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EL PROGRAMA UNIVERSITARIO DE ALIMENTOS

NMX-F-229-1972. MTODO DE PRUEBA PARA LA DETERMINACIN DE

VITAMINA "C" EN LECHE. NORMAS MEXICANAS. DIRECCIN GENERAL DE
NORMAS.
1. ALCANCE
Esta Norma tiene por objeto establecer el mtodo de prueba para la determinacin de
vitamina "C" en leches, por el mtodo volumtrico.
2. APARATOS Y EQUIPO

Balanza analtica con sensibilidad de 0.0001 g

Bao Mara
Matraces aforados de 100 y 200 ml
Pipetas volumtricas de 10 y 25 ml
Embudo de 8 10 cm de dimetro aproximadamente
Papel filtro
Microbureta de 10 ml
Mortero de porcelana
Matraces Erlenmeyer de 125 y 250 ml
Probeta graduada de 25 ml
Material comn de laboratorio.

3. MATERIALES Y REACTIVOS
Los reactivos que a continuacin se mencionan deben ser grado analtico, a menos que se
indique otra cosa; y cuando se hable de agua, sta debe ser destilada.
Vitamina "C" (cido ascrbico) cristalizada grado farmacutico (conservada en un frasco
mbar en el desecador con gel de slice).
Solucin al 10% de cido metafosfrico. Se pesan de 60 a 70 g barras de cido
metafosfrico (HPO3), se elimina la capa blanca que generalmente se forma en la superficie,
lavndolas con agua se secan rpidamente con papel filtro y se fragmentan en un mortero.
Posteriormente se pesan 50 g de estos pedazos y se disuelven sin calentar en 500 ml de agua
y se filtra la solucin en papel plisado. Esta solucin se puede usar una semana si se
conserva a la temperatura de 4C en un frasco mbar.
cido metafosfrico al 2%. Se diluye con agua 1:5 en volumen, la solucin al 10%.
Solucin acuosa de cido actico al 10%.

Solucin de sal sdica del 2.6 diclorofenol indofenol. Se pesan exactamente 100 mg del
reactivo en un vaso previamente tarado, se le agrega agua y se calienta a ebullicin sin dejar
de agitar. Se enfra y filtra por papel y se recibe el filtrado en un matraz aforado de 200 ml.
Se lava el filtro con agua y se reciben las aguas del filtrado en el mismo matraz y despus se
afora. Esta solucin se conserva en recipientes mbar, verificando el titulo da vez que se
emplee.
Solucin de cido metafosfrico-actico. Se disuelven agitando 15 g de barras de cido
metafosfrico glacial recientemente pulverizado, en 40 ml de cido actico y 200 ml de
agua; se diluyen hasta cerca de 500 ml y se filtra por papel filtro plegado en un frasco con
tapn esmerilado. El cido metafosfrico (HPO3) se transforma en cido fosfrico (H3PO4)
y en refrigeracin la solucin puede durar de 7 a 10 das sin alteracin.
Determinacin del titulo de la solucin de la sal sdica del 2.6 diclorofenol-indofenol.
Se pesan exactamente 50 mg de cido ascrbico grado farmacutico y se pasan a un matraz
aforado de 100 ml. Se disuelven con la solucin de cido metafosfrico al 2% y se afora con
el mismo cido a 20C.
Se toman con pipeta 10 ml de esta solucin en el Erlenmeyer y se aaden 10 ml de cido
actico al 10% ms el agua necesaria pare igualar el volumen de las diferentes
determinaciones, y se titula con la solucin de sal sdica del 2,6-diclorofenol-indofenol hasta
coloracin rosa persistente por 15 segundos.
Ttulo = A = mg de vit "C"/ml de la solucin = f
B
Donde:
A = mg de vit. "C" contenidos en los 10 ml de la solucin.
B = ml de la solucin de la sal sdica del 2,6-diclorofenol-indofenol empleados en la
titulacin.
4. TOMA DE LA MUESTRA
Se toma una muestra representativa del lote de prueba de acuerdo con la Norma Mexicana
de Muestreo NMX-R-017 en vigor.
5. PREPARACIN DE LA MUESTRA Y DETERMINACIN.
a) Para leche en polvo
Se pesa la muestra (M) en un vaso de precipitado y se prepara una pasta con la cantidad
suficiente del cido metafosfrico al 2%, hasta un volumen convenido en la determinacin.

Este volumen se designa con la letra U (ver 7.1.1); la solucin final debe contener de 10 a
100 mg de cido ascrbico por cada 100 ml, esta solucin se filtra.
b) Para leche lquida
Se toma una cantidad tal de leche que contenga no ms de 100 mg de cido ascrbico, y se
diluye con solucin de cido metafosfrico actico a un volumen tal que contenga de 10 a
100 mg de cido ascrbico por cada 100 ml. Dicho volumen se designa con U, esta solucin
se filtra.
Determinacin.
Se titulan tres muestras alcuotas, cada una conteniendo aproximadamente 2 mg de cido
ascrbico; se agregan 10 ml de cido actico al 10% y agua en cantidad suficiente para
igualar el volumen, se titula con la solucin de sal sdica del 2,6-diclorofenol-indofenol
hasta coloracin rosa persistente por 15 segundos. Se hacen determinaciones en blanco para
corregir las titulaciones, usando los volmenes apropiados de la solucin de cido
metafosfrico-actico y agua (ver 7.1.2).
6. CALCULOS Y RESULTADOS
La cantidad de vitamina "C" se calcula por la siguiente expresin, en la cual las letras
representan valores medios as:
Vitamina "C" mg por g ml = (V - V1) x f x U
M Y
Donde:
V = ml gastados para titular la muestra
V1 = ml gastados para titular el blanco
f = mg de cido ascrbico contenido en 1 ml de la solucin titulada de la sal sdica del 2,6
diclorofenol-indofenol
M = Peso en gramos de la muestra o volumen en ml
U= volumen inicial conocido
Y = volumen de la alcuota tomada en la titulacin
7. APNDICE
7.1 Observaciones.
7.1.1 En la determinacin de la leche en polvo se usa aproximadamente 10 ml de la
solucin extractora por gramo de muestra.
7.1.2 Se sugiere usar alcuotas de 25 ml de filtrado.

8. BIBLIOGRAFA
Official Methods of Analysis of the Association of Official Agricultural Chemists. Eleventh
Edition 1971.Procedure 39.052.