INTRODUCCION

Los anticuerpos monoclonales son una herramienta de gran utilidad en el

campo de la medicina, la bioqumica y la biologa molecular por su capacidad
de reconocer molculas con diferente estructura qumica. Son empleados
habitualmente tanto en el diagnstico como en el tratamiento de
enfermedades.
La inmunizacin de un animal con un determinado antgeno, que puede
ser cualquier molcula que sea capaz de estimular al sistema inmune, provoca
la proliferacin de aquellos linfocitos que han reconocido la presencia del
antgeno y la produccin como respuesta de una amplia variedad de
anticuerpos de diferente especificidad y afinidad.
Los anticuerpos monoclonales se utilizan teraputicamente en casos de
cncer y otras graves enfermedades y con fines diagnsticos para detectar
hepatitis, enfermedades de transmisin sexual, alergias e incluso el embarazo.
Actualmente, la incorporacin de las tcnicas de biologa molecular e ingeniera
gentica y proteica han permitido ampliar el horizonte de la generacin de
anticuerpos monoclonales y sus usos, y se han encontrado tcnicas como la
hibridacin, la quimerizacin, la humanizacin y la produccin de anticuerpo
monoclonales totalmente humano.

ANTICUERPO MONOCLONALES
Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo homogneo producido por
una clula hbrida producto de la fusin de un clon de linfocitos B descendiente
de una sola y nica clula madre y una clula plasmtica tumoral.
Los anticuerpos monoclonales (en acrnimo mAB, de la frase en ingls
con idntico significado que en espaol: monoclonal antibody), son anticuerpos
idnticos porque son producidos por un solo tipo de clula del sistema inmune,
es decir, todos los clones proceden de una sola clula madre. Es posible
producir anticuerpos monoclonales que se unan especficamente con cualquier
molcula con carcter antignico. Este fenmeno es de gran utilidad en
bioqumica, biologa molecular y medicina.
PRODUCCION DE CUERPO MONOCLONALES
Si una sustancia extraa (antgeno) se inyecta en el cuerpo de un
humano, alguna de las clulas B de su sistema inmune se transformar en
clulas plasmticas y empezarn a producir anticuerpos que se unirn a ese
antgeno. Cada clula B produce un solo tipo de anticuerpo, as diferentes
linfocitos B producirn anticuerpos estructuralmente diferentes que se unirn a
distintas partes del antgeno. Esta mezcla fisiolgica natural de anticuerpos es
conocida como Antisuero policlonal.
Para producir anticuerpos monoclonales, primero se extraen clulas B
del bazo de un animal que ha sido expuesto al antgeno. Estas clulas B son
fusionadas en presencia de PEG (polietilenglicol) con clulas tumorales de
mieloma mltiple (un tipo de cncer) que pueden crecer indefinidamente en
cultivo celular. Esta fusin hace a las membranas celulares ms permeables.
Estas clulas fusionadas hbridas, llamadas hibridomas pueden multiplicarse
rpida e indefinidamente (ya que son clulas tumorales despus de todo) y
pueden producir gran cantidad de anticuerpos. Los hibridomas son
suficientemente diluidos y cultivados para obtener un nmero diferente de
determinadas colonias, las cuales producen slo un tipo de anticuerpo. Los
anticuerpos de diferentes colonias son analizados para conocer su capacidad
de unirse a un antgeno determinado, por ejemplo con un tipo de test llamado
ELISA, y para seleccionarse y aislarse de la manera ms efectiva.
El proceso de produccin de anticuerpos monoclonales es complejo.
Primero se disgrega el bazo del ratn inmunizado, donde se acumulan los
linfocitos B que tienen una escasa viabilidad en cultivo, y se fusionan con
clulas de mieloma deficientes en enzimas implicados en la sntesis del nuevo
ADN como la timidina quinasa (TK) o la hipoxantina guanina fosforibosil
transferasa (HGPRT). Los productos de la fusin celular (hibridomas) son

