Tema 3.

Las protenas fibrosas:

queratinas y colgeno.
Las protenas transportadoras de oxgeno:
mioglobina y hemoglobina.

Las protenas fibrosas:

queratinas y colgeno
Caractersticas generales de las protenas fibrosas.
Diseo estructural de las - y -queratinas.
El colgeno: caractersticas generales, tipos,
residuos modificados.
Estructura de la triple hlice del colgeno.
Formacin de fibras.
Biosntesis del colgeno.

Principales protenas fibrosas

Las protenas fibrosas tienen un solo tipo de estructura secundaria,
y estructuras cuaternarias.
Suelen conferir propiedades como fuerza, flexibilidad o elasticidad.
Funcin

Estructura

Ejemplos

Estructuras de proteccin fuertes e

insolubles , de dureza y flexibilidad
variables
uas, cuernos, pelo, lana

Hlices enrolladas y
entrecruzadas por
linkers rgidos: puentes diS

-queratinas

Fibras suaves, flexibles,

no elsticas
telas araa, seda, plumas, escamas

Lminas en capas unidas

no covalentemente por
interacciones de Van der Waals

-queratinas:
Fibrona

Fibras con gran fuerza de tensin,

sin estiramiento
tendones, cartlago

Hlices triples entrecruzadas

por linkers flexibles (Lys-HyL)

Colgeno

Fibras elsticas
arterias, pulmones, vejiga, ligamentos

Elastina

Protenas fibrosas: composicin en aminocidos

En general son ricas en

residuos hidrofbicos,
e insolubles en agua

Las -queratinas
Han evolucionado para soportar esfuerzos mecnicos. Son componentes
mayoritarios del pelo, epidermis, uas, cuernos, picos, etc, slo en Vertebrados
Son miembros de las protenas de los filamentos intermedios, que tienen
misiones estructurales intracelulares: otras de ellas son del citoesqueleto
Cada cadena polipeptdica tiene
ms de 300 residuos en hlice
dextrgira, con extensiones N y C
no helicoidales. Cada dos cadenas se
enroscan entre s de forma levgira.

dmero

dmero

protofilamento microfibrilla

Cada 4 residuos hay uno apolar

(Ala, Val, Leu, Ile, Met y Phe): se
forma una tira hidrofbica para la
asociacin entre las dos hlices .

Son ricas en Cys (10-18%), que
forman puentes diS entre las
cadenas a distintos niveles.

Dos monmeros enroscados forman un dmero u
ovillo. Estos se asocian en niveles sucesivos formando
protofilamentos, protofibrillas y microfibrillas.
Los niveles superiores de asociacin no estn claros.

2-3 nm

Estructura del pelo

La estructura de las -queratinas
justifica por qu es posible ondular
el cabello de forma permanente

Corte transversal de un pelo

En presencia de calor hmedo, las

hlices se estiran y sus enlaces de H
se rompen. Luego se moldea el pelo y
se aplica un agente reductor. Luego se
aplica un agente oxidante y se enfra.

Las -queratinas
Estn formadas por capas de lminas antiparalelas, ricas en residuos
con grupos R pequeos, lo que permite un estrecho empaquetamiento de
las capas.
Son fuertes, flexibles y poco extensibles. A diferencia de las -queratinas,
suelen ser extracelulares.
Son ricas en Gly (50%) Ala (30%) y Ser. No tienen Cistena.
Suelen tener secuencias repetidas de (Ser-Gly-Ala-Gly)n, aunque tambin
hay aminocidos ms voluminosos que interrumpen peridicamente los
segmentos de lmina , haciendo menos compacto el empaquetamiento.

Vista superior

Vista lateral

Estructura de la protena fibrona

Puentes de H

Lminas
antiparalelas

van der Waals

Como en las otras -queratinas, la estructura est estabilizada por puentes

de H entre las lminas antiparalelas adyacentes, e interacciones de van
der Waals entre las capas de lminas superpuestas.
Es la protena principal de las fibras de las polillas de seda y de las telas de
araa. Es muy flexible porque la estructura est mantenida por interacciones
dbiles, pero no se estira porque las lminas ya estn muy expandidas.

