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CENTRO DE CINCIAS NATURAIS E EXATAS CCNE

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA
DISCIPLINA DE GENTICA AGRONOMIA
Unidade 1 Gentica Molecular
1. Introduo
Ao se analisar um indivduo, seja uma planta, seja um animal, o que se v o conjunto de fatores que ao
agirem, cada um h seu tempo, produzem o que se denomina fentipo. Esse conjunto composto pelos
componentes celulares, sobretudo pelo ncleo, alm de um componente chamado ambiental.
O ncleo o que age de forma decisiva na expresso do fentipo, ou aparncia do indivduo, pois ele
contm o que se denomina a molcula da vida, ou DNA.
Mas o que tem esse DNA que faz com que as ervilhas de Mendel sejam amarelas ou verdes, lisas ou
rugosas? Que o feijo tenha flores roxas ou brancas e que suas sementes sejam pretas, marrons ou brancas? O
que tem esse DNA que faz o animal engordar mais rpido num bom pasto, em relao a outros animais que
no engordam tanto com a mesma forragem? Que estruturas moleculares contribuem para fazer com que esse
fentipo se manifeste diferentemente em pocas especficas de desenvolvimento dos indivduos? O que faz
que tecidos de crescimento vegetativo se transformem em reprodutivos e, por ltimo, como isso passa atravs
das geraes?
A Gentica Molecular consegue responder a essas questes, inclusive estabelecendo relaes com a
Fisiologia Vegetal. Como se trabalha apenas com exemplos vegetais tentar-se- us-los, em sua maioria, para
explorar essas questes e evidenciar a importncia de se conhecer intimamente o DNA, sua composio e sua
transmisso atravs das geraes.
Na dcada de 50 a estrutura da molcula de DNA foi descoberta por Watson e Crick que estabeleceram
um modelo de conformao dessa molcula que se encontra no ncleo das clulas dos vegetais e animais, nos
seres humanos e procariontes (h vrus que tem o RNA como material gentico no lugar do DNA). O modelo
da estrutura do DNA atualmente muito divulgado, dada sua grande importncia em todas as reas
relacionadas com a Biologia, como a Fsica, a Qumica, a Bioqumica e a Fisiologia Vegetal. Pode-se nesse
momento dizer que genes e enzimas estabelecem um par perfeito para o funcionamento celular, pois um est
em estreita relao com o outro.
O presente captulo tem por objetivo descrever a funcionalidade do DNA do ncleo das clulas e como os
genes, que esto no DNA, se transformam em protenas para o funcionamento das plantas.

2. O gene e a Enzima
Ao se cruzar cultivares de feijo (Phaseolus vulgaris L.) que tm flores brancas, que sejam homozigotas,
obtm-se a primeira gerao filial, a F1, com flores de cor prpura. Sabe-se que a gerao F1 , por excelncia,
heterozigota, derivada do cruzamento entre paternais homozigotos, portanto possuem em seu gentipo as duas
formas allicas em todos seus genes.
Ao se cruzar as plantas da F1 entre si obtm-se a gerao F2, onde se percebe que a proporo de flores
prpuras para brancas de 9:7. Com essa proporo chega-se a concluir que so dois genes que esto agindo
para a manifestao do fentipo e que o produto proteico resultante possui uma interao do tipo Epistasia
(Ver Unidade 5).
de conhecimento que na epistasia um alelo de um gene pode inibir o outro, ou que, quando os dois
alelos ou apenas um de um gene no est presente no gentipo, o fentipo fica alterado. Para melhor se
entender a proporo episttica mencionada o tabela 1.1 demonstra a segregao fenotpica e a relao com a
proporo episttica dos genes.
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Tabela 1.1 Demonstrao do gentipo, fentipo e proporo episttica em F2 com dois genes interagindo
entre si.
Nmero
9
3
3
1

Gentipo
A- BA- bb
aa Baa bb

Fentipo
Prpura
Branca
Branca
Branca

Proporo Episttica
9
7

Portanto para a produo da cor prpura os dois alelos dominantes A e B devero estar nos mesmos
indivduos. Na falta de um deles a cor passa a ser branca. O que tm esto esses dois alelos para produzirem a
cor prpura?
A cor das flores depende dos pigmentos que so produzidos e esses derivam de rotas metablicas
especficas de transformaes de substratos. E a transformao dos substratos depende de enzimas. As
enzimas so protena com atividade cataltica constitudas de sequncias de aminocidos. Para que a sequncia
de aminocidos funcione como uma enzima necessria ter uma informao prvia que dite onde se colocar
a alanina ou a serina, se a metionina deve ou no ficar na sequncia. E quem determina isso tudo o DNA que
constitudo de um conjunto ordenado de nucleotdeos, que so os precursores para a formao das cadeias de
protenas.
Ento para se responder como a cor prpura produzida deve-se levar em considerao que um alelo
dominante de um gene A deve estar presente. Esse alelo, no DNA, possui a informao, codificada na
sequncia e bases nucleotdicas, que produz uma enzima que transforma o substrato 1 em 2. Assim como, no
outro gene B, o alelo dominante tambm deve estar presente para haver a transformao do substrato 2 em 3.
O substrato 3 o que produz a cor prpura.
Em resumo:

Caso um desses alelos no esteja presente no indivduo cor ser branca, porque haver bloqueio na rota
metablica, conforme esquema abaixo:

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Se for considerada uma planta, em princpio, pode-se dizer que todas as suas clulas possuem o mesmo
contedo gentico, portanto o mesmo nmero de cromossomos e genes. Esta informao vlida, porm
vrias alteraes cromossmicas so passveis de acontecer. Por exemplo, as clulas dos vasos condutores no
possuem mais ncleos e as clulas das folhas podem ter mais de 2 genomas, entretanto quando se refere s
reprodutoras, a sim elas possuem o mesmo nmero cromossmico (so haploides), salvo algum problema
provocado pro mutagnicos Mas como pode cada gerao possuir a mesma informao gentica contida no
DNA?

