Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Facultad de Ciencias Biolgicas

EAP Gentica y Biotecnologa

ARBOLEDA WONG, Pool

BENDEZ SAYAS, Stacy
CUBAS MONTECINO, Diana
LLACSAHUANGA ALLCA, Lidia Elena
OBREGON HUAMAN, Gisvell Amanda
SNCHEZ CASTRO, Eduardo Enrique
TORREJN MALDONADO, Daniel Alcibiades

Laboratorio de Fisiologa Vegetal

PRACTICA N3:
Transpiracin en hojas de lamo

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UNMSM 2016-I
Laboratorio de Fisiologa Vegetal

Materiales

3 matraces de 50mL

3 pipetas de 10 mL

Solucin ABA 10-5 M y solucin KIN 10-5 M, 50 mL para cada concentracin de

hormona.

9 tubos de prueba de 5 mL de capacidad (tres para cada tratamiento).

Parafilm

Ramas jvenes de Populus sp. (lamo)

Hoja de afeitar

1 gradilla para colocar los 9 tubos de 5 mL

Procedimiento
1. Se prepar las soluciones de KIN y ABA en la concentracin que se indic
anteriormente
ABA y KIN (mL)

Molaridad
[M]

0,5

0.001

50

0.00001

Mtodo utilizado: Dilucin de concentraciones (ni = nf)

Solucin
madre
ABA y KIN

0,5 ml

Agua
Molaridad
destilada [M]
49,5 ml

10-3

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2. Se coloc en cada tubo de 5 mL cada concentracin de hormona y agua destilada, segn

corresponda y se tap cada tubo con parafilm.

2. Se eligi 9 hojas saludables las cortamos bajo el agua a la altura de la yema, y la

mantenimos en una placa petri con agua.

3. Perforamos con el estilete el parafilm a fin de introducir el peciolo de la hoja de

lamo. Insertamos la hoja a travs de la perforacin en el tubo, sumergiendo el
extremo cortado ms de 1cm en la solucin. Es importante asegurarse de que el
parafilm cubra bien los tubos de modo que se anule toda prdida por evaporacin.

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4. Pesamos inmediatamente cada tubo con la hoja, esto corresponde a su peso al inicio del
experimento (p0). Asimismo registramos la hora de inicio del experimento (t o). Luego
colocamos los tubos sobre el soporte y en el rea designada. Repita el pesado de sus tubos
luego de 3 horas aproximadamente (pf). Registrndose en la tabla la hora, a fin de realizar
los clculos de transpiracin en funcin al tiempo en horas.

El mtodo para medir la Transpiracin en esta prctica fue el Mtodo de pesada de partes
separadas de la planta (Cambio de volumen de una solucin o de agua)

Se corta la parte de la planta a la cual se le quiere medir la transpiracin, por lo general las hojas, y
se introduce en un tapn perforado de goma o silicona, en un cilindro graduado transparente bien
hermtico, con un volumen de agua conocido. Despus de cierto tiempo bajo condiciones de campo
o de invernadero, se mide de nuevo el volumen y ese ser el volumen de agua transpirado. Se
determina el rea foliar y se expresan los resultados en cm3 de H2O x cm2 de superficie foliar por
hora. (1)

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Resultados
Tabla 1. Ficha de Registro: Transpiracin de la Hoja de lamo
Fecha 14/04/2016
Tratamiento

Hora

Tiempo
(h)

Peso (g)

Peso (g)

rea Foliar*
(cm2)

Transpiracin
(g/cm2/h)

Transpiracin
Respecto
Control** (%)

Repeticin Inicial Final

P0
Pf
1
2
12.35 12.14
0.21
58
0.0018
09:45 11:45
KIN 10-5 M
2
2
12.44 12.19
0.25
58
0.0022
09:45 11:45
8%
3
2
12.88 12.69
0.19
58
0.0016
09:46 11:46
Promedio
12.56 12.34
0.22
58
0.0019
1
2
13.01 12.75
0.26
58
0.0022
09:44 11:44
-5
ABA 10 M
2
2
14.26 14.12
0.14
58
0.0012
09:44 11:44
-20%
3
2
12.05 11.97
0.08
58
0.0007
09:45 11:45
Promedio
13.11 12.95
0.16
58
0.0014
1
2
15.72 15.6
0.12
50
0.0012
09:47 11:47
Control (Agua
2
2
15.52 15.33
0.19
50
0.0019
09:47 11:47
Destilada)
3
2
14.96 14.75
0.21
50
0.0021
09:47 11:47
Promedio
15.40 15.23
0.17
50
0.0017
Control
*Las hojas se marchitaron en la espera para evaluar la transpiracin (30 horas aproximadamente), as que se estim el rea Foliar en general
(58 cm2).
**Considere la tasa de transpiracin.

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Discusin
Los ciclos de apertura-cierre de estomas estn sujetos a diversos mecanismos fisiolgicos, por
ejemplo la regulacin mediante fitohormonas (1), como ABA y KIN, utilizados en esta prctica como
inductores del cierre y apertura de estomas, respectivamente, en base a estas propiedades se evala la
cantidad de agua perdida en esta prctica. Las hojas sumergidas en agua son los sistemas controles,
es decir, reflejan la relacin entre cantidad de estomas abiertos y cerrados en una hoja con un estado
fisiolgico normal (control). El peso de las hojas tratadas tanto con ABA como KIN sufrieron
variaciones, lo que confirma lo sealado en la bibliografa cientfica. Adems la tabla 1 confirma la
funciones particulares ABA y KIN, se verifica esto al observar que la tasa de transpiracin de las
hojas tratadas con ABA disminuyen 20% respecto del control, ya que esta fitohormana causa el cierre
estomtico era lgico que se reduzcan las cantidad de agua transpiradas. En sentido contrario, con el
tratamiento con KIN la tasa de transpiracin aumento en 8% respecto del control, ya que el KIN
estimulo la apertura estomtica causando la prdida mayor de agua que las de control.
Algunos datos de la ficha no se aproximan entre s, esto puede haber sido causado por diversos
factores que dependen tanto del operador como de la condiciones de laboratorio: volmenes de agua
evaporados a travs del parafilm, lo que genera una prdida de agua ms rpida; la longitud sumergida
del peciolo, que pudo recaer en un lento ingreso de las fitohormonas en los haces vasculares; hojas
humedecidas en una o ambas superficies, que provocan una variacin considerable del balance hdrio
respecto de las hojas del mismo tratamiento, etc.
El sistema utilizado (hoja extrada-solucin correspondiente) es un mtodo eficaz para generar un
flujo hdrico favorable obligado, ya que hay suficiente cantidad de agua en contacto con el peciolo y
el ambiente seco al que estaba expuesto la hoja, esto genera una diferencia de potencial hdrico
constante que permitir la evaluacin garantizada del movimiento del agua desde la base del peciolo
hasta la superficie foliar.

Argumentos bibliogrficos:
- Se ha ensayado la kinetina en plantas regadas con agua salada, en el modelo de Triticum aestivum.
Una planta de agua salada debe entenderse como una planta en un medio hipertnico, por lo que el
ingreso del agua tiende a ser incluso mayor al que precisa la planta. Por diferentes motivos, la planta
reduce su transpiracin y a su vez su actividad fotosinttica en estos medios; sin embargo, el
tratamiento con kinetina (as como con otros qumicos como la spermina independientemente como
en conjunto) aumenta la transpiracin significativamente asemejndola a las plantas regadas con agua
dulce (2). Como sabemos la kinetina cumple un rol en el cual mantiene a los estomas abiertos, esto

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precisamente ayudara a eliminar en parte la absorcin extra del agua as como favorecera a la
fijacin del carbono mejorando la produccin del trigo, lo cual se evidenci tambin en la
investigacin por un aumento del peso seco de la planta.
- Son los estomas los responsables de la mayor proporcin de prdida de agua en las plantas. El ABA
juega un papel importante ante la disminucin en el contenido de agua de la hoja, pues regula el
proceso de cierre de los estomas cuando el mesfilo comienza a sufrir deshidratacin provocando que
la transpiracin disminuya (3). Esta fitohormona produce una prdida de iones K+ y de aniones Clo malato2- en las clulas guardia, que provoca una salida de agua del citoplasma, dando lugar al cierre
del estoma (4). Al comparar el porcentaje de transpiracin, luego de dos horas, entre grupo control y
el grupo tratado con ABA vemos que hay una disminucin del 20% en la transpiracin lo que
concuerda con la funcin ya estudiada del cido abscsico.
Observacin
No se adjunt lo datos obtenidos por los otros grupos debido a que no se dio su publicacin.

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Bibliografia
1. Daszkowska-Golec A, Szarejko I. Open or Close the Gate Stomata Action Under the Control of
Phytohormones in Drought Stress Conditions. Frontiers in Plant Science. 2013;4:138.
doi:10.3389/fpls.2013.00138.
2 Aldesuquy HS, Baka ZA, Mickky BM. Role of kinetin and spermine in the reversal of seawater
stress-induced alteration in growth vigor, water relations and nucleic acids of wheat plants. Phyt Ann Rei Bot. 2014;54(2):25174.
3. Taiz, L. and Zeiger E. Plant Physiology. 4th ed. Sinauer Associates; 2006.
4. Roelfsema MRG, Hedrich R. Studying guard cells in the intact plant: modulation of stomatal
movement by apoplastic factors. New Phytol [Internet]. Blackwell Science Ltd; 2002
Mar;153(3):42531.

Available

from:

http://doi.wiley.com/10.1046/j.0028-

646X.2001.Documedoc.doc.x.

5. Miliarium Aureum. [Online].; 2004 [cited 2016 Abril 17. Available from:
http://www.miliarium.com/Proyectos/EstudiosHidrogeologicos/Anejos/Medida_Tranpiraci
on/Medida_Transpiracion.asp.