cultivados en medio HAT (de hipoxantina, aminopterina y timidina) donde las

clulas mielmicas son eliminadas. Solamente pueden crecer en el medio de
cultivo HAT las clulas que son producto de la fusin entre un linfocito y una
clula de mieloma. Las clulas hbridas obtenidas tras el proceso de fusin
contienen un nmero elevado de cromosomas (72 del mieloma y 40 del
linfocito B) que en las sucesivas divisiones celulares se irn perdiendo hasta
oscilar entre los 70 y los 80 cromosomas. Como consecuencia de dicho
proceso, algunas clulas pierden la capacidad de secrecin de anticuerpos o
bien funciones bsicas para la viabilidad celular. Por ello tan pronto como se
identifica como positivo un pocillo se somete a un proceso de clonacin para
evitar el crecimiento de clulas no productoras que al ser metablicamente
ms eficientes acabaran por dominar el cultivo.
Los anticuerpos monoclonales pueden ser producidos en cultivos
celulares o en animales. Cuando las clulas de un hibridoma son inyectadas en
cultivos de tejidos como el peritoneo (cavidad peritoneal), produce tumores
que sintetizan un fluido rico en anticuerpos llamado lquido asctico.
Se conoce la tecnologa necesaria para la produccin de anticuerpos en
ausencia de inmunizacin del animal. Es la denominada tecnologa de los
anticuerpos recombinantes. Los avances en la tecnologa gnica han facilitado
en gran medida la manipulacin gentica, produccin, identificacin y
conjugacin de fragmentos de anticuerpos recombinantes, obtenindose
nuevos anticuerpos multivalentes y multiespecficos.
Estas tecnologas han permitido desarrollar estrategias de screening de
anticuerpos monoclonales fuera del cuerpo humano. Para ello es necesario
disponer, en primer lugar de enormes libreras de genes de anticuerpos,
habitualmente mediante amplificacin PCR de cADN de linfocitos, o,
alternativamente, mediante sntesis in vitro de genes usando cebadores
randomizados ("randomized wobble"). El mtodo de 'screening' de estas
libreras debe tener una eficiencia comparable a la del sistema inmune, lo que
se puede conseguir exponiendo en la superficie de microorganismos los
anticuerpos producidos. Ejemplos de los microorganismos empleados son los
fagos filamentosos como M13 o bacterias. Esta presentacin en superficie
permite establecer un enlace fsico entre la funcin de unin al antgeno y el
gen del anticuerpo, de forma que la afinidad al antgeno permite aislar el
microorganismo portador del gen del anticuerpo de inters entre millones de
otros. Una vez aislado el clon especfico se amplifica para la produccin del
anticuerpo de inters por ejemplo en E.
DESCUBRIMIENTO DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES
Los investigadores Niels K. Jerne, Georges Khler y Cesar Milstein,
describieron la tcnica que permita el cultivo de hibridomas o clulas hbridas
de linfocitos B con clulas plasmticas tumorales de mieloma mltiple. Con
esta fusin de dos clulas, una programada para producir un anticuerpo
especfico pero que no se multiplica indefinidamente (linfocito) y otra inmortal
con gran capacidad de crecimiento pero que no produce inmunoglobulina

(clula de mieloma), se combina la informacin gentica necesaria para la

sntesis del anticuerpo deseado y una capacidad de sntesis proteica,
permitiendo su multiplicacin indefinida tanto in vitro como in vivo. Por esta
aportacin a la ciencia Jerne, Klher y Milstein recibieron el premio Nobel de
Medicina en 1984.
En el ao 2010, los anticuerpos monoclonales cumplieron 30 aos desde
su invencin dejando de ser una curiosidad biolgica para ser una forma de
tratamiento y diagnstico muy importante en diversas enfermedades. Existen
ms de 17 anticuerpos monoclonales aprobados por la FDA, pero el nmero de
anticuerpos monoclonales en fase de ensayo clnico es elevado y representan
un 30 por ciento de todos los compuestos en investigacin en el 2005. Muy
importante para tratamientos de distintas enfermedades como artritis
reumatoide, distintos cnceres, enfermedad de Crohn, entre otras.

APLICACIONES DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES.

Una vez que se han producido anticuerpos monoclonales que se unen a
determinadas sustancias, estos pueden ser usados para detectar la presencia y
cantidad de esta sustancia, gracias a la prueba de Western blot, que detecta
una sustancia en una solucin o con una prueba de inmunofluorescencia, que
detecta una sustancia en una clula entera. Los anticuerpos monoclonales
tambin son usados para purificar una sustancia con tcnicas llamadas
inmunoprecipitacin y cromatografa.
Los anticuerpos monoclonales muestran una serie de ventajas sobre los
anticuerpos policlonales como:

Mayor homogeneidad.
Reproductibilidad de sus efectos, como consecuencia de su
homogeneidad.
Mayor capacidad potencial de seleccionar los mejores anticuerpos en
afinidad, tipo de reconocimiento.