3. Constituio do DNA
O DNA constitudo pelo acar (desoxirribose), o fsforo (H3PO4) e bases nitrogenadas (Pricas
Adenina e Guanina e Pirimdicas Citosina e Timina).
O acar e o fsforo constituem o que se chama de corrimo e as bases nitrogenadas ligadas entre si, duas
a duas, os degraus de uma escada imaginria enrolada de forma helicoidal. A molcula de DNA possui
filamento duplo.
3.1. As Ligaes no DNA
As ligaes entre a molcula de fsforo e o acar so do tipo fosfodister. O fsforo (-PO4) liga-se ao
carbono 5 do acar de um nucleotdeo e ao carbono 3 do nucleotdeo subsequente. Portanto, ao longo de um
dos filamentos do DNA, a ligao 5 >>> 3. Sendo o DNA uma molcula dupla o outro filamento possui a
ligao, entre o fsforo e o acar, na sequncia 3 >>> 5. Diz-se ento que os filamentos so Antiparalelos.
Para manter ambos os filamentos unidos os degraus da escala, que so as bases nitrogenadas, esto ligadas
entre si por pontes de hidrognio. As bases nitrogenadas possuem uma ordenao especfica de ligao. A
Adenina liga-se com 2 pontos de hidrognio a Timina e a Citosina com 3 pontes a Guanina. Esse pareamento
constante, apenas as quantidades se alteram.
Toda molcula de DNA, num organismo, encerra a informao para o desenvolvimento desse mesmo
organismo. A cor do hipoctilo, a posio e a pigmentao das folhas, das flores, o tamanho das vagens ou das
espigas, o peso das sementes, a produtividade so caractersticas determinadas pelos genes que esto no DNA.
E, alm disso, possui tambm a informao para a produo de enzimas que iro desdobrar os substratos no
interior das clulas, para que essas caractersticas possam se manifestar.
Portanto, a molcula de DNA tem o que se denomina de gene. Se o gene est presente caracterstica que
ele determina aparecer. Se a sua forma allica estiver presente no gentipo, outra caracterstica se
manifestar, dependendo do tipo de interao que estiver envolvido esse gene.
Uma das propriedades funcionais do DNA a sua duplicao. Essa propriedade permite que uma cpia do
DNA j existente na clula sirva de molde para que outra seja formada. Esse processo de duplicao do DNA
ocorre numa fase do ciclo celular vegetal chamado de interfase.

4. A Duplicao do DNA
As pesquisas sobre o comportamento do DNA foram elaboradas inicialmente em bactrias,
principalmente em Echerichia coli, mas devido ao comportamento celular dos eucariontes serem semelhantes,
inferiu-se o modelo de conformao e de duplicao do DNA para todos os organismos. A prpria
conformao da estrutura da molcula de DNA pressupe sua duplicao, segundo seus descobridores.
Para entender como e porque o DNA se duplica necessrio dividir-se o ciclo de vida de uma clula em
duas partes: a interfase e a diviso celular, conforme esquema abaixo:

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na interfase que os genes se expressam, pois ocorre a diferenciao celular.


