UNIVERSIDAD

NACIONAL

MAYOR DE SAN
MARCOS
(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE QUMICA E ING. QUMICA

EAP. INGENIERA
QUMICA

LABORATORIO DE ANALISIS INSTRUMENTAL

ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORCION
MOLECULAR ULTRAVIOLETA - VISIBLE
PROFESORA

FECHA DE LA PRCTICA

FECHA DE ENTREGA

TURNO

QUIM. ALVAREZ BAUTISTA JENNY

13/ 09 / 14
27/ 09 / 14
SABADO

13 17 HORAS

INTEGRANTES:

ABAD CASTILLO WILLIS

11070194
SALAS PASTOR MARIO
12070047
RAMIREZ ARCE MARY
12070198
VALVERDE ARMAS ANDRES
12070170
NEZ AGUILAR GIUSEPPE
12070154
MINAYA CCAIHUARE PAOLO
12070152
CURI AGUADO
12070144

ESPECTROSCOPA MOLECULAR UV-VIS

(ULTRAVIOLETA-VISIBLE)
Es una tcnica analtica que mide la absorcin de la luz, dependiente de
las longitudes de onda, en la regin visible o ultravioleta.
Una muestra en solucin es irradiada en el rango del UV-Visible. Ciertas
longitudes de onda son selectivamente absorbidas por la muestra
produciendo un patrn espectral caracterstico, el cual puede ayudar a
identificar el material.
Para la determinacin en la regin ultravioleta es necesario emplear
porta muestras de cuarzo que no absorba en esta zona del espectro.
Los componentes bsicos de los espectrofotmetros son similares a los
de un colormetro pero con mejoras y ampliaciones que les permitan una
mayor precisin en las medidas.
Se distinguen dos tipos fundamentales: los de chorro simple y los de
chorro doble. Estos ltimos son ms prcticos ya que permiten obtener
directamente la absorcin relativa de la muestra respecto a la referencia
en todo el intervalo de longitudes.

Fundamento de la tcnica:

Cuando un haz de luz atraviesa una disolucin con un soluto

absorbente, la intensidad de este haz se disminuye debido a la
absorcin de una parte de la energa radiante de una frecuencia
caracterstica por parte de molculas o de iones del soluto cuando se
excitan a niveles energticos superiores. En general podemos decir
que:
Yo=Ya+It+ir

Donde Y o es la intensidad de luz incidente, Y a es la intensidad de luz

absorbida, Y t es la intensidad de la luz transmitida y I r puede ser
eliminada.
Nuestros ojos detectan longitudes de onda de la luz visible no
absorbida, es decir, la luz que transmitida. Las medidas de la
cantidad de luz transmitida se pueden hacer con un instrumento
llamado espectrofotmetro, un esquema del que se muestra en la
figura y que consta fundamentalmente de una fuente de luz, un
selector de longitud de onda, una cubeta de material transparente a
la radiacin y un detector.

Espectrofotmetro
La absorbancia (A) de la sustancia se relaciona con la intensidad de la
luz incidente y de la luz transmitida segn la ecuacin conocida como
ley de BOUGIES-Lambert-Beer:
A = -log T = -log Y t / I o = l c
Dnde:
A = absorbancia
T = transmitancia
= absortividad molar; es una constante de proporcionalidad que

depende de la sustancia y de la longitud de onda. (Unidades: mol -1)

Y t = intensidad de la luz transmitida
I o = intensidad de luz incidente
l = camino ptico recorrido por la luz dentro de la disolucin (unidades:
cm)
c = concentracin de la sustancia que absorbe (unidades: mol -1)

Descripcin de la tcnica:

En este experimento usted determinar la concentracin de manganeso

en acero por espectrofotometra.
El mtodo ms usado en la determinacin espectrofotomtrica de
manganeso se basa en la oxidacin del in de manganeso, Mn2+ al
permanganato, MnO4-. El in de permanganato absorbe luz visible en la
regin de los 525 nm lo que le imparte un color violeta a la solucin
acuosa de este in.
El experimento consiste principalmente en preparar soluciones estndar
permanganato de potasio (KMnO4) con su respectivo blanco para ajustar
la absorbancia a 0, luego preparar soluciones del desconocido y su
blanco.
Finalmente, determinar la absorbancia de todas las soluciones
preparadas. Con estos datos preparar una curva de calibracin de
absorbancia como funcin de concentracin conocida de manganeso y
con la absorbancia de las soluciones desconocidas podr determinar la
concentracin del in de MnO4-. Las medidas espectrofotomtricas las
llevar a cabo en un espectrofotmetro visible GENESYS.

