Ao de la consolidacin del Mar de Grau

PRACTICA N 4

RECONOCIMIENTO Y DETERMINACION DE CARBOHIDRATOS

CURSO:

BIOQUIMICA I

DOCENTE:

Q.F MARLON PADILLA HUARI

ALUMNOS:

-SOLORZANO ROJAS KATHERIN

-DIAZ CARLOS
-CASTILLO CAARI LORENA

CICLO:

VI

AULA:

200

SECCIN:

1X

TURNO:

MAANA

AO

2016

RECONOCIMIENTO Y DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS

MARCO TEORICO

Carbohidrato es el nombre que deriva del hecho que el hidrogeno y el oxgeno

estn en la misma proporcin que en el agua (hidrato); es decir hay 2
hidrgenos por cada oxgeno. El termino carbohidratos, azucares, glcidos o
hidratos de carbono se identifica y designa un grupo de sustancias naturales
que cumplen funciones vitales como componentes de los organismos vivos.
Dentro de la clasificacin de carbohidratos encontramos:
CLASIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Simples
Monosacridos: son las unidades ms sencillas de los carbohidratos
Ejemplo: glucosa y fructosa

Disacridos: formados por la unin de dos monosacridos iguales o distintos:

lactosa, maltosa, sacarosa, etc. Los disacridos no se utilizan como tales en el
organismo, sino que ste los convierte a glucosa. En este proceso participa una
enzima especfica para cada disacrido, lo rompen y se producen los
monosacridos que los forman.

Oligo
sacridos: pol
meros de hasta
20 unidades de
monosacridos.
Complejos
Polisacridos:
Est
n constituidos
por un gran nmero de monosacridos unidos mediante enlaces
glucosdicos,constituyendo largas
cadenas. Los polisacridos pueden
ser homopolmeros, cuando la unidad repetitiva es un solo tipo
de
monosacrido
oheteropolmeros, cuando las unidades repetitivas estn

constituidas al menos por dos monmeros diferentes, (un ejemplo es el cido

hialurnico, formado por los monmeros N- acetil glucosamina y el cido
glucurnico). El cido hialurnico se encuentra en el tejido conectivo
donde acta como pegamento para mantener unidas las clulas, es de
importancia para el ensamble en el
tejido conjuntivo y seo.
Almidn: Este polisacrido est formado por unidades de glucosa, por tanto es
un polmero de sta. Se encuentra en los cereales como maz, arroz y trigo,
tambin se encuentra en las papas.
Celulosa.-La celulosa, al igual que el almidn es un polmero de glucosa. El
tipo de enlace que une las molculas de glucosa en la celulosa, es diferente del
enlace que une las del almidn, por esta razn la celulosa no se puede
utilizarse por el organismo humano como alimento, ya que carece de las
enzimas necesarias para romper ese tipo de enlace, pero tiene un papel
importante como fibra en el intestino grueso.
Glucgeno: es la reserva de carbohidratos de los animales, y la mayor y
primera fuente de disponible de glucosa. Se almacena en hgado y msculo
(unos 340 g).

Reaccin de Fehling: Esta reaccin identifica a carbohidratos reductores en

general. Cuando se calienta un carbohidrato reductor en una solucin alcalina
de cobre, se inestabiliza el doble enlace, por lo que cambia constantemente de
posicin, dando origen a los llamados Enodioles, los enodioles en algn
momento se rompen por el doble enlace, dando fragmentos de gran potencia
reductora.
Los fragmentos reductores en presencia de iones cpricos ,se convierten en
fragmentos cidos, a la vez que los iones cpricos pasan a cuprosos, entonces
se combinan con los hidroxilos de la solucin para formar hidrxido cuproso
de color amarillo, este con el calor se convierte a Oxido cuproso que precipita
dando un color rojo ladrillo caracterstico. Esto es lo que identifica a un
carbohidrato como reductor.
Reaccin de Barfoed: Esta reaccin identifica carbohidratos reductores y
puede distinguir entre monosacridos y disacridos. La reaccin utiliza un
reactivo oxidante ms dbil, por lo que las condiciones de la reaccin son ms
bien acidas que alcalinas.es una reaccin un poco ms lenta que la de
Fehling. El reactivo es acetato cprico en cido actico diluido.
El carbohidrato reductor, al contacto con el reactivo da el caracterstico
precipitado de color rojo ladrillo.

Los monosacridos reductores dan la reaccin positiva en poco tiempo (de 2 a

5 minutos), mientras que los disacridos reductores dan positiva pero mas
lentamente (de 5 a 10 minutos).
En una mezcla de monosacridos y disacridos reductores, bastara filtrar el
primer precipitado que aparezca, que corresponder al monosacridos y
esperar la formacin de un nuevo precipitado, que si existe corresponder al
disacrido.
Reaccin de Seliwanoff: Esta reaccin identifica carbohidratos cetohexosas.
Al reaccionar una cetohexosa (fructosa es la ms comn) con cido
clorhdrico, el carbohidrato pierde molculas de agua, dando como resultado el
5-hidroximetilfurfural. Esta molcula reacciona con el resorcinol dando un
complejo rojo intenso, que ser signo de la presencia de la cetohexosa. No es
precipitado sino complejo.
La reaccin es muy rpida en cuanto a la formacin del complejo. Lo que vara
en cuanto a tiempo es la formacin del 5-hidroximetilfurfural. Las cetohexosas
lo dan rpidamente, mientras que las aldohexosas lo dan lentamente y
dbilmente, por lo que esta reaccin se considera ms bien caracterstica para
identificacin de cetohexosas y en concreto de fructosa.
Reaccin de Bial: Identifica Carbohidratos aldopentosas .Al reaccionar una
aldopentosa con acido clorhdrico pierde molculas de agua y produce la
sustancia conocida con el nombre de furfural.
El furfural puede reaccionar en medio acido con el orcinol, si en estas
condiciones se agrega una pequea cantidad de cloruro frrico, se formara un
complejo verde. Las cetopentosas en estas condiciones dan un complejo de
color rojo. Las cetohexosas y las metilpentosas dan un complejo naranja, que
al reposar producen un precipitado de color verde oscuro. Las triosas y los
cidos 5-cetoaldonicos dan positiva la reaccin, as como los cidos uronicos ,
por lo que hay que tener cuidado de que en la mezcla de reaccin no existan
estos compuestos si es que se requiere demostrar la presencia de las
aldopentosas.

OBJETIVOS
Demostrar las propiedades reductoras de algunos carbohidratos.
Reconocimiento cualitativamente un carbohidrato a partir de reacciones
qumicas especificas

 Identificar Carbohidratos Reductores en general a partir del Reactivo de

Fehling.
Diferenciar entre Monosacridos y Disacrido a partir del Reactivo de
Barfoed.
Identificar las Cetohexosas a partir del reactivo de Seliwanoff.
Reconocer las aldopentosas a partir del Reactivo de Bial.
MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales:
Tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 ml
Un vaso de precipitados de 500 ml
Una varilla de vidrio
Una placa de calentamiento
Una gradilla para tubos de ensayo
Una pinza metlica para tubo de ensayo
Una esptula
Bao maria
Reactivos:
Muestras de soluciones de Carbohidratos 0.1M:
Solucin de glucosa
Solucin de sacarosa
Solucin fructosa
Solucin de maltosa
Solucin lactosa.
Solucin xilosa o arabinosa
Reactivo de Felhing A
Reactivo de Felhing B
Reactivo
de
Seliwanoff
Reactivo de Bial

PROCEDIMIENTO

ENSAYO DE FEHLING: Determinacin del Poder Reductor

Colocamos en 6 tubos de ensayo 2.5ml de la muestra problema

2.5ml de glucosa al tubo 1

2.5ml de fructosa al tubo 2
2.5ml de sacarosa al tubo 3
2.5ml de lactosa al tubo 4
2.5ml de maltosa al tubo 5
2.5ml de xilosa al tubo 6

Enjuagamos la pipeta dos veces despus de haber pipeteado los

carbohidratos.
Adicionamos 15 gotas de Fehling A y 15gotas de Fehling B a los cinco
tubos.

 Agitamos para homogenizar

RESULTADOS

Introducimos los tubos en un bao

previamente calentado (hirviendo) y
contine el calentamiento.
Anotamos el tiempo en que cambia el
color

Apareci a unos minutos el precipitado

caracterstico de color rojo ladrillo, en
la mayora de los tubos (de uno a tres
minutos) sacamos del bao todos los tubos con ayuda de las pinzas y

colquelos en la gradilla. Los tubos con reaccin positiva sern los que
contienen carbohidratos reductores.

Resultados:
El reactivo Fehling A
El reactivo Fehling B

sulfato de cobre
solucin alcalina

al agregar la solucin alcalina ellos rompen el enlace carbonilo esto

forma el ENOL esto tiene un poder reductor
El ENOL es un grupo funcional que son altamente reductores (reduce al
sulfato de cobre)
El tubo 4 es la sacarosa demora en cambiar porque es un disacrido
est compuesto por glucosa y fructuosa estn fuerte su estructura que
es difcil de romper.
Identifica que todos son carbohidratos
El reactivo de fehling A y fehling B esta este ensayo pone de manifiesto la
presencia
de
azucares
reductores
(lactosa,
sacarosa,
manosa.glucosa.fructuosa, xilosa, etc.). Se trata de una reaccin redox en la
que el grupo aldehdo (reductor) de los azcares es oxidado a grupo cido por
el Cu2+ que se reduce a Cu+. Tanto los monosacridos como los disacridos
reductores reaccionan con el Cu2+ dando un precipitado rojo de xido cuproso.
La reaccin tiene lugar en medio bsico por lo que es necesario introducir en la
reaccin tartrato sdico-potsico para evitar la precipitacin del hidrxido
cprico.
REACCION DE BARFOED:

Colocamos en 6 tubos de ensayo 1ml de la muestra problema

1ml de glucosa al tubo 1

1ml de fructosa al tubo 2
1ml de sacarosa al tubo 3
1ml de lactosa al tubo 4
1ml de maltosa al tubo 5
1ml de xilosa al tubo 6

Agregamos 5ml del reactivo de Barfoed ya preparado a cada uno de los

6 tubos.