O perodo de interfase pode ser subdividido em trs subperodos: G1, S e G2. Ambos subperodos, G1 e
G2, derivam da primeira letra da palavra gap, que, em ingls significa parada. No perodo G1 so produzidas
enzimas para o crescimento e diferenciao celular, e enzimas que atuaro sobre o DNA no subperodo
seguinte. Neste estgio o DNA recebe o nome de cromatina. Ela est desespiralizada permitindo a expresso
fenotpica do gene, atravs de outra macromolcula denominada RNA.
No perodo S (sntese) onde ocorre a duplicao de toda molcula do DNA. Enzimas especficas j
produzidas agem sobre o DNA fazendo sua duplicao.
Esse processo, como no poderia deixar de ser, de forma ordenada. Nas extremidades e ao longo do
DNA, ao mesmo tempo, protenas comeam a agir desenrolando os filamentos, so as chamadas DNAtopoisomerases. A DNA-helicase provavelmente quebre as pontes de hidrognio no local de origem da
duplicao. Com o afrouxamento dos fios de DNA a principal enzima de duplicao pode agir. a DNA
polimerase.
4.1. A Duplicao do DNA semiconservativa
A DNA polimerase coloca novos nucleotdeos apenas diante de um molde de DNA. Portanto um dos
filamentos dos novos DNAs ser velho e outro ser novo, por isso a denominao semiconservativa.
Para a DNA-polimerase iniciar sua atividade necessita de uma extremidade livre 3OH, que gerada por
uma enzima chamada primase. Essa enzima responsvel pela colocao de um primer (pequeno segmento
de RNA ou de DNA, tambm chamado de disparador) no filamento cuja polaridade 5 >>> 3. Esse
primer colocado na extremidade 3 da cadeia molde. A partir da a DNA-polimerase sintetiza novos
nucleotdeos. Esse primer posteriormente retirado pelo processo enzimtico de correo, feito pela prpria
DNA-polimerase.
A DNA-polimerase s funciona diante de um molde, cuja polaridade 3 >>> 5. Se os fios do DNA
so antiparalelos como agiria a DNA polimerase no molde 5 >>> 3? Vrios modelos de duplicao foram
propostas pelos pesquisadores moleculares. O modelo faca e o descontnuo foram os primeiros, entretanto
o modelo descontnuo ganhou maiores evidncias (GARDNER, 1975).
O modelo descontnuo prev que o filamento original da polaridade 3 >>> 5 seja duplicado
continuamente (filamento leading) e o filamento 5 >>> 3 de forma descontnua (filamento leaging). Para
isso, conforme j descrito a primase sintetiza um primer no local de origem da duplicao, junto ao filamento
5 >>> 3 e a partir da a DNA polimerase sintetiza o novo filamento dirigindo-se para o lado oposto da
origem da duplicao. Esse modelo tem se mantido at ento, desde que R. Okazaki o concebeu. Os
fragmentos no fio leaging formados receberam o nome do descobridor Fragmentos de Okazaki. Aps a
duplicao, formando o fragmento de Okazaki e a retirada da molcula de primer pela ao de correo da
DNA polimerase, a enzima ligase promove a ligao dos fragmentos, completando toda a duplicao.
Alm dessa importante ao enzimtica sobre o DNA para sua duplicao, no perodo S da interfase,
salienta-se que no final de todo o processo a quantidade de DNA fica duplicada. Portanto, essas molculas
agora duplicadas, possuem a mesma informao gentica. E quando ocorre a condensao para a diviso
igualitria dos genes entre as clulas, os cromossomos se formam j com as cromtides-irms. Pode-se
afirmar, ento, que as cromtides-irms, dos cromossomos homlogos so produzidas neste subperodo. Essas

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cromtides-irms dividir-se-o nas fases de anfase e anfase II, da mitose e meiose, respectivamente, levando
para as geraes seguintes mesma informao. (Ver Unidade 2). Essa gerao pode ser celular, no mesmo
tecido, no mesmo indivduo, por exemplo, tecido meristemtico, como gerao populacional.
Essa descrio referiu-se a primeira funcionalidade da molcula de DNA. A segunda funcionalidade
a transferncia da informao do gene para formao das protenas.

5. O Processo de Expresso Fenotpica


O DNA pode ser copiado em novo DNA, como processo acima descrito, ou ser copiado para uma nova
macromolcula chamada RNA (cido ribonucleico).
Se se entendesse o gene como uma conta, o DNA pode ser entendido como um colar de contas. Os
genes desta forma estariam dispostos linearmente ao longo de todo DNA.
Hoje se sabe que nem todos os genes se transformam em protenas para originarem fentipos. H genes
nos eucariontes que no funcionam. Esses j funcionaram durante o processo de evoluo da espcie ou
podero funcionar, permitindo sua readaptao a ambientes modificados, como tem acontecido nos ltimos
tempos.
H no genoma sequncias de genes no repetidas e sequncias altamente repetitivas decorridas de
processo de duplicao ao longo da evoluo. A maioria dos genes estruturais est nas sequncias no
repetitivas produzindo as protenas. Em ervilhas, cerca de 15% do DNA constitudo de cpias nicas ou com
pouca repetio (MANTELL et al, 1994). Esses autores citam que o DNA altamente repetitivo forma a
heterocromatina nos centrmeros dos cromossomos.
Ao longo do DNA existem genes que controlam genes. So chamados de controladores ou reguladores.
Esses genes produzem protenas que se ligam ou se desligam do DNA permitindo a produo ou no de
protenas pelos genes estruturais.
Os genes estruturais so os que realmente produzem enzimas que entraro nas rotas metablicas para a
transformao de substratos e, por consequncia, a caracterizao do fentipo. Por isso pode-se afirmar que
esses so os genes que se transformam em fentipos. Entretanto, para a manifestao do fentipo, outras
estruturas so necessrias. So os RNAs. Trs RNAs so os mais salientados para que os genes estruturais
possam funcionar, o RNA mensageiro, o RNA ribossmico e o RNA transportador.
Todos esses RNAs so copiados do DNA pelo processo enzimtico, entretanto cada um tem forma e
funo especifica.
Os RNAs ribossmicos (RNAr) so produzidos na regio organizadora do nuclolo (RON) e se constitui
na maior quantidade de RNA celular. Originam os ribossomos atravs do enrolamento da fita de RNA e pode
ser encontrado, a nvel celular, no reticulo endoplasmtico formando o reticulo endoplasmtico rugoso.
Possuem a funo de reunir o RNAm e o RNAt e os aminocidos no processo de traduo.
Os RNAs transportadores (RNAt) so estruturas mais simples de RNA e possuem a forma de trevo. Sua
funo carregar os aminocidos livres no citoplasma para os ribossomos. O RNAt possui o que se denomina
de anticdon. So trs bases ribonucleotdicas numa das extremidades da molcula que tem estreita relao
com o aminocido que ser carregado numa das alas do trevo.
O RNA mensageiro (RNAm) de forma linear e um transcrito de uma das fitas do DNA, ou mais
especificamente, do(s) gene(s) estrutural(is).
Por um processo semelhante o da duplicao do DNA, o RNA produzido sendo mediado pela enzima
RNA polimerase DNA dependente e esse processo chama-se transcrio.
5.1. A Transcrio