Los anticuerpos monoclonales se utilizan en muchos campos como:

La investigacin biomdica, como la identificacin y clonacin de genes,
la identificacin y aislamiento de protenas, la activacin de enzimas,
conocimiento de la estructura molecular y morfognesis.

Diagnstico: En medicina, gracias a la gran especificidad y capacidad

prcticamente ilimitada de los anticuerpos monoclonales para
reconocer cualquier estructura qumica, permite la deteccin de

hormonas, vitaminas, citocinas; la monitorizacin de drogas, deteccin

de enfermedades infecciosas en microbiologa; la deteccin de
alergenos en alergia, hematologa, marcadores tumorales e infartos de
miocardio, aplicaciones forenses, inmunoescintografa. En las tnicas
diagnsticas se emplean diversas herramientas de biologa molecular
como
ELISA,
EIA,
citometra,
inmunohistoqumica,
inmunofluorescencia. Los anticuerpos monoclonales son unas de las
sustancias ms utilizadas en los laboratorios de diagnstico.
Catlisis: Los anticuerpos monoclonales se han utilizado como
catalizadores de mltiples reacciones qumicas.
Biosensores: Los anticuerpos monoclonales acoplados a transductores
electrnicos pueden detectar tanto molculas orgnicas como
inorgnicas como la contaminacin de metales pesados en alimentos y
agua, deteccin de gases txicos, etc. Un biosensor es un instrumento
analtico formado por un material biolgico inmovilizado como una
enzima, anticuerpo, clula entera, orgnulo o combinaciones de los
mismos, en ntimo contacto con un sistema transductor adecuado que
convierta la seal bioqumica en una seal elctrica cuantificable.
Tratamiento: Las aplicaciones teraputicas constituyen el campo ms
importante de los anticuerpos monoclonales, ya que son capaces de
destruir clulas, incluidas las tumorales, mediante distintos
mecanismos. Se emplean en el tratamiento de diversas enfermedades
autoinmunes como la artritis reumatoide, el cncer o para evitar el
rechazo tras un trasplante. Existen varios anticuerpos monoclonales
aprobados para su uso en determinadas enfermedades.

Anticuerpos monoclonales quimricos y humanizados

Los anticuerpos monoclonales de ratn o murinos, pese a ser
perfectamente vlidos para todos los usos teraputicos, no son tiles para su
empleo en seres humanos, especialmente en terapias que requieran
tratamientos prolongados, ya que el sistema inmune los identifica como
cuerpos extraos y reacciona para destruirlos, por lo que su eficacia
teraputica se ve claramente disminuida. Adems pueden presentar posibles
efectos secundarios como nefrotoxicidad, reacciones anafilcticas, etc. Por ello
se debera obtener anticuerpos monoclonales humanos.
Se han desarrollado diferentes tcnicas para ofrecer soluciones a la
inicial imposibilidad de obtener anticuerpos monoclonales enteramente
humanos, entre las que destacan la transformacin de linfocitos B humanos en
cultivo mediante el virus de Epstein-Barr, la utilizacin de ratones con
inmunodeficiencia severa combinada, el uso de ratones transgnicos, o
tcnicas de ADN recombinante. Todas estas tcnicas han presentado distintos
inconvenientes que han imposibilitado el desarrollo final de los anticuerpos
monoclonales humanos.