Coloque los cinco tubos
al mismo tiempo en el agua hirviendo
y anote el tiempo.

Bao mara:

Esperamos 10 minutos, observando cuidadosamente la aparicin de

precipitados .El precipitado va a ser un poco menos grueso que en la
reaccin anterior. Anotamos el tiempo aparicin de precipitado.

Resultados:
Este ensayo se emplea para diferenciar a
los monosacridos de los disacridos.
Estos ltimos reaccionan ms
lentamente con el acetato cprico,
debido probablemente al tamao
molecular, aunque tambin pueden
estar implicados otros factores tales
como una interaccin ms compleja
con los dos anillos monosacridos.
El BARFOED identifica ms rpido
en
menor
tiempo
a
los
monosacridos porque estn solos
(precipitado rojo ladrillo)
El BARFOED identifica ms lento en
mayor tiempo a los disacridos
porque estn unidos.

REACCION DE SELIWANOFF:

a. Colocamos en 6 tubos de ensayo 1ml de la muestra problema

1ml de glucosa al tubo 1

1m de fructosa al tubo 2
1m de sacarosa al tubo 3
1m de lactosa al tubo 4
1m de maltosa al tubo 5
1m de xilosa al tubo 6

b. Agregamos 5ml de Seliwanoff ya preparado a cada uno de los tubos.

c. Colocamos los
en el bao de

tres tubos al mismo tiempo

agua hirviendo.

 Observamos la aparicin
del color y el tiempo en el
bao
de
agua
hirviendo.Aquellos
tubos
que sean positivos sern
los
que
contienen
Cetohexosas.

Resultados:
La reaccin identifica Cetohexosas. Sabemos que de las muestras que
tenemos para esta prctica solamente una contiene Cetohexosa por lo que
basta probar esa muestra y otras dos como controles negativos.
Esta prueba es especfica para las cetosas. Las cetosas se deshidratan ms
rpidamente que las aldosas, dando furfurales. Estos se condensan con el
resorcinol produciendo un complejo coloreado. Si el tiempo de ebullicin se
prolonga, puede dar tambin positivo para otros azcares.

Identifica a los monosacridos que tiene en su estructura solamente el

grupo funcional cetona (fructuosa)

Reaccin del furfural e hidroximetil-furfural con resorcinol dando lugar a

derivados de color rosa-rojo. Es una prueba especfica de hexosas. Las
cetosas en medio cido se deshidratan ms rpidamente que las aldosas, por
lo que ambos grupos pueden diferenciarse en funcin del tiempo que tarda en
aparecer el producto coloreado.

REACCION DE BIAL:

Colocamos tres tubos de

ensayo y enumerado

Se pipeteo 10 gotas de xilosa en el tubo 1,1 gotas de glucosa en el

tubo 2,10 gotas de fructuosa en el tubo 3.

tubos enumerados.

Agregamos 5 ml
del reactivo de
BIAL, ya preparado
a cada uno de los

Colocamos los tres tubos al mismo tiempo a bao de agua hirviendo.

CONCLUSIONES:
De los tres tubos el que cambio la coloracin fue la XILOSA
con una coloracin de amarillo verdoso, por tanto es la que
contiene carbohidrato pentosa.
En un tiempo de 23 minutos.

CONCLUSIONES

Con el reactivo de fehling A y fehling B reconocemos carbohidratos

reductores en este caso todos dieron positivos demorando ms los
disacridos (maltosa y sacarosa)
Con el Barfoed podemos diferenciar monosacridos y disacridos, el
monosacrido acta ms rpido que el disacrido, controlas el tiempo.
El reactivo de Selivanof reconoce solamente carbohidratos que
contengan grupo funcional cetona en este caso la fructuosa dio positivo.
En el reactivo Bial reconoce aldopentosas es decir que contengan grupo
aldosa de 5 carbonos, en este caso la xilosa sale positivo un color pardo
tubio

BIBLIOGRAFIA
-

https://deymerg.files.wordpress.com/2011/03/lab-aldehidos-y-cetonasudea.pdf

http://genesis.uag.mx/edmedia/material/quimicaii/carbohidratos.cfm

http://danielamartineze.blogspot.pe/2012/09/identificacion-decarbohidratos.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Prueba_de_Barfoed