Seda de araa
Se usa para las telas, sacos de huevos y envoltura de las presas.
Es un material extremadamente flexible y fuerte (ms que el acero), de
forma que puede aguantar mucha tensin sin romperse.
Est compuesto por partes cristalinas ricas en fibrona, y partes estirables
tipo caucho.

Orificios de las glndulas

de la seda de una araa

El colgeno proporciona resistencia a la tensin

Es la protena ms abundante en los Vertebrados (25-30% del total),
pero tambin aparece en Invertebrados.
Es el principal componente del tejido conjuntivo: huesos, tendones,
cartlago, crnea.
Est formado por unidades de tres cadenas polipeptdicas entrelazadas
entre s formando una triple hlice.
La Gly constituye el 35%, mientras que en otras protenas suele ser el 5%.
Tambin hay un 11% de Ala. La Pro es ms abundante que en otras
protenas (21% con Hyp).
Posee residuos aminoacdicos modificados: 4-hidroxiprolina (Hyp) y 5hidroxilisina (Hyl).

Caractersticas peculiares de la secuencia del colgeno

Gly-Pro-Met-Gly-Pro-Ser-Gly-Pro-Arg-
Gly-Leu-Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Ala-Hyp-
Gly-Pro-Gln-Gly-Phe-Gln-Gly-Pro-Hyp-
Gly-Glu-Hyp-Gly-Glu-Hyp-Gly-Ala-Ser-

Secuencia consenso

Pro
Gly - X - Y
Hyp

Estructura del colgeno

Es un polmero de unidades llamadas TROPOCOLGENO
El tropocolgeno es una protena de 285 kDa
formada por tres cadenas polipeptdicas del
mismo tamao, unos 1000 residuos.
Cada una de esas tres cadenas forma una
hlice levgira (a,b), con ngulos de giro =
-51, = +153.
La hlice levgira del colgeno es una
estructura secundaria nica, claramente
distinta de la hlice . Las secuencias tpicas
del colgeno no se adaptan a estructuras en
hlice o lmina .
Las tres cadenas polipeptdicas de unos 1000
residuos se asocian entre s formando una
(super)hlice triple dextrgira (c).

La triple hlice del colgeno

3 hlices levgiras

Tres cadenas o hlices levgiras (con 3,3

residuos por vuelta) se enrollan entre s,
formando una triple (super)hlice
dextrgira.
La triple hlice forma una especie de cable
rgido, y est estabilizada por puentes de H.
La triple hlice tiene ms fuerza de tensin
que un cable de acero de la misma seccin.

Superhlice
dextrgira

Muchas hlices triples se ensamblan para

dar una fibrilla de colgeno.

Fibrilla de colgeno

300 nm
1,5 nm

Base estructural de la
triple hlice del colgeno
Cada tercer resto de una cadena pasa a travs
del centro de la triple hlice. La falta de espacio
explica la presencia de la Gly en esos lugares.
El ensamblaje de las cadenas requiere que estn
desplazadas un residuo entre s a lo largo del
eje, de forma que en cada nivel de la triple hlice
se hallen los restos Gly, X e Y correspondientes a
las tres cadenas adyacentes:
Gly-Pro-Met-Gly-Pro-Ser-Gly-Pro-Arg-
Hyp-Gly-Pro-Hyp-Gly-Ala-Hyp-Gly-Leu-
Pro-Gln-Gly-Phe-Gln-Gly-Pro-Hyp-Gly-

El -NH de cada Gly establece un puente de H

con el -CO del resto X (generalmente Pro) situado
en otra cadena adyacente.
Los residuos situados a cada lado de la Gly (en
general Pro, Hyp, Hyl) se sitan hacia el exterior
de la hlice.