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A transcrio o processo de copiar o DNA para o RNA. Isto um processo normal na clula, porque o
RNA uma molcula pequena, em relao ao DNA, e, portanto, pode-se locomover atravs dos poros da
carioteca, indo do ncleo para o citoplasma, mais especificamente, para o retculo endoplasmtico rugoso.
Na transcrio pode-se dizer que os genes so escolhidos para serem transcritos, dependendo do rgo
em que estiverem e do estgio de desenvolvimento do vegetal. Genes da raiz no se manifestaro nas folhas e
vice-versa, dada especificidade do tecido vegetal.
No ponto onde o gene ou grupo de genes se encontram os filamentos do DNA se afrouxam e a RNA
polimerase liga-se ao stio promotor. Esse stio permite a sntese, porm, quando o gene no deve ser
transcrito o stio promotor no permitir a ao a RNA polimerase.
Essas regies, ditas promotoras, possuem sequncias de bases constante em todos os organismos,
apresentando somente pequenas variaes e so chamadas de TATA box porque so ricas em adenina e timina
(TATAATG em bactrias e TATAAAT em eucariontes). Elas podem ser chamadas, respectivamente de
Pribnow box e Hogness box, lembrando os pesquisadores que as encontraram.
As regies promotoras encontram-se sempre antes do trecho que ser copiado do DNA para o RNAm,
nesse local que a RNA polimerase se liga. O local dessa regio varivel; pode estar de 5 a 10 bases antes da
regio codificante, para alguns autores. Outros citam, no caso da zena no milho, estar regio promotora,
cerca de 20 a 30 bases antes do gene estrutural (MANTELL et al, 1994).
Outra sequncia tambm conhecida que participa do controle da sntese de protenas a regio chamada
CATA box. Est localizada, no caso da zena, no milho, cerca de 70 a 80 bases antes do local da sntese,
conforme abaixo.
Elemento de Controle
GCCCAATCT

Regio Promotora
TATAAAA

-70

Gene Estrutural
TACTGCGATCGAAATTTCCCTATATG

A partir desse stio a RNA polimerase inicia o processo de transcrio da fita de DNA copiando-a de
forma complementar, apenas com duas alteraes: uma nas bases, a base nitrogenada que ir parear com a
adenina ser a uracila e a outra no acar, que uma ribose. Dessa forma simples o RNA mensageiro vai se
formando, at que a RNA polimerase encontre o ponto de trmino da transcrio. A direo dessa sntese da
extremidade 5 >>> 3 da molcula de DNA.
Guilfoyle e Malcolm em 1980 (citado por MANTELL et al, 1994) isolaram a enzima RNA polimerase em
embries de soja, enquanto Jendrirak (1980), citado pelos mesmos autores, a isolou em trigo. Isto foi
confirmao da analogia do que ocorre entre os processos de transcrio em organismos diferentes, no caso a
soja e o trigo.
Deve-se aqui por uma ressalva: nos eucariontes o RNA produzido da forma acima descrita recebe,
atualmente, o nome de pr-RNA, pois ele contm partes que iro se transformar em protenas e partes que no
fazem parte das protenas, naquele momento.
Aps a produo do pr-RNA algumas transformaes devem ocorrer para que ele possa atravessar a
carioteca e ir at os ribossomos. Essas modificaes so necessrias porque grande parte dos genes
eucariontes interrompida. Entretanto, a RNA polimerase copia todo segmento, indiscriminadamente, do
DNA para formar o pr-RNA. As transformaes posteriores so para que passe somente cheguem ao
citoplasma, partindo do ncleo, as informaes na forma de bases nucleotdicas que codificaro a protena. As
estruturas no pr-RNA que se transformaro em protenas se chamam exons e segmentos que no so
traduzidos que se denominam de introns. (Figura 1.1)

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Figura 1.1 Formas de produo de RNAm a


partir de diferentes exons que ocorre em
diferentes tecidos vegetais (Alternative splicing)
(Fonte:
http://pandasthumb.org/imagens/altsplice.jpg)

5.2. Transformaes no pr-RNAm


Quatro etapas so importantes para a transformao do pr-RNA em RNAm:
a) Retirada dos introns - Os introns no devero passar para o citoplasma, porque no iro ser
traduzidos em protenas. Isto o que se denomina de economia celular.
b) Ligao dos exons Os exons ligados originaro a sequncia correta de nucleotdeos que a
informao para originar a cadeia polipeptdica.
c) A adio do CAP Uma molcula de 7-metil-guanosina adicionada na extremidade 5 do prRNA com a finalidade de direcionar o RNAm at os ribossomos.
d) A adio da cauda de Poli A Vrias sequncias de adenina so adicionadas na extremidade 3.
Aps essas transformaes, que ocorrem ainda dentro do ncleo, o RNAm est pronto para ir at o
retculo endoplasmtico e iniciar o processo de traduo.
Nem todos os organismos tm como material gentico, o DNA de filamento duplo. H vrus que possui
molculas de RNA como material gentico. Um exemplo o TMV, vrus do mosaico do tomate, que um
retrovrus. Antes desse vrus infectar a planta ocorre a produo do DNA a partir do seu RNA usando a
enzima chamada transcriptase reserva. A partir da fixa-se sobre a folha e injeta seu DNA no interior da clula
hospedeira, que possui DNA normal de filamento duplo e aps a clula passa a trabalhar com as informaes
genticas injetadas pelo vrus.
5.3. A Traduo
O processo de traduo o de transformar a informao que o RNAm tem em protena. Para isso os trs
elementos, RNAm, RNAt e RNAr se encontram formando um s conjunto (Figura 1.2).