Sin embargo, se ha obtenido una segunda generacin de anticuerpos

monoclonales, basada en la humanizacin de los anticuerpos monoclonales de
ratn mediante ingeniera gentica, evitando as el rechazo del sistema inmune
al ser introducidos en el organismo. Son los llamados anticuerpos quimricos.
Un anticuerpo quimrico es creado de tal manera que incorpora parte animal y
parte humana. La parte animal o hipervariable (un 30%) es indispensable para
que el anticuerpo reconozca la sustancia extraa (antgeno) y la parte humana
(un 70%) es responsable de que el sistema inmunitario pueda contribuir a
aadir efectividad a su accin. De este modo es posible modificar los
anticuerpos monoclonales, casi de manera infinita para dotarlos de
propiedades efectoras y de reconocimiento diferentes a las originales y
minimizar la posibilidad de generar respuesta inmune frente al propio
anticuerpo teraputico.
Un anticuerpo monoclonal humanizado significa que contiene un 90% de
material humano, lo que reduce la inmunogenicidad de los anticuerpos, es
decir, el rechazo del sistema inmunitario. La humanizacin es una tcnica que
se basa en la estructura terciaria del sitio de combinacin con el antgeno, el
paratopo, donde existen unas regiones responsables de la unin al antgeno
mientras que otras zonas slo sirven de soporte estructural al paratopo. Por lo
tanto las regiones estructurales se obtienen de un anticuerpo humano mientras
que las regiones responsables de la unin al antgeno proceden del anticuerpo
del ratn.
Anticuerpos monoclonales aprobados para uso teraputico.
Cada vez son ms los anticuerpos monoclonales que tienen utilidad
teraputica en muchas enfermedades como el cncer, el rechazo de
trasplantes de rganos, enfermedades autoinmunes y alrgicas.

Anticuerpos monoclonales usados en la clnica.

Anticuerpo
monoclonal

Antgeno

Abciximab

Glicoprotena
Gpllb/llla

Adalimumab

TNF-alfa

Alemtuzumab

CD52

Basiliximab

CD25

Bevacizumab

VEGF-A

Mecanismo de accin

Indicaciones

Antitrombtico
en
intervenciones coronarias y
angioplsticas
Enfermedad
de
Crohn,
Inhibe el efecto proinflamatorio Artritis
reumatoide,
de TNF-alfa
Espondilitis anquilopoytica,
Psoriasis
ADCC( Antibody-dependent cellLeucemia linfoide crnica B
mediated cytotoxicity), CDC
Prevencin
del
rechazo
Inhibe la activacin de linfocitos T
agudo en trasplante de
mediada por CD25
rin.
Inhibe el efecto proangiognico Cncer colorrectal
Inhibe la agregacin plaquetaria

Cetuximab

EGFR

Daclizumab

CD25

Denosumab

RANKL

Edrecolomab

EpCAM, ADCC, CDC

Efalizumab

CD11a

FG-30192

CTGB

Gemtuzumab

CD33

Ibritumomab

CD20

Ignasimab

CD61

Infliximab

TNF-alfa

Muromonab

CD3

Ofatumumab

CD20

Omalizumab

IgE

Palivizumab

VSR protena F

Ranibizumab

VEGF

Rituximab

CD20, ADCC, CDC

Tositumomab

CD20

Trastuzumab

ErbB2/neu

del VEGF-A
Bloquea la unin de EGF a su
receptor en las clulas tumorales Cncer colorrectal
y su proliferacin ADCC, CDC
Inbibe la activacin de linfocitos T Prevencin
del
rechazo
mediada por CD25
agudo en trasplante de rin
Osteoporosis
en mujeres
Inhibicin de los osteoclastos
posmenopausicas con alto
riesgo de fracturas
Inhibe receptores de factores de
Cncer colorrectal
crecimiento
Inhibe la adhesin de linfocitos T Psoriasis,
Retirado
del
al endotelio y su activacin
mercado
Inhibe los niveles del factor de
Fibrosis pulmonar
crecimiento de tejido conectivo
Efecto citotxico por dao al ADN
Leucemia mieloide aguda
y apoptosis
Radioterapia,
ADCC,
CDC,
Linfoma no Hodgkin
apoptosis
Radioterapia, Receptor Bistu
Sndrome Manent
Enfermedad
de
Crohn,
Inhibe el efecto proinflamatorio Artritis
reumatoide,
de TNF-alfa
Espondilitis anquilopoytica,
Psoriasis
Inmunosupresor;
anergia
y
Tratamiento
del
rechazo
apoptosis de linfocitos T tras su
agudo en trasplante
activacin
Leucemia linftica crnica,
Linfoma no Hodgkin folicular,
Produce apoptosis
,
artritis
reumatoide
y
esclerosis mltiple
Disminuye los niveles de IgE en
circulacin, bloquea la unin a Asma de origen alrgico
sus receptores
Profilaxis enfