Actividad 2 Exploracin

ACTIVIDAD 2
EXPLORACIN

JOS MANUEL ACOSTA RODRGUEZ

CDIGO

16459089

MARA ISABEL GRISALES

CDIGO

29742604

LILIANA PATRICIA MULATO

CDIGO

31532121

LUZ IRENE PINEDA

CDIGO

31642374

VIVIANA RUBY GMEZ

CDIGO

29705641

MICROBIOLOGA AMBIENTAL 358010A_288

GRUPO NO. 11

JORGE ALEJANDRO RODRGUEZ

TUTOR DE CURSO

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

ESCUELA DE CIENCIAS AGRCOLAS, PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE ECAPMA
MARZO 29 DE 2016

Actividad 2 Exploracin

NMERO DE GRUPO COLABORATIVO.

358010 No. 11
NOMBRES Y APELLIDOS DE ESTUDIANTES
QUE NO COLABORARON Y NOMBRE DEL
CEAD.
1. Qu es una clula procariota? Realice una pequea descripcin
Considerada como la ms primitiva, de estructura sencilla, han sobrevivido y colonizado los
ambientes ms inhspitos gracias a la flexibilidad en su fisiologa, permitindole ocupar nichos
donde sera imposible a otros tipos de clulas. (Raisman & Gonzales, 2013) En trminos
generales Henry & Heinke (1999) muestran que las clulas procariotas, carecen de ncleo, el
material gentico est disperso, no est en orden, no est separado del citoplasma por una
membrana nuclear. Solo incluyen bacterias y algas azules (p. 255). Su divisin celular es directa
y pueden ser de formas anaerobias estrictas, aerobias, microareroflicas, facultativas. (Raisman
& Gonzales, 2013)
2.

D 3 ejemplos de bacterias que se encuentren en su entorno laboral.

a) Escherichia Coli: La misma que se encuentra en la flora intestinal de los mamferos

incluido el ser humano; la E. coli no representa mayor problema a menos que se trate de una
cepa con elementos genticos codificante de factores virulentos, como la E. coli 0157:H7 la cual
al ingresar en el ser humano puede ocasionar graves problemas de salud a nivel intestinal y renal,
se encuentra en los entornos laborales en casinos y restaurantes donde se procesan carnes y/o
personas infectadas que pueden manipular alimentos sin las medidas sanitarias de rigor.
(Condado de San Diego, 2005)
b) Entamoeba histolytica: Son microorganismos protistas, eucariotas unicelulares,
carecen de pared celular y su locomocin se realiza a travs de seudpodos, usados igualmente
para la nutricin. Existen diversos tipos de amebas y pueden producir enfermedades del tracto
intestinal y heptico en animales y el ser humano. Se pueden encontrar en el ambiente de trabajo
en contacto con personas infectadas que no se lavan las manos al ingresar al bao, o que
manipulan elementos de contacto publico pues los quistes de Entamoeba son resistentes y
pueden durar varias das sobre objetos o superficies infectadas. (HHS, 2015)
c) Pseudomonas aeruginosa: Son bacilos G (-), aerobios estrictos, metabolismo oxidado
no fermentativo. Estn esparcidas por el medio: suelo, agua y pasando a las plantas y a los
animales. Los elementos que se encuentran implicados son: leche no pasteurizada, vegetales,
agua.se encuentra en casi todos los entornos laborales en oficinas, bodegas, baos, cocinas y
reas comunes donde encuentra un ambiente hmedo e ideal para su propagacin, incluso en
hospitales es comn. (Berlin, 2001)
3.
Nombre los agentes con los cuales se tien las bacterias para observar su
morfologa?
Dado el tamao en clulas y bacterias de difcil observacin aun con el microscopio ptico,
por lo cual a falta de contraste entre clula y medio circundante, se emplea tcnicas y agentes
colorantes para hacerlas ms visibles y revelar incluso algunos constituyentes de las clulas
como flagelos, capsulas, esporas, pared celular etc., (Universidad de Buenos Aires, 2015). As
en este punto se identifican las principales agentes de tincin para observacin morfolgica en
bacterias:

Actividad 2 Exploracin

a) Cristal Violeta: Conocido como violeta de metilo son un grupo de compuestos mezclas
de tetrametilamonio, pentametil y hexametil pararosanilins, utilizados como indicador
colorante catinico en la tcnica de tincin de Gram, para identificar bacterias
grampositivas ya que el cristal violeta se fija a la pared celular de estas. (Lillie, 1992)
b) Safranina: conocida como rojo bsico 2 es un agente biolgico usado de contraste, en
la tincin de Gram para identificar a bacterias gramnegativas, una vez han sido
retiradas de la delgada capa de mureina el cristal violeta con alcohol, quedando el
citoplasma incoloro y es donde acta como colorante la safranina tiendo de rosa a la
bacteria. (Universidad de Granada, 2014)
c) Rodamina-Auramina: En las paredes celulares los cidos miclicos tienen afinidad con
fluorocromos rodamina y auramina, los que se fijan y revelan color amarillento o
naranja sobre fondos verdes. (Universidad de Buenos Aires, 2015).
d) Naranja De Acridina: Fluorocromo que se une con el cido nucleico de manera nativa
o desnaturalizada, su color puede variar conforme el pH y concentracin, este
colorante da una fluorescencia verde con microorganismos vivos y roja en el caso de
organismos muertos. (Universidad de Buenos Aires, 2015).
e) Carbolfucsina: Es una mezcla de fucsina con cido carblico, usadas en la tcnica de
Ziehl Neelsen, til debido a que las paredes celulares en algunas bacterias al contener
cidos miclicos o grasos de cadena larga se pueden hacer resistentes a la
decoloracin con alcohol-cido, una vez se hace tincin con otros colorantes bsicos.
(Universidad de Buenos Aires, 2015).
4. Con el grupo colaborativo, escojan una tcnica de tincin para bacterias y explique el
procedimiento para realizarla por medio de un pequeo diagrama de flujo.

Imagen 1: Diagrama de flujo de los pasos requeridos para la elaboracin de una tincin de Gram, tcnica seleccionada
por el grupo.

Actividad 2 Exploracin
5.

Nombre cuales son las morfologas bsicas de las bacterias.

Son organismos microscpicos, unicelulares, estas pueden mostrar un amplio rango de

formas diferentes y tamaos conocidos como morfologas, y puede variar tambin conforme las
diferentes especies, entre sus formas encontramos: las esfricas (cocos), espirales (espirilos),
cilndricas (bacilos) y espiroquetas, y las pleomorficas que pueden cambiar su forma, las bacterias
tienen pared rgida, contiene ADN, membrana citoplasmtica, polirribosomas. La morfologa
generalmente estara determinada por las paredes celulares y los citoesqueletos, la importancia
de su forma determina la capacidad de asimilar nutrientes y sobrevivir. (Molina & Uribarren, 2015)
6.

Explique brevemente qu es un hongo.

Protistas superiores eucariotas, no son fotosintticos (no fotosntesis) se dividen en:

mohos, levaduras y setas. (Henry & Heinke, 1999). Los hongos son organismos poseen clulas
con ncleo (eucariontes) y su nutricin es a partir de otros seres vivos orgnicos para obtener los
nutrientes (son hetertrofos). Las clulas de los hongos presentan gruesas paredes de
polisacridos conocido como quitina, que le provee de resistencia. (Henry & Heinke, 1999). La
mayor parte de los hongos son pluricelulares con estructuras compuestos de filamentos
microscpicos de forma tubular o hifas las cuales agrupadas forman micelios. Su importancia
ambiental radica en que son grandes descomponedores de materia orgnica e incluso algunos
sirven de alimento o parte de procesos industriales diversos. (Biodiversidad Mexicana, 2014)
7.

Explique brevemente qu es una levadura.

Son organismos unicelulares, ms grandes que las bacterias, son ovoides, esfricas,
elipsoidales (curva), se reproducen de forma asexual, son facultativas (aerobias y anaerobias)
muy utilizadas en la industria alimentaria. (Henry & Heinke, 1999). En general son hongos
unicelulares Ascomicetos, aunque unicelulares pueden formar filamentos, su divisin s por fisin
o gemacin o en el caso de ciclo sexual por conjugacin, algunas especies pueden ser simbiontes
y otras patgenas en animales y el hombre. (Universidad de Granada, 2008)
8.

Explique brevemente qu es un microorganismo auttrofo

Estos organismos a partir de dixido de carbono obtienen su aporte de carbono, los

requerimientos energticos para su desarrollo y funcionamiento los derivan a partir de la
energa solar o a partir de la oxidacin de algunos compuestos inorgnicos. En este tipo de
organismos, se produce una sintetizacin de sustancias inorgnicas, que formaran parte del
componente esencial para funciones metablicas, por esta razn los organismos auttrofos no
requieren la participacin de otros seres vivos en su alimentacin. As mismo pueden ser foto
auttrofos al utilizar luz solar para generar energa o quimiautotrofos si oxidan compuestos
inorgnicos como fuente energtica (Henry & Heinke, 1999)
Su clasificacin puede encontrarse en: Auttrofos Inferiores como las cianobacterias
procariotas, algas eucariotas y algas cromfilas. Auttrofos superiores con rganos y tejidos
especializados que proveen parte del equilibrio climtico medioambiental. Las plantas
vasculares, formadas por tallos, xilema y floema, sistemas especializados en conduccin de
lquidos y nutrientes entre la estructura orgnica y Plantas no vasculares, carentes de xilema y
floema para transporte de nutrientes o lquidos esenciales, entre las cuales se encuentran las
algas acuticas y briofitas terrestres (Prez, 2014)

Actividad 2 Exploracin

9. Explique brevemente qu es un microorganismo hetertrofo.

En general estos organismos si dependen de otros organismos como fuente externa de
nutricin y energa, que se derivan de la apropiacin de sustancias orgnicas previamente
sintetizadas por organismos hetertrofos o auttrofos. En esta definicin se encuentran muchas
bacterias, animales y el ser humano. Para su nutricin se aprovechan de las formas a) Holozoica,
b) Parasitismo, c) Saprofitismo. Segn la forma como se obtiene la energa en un organismo
hetertrofo, podr clasificarse en Fotorganotrofos, que fijan energa a partir de sntesis
nicamente en presencia de la luz y en medios principalmente anxicos, entre ellos se
encuentran las bacterias purprea y familia de seudomonadales. Tambin se localizan los
Quimiorganotrofos, que extraen directamente por procesos especiales energa qumica a partir
de materia o sustancias orgnicas de diverso origen. En este grupo se incluyen el ser humano,
animales, el reino fungi, algunos moneras y arqueobacterias. (Grupo Polochic, 2009)

a)

b)

c)

d)
e)
f)
g)
h)

