Laboratorio de bioqumica, 17 Nov.

2015
Informe No.1

ESPECTROSCOPIA Y DILUCIONES

Viany Gutirrez
Rodriguez E. Duvn (2111841)

Resumen
A partir de una solucin patrn de CuSO 4 0,1 M se prepar una serie de nuevas soluciones
diluidas con el fin de medir la absorbancia y comprobar la relacin estrecha que sta
mantiene con la concentracin y as finalmente poder determinar la concentracin de una
disolucin problema.

Palabras claves: Absorbancia, ley de Lambert-Beer, dilucin, espectrofotometra

La ley de Beer-Lambert1 relaciona la

absorbancia de una solucin con su
concentracin y se expresa de la siguiente
forma

1. Introduccin
La espectroscopia es en la actualidad una de
las ms eficientes herramientas analticas con
las que puede contar un qumico dada la
capacidad que tienen las sustancias de
interactuar con la radiacin electromagntica.
Las sustancias coloreadas tienen la capacidad
de absorber la energa radiante que pertenece
al rango visible del espectro y las incoloras
absorben en la regin ultravioleta. Dada la
imposibilidad de trabajar con muestras
concentradas a menudo es necesario realizar
diluciones para garantizar que los datos son
confiables.

A=b c

Donde A es la absorbancia,
-1.

es la
-1

absortividad molar, dada en mol cm , b es el

ancho de la cubeta y c la concentracin. La
absorbancia tambin se define como
A=log(

2. Fundamento terico

Io
)
I

Donde Io e I indican las intensidades

incidentes y transmitidas respectivamente por
1

lo que A se puede interpretar como una

medida de la radiacin de luz que llega al
detector.

Dilucin
1:2
1:5
1:10
1:50
1:100

Es clave mencionar que la ley de BeerLambert solo se cumple a concentraciones

bajas y que absorbancias iguales a 2 o ms no
son confiables ya que en estas condiciones la
linealidad entre la concentracin y la
absorbancia se pierde.

Volumen sln patrn (ml)

2,5
1
0,5
0,1
0,05

Tabla 1. Volumen de solucin 0,1 M empleada en la parte 1

(Aforado a 5ml)

Parte 2
Para esta parte se asumi que la concentracin de
la solucin es 5X y se pidi preparar diluciones de
concentracin 0,5X, 1X y 2X. Dado que la
disolucin patrn fue la misma utilizada en la
parte 1 se obtuvieron los resultados mostrados en
la tabla 2.

3. Parte Experimental
A partir de una solucin 0,1 M de CuSO4 se
prepar una serie de nuevas disoluciones de
menor concentracin, es decir se realizaron
diluciones como se indica a continuacin:

Dilucin
2X
1X=1:5
0,5X=1:1
0

Parte 1:
Se prepararon 5 disoluciones: 1:2, 1:5, 1:10,
1:50 y 1:100 a partir de la disolucin patrn,
0,1 M. Las cantidades de solucin patrn a
utilizar en cada dilucin fueron calculadas
multiplicando la cantidad final de disolucin
por la relacin de dilucin, por ejemplo para
preparar la dilucin 1:5 se tiene que:

Volumen sln patrn (ml)

2
1
0,5

Tabla 2.Volumen de solucin 0,1 M empleada en la parte 2.

(Aforado a 5ml)

Parte 3
En esta seccin se realizaron diluciones en serie
1:5, 1:25, 1:125, 1:625 a partir de la disolucin
0,1 M, para lo cual se prepar la disolucin 1:5
con base en la informacin de la tabla 1.
Posteriormente a partir de la disolucin 1:5 se
prepar la disolucin 1:25 tomando 1ml de la
disolucin 1:5 y aforando a 5 ml. De la misma
forma fueron preparadas las dems diluciones,
siempre tomando 1ml de la dilucin anterior y
aforando a 5 ml. Los valore se muestran en la
tabla 3.

Vdisolucin patrn = 5.(1/5) = 1ml.

Todas las diluciones se aforaron a 5ml. Las
cantidades utilizadas se relacionan en la tabla
1.
2

1:125
1:625
Dilucin
1:5
1:25
1:125
1:625

Volumen empleado
1 ml de solucin 0,1 M
1 ml de solucin 1:5
1 ml de solucin 1:25
1 ml de solucin 1:125

Tabla 4. Datos obtenidos experimentalmente. Las absorbancias

fueron registradas a 700 nm

5. Anlisis de resultados

Tabla 3. Volumen de cada solucin empleado en la parte 3.

(Aforado a 5ml)

A partir de los resultados mostrados en la

tabla 3 se puede graficar los datos de
absorbancia en funcin de la concentracin.
Los datos que mejor se ajustaron se muestran
en la tabla 5 que fueron los de la parte 1 con
los cuales se construy la grfica 1 que
muestra una relacin lineal.

4. Resultados
La tabla 4 muestra los resultados obtenidos
luego de medir la absorbancia de las distintas
disoluciones. Las concentraciones de las
soluciones fueron calculadas con la relacin
de dilucin:

concentraci Absorbanci
n
a
1,00E-03
0,056
2,00E-03
0,061
0,01
0,115
0,02
0,16
0,05
0,298

V1C1 = V2C2

Soluci
n
1:2
1:5
1:10
1:50
1:100
2X
1X
0,5X
1:5
1:25

0,082
8x10-4 M
0,042
1,6x10-4 M
Disolucin problema
0,220
-

absorbanci concentraci
a
n
Primera parte
0,298
0,05 M
0,160
0,02 M
0,115
0,01 M
0,061
2x10-3 M
0,056
1x10-3 M
Segunda parte
0,360
0,04 M
0,160
0,02 M
0,115
0,01 M
Tercera parte
0,160
0,02 M
0,155
4x10-3 M

Tabla 5. Datos experimentales empleados en el clculo de la

regresin lineal

C=
f(x) = 4.9x + 0.06
R = 1

Este resultado tiene sentido ya que segn los

datos de la tabla 4, la absorbancia 0,220 de la
muestra problema se encuentra entre las
absorbancias 0,160 y 0,298 es decir entre
concentraciones de 0,02 y 0,05 M.

Grafica 1. Relacin entre la absorbancia y la concentracin. La

pendiente de la curva da el valor de la absortividad molar

6.

Conclusin

De la grfica 1 se concluye que la ecuacin lineal

que ajusta mejor los resultados es
A ( c )=4,9004 C+00567

0,1633
=0,033 M
4,9004

(1)

Por tanto al reemplazar el valor de absorbancia

obtenido para la disolucin problema (tabla 4) en
la ecuacin 1 es posible obtener la concentracin
de la disolucin, por tanto

El valor de absorbancia de la muestra

problema (tabla 4) predicen que su
concentracin esta entre 0,02 y 0,05 M,
por tanto el valor calculado de 0,033 M se
ajusta
muy
bien
a
los
datos
experimentales.

Bibliografa

0,220=4,9004 C+ 00567

1. Douglas A. Skoog. Principio de anlisis

instrumental, 5 ed; McGraw-Hill, 2001.

0,2200,0567=4,9004 C