Gly

Organizacin de las hlices en fibrillas de colgeno

tropocolgeno

fibrillas

La Lys y la Pro se hidroxilan tras incorporarse a la protena

Estos procesos tienen lugar justo tras
la incorporacin de los aminocidos, con
las cadenas polipeptdicas todava
unidas a los ribosomas.
La formacin de 4-hidroxiprolina
fuerza al anillo de la Pro a adquirir un
pliegue estructuralmente favorable.

Lisil hidroxilasa

Lys

Hyl
vitamina C

Tanto la Hyl como la Hyp permiten

desarrollar ms puentes de H dentro de
Prolil hidroxilasa
la triple hlice del colgeno.
La Hyl sirve para la adicin posterior
de glucosas y galactosas

Pro

Hyp

vitamina C
La vitamina C (cido ascrbico) se
necesita para mantener el estado de
oxidacin del Fe2+ que estos enzimas
usan como cofactor crtico para su
actividad.
El escorbuto (deficiencia en vit C) provoca un
Vitamina C
colgeno defectuoso: lesiones cutneas y en
encas, fragilidad capilar y cada de dientes

En Vertebrados hay muchos tipos de colgeno

Los tipos de colgeno se diferencian por la naturaleza de sus
cadenas (I, II, III, IV, V) y las asociaciones entre ellas (1, 2, 3,)
tipo

composicin

localizacin

Tipo I

[1(I)]22(I)

Mayoritario: huesos, piel, tendones

Tipo II [1(II)]3

Cartlago, vtreo, discos intervertebrales

Tipo III [1(III)]3

Vasos sanguneos, cicatrices, piel fetal

Tipo IV [1(IV)]3

Membrana basal, cristalino

[2(IV)]3
Tipo V [1(V)]22(V)

Superficies celulares, placenta

[1(V)]3
[1(V)][2(V)][3(V)]
Tipo VI

ntima de la aorta

La gelatina es un derivado del colgeno, pero tiene poco

valor alimenticio por tener muy poca variedad de aminocidos

Formacin de fibras de colgeno

Tropocolgeno

300 nm

Formacin de fibrillas
y entrecruzamiento
Enlaces cruzados
covalentes

Fibrilla de colgeno
Agregacin

Fibra de colgeno

Formacin de enlaces cruzados

Residuos de Lys

Enlace cruzado aldlico

Una vez ensambladas las fibras de colgeno, se desarrolla la formacin de

enlaces cruzados covalentes intramoleculares entre residuos de Lys o Hyl de
cadenas distintas de una molcula de tropocolgeno, e intermoleculares entre
distintas molculas de tropocolgeno.

Sntesis del colgeno

en fibroblastos
preprocolgeno
procolgeno
secrecin
procolgeno

tropocolgeno
fibrillas de colgeno

Protenas transportadoras de oxgeno:

mioglobina y hemoglobina

Introduccin a las protenas transportadoras de oxgeno.

Estructura del grupo prosttico hemo.
Estructura de la mioglobina (Mb) y la hemoglobina (Hb).
Caractersticas de la unin de oxgeno a la Mb y la Hb.
Alosterismo y cooperatividad en la Hb.
El efecto Bohr. Papel del 2,3 bisfosfoglicerato.

Protenas transportadoras de oxgeno

La evolucin de vida anaerobia a aerobia supuso una mejora en
la obtencin de energa
Anaerobiosis
Glucosa 2 ATP
Aerobiosis
Glucosa 30-32 ATP
El O2 es muy poco soluble en agua, por lo que los animales multicelulares
han desarrollado sistemas circulatorios para proveer a las clulas de O2 para el
metabolismo aerobio
Ninguna cadena R de puede unir O2, pero el Fe y el Cu s pueden. Sin
embargo, el Fe en solucin provoca especies reactivas que pueden daar las
biomolculas, por lo que se han desarrollado protenas transportadoras de O2

Mioglobina (Mb)
Transporta oxgeno en
el tejido muscular

Hemoglobina (Hb)
Transporta oxgeno
por la sangre

Ambas necesitan un componente no peptdico: el grupo prosttico hemo,

capaz de unir reversiblemente el O2

La Mb y la Hb son las protenas ms estudiadas y mejor conocidas

Estructura del grupo hemo: Protoporfirina IX + Fe2+

Anillo tetrapirrlico

El tomo de hierro tiene seis enlaces de coordinacin, cuatro en el plano y

unidos a la molcula de porfirina, y dos perpendiculares.
El grupo hemo tambin es tpico de citocromos, tanto transportadores de
electrones en la cadena respiratoria como citocromos P450, que catalizan
mltiples reacciones redox.
Estas y otras enzimas que portan grupos hemo catalizan una gran variedad de
oxidaciones bioqumicas gracias a la activacin del O2 por hierro.
Las protenas que tienen un grupo hemo se llaman hemoprotenas.

La Mioglobina (Mb)
Es de la familia de las globinas.
Es un monmero de 153 residuos, con
Pmol 16.700.
Est formada por ocho hlices (A-H),
lo que supone un 78% de la secuencia, y
pocas zonas no helicoidales, con giros
(p.e., CD) y los extremos N y C.
Tiene una estructura compacta, con el
interior apolar, salvo dos residuos His
(His F8 proximal e His E7 distal).
Extremo C

Extremo N

Su estructura tridimensional
fue determinada por
Perutz y Kendrew

El grupo hemo est insertado en una

oquedad cerca de la superficie.
En el hemo, el Fe est ligeramente fuera
del plano de la porfirina, hacia la His F8
(proximal) a la que est enlazado.
Aparte de esta unin a la His, el hemo no
est unido covalentemente a la parte
proteica de la Mb.

Estructura terciaria
de la Mioglobina
(PDB ID 1MBO)

Residuos hidrofbicos

El Fe2+ est unido mediante

cuatro enlaces de coordinacin
al anillo de protoporfirina, que
a su vez est encajado en una
oquedad de la protena

Disposicin del Fe2+ y unin del O2 en el grupo hemo

de la Mioglobina
Vista lateral

His E7
His F8

His F8
Plano del anillo de
protoporfirina IX
El Fe2+ del hemo est enlazado a la
His F8 de la Mb a travs de su quinta
posicin de coordinacin

El O2 se une reversiblemente a la
sexta posicin de coordinacin del
Fe2+, e interacciona con la His E7

Unin del O2 al grupo hemo de la Mioglobina

o de la Hemoglobina
DesoxiMb / DesoxiHb
His F8
proximal

Fe2+

VACIO

OxiMb / OxiHb
His F8
proximal

La unin del O2 a la sexta

posicin de coordinacin del
Fe2+ causasun desplazamiento
de 0,04 nm de ste hasta el
plano del hemo
metaMb/ metaHb
ferriMb / ferriHb

His F8
proximal

Fe3+

H 2O

El Fe3+ no une O2

Fe

His E7

La unin del O2 a la Mioglobina presenta cintica hiperblica

[MbO2]
Fraccin de saturacin YO2 =
[Mb]+[MbO2]
Fraccin de saturacin (Y)

Cuando [MbO2] = [Mb], la

YO2 = 0,5. La Mb est al 50%
de saturacin
P50 es la presin de O2 a la
que se alcanza el 50% de
saturacin
Si tenemos Mb saturada de
O2 y la bajamos de 10 a 0,25
kPa, perder la mitad del O2

Presin parcial de oxgeno (pO2), kPa

P50 es el parmetro que

reflejar la AFINIDAD de la
protena por el O2. A menor
valor de P50, mayor afinidad

La Hemoglobina (Hb)
Es una protena con estructura cuaternaria,
de forma seudoesfrica, y con un dimetro de
5,5 nm.
Est formada por cuatro cadenas: dos
(141 residuos) y dos (146 residuos), y tiene
un Pmol 64.500

Tiene cuatro grupos hemo, uno por

cadena
Las estructuras terciarias de las cadenas
y son muy similares, aunque menos de la
mitad de los residuos son idnticos
Las cuatro cadenas estn en posicin
tetradrica. Cada una de las cadenas est
en contacto con las dos cadenas . Sin
embargo, hay pocas interacciones - o -.
Existen otros tipos de cadenas similares a
las () y (, , )

Las cadenas de la Hemoglobina son muy similares

estructuralmente a la Mioglobina

Hemoglobina

Mioglobina

grupo
hemo
La similaridad en estructura
terciaria se da a pesar de su pobre
homologa de secuencia (< 20%).