10. Cules son los medios de cultivo ms utilizados para propagacin de bacterias y
hongos?
En la actualidad existen una gran cantidad de medios de cultivo para bacterias y hongos,
sin embargo es este trabajo se mencionaran los ms utilizados en laboratorios de microbiologa:
Agar nutritivo: Este medio de cultivo se utiliza de manera rutinaria casi para todo tipo de bacterias,
dadas sus caractersticas de ser un medio solido resistente a altas temperaturas, ideal para
crecimiento bacterial sobre su superficie para identificacin ms sencilla que en medios lquidos.
El agar nutritivo puede estar formado por: Peptona, Extractos de crnicos y/o extractos de
levadura, Agar, NaCl, y Agua destilada; manteniendo el medio un pH de 6.8 a 25 C (Casado,
Torrico, & Medina, 2012)
Agar Sangre: Medio enriquecido utilizado en investigacin para crecimiento de estreptococos.
Entre sus componentes se una agar nutritivo enriquecido con NaCL o el tripticase de soja.
Se adiciona al medio, sangre de mamfero principalmente de carnero diluida al 5% o de otros
animales incluso de humanos. (Casado et. Al., 2012)
Agar Chapman: Este medio permite el crecimiento de grupos bacterianos seleccionados e inhibe
el crecimiento de los no deseados, en este medio es posible distinguir organismos patgenos en
cortos periodos de tiempo. (Casado et. Al., 2012)
Lwenstein - Jensen: Este medio es una base para preparados de medios destinados al cultivo
y aislamiento de micobacterias. (Casado et. Al., 2012)
Agar Czapek: Este medio ideal cultivo de bacterias y hongos capaces de aprovechar el nitrato de
sodio como su fuente de nitrgeno. (Casado et. Al., 2012)
Agar Extracto de Malta: Usado principalmente para aislamiento, deteccin y conteo de levaduras
y mohos. (Casado et. Al., 2012)
Agar Papa y Dextrosa: Usado principalmente como medio para el cultivo de levaduras y mohos.
(Casado et. Al., 2012)
Peptona de Soya: Medio formado por hidrlisis de la harina de soya y papana. Con un alto
contenido de vitaminas y carbohidratos, es ideal para bacterias y hongos ms exigentes. (Casado
et. Al., 2012)
11. Realice la descripcin macroscpica y microscpica de una bacteria.
La bacteria seleccionada para este punto del trabajo es la Salmonella, enterobacteria
patgena de organismos de sangre fra y caliente, se transfiere al ser humano por alimentos
contaminados con esta (Sabalete, 2010)

Actividad 2 Exploracin

a) Descripcin macroscpica: En medio Hektoen a 37C Producen colonias grandes, de

tono verde y precipitado grisceo a negro por la produccin de H2S, las colonias
pueden medir de 2 a 3 milmetros y lisas, convexas, brillo a la luz y generalmente
centro de color ms oscuro o negro que en los bordes. (Sabalete, 2010)
b) Descripcin microscpica: Bacilos con forma de bastoncillo de 1-3/0.5 m; procariotas,
son gramnegativos, anaerobios facultativos, poseen flagelos peritricos, no desarrollan
cpsula no forman esporas. Son catalas positivos y oxidasa negativos; Generalmente
mviles y logran producir sulfuro de hidrgeno (H2S). no producen ureasa y pueden
fermentar glucosa y no lactosa. (Sabalete, 2010)

Figura 1: Boceto de morfologa microscpica

de bacterias Salmonella, en tono rosceo
por tincin de Gram (gramnegativas) en una
de ella se aprecia el corte representativo de
las procariotas sin ncleo celular definido.

Figura 2: Boceto de morfologa macroscpica

de un cultivo de bacterias Salmonella, en
medio Hektoen.

12. Realice la descripcin de una bacteria de inters ambiental, describiendo la siguiente

informacin: Nombre, caractersticas, ambiente donde se encuentra.
Bacterias promotoras de crecimiento en plantas para propsitos agrcolas y ambientales
(Azospirillum), estas bacterias son un grupo de diferentes especies que logran incrementar el
crecimiento y productividad vegetal, entre los organismos ms conocidos estn las especies que
pertenecen a los gneros Rhizobium, Pseudomonas, y Azospirillum.
Las caractersticas tiles para su identificacin son la forma vibroide, el pleomorfismo y su
movilidad en espiral. Las clulas contienen cantidades elevadas de polihidroxibutirato (polmero
producido por ciertos microorganismos como un producto de asimilacin de Carbono) hasta 50%
de su peso seco celular; una de las caractersticas fenotpicas que se usa de forma amplia para
reconocer el gnero Azospirillum es el color rojo escarlata que toman las colonias al crecer en un
medio adicionado del colorante rojo Congo. Los Azospirilla muestran una amplia distribucin
Geogrfica alrededor del mundo pero con mayor abundancia en las regiones tropicales; tambin
los podemos encontrar en las regiones templadas, fras y desrticas. Las bacterias del genero
Azospirillum han sido recogidas de la superficie de la raz de una amplia variedad de plantas y de
su rizosfera, dentro de esas plantas estn cereales como el maz, arroz, trigo, avena, sorgo
tambin de pastos forrajeros.

Actividad 2 Exploracin

13. Realice la descripcin de un hongo de inters ambiental, describiendo la siguiente

informacin: Nombre, caractersticas, ambiente donde se encuentra.
Hongos liquenizado: Organismo formados por 2 componentes un Micobionte y un
Ficobionte.
Son principalmente Ascomycotina y solo unos pocos perteneces a los
Basidiomycotina o Deuteromycotina. El trmino liquen o Lichen, ampliamente usado hasta hace
unas dcadas, se encuentra en franco desuso en la actualidad, especialmente debido a que
representa un grupo artificial de organismos con mltiples orgenes. El trmino actual para estos
organismos es hongos liquenizados. 13.500 especies (Marcano, 1994) de distribucin
cosmopolita. Se desarrollan en todos los tipos de sustratos y de ambientes, por lo que se los
domina ubicuistas. Son buenos bioindicadores de contaminacin. Diversidad de hongos
liquenizados, independiente en diferentes linajes de grupos fngicos sugiere que el inicio de esta
simbiosis ocurri diferentes tiempos geolgicos (Hernndez M. 2001). Esta es una de las
principales razones de que los hongos liquenizados son considerados como un grupo polifiltico,
con orgenes en Ascomicetes y Basidiomicetes. Se encuentran en la mayora del hbitat terrestre.
Incluidos los que son adversos para otros organismos (por ejemplo, altitud, altas latitudes, y sitios
en sucesin recin modificados).
14. Microorganismo de inters ambiental y su posible aislamiento.
El microorganismo seleccionado es el hongo Trichoderma pertenecientes a los
ascomycota, es un hongo benfico entre otros para los cultivos de la caa de azcar y el control
de plagas e inhibidor de otros hongos en las primeras fases de crecimiento de la caa y
disminucin de fertilizantes bioqumicos al componente edfico en un 40% adems este
contribuye al crecimiento en de las races de la caa por lo cual las plantas tienden a ser ms
resistentes a la sequa. Su posible aislamiento estara caracterizado de la siguiente manera:
a) Toma de la muestra: Se realiza en los campos de cultivo maduros 5 submuestras de suelo y
sustrato a 20 cms de profundidad, igualmente una muestra del sistema radicular de la planta sana

b) Transporte: Se utiliza para retirar el suelo, sustrato y raices un barreno helicoidal, y se deposita
las muestras en fundas plsticas de 14 x 20 cms agitando para homogeneizar, para luego
depositarse en nevera hielera porttil para traslado al laboratorio. (Moya, et al. 2014)
c) Medio de cultivo: El requerimiento nutricional del Trichoderma es comn de los hongos, por ello
se utiliza medio de cultivo PDA (papa dextrosa agar) , que debe prepararse con 5 das de
anticipacin a la siembra, constituido principalmente por PDA sinttico Oxoid CM0139, y agar
bacteriological (Oxoid LP 0011) (Moya, et al. 2014)
d) Tcnica de siembra en el laboratorio: Las muestras se tamizan y envasan en un frasco con 90ml
de agua destilada para crear dilucin madre. Las races se sacuden hasta desprender el suelo,
se cortan en trozos de 1 cm y se envasan 10 gramos en frascos de 300mL con 150 mL de agua
destilada, agitndose durante 20 minutos para preparar dilucin madre. Ambas diluciones se
llevan a cabina de flujo laminar para crear diluciones seriadas y proceder a sembrar en cajas de
Petri con el medio de cultivo PDA distribuyendo sobre toda la superficie en estas cajas 0.1 mL de
dilucin y luego llevadas las cajas a la incubadora a 25 y 30 C (Moya, et al. 2014)

Actividad 2 Exploracin

8
Bibliografa

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