Hernndez Miguel Mariana Saray

Lpez Marn Ana Rosa

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Antecedentes. Prctica 7. CROMATOGRAFA EN COLUMNA.

a) Cromatografa en columna. Para qu sirve y sus aplicaciones.
La cromatografa en columna utiliza una columna de vidrio vertical que se llena con un
soporte slido adsorbente. Tambin es fundamental para determinar el disolvente (o
mezcla de disolventes) adecuado, como paso previo a la realizacin de una
cromatografa en columna.
La polaridad es la base de esta tcnica. La fase estacionaria por gel de slice es polar y
los analitos al separarse presentan diferentes polaridades. Quedaran ms retenidos
por la fase estacionaria los ms polares y la eleccin del disolvente en funcin de su
polaridad, har que los analitos sean arrastrados ms rpido o ms despacio, o incluso
quedar completamente retenidos en la fase estacionaria, consiguiendo su separacin.
b) Cromatografa de adsorcin, de particin o reparto.
-Adsorcin: la fase estacionaria es un slido en el que los componentes de la muestra
son adsorbidos. La fase mvil puede ser un lquido (cromatografa lquido-slido) o un
gas (cromatografa gas-slido). Los componentes se distribuyen entre dos fases a
travs de la combinacin de adsorcin y desorcin.
-Particin: la fase estacionaria de la cromatografa de particin es un lquido soportado
en un slido inerte. Al igual que en la cromatografa de adsorcin, la fase mvil puede
ser un lquido o un gas.
c) Factores que influyen en una separacin por cromatografa en columna.
-Longitud de la columna: la longitud del dispositivo en el que se empaqueta la
columna.
-Volumen de la columna: volumen total de gel que se empaqueta en una columna
cromatogrfica.
-Volumen muerto de la columna: cantidad de solvente que tiene que atravesar la
columna para asegurar que se ha reemplazado completamente.
-Matiz de la columna: sustancia que esta empapada de solvente y que se empaqueta
en la columna.
d) Seleccin de eluyentes y adsorbentes para la separacin de
compuestos por cromatografa en columna.
La eleccin del eluyente depende de la polaridad de las sustancias que van a ser
separadas frecuentemente es necesario usar mezclas de disolventes.
Para los adsorbentes generalmente su eleccin depende del tipo de compuestos a
separar.
Referencias:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cromatograficos_6700.pdf Acceso: 27
de marzo 2016, 20:30 horas.
Brewster R. Q., et al. Curso Prctico de Qumica Orgnica. 2 Edicin. Madrid.

Diagrama de flujo:

Se coloca la llave de la columna en posicin de

cerrado; se introduce hasta el fondo un pedazo
de algodn, se agregan 5 mL de (AcOEt) y se
presiona con el algodn para eliminar las
burbujas.

Se
coloca
la
columna
de
cromatografa en un soporte, de tal
forma que se encuentre vertical y a
la altura de los frascos viales.

En un vaso de precipitados de 100 mL se disuelve

la muestra problema con el eluyente y se vierte lo
ms rpido posible y con cuidado. Se abre la llave
para colectar el eluyente y que se adsorba la
muestra aplicada.

Se marcan los frascos viales a 6 mL y se colectan

fracciones, se verifica la separacin realizando
cromatoplacas.

Se eluyen las cromatoplacas en una

mezcal del eluyente utilizado y se
observa en cuales fracciones hay
presencia
del
compuesto
separado
revelando con una cmara UV.

Se prepara una suspensin de slica

gel para columna, 6 g en 30 mL de
eluyente y se agita hasta que no haya
burbujas de aire. Con el embudo se
vierte la suspensin en la columna lo
ms rpido posible y se golpea para
que el empaquetamiento sea uniforme.
Se abre la llave para eliminar el exceso
de disolvente, el eluyente debe estar
0.5 cm arriba de la slica.

Para recuperar el principio activo se

destila el disolvente por medio de una
destilacin simple, se deja un residuo de 5
mL y se vierte en el vidrio de reloj para
que termine de evaporarse en la
campana.

Se pesa el producto recuperado, se determina el

punto de fusin y se calcula el rendimiento.