Mioglobina
153 residuos

Cadena de
Hemoglobina
146 residuos

Hay nueve posiciones de la

secuencia que estn muy
conservadas (Gly B6, Pro C2, His
F8, His E7, etc), tanto en las
cadenas y de la Hb como en la
cadena de la Mb, y en todas las
globinas conocidas

Existen distintas formas de la Hemoglobina, con distintas propiedades

de afinidad por el O2 en funcin del ambiente fisiolgico en el que estn.
As, p.e., la Hb fetal tiene ms afinidad por el O2 que la materna, por lo
que sta puede cedrselo y suministrar O2 al feto
La Hb A2 aparece en torno a un 3% en adultos

- Hemoglobina adulta

Hb A1

- Hemoglobina adulta

Hb A2

2 2

- Hemoglobina fetal

Hb F

2 2

- Hemoglobina embrionaria

2 2

2 2
2 2

La Hemoglobina es un transportador de O2 ms verstil que

la Mioglobina gracias a que presenta cintica sigmoidal,
debida a la unin cooperativa del O2
La unin cooperativa hace que a las
molculas de Hb les cueste unir las
primeras de las 4 molculas de O2,
pero una el resto ms eficazmente
Esto provoca que la unin del O2 a la
Hb presente una cintica sigmoidal, y
que tenga mayor P50 y menor afinidad
por l que la Mb
Debido a ello, la Hb es capaz de
ceder la mayor parte del O2 que
carga en los pulmones a la Mb de los
tejidos metablicamente activos: a esa
pO2 la Mb est todava al 85% de
saturacin

P50 Mb

P50 Hb

(1 kPa = 7,5 torr)

La Mb lo almacena y lo va cediendo
segn las necesidades tisulares

La cooperatividad en la Hemoglobina
La evolucin de una protena monomrica (Mioglobina) a una tetramrica
(Hemoglobina) se traduce en la adquisicin de nuevas propiedades:
1.- La Hb tiene menor afinidad por el O2 que la Mb, de forma que lo cede a
pO2 en las que la Mb lo capta.
As, la Hb se satura de O2 en los pulmones (pO2 alta), lo libera fcilmente en
los tejidos (pO2 baja), y lo libera an ms cuando los tejidos estn activos (pO2
muy baja).
2.- La unin del O2 a Hb es cooperativa: la unin inicial de O2 favorece la
unin subsiguiente de ms O2 a la misma molcula. De la misma manera, la
liberacin de O2 favorece la liberacin de ms O2 de la misma molcula.
La cooperatividad en la Hb aumenta la eficiencia en el transporte de O2
desde los pulmones a los tejidos. Debido a la cintica sigmoidal de unin del
O2, el grado de saturacin de la Hb cambia mucho ms dramticamente al
variar la pO2.
3.- Adems, la afinidad de la Hb por el O2 est regulada por el pH y del CO2
(Efecto Bohr), y por organofosfatos a travs del 2,3-BPG.
Los parmetros de unin y liberacin de O2 por Hb son regulados mediante
control alostrico por molculas que delatan el estado metablico

Unin (y disociacin) cooperativa de un ligando

y cambios conformacionales alostricos
La hemoglobina y las dems
protenas alostricas son capaces de
responder a molculas especficas de
su entorno mediante cambios
conformacionales transmisibles entre
partes de la molcula, que alteran su
estructura cuaternaria y su
funcionalidad.
Alosterismo: allos (otro) stereos
(forma). Fenmeno por el cual la unin
de una molcula especfica a una
protena provoca un cambio
conformacional que modifica las
condiciones de unin de otra molcula,
en otra ubicacin distante, lo que
afecta a su actividad biolgica.
Estas molculas se denominan
efectores o moduladores alostricos
y pueden ser positivos o negativos

Base estructural del comportamiento alostrico de la Hb

0,039 nm

La Hb es un tetrmero formado por

dos dmeros 11 y 22.

hlice F

Tras la unin del O2 al Fe de un grupo

hemo, ste se desplaza 0,039 nm hacia
el interior del anillo, arrastrando a la
His F8 y a la hlice F.
Ello se traduce en cambios
estructurales en la interfase entre las
cadenas de la Hb y otras regiones de la
molcula, lo que constituye el origen
molecular de la cooperatividad.
Hay cambios conformacionales
debidos a la unin del O2:
- los dmeros 11 y 22 giran unos
15 entre s
- se rompen 8 puentes salinos entre
las subunidades
- las interfases 21 y 12 sufren
cambios y actan como conmutadores
del cambio conformacional de T a R

Cambios en la estructura de la Hb tras la unin del O2

O2

H 2O
Ruptura de 8 puentes salinos y
mayor interaccin con el agua

desoxiHb (forma T)

oxiHb (forma R)

Tras la unin del O2, hay una transicin alostrica de carcter cooperativo
en la estructura de la Hb, que pasa desde el estado o conformacin T de
baja afinidad al estado R de alta afinidad.
O2

desoxiHb (forma T)

O2

O2

O2

O2

O2

O2

oxiHb (forma R)

Este equilibrio est afectado por diversos

efectores alostricos (H+, CO2 y 2,3-BPG)

El efecto Bohr
Los H+ y el CO2 disminuyen la afinidad de la hemoglobina por el O2
Los H+ se unen a la Hb y favorecen la
adopcin de la forma T de baja afinidad.
El CO2 es un producto del metabolismo
celular que debe ser transportado a los
pulmones para su liberacin.
La mayor parte es convertido en HCO3- y
transportado por la sangre. Otra parte puede
unirse a los extremos amino de la Hb
formando carbamatos, lo que tambin
favorece la conformacin T.

Sitios de unin de H+ en la Hb
His 146 (C-terminal) de cadenas
(40% efecto Bohr)
N-terminal de cadenas
(20-30% efecto Bohr)

As, el CO2 tisular reduce la afinidad del O2

por la Hb al aumentar la [H+] de dos formas:
CO2 + H2O HCO3- + H+
R-NH2 + HCO3- R-NH-COO- + H+
Estas y otras reacciones contribuyen a una
bajada del pH tisular, lo que reduce la
afinidad de la Hb por el O2 y promueve la
liberacin de O2 en los tejidos.
Son efectores alostricos negativos con un efecto positivo sobre la funcionalidad

Transporte de O2 y CO2 entre

los tejidos y los pulmones

La Hb transporta cerca del 40% del total

de H+ y el 15-20% del CO2 formado en los
tejidos hacia los pulmones.
En ellos libera los CO2 y H+ unidos y
vuelve a enlazar O2.

El 2,3-bisfosfoglicerato
(2,3-BPG) es un
efector alostrico
negativo de la
hemoglobina
Se forma a partir del intermediario
glucoltico 1,3-BPG, pero no es un
metabolito de la ruta
Se introduce en el hueco central de la
desoxiHb, e interacciona con residuos
positivos de His y Lys de las cadenas
Disminuye la afinidad por el O2 al
estabilizar la configuracin T desoxiHb
mediante estas interacciones
En la oxigenacin es expulsado de
la cavidad central al hacerse sta ms
pequea
En su ausencia, la unin de O2 a la
Hb tiene cintica casi hiperblica

Transporte de O2 por
la hemoglobina en
presencia y ausencia
de CO2 y 2,3-BPG
El comportamiento de la
hemoglobina en la sangre
es el resultado de la accin
de varios efectores
alostricos negativos y de
la unin cooperativa de O2