REACCIONES IMPORTANTES
Tratamiento de la muestra de Acero para determinacin de Mn:
Dilucin de la muestra con los cidos H3PO4 + HNO3 + Agua:

Fe 2 HNO3 Fe 3 NO2 NO
MnO HNO3 Mn 2 NO2 NO

Al realizar la disolucin de la muestra, la mezcla de cidos H3PO4 + HNO3:

acta sobre los componentes dejndolos en estados inicos, donde el cido
ntrico acta tanto en la muestra de acero como en el de manganeso y el
cido fosfrico va a acomplejar al in frrico dando un complejo incoloro,
cuya reaccin es la siguiente:

2PO 43 Fe 3 Fe(PO 4 )2

Complejo incoloro

( NH 4 ) 2 Fe( SO4 ) 2 6 H 2O

Agregacin de Sal de Mohr:

La adicin de sal de Mohr es para dar las mismas condiciones a la muestra
patrn con el fin de igualar el contenido de hierro de los patrones con el
hierro contenido en la muestra de acero a determinar.
Oxidacin del Mn con la adicin de peryodato de potasio.
2Mn 2 5IO4 3H2O 2MnO 4 5IO 3 6H

Reacciones en el equipo de espectrofotometra:

En el proceso de absorcin de radiacin electromagntica una especie, en
un medio transparente, capta selectivamente ciertas frecuencias de la
radiacin electromagntica. El fotn absorbido hace pasar la especie M a
un estado excitado M*:
M + h M*
Tras un corto periodo, se pierde la energa de excitacin, generalmente en
forma de calor, y la especie vuelve a su estado fundamental:
M* M + Calor

CLCULOS DETALLADOS
Calibracin del espectrofotmetro SPECTRONIC C-20 GENESIS
Se calibra a partir de la solucin de CoCl 2 en HCl a 1% midiendo los valores de
absorbancia en el rango de 450 a 700 nm cada 10 nm se mide la absorbancia.
Se obtuvieron los datos presentes en la tabla N1. En el cual la mxima
absorbancia se da en un max de 510 nm (segn lo terico debe ser max de
510nm). Este resultado se encuentra en la grfica N1.
Determinacin mxima del mximo del permanganato
Se utiliza el blanco y el patrn 2 (anteriormente descritos). Con ello se
determin el mximo para el permanganato mediante la grfica N2. Se
determin que el mximo es 525 nm, el cual se encuentra en la tabla N2.
Determinacin cuantitativa del manganeso en el acero
Se calcula la concentracin del Mn en cada uno de los patrones

-PATRN 1:

W(g)Mn/250mL =

0.1547 g MnSO 4. H 2O
PA Mn
x
250 mL
PF MnSO 4 H 2 O

0.1547 g
250 mL x

54.94 g /mol
-4
168.94 g /mol = 2.0124x10 g/mL=

W(g)Mn=0.20124mg/mLx

1000 mL
1L

=201.24 mg/L

W(g) Mn = 201.24ppm
Ahora se calcula la concentracin para 2mL del patrn diluidos en 100mL

1L

P1 =201.24mg/L x 1000 mL

2 mL
100 mL

P1= 4.0247 mg/L

Se repiten los clculos para los patrones P2 y P3
P2= 10.0618 mg/L
P3=20.1236 mg/L

MUESTRAS (MI)
Se calcula la concentracin total de la muestra en base al peso de dicha
muestra diluido en 100mL.
M1 total = 0.1142g/100mL = 1.1420 x 10 3 mg/L
M2total = 0.1177g/100mL =1.1770 x 103 mg/L
M3 total = 0.1202g/100mL = 1.2020x 103 mg/L
Del grfico N 3 se obtienen las concentraciones de manganeso (Mn) en las
muestras.
M1 =11.2686 mg/L
M2 =12.1642 mg/L
M3= 7.2388 mg/L
Determinacin del % de Mn en cada muestra de acero
Se utiliza la siguiente frmula:

% Mn =

M1
x 100
M 1total

Para muestra 1 (M1)

% Mn =

11.2686
x 100=0.986 0.99
1.1420 x 10 3

M2:
% Mn = 1.03 %
M3:
% Mn = 0.60 %

TABLA DE DATOS
1.- Concentracin de Mn en Patrones
Concentracin de
Mn en cada patrn (mg/L)
Patrn 1
Patrn 2
Patrn 3

4.0247
10.0618
20.1236

2.-

Verificacin de la
espectrofotmetro con

(nm)
480
490
500
510
520

(nm)
525
450
530
460
540
470
550
480
490
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650
660
670
680
690
700

A
0.009
0.025
0.035
0.050
0.058
A
0.064
0.198
0.061
0.262
0.056
0.311
0.055
0.347
0.379
0.418
0.444
0.430
0.380
0.298
0.213
0.145
0.091
0.063
0.052
0.044
0.039
0.037
0.036
0.034
0.032
0.031
0.029
0.026
0.022
0.019

calibracin
cocl2 en Hcl al 1%.

del

3.-Determinacin de la longitud de onda mxima ( mx) del mn

usando patrn 2.

4.- Absorbancia de las soluciones patrones y muestras.

