobjetos
Cubreobjetos
Vaso
precipitacin
Pinzas
Gotero

Reactivos
Equipos
cido clorhdrico
Microscopio
Alfeina
Hornilla
elctrica
de
cido actico
Orcena
Azul
metileno

de

Desarrollo de la prctica
-

Con al menos 8 - 10 das anteriores a la realizacin de la actividad

experimental, se debe colocar una cebolla en un frasco y agregar
agua corriente hasta que se cubra la porcin radicular del vegetal (la
cebolla no debe estar sumergida por completo en el agua).
Se debe cambiar el agua del frasco por agua limpia, al menos dos
veces, a los 3 y 6 das.
La raz de la cebolla debe de estar sumergida en agua hasta el
momento de realizar la prctica.
1. Cortar sobre un portaobjetos, una porcin de 1 a 2 mm de la punta
de la raz en crecimiento, con ayuda de un bistur.

2. Agregar con un gotero, una gota de cido clorhdrico (HCl) 5 N, y

dejar reposar entre 15 a 25 minutos.
3. Con ayuda de papel absorbente se retira el exceso de HCl.
4. Posteriormente se tie con aceto-orcena durante 20 minutos
(puede usarse el calor de una parrilla por breves momentos para
acelerar la fijacin del colorante).
5. Con ayuda de unas pinzas de diseccin, colocar el corte en un
portaobjetos limpio y aadir una gota de cido actico al 45%.
6. Inmediatamente despus, colocar un cubreobjetos y presionar con
la goma de un lpiz para formar una
7. monocapa celular (tcnica de squash). Y lo Llevamos al microscopio
y observamos con el lente 10x y 40x.
8. Ponemos en la muestra una gota de azul de metileno y esperamos
por 10 minutos. Despus de transcurrido ese tiempo lavamos con
agua destilada cogiendo la raz con una pinza para que no se
mueva, cubrimos con un cubre objetos y observamos en el
microscopio con los mismos lentes (10x y 40x).
OBSERVACION MICROSCOPICA:
1. Se realizar a fuertes aumentos.
2. La orcena A reblandece las membranas celulares y la B completa
el proceso de tincin.
3. Con la presin sobre el portaobjetos de la preparacin se logra una
extensin y difusin de las clulas del meristemo de la cebolla.
4. La preparacin presenta el aspecto de una dispersin de clulas
por todo el campo que abarca el microscopio.
5. Se observan clulas en diversas fases o estados de divisin celular.
6. Se ven los cromosomas teidos de morado por la orcena.
Anlisis de resultados Luego de realizar las mediciones y clculos
correspondientes estos deben ser estudiados. El estudiante debe

centrarse en interpretar los datos, contrastarlos con los clculos y datos

existentes sobre el tema.
Conclusiones y recomendaciones
Quedo totalmente claro el proceso que sigue la clula para llegar a
cumplir su ciclo de divisin que es:
En primer lugar esta el crecimiento celular, el cual pasa a la replicacin
de ADN, distribucin de los cromosomas duplicados a las clulas hijas y
por ultimo la divisin celular con sus respectivas fases.
Este trabajo nos sirvi para entender mejor el proceso de mitosis de una
manera practica, es decir viendo nosotros mismos, como se lleva a cabo
dicho proceso, de esta forma justificar y llegar a una conclusiones a
partir de lo entendido
Bibliografia
1. Karp, G. 2006. Biologa Celular y Molecular: Compuestos y
experimentos. 4 ed. Ed. McGraw-Hill Interamericana. pp. 13201340.
2. BUENO, M. (2001). Mitosis y meiosis en clulas vegetales. Guas de
laboratorio de gentica II. Departamento de Biologa. Universidad
Nacional de Colombia. Bogot
3. Snchez, R.J. y Suja, S.J. Prcticas de Biologa Celular.
Departamento de Biologa. Unidad de Biologa. Universidad
Autnoma de Madrid.