(A)

(B)

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(C)

(D)

Figura 1.2 Representao da sntese de protenas (traduo), onde (a) o inicio da sntese
com a reunio dos RNAs e o primeiro cdon que AUG Metionina; (b) alongamento da
cadeia de protenas; (c) continuao do alongamento e (d) termino da sntese com a entrada do
cdon de fim. (Fonte: Snustad, D.P.; Simmons, M.J. p.294-299, 2001)
O RNAr j fixado no retculo endoplasmtico possui dois stios: o stio A, tambm chamado de
anterior ou amino-acil e o stio P, posterior ou peptidil e o stio E que o de sada do RNAm. A entrada do
RNAm se d no stio A, que reconhecido pelo CAP na extremidade 5.
O primeiro cdon do RNAm (conjunto de trs nucleotdeos) exposto no stio A. Neste instante o
RNAt, livre no citoplasma, e que possui o anticdon, ativado para encontrar o aminocido correspondente a
informao do cdon.
A ativao do aminocido especfico se d atravs da enzima aminoacil RNAt sintetase e demanda
uma reao com ATP. O resultado um aminocido adenilado com energia para fixar-se ao RNAt. Quando
essa reao ocorre h liberao de energia e o RNAt est carregado com o aminocido. Esse levado at o
ribossomo. H ento o pareamento do cdon com o anticdon no stio A. A partir de agora a fita do RNAm
anda dentro do ribossomo. Com esse movimento o par cdon-anticdon passa do stio A para o stio P e novo
cdon exposto no stio A para que outro RNAt seja ativado e traga outro aminocido. Quando ambos os
stios, A e P, esto ocupados com as duplas cdons-anticdons ocorre ligao entre os resduos de
aminocidos. Com o deslocamento, mais uma vez, ocorre a liberao do RNAt do stio P e o do stio A passa
para o P. Dois resduos de aminocidos j esto ligados entre si. Com a ativao de protenas de elongao,
chamadas fatores e elongao (EF), a cadeia de protenas vai se formando, pois os aminocidos vo sendo
colocados conforme a informao ditada pelo cdon exposto no stio A do ribossomo. O processo continua
sequencialmente at encontrar o ponto final.
O ponto final caracterizado por trs cdons. So eles: UAA, UAG e UGA. Esses cdons vm na
poro 3, antes da cauda de Poli A e determina o desligamento do RNAm do RNAr. O que permanece a
protena formada com sua sequncia primria de aminocidos e j com suas outras estruturas, secundria,
terciria e quaternria, definidas. Essa correlao existente entre cdons no RNAm e aminocidos na protena,
permitiram o estabelecimento de um cdigo gentico.

6. O Cdigo Gentico
Depois das descobertas que: (1) o DNA o material gentico; (2) que o RNAm uma cpia do DNA e o
intermedirio entre a informao gentica e a protena e (3) que a estrutura primria da protena est em

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acordo com a informao constante no DNA, ficou estabelecido um cdigo, com pequenas variaes entre os
organismos e que resume todo o processo de traduo.
Os itens a seguir demonstram o cdigo gentico:
1) H colinearidade entre genes e protenas O RNAm entra nos ribossomos na forma de
sequncia de cdons 3 bases ribonucleotdicas juntas que determinam a ativao enzimtica
do RNAt respectivo e do aminocido especfico. Se h, por exemplo, 250 cdons existiro 250
aminocidos na cadeia polipeptdica.
2) O cdigo em trincas Com a explicao do item anterior percebe-se que cada trs bases
ribonucleotdicas no RNAm corresponde a um cdon e que nenhuma dessas bases ser
aproveitada para outro cdon, anterior ou posterior.
3) O cdigo degenerado Ao se verificar a tabela de cdons percebe-se que vrios aminocidos
so codificados por mais de um cdon, por exemplo, glicina codificada por GGG, GGC, GGA e
GGU. Exceo a esta propriedade tem a metionina que codificada apenas por AUG e triptofano
por UGG, somente.
4) O cdigo dito no ambguo Em condies naturais cada cdon sintetiza sempre o mesmo
resduo de aminocido seja qual for protena. A ambiguidade pode ser encontrada em sistemas
de cultivo de clulas. Por exemplo, uma linhagem de E. coli sensvel ao antibitico
estreptomicina, ir codificar isoleucina, leucina ou serina diante do antibitico para a sequncia
UUU. Normalmente ela codifica para fenilalanina (BURNS e BOTTINO, 1989).
5) O cdigo tem ponto inicial O cdon de incio das cadeias o AUG que codifica metionina e
est sempre na poro 5 do RNAm. Parece que a metionina est presente em todas as snteses,
sempre aps um ponto final ou no incio da cadeia. Se esse aminocido no tiver funo
fisiolgica na cadeia polipeptdica retirado enzimaticamente.
6) O cdigo tem ponto final Na posio 3 o RNAm traz cdons que permitem o desligamento do
RNAm do ribossomo e da protena formada, tudo isso enzimaticamente. Esses cdons no
possuem transportadores especficos e so constitudos pelas seguintes sequncias de
ribonucleotdeos: UAA, UAG e UGA. O final da cadeia no tem apenas um desses cdons e sim
vrios, para fornecer ao ribossomo a informao para que as cadeias possam se desligar.

7. A Tabela de cdons
A tabela de cdons abaixo demonstrada o resultado final do experimento de Marshall Nirenberg e
Heinrich Matthaei que se utilizaram da bactria Escherichia coli em meio de cultura (GRIFFITHIS et al,
2006).
Segunda Base
Primeira Base

Incio da cadeia

Terceira Base

GLICINA

C. GLUTMICO

ALANINA

VALINA

GLICINA

C. GLUTMICO

ALANINA

VALINA

GLICINA

C. ASPRTICO

ALANINA

VALINA

GLICINA

C. ASPRTICO

ALANINA

VALINA

ARGININA

LISINA

TREONINA

METIONINA1

ARGININA

LISINA

TREONINA

ISOLEUCINA

SERINA

ASPARAGINA

TREONINA

ISOLEUCINA

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SERINA

ASPARAGINA

TREONINA

ISOLEUCINA

ARGININA

GLUTAMINA

PROLINA

LEUCINA

ARGININA

GLUTAMINA

PROLINA

LEUCINA

ARGININA

HISTIDINA

PROLINA

LEUCINA

ARGININA

HISTIDINA

PROLINA

LEUCINA

TRIPTOFANO

FIM DA CADEIA

SERINA

LEUCINA

FIM DA CADEIA

FIM DA CADEIA

SERINA

LEUCINA

CISTENA

TIROSINA

SERINA

FENILALANINA

CISTENA

TIROSINA

SERINA

FENILALANINA

8. A Protena
Depois de formada via processos de transcrio e traduo, derivadas de um ou mais genes, a protena tem
a funo de: catlise enzimtica, sustentao mecnica, controle do crescimento e diferenciao celular.
A catlise enzimtica a expresso fenotpica indireta do gene na qual a protena formada possui o
destino de transformar substratos, aumentar a velocidade das reaes quando necessrio. Pode-se neste caso
citar como exemplo a enzima fosfofrutocinase que catalisa a transformao da frutose 6-fosfato em frutose
1,6-bifosfato, na rota metablica da gliclise.
A ao de sustentao mecnica, devido s protenas est na presena do colgeno, uma protena fibrosa
presente na pele e ossos dos animais.
No controle de crescimento e diferenciao celular, a expresso do gene se d pelo controle da informao
gentica que permite a multiplicao das clulas no processo de mitose e na diferenciao dessas clulas, para
que elas assumam o papel destinado no local onde se encontram. Exemplos dessas protenas so os hormnios
vegetais, tais como, giberelina, auxina, citocinina.
A expresso fenotpica direta tem-se como exemplo, os genes Z1; Z2 e Z3 que controlam a produo de
isozimas lipoxigenases, responsveis pela associao de compostos carbonlicos de cadeia curta s protenas.
Os compostos carbonlicos so responsveis pelo sabor desagradvel no gro de soja e seus derivados.
A sntese de protenas de reserva das sementes tem sido estudada extensivamente em muitas plantas
cultivadas, com o objetivo de melhorar o valor nutricional atravs de tcnicas de manipulao gentica. Nas
leguminosas, as protenas esto nos cotildones e nas gramneas no endosperma. Entre as protenas de reserva
das sementes as prolaminas e glutelinas esto nos cereais e em gramneas selvagens, enquanto que as
globulinas e as albuminas so encontradas em dicotiledneas. Quando as sementes esto em formao, as
protenas de reserva so produzidas ao nvel de retculo endoplasmtico, sendo posteriormente transportadas
para os locais de reserva que so os vacolos, chamados como corpos proteicos.

9. Regulao da produo de enzimas


Viu-se no incio deste captulo que a produo de determinado fentipo, cor prpura das flores de feijo,
dependente exclusivo de dois genes de interao episttica. A cor branca evidencia a falta de um alelo
dominante. Os fentipos finais, como resultantes de todo processo molecular, so dependentes dos genes, das
interaes entre si e deles com o meio ambiente de forma que a cor prpura s ser produzida pela presena
dos dois alelos dominantes. Essa situao mostra que as enzimas so reguladas pelo alelo presente no gentipo
das plantas.

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Gentica Molecular

Sob esse aspecto e do ponto de vista dos cromossomos, pode-se dizer que todas as clulas do vegetal
possuem todos os genes, porm surge uma questo, como que ocorre a regulao metablica desses genes?
Quando se analisa uma cenoura, por exemplo, pode-se perceber que no colo a cor verde aparece quando
ela fica a descoberta do solo. A luz, portanto a indutora para que genes responsveis pela produo de
clorofila fiquem ligados e o fentipo verde aparea. No pice da cenoura a cor sempre constante. Neste
ponto os genes responsveis pela produo de clorofila esto desligados ou bloqueados e a cor verde no se
manifesta.
Outro processo indutivo de regulao gnica pode ser observado quando sementes colocadas no solo
comeam o processo de germinao. Nesse caso necessrio que molculas de gua penetrem pelo tegumento
atingindo o embrio. Entretanto para que o embrio seja nutrido, a giberelina, um hormnio vegetal ativado
e, a partir dele, enzimas so produzidas para a degradao do endosperma. A primeira enzima produzida pela
induo da giberelina a alfa-amilase na camada de aleurona, tornando-se, portanto, a principal hidrolase na
germinao das sementes. uma endoenzima que hidroliza das ligaes -(1,4) ao longo dos polmeros de
amilose e amilopectina, transformando o amido em acares que iro migrar para os pontos de crescimento do
embrio.
A giberelina, que produzida nas clulas do eixo embrionrio, difunde-se at o escutelo e a camada de
aleurona, onde atua como um ativador primrio na cascata de sinais, que culmina com a induo de um fator
de transcrio (o GAMyb) e a expresso gnica das enzimas hidrolticas (UEGUCHI-TANAKA et al., 2000).
Em ervilhas altas foi identificado o gene Le(le) que promove o alongamento do caule. O alelo Le codifica
uma enzima que hidrolisa a giberelina GA20 para produzir GA1. O alelo recessivo le codifica uma enzima
defectiva que tem funo diminuda na proporo de 1/20 da normal, deixando as plantas ans por possurem
menos GA1.
A giberelina tambm atua sobre as protenas que regulam a diviso celular (CDKs) protenas quinases
dependentes de ciclina em plantas de arroz submersas. Nessas plantas a giberelina ativa o ciclo celular
primeiro na transio da fase G1 para a fase S, provocando aumento da atividade mittica. Os genes CDKs
so ento ativados nas fases anteriores da mitose e quando atingem essa fase disparam a diviso celular no
meristema intercalar do caule, aumentando o nmero de clulas e tambm possibilitando seu alongamento.
Seja pela presena de alelos, seja pela de agentes indutores, o processo de regulao da produo de
protenas ocorre quando os genes controladores permitem. Na falta do agente indutor os genes controladores
produzem uma protena que se une aos genes operadores, impedindo a ao da RNA polimerase. Quando
agente indutor estiver presente, esse induz que os genes controladores produzam uma protena que no mais se
liga ao gene operador, liberando a transcrio dos genes estruturais.
O mecanismo de liga ou desliga provocado pela presena ou ausncia do indutor, segue o modelo
bioqumico chave-fechadura. Na ausncia do indutor, o stio ativo da enzima liga-se ao gene promotor e
bloqueia a transcrio. Esse mesmo stio se altera pela presena do agente indutor e agora a enzima no mais
se liga ao promotor e a transcrio ocorre (Ver apresentao em Power point Gentica Molecular).
Esse sistema de regulao gnica segue o modelo operon descrito por Griffithis (2006) em procariontes.
Nos organismos eucariontes, entre eles as plantas, o mecanismo de regulao gnica mais complexo com o
silenciamento ou no dos genes a serem transcritos, de acordo com os estgios de desenvolvimento da
planta (GRIFFITHIS et al., 2006).

10. Referncias bibliogrficas


BURNS, G.W.; BOTTINO, P.J. Gentica. 6.ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan. 1991. p.381.
DE ROBERTIS, E.D.P.; DE ROBERTIS Jr., E.M.F. Bases da Biologia Celular e Molecular. 2.ed. Rio de
Janeiro: Guanabara-Koogan. 1993. p.307.

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Gentica Molecular

GARDNER, E.J. Gentica. 5.ed. Rio de Janeiro: Interamericana. 1977. p.47-79.


GARDNER, E.J.; SNUSTAD, D.P. Gentica. 7.ed. Rio de Janeiro: Interamericana. 1986. p.497.
MANTEL, S.H.; MATHEWS, J.A.; McKEE, R.A. Princpios de Biotecnologia em Plantas. Ribeiro Preto:
Sociedade Brasileira de Gentica. 1994. p.344.
RAMALHO, M.; SANTOS, J.B.; PINTO, C.B. Gentica na agropecuria. 2.ed. So Paulo: Editora Globo.
1989. p.19-59.
SNUSTAD, D.P.; SIMMONS, M.J. Fundamentos de Gentica. 2.ed. Rio de Janeiro: Guanabara-Koogan.
2001. p.756.
SUZUKI, D.T.; GRIFFITHS, A.J.F.; MILLER, J.H.; LEWONTIN, R.C. Introduo Gentica. 4.ed. Rio de
Janeiro: Guanabara-Koogan. 1992. p.633.
UEGUCHI-TANAKA, M.; FUJISAWA, Y.; KOBAYASHI, M. et al. Rice dwarf mutante dl which is
defective ini the alpha subunit of the heteromeric G protein, affects gibberellin signal transduction.
Procedings Natural Academic Science. USA. v.97. p.11638-11643, 2000.

Exerccios
1. Uma clula produz cerca de 4.000 protenas cada uma com 250 aminocidos, em mdia. Calcule o
comprimento mnimo que deve ter o DNA desta clula, em nmero de nucleotdeos. R: 3.000.000 de
nucleotdeos.

2. Um filamento simples com as seguintes bases nitrogenadas: ...AAAGTTCC... . Pode-se saber se pertence
classe dos RNAs ou do DNA? Se for o DNA, qual o seu filamento complementar? Se formasse um
RNAm destes filamentos de que bases seria constitudo? R: DNA. Fio complementar ..TTTCAAGG.. RNAm ..UUUCAAGG.. e ..AAAGUUCC..

3. Usando a informao da tabela de cdons (na pgina 9), determine quais so os seguintes polipeptdicos
formados a partir do RNAm dados: R: MET PRO GLU PRO AS GLI GLI PF | ..MET FEN PRO SER
TRE ALA PF..| ..LIS TRE TRI ARG TRE HIS PF

a. Considerando o primeiro filamento apenas, possvel se determinar a polaridade deste RNAm e do


DNA? Se sim, quais sero? R: Sim. RNAm 5 3 | DNA 3 5
4. Se uma protena tiver a seguinte sequncia de aminocidos:

a. Quais as sequncias de nucleotdeos no DNA, no RNAm e RNAt que correspondem em cada caso
(Cite apenas uma possvel). R: 1 sequncia: DNA GCCGTGACTTACTATCACACT / RNAm CGG CAC UGA

b.

AUG AUA GUG UGA / RNAt GCC GUG UAC UAU CAC | 2 sequncia: DNA TACTAGTTGCATAAGGACATT /
RNAm AUG AUC AAC GUA UUC CUG UAA / RNAt UAC UAG UUG CAU AAG GAC | 3 sequncia: DNA
TCCAGCAGTACCCCTACCAGG / RNAm AGG UCG UCA UGG GGA UGG UCC / RNAt UCC AGC AGU ACC
CCU ACC AGG | 4 sequncia: DNA TACGCGTAAACCATCATCATCTACGTAAGGATC / RNAm AUG CGC
AUU UGG UAG UAG UAG AUG CAU UCC UAG / RNAt UAC GCG UAA ACC UAC GUA ACC.
Determine a polaridade de cada um dos filamentos do DNA que possui a informao gentica. R: 1
sequncia: 5 3 / 2 sequncia: 5 3 / 3 sequncia: indeterminada / 4 sequncia: 5 3.

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5. A distncia entre pares de bases no DNA de 3,4 angstrons. Qual o tamanho do DNA do milho se ele
possui 1,36 x 1010pb? E o fumo, j que ele tem 2,18 x 109pb? Dados: 1 angstrons = 10-10m. R: Milho 4,624
m. Fumo 0,74m.

6. Em feijo (Phaseolus vulgaris L.) o gene da enzima mlica foi codificado e partes dele se encontram
abaixo especificado.

O fio a ser usado nessa questo o que tem TIMINA na extremidade 3. A partir dessa informao:
a. Qual o pr-RNAm e o RNAm? R: Pr-RNAm 5 AUG AAC UCG CAU GUC AAAU AAGUUG GUACCU
UGGAUGCAGUUUUAG 3 / RNAm 5 AUG AAC UCG CAU AAG UUG UGG AUG CAG UUU UAG 3

b. Quais os aminocidos que faro parte dessa enzima? R: MET AS SER HIS LIS LEU TRI MET
GLU FEN PF

c. Quantos RNAt diferentes sero necessrios para essa sntese? R: 9 RNAt


7. Ativaes metablicas so necessrias para que ocorra a sntese de protenas nos ribossomos. A poro do
gene abaixo descrito servir de molde para a produo de uma protena especifica que a clula utilizar
para a quebra de cadeias de amido no endosperma das sementes. Baseado nisso diga:
a. Quais transportadores so ativados. R: RNAt UAC CCA AUA CCG AUG AAA GCU;
b. Quais rotas metablicas so ativadas para produo dos aminocidos. R: Ciclo de Krebs (oxalacetato);
Gliclise (3-fosfoglicerato); Gliclise (fosfoenolpiruvato); Gliclise (3-fosfoglicerato);

c. Qual o destino dessa protena produzida. R: Gliclise (3-fosfoglicerato); Gliclise (fosfoenolpiruvato); Ciclo
de Krebs (-cetoglutarato); germinao das sementes.

8. O gene FLORICAULA (FLO) selvagem controla a formao de flores na espcie Anthirrinum, enquanto
que o seu floricaula (flo) impede a formao de flores. De acordo com essa informao d uma
explicao, pelo ponto de vista da transcrio gnica que esclarea a diferena entre os alelos de um
mesmo gene.
9. Descreva o processo enzimtico da sntese do DNA e da produo de molculas de RNA relacionando-os
com os perodos do ciclo celular.
10. Descreva as funes dos pontos iniciais e do final na sntese de protenas relacionando-os com as
propriedades do cdigo gentico.
11. Uma molcula de RNAm possui 236 nucleotdeos de purinas e 325 de pirimidinas, para a formao de um
polipeptdio. Quantos aminocidos podero ser formados a partir dessas quantidades de nucleotdeos? R:
79 aminocidos a partir das purinas e 108 a partir das pirimidinas;

12. Para a formao das cadeias de protenas so necessrios aminocidos correspondente aos cdons do
RNAm. Foi detectada na clula uma cadeia polipeptdica com a seguinte sequncia de aminocidos:
TIROSINA VALINA ASPARTATO HISTIDINA LISINA. Baseado nessa cadeia de a origem
metablica desses aminocidos. R: As origens metablicas de cada um dos aminocidos so: Gliclise (3-fosfoglicerato);
Gliclise (piruvato); Ciclo de Krebs (oxalacetato); Ribose-5-fosfato; Ciclo de Krebs (oxalacetato).

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