Soluci
n
P1
P2
P3
M1
M2
M3

A
0.018
0.064
0.126
0.069
0.075
0.042

TABLA DE RESULTADOS
1.-Pocentaje de Mn en muestra de acero.

Muestra 1
Muestra 2
Muestra 3

Concentracin
(nm)
total de
450la
muestra460
(mg/L)
1.1420 470
x 10

1.1770480
x 103
490
1.2020x
103
500
510
520
530
540
550
560
570
580
590
600
610
620
630
640
650
660
670
680
690
700

Concentracin

A
de Mn en las
0.198
muestras (mg/L)
0.262
11.2686
0.311
0.347
12.1642
0.3797.2388
0.418
0.444
0.430
0.380
0.298
0.213
0.145
0.091
0.063
0.052
0.044
0.039
0.037
0.036
0.034
0.032
0.031
0.029
0.026
0.022
0.019

% de Mn en
Muestra
0.99
1.03 %
0.60 %

GRFICAS EXPERIMENTALES
A) VERIFICACIN DE LA CALIBRACIN DEL ESPECTROFOTMETRO
CON CoCl2 en HCl al 1%.

Grfica 1 Calibracin del espectrofotmetro

0.5
0.45
0.4
0.35
0.3
Absorbancia

0.25

0.2
0.15
0.1
0.05
0
400

450

500

550

600

650

700

750

Longitud de onda (nm)

B) DETERMINACIN DE LA LONGITUD DE ONDA MXIMA ( mx) DEL Mn

USANDO PATRN 2.
(nm)
480
490
500
510
520
525
530
540
550

A
0.009
0.025
0.035
0.050
0.058
0.064
0.061
0.056
0.055

Grfica 2 Determinacin mx del Mn

0.07
0.06
0.05
0.04
Absorbancia

0.03
0.02
0.01
0
470

480

490

500

510

520

530

540

550

Longitud de onda (nm)

C) CURVA DE CALIBRACIN CON LOS DATOS DE ABSORBANCIA vs

CONCENTRACIN (mg Mn/L)

Soluci
n
P1
P2
P3
M1
M2
M3

C
(mg/L)
4.0247
10.061
8
20.123
6
11.268
6
12.164
2
7.2388

A
0.018
0.064
0.126
0.069
0.075
0.042

560

Grfica 3 Curva de calibracin

0.14
0.12

f(x) = 0.01x - 0.01

R = 1

0.1
0.08
Absorbancia

0.06
0.04
0.02
0
2

10

12

14

Concentracin ( mg/L)

16

18

20

22

DISCUSION DE RESULTADOS

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Conclusiones:
La sal de Mohr (Fe(NH4)2)(SO4)2.7H2O que contiene al Fe3+
(amarillo) y el H3PO4 forman un complejo fosfrico incoloro,
mediante el enmascaramiento al Fe 3+ , evitando as una
interferencia de coloracin.
El Blanco debe contener todos los reactivos utilizados en la
preparacin de la disolucin coloreada, pero nada de la
sustancia que se est analizando, en este caso el
Manganeso (morado).
Cuando se grafica la Absorbancia(A) vs la Concentracin (C)
de los patrones y las muestras, las absorbancia de las
muestras deben estar situadas entre el rango de los
patrones para la luego localizar las concentracin de cada
una de ellas (muestra 1 y muestra 2). Si esto ocurre el
anlisis realizado es ptimo.

Recomendaciones:
Se debe tener bien en cuenta el rango en el que se va a
trabajar; en este caso el rango visible. Por lo tanto, se
emplea las celdas de material de vidrio para el anlisis por
espectrofotometra visible.
Para la preparacin de la mezcla de cidos se emplea agua,
para que de esta manera la solucin est diluida y el HNO 3
no est tan concentrado, as se evita que se forme un xido
con el Fe lo cual podra dificultar la identificacin del
Manganeso en la muestra.

 Limpiar cuidadosamente y correctamente con papel tis las

celdas de vidrio, ya ciertas interferencias podran afectar en
el anlisis espectrofotomtrico.

BIBLIOGRAFIA

Hewlett Packard. 1988. The Diode-Array Advantage in UV-VIS

Spectroscopy. Publication No12 - 55948912.

Inge, J.A. Jr. and Crouch, S.R. 1988. Spectrochemical Analysis.

Prentice Hall International, Inc.

Skoog, D.A. y West, D.M. 1984. Anlisis Instrumental. 2a edicin.

Ed. Interamericana.

Rubinson, K. A., Rubinson, J. F. Anlisis Instrumental. Pearson

Educacin, S.A. Madrid, Espaa, 2001.
Willard, H. H., Merrit, L. Jr., Dean, J. A. y Settle, F. A. "Mtodos
Instrumentales De Anlisis".
Grupo Editorial Iberoamrica. Mxico, D.F. 1991.koog.-Holler
Nieman, Anlisis Instrumental, quinta edicin, Mc Graw Hill, 2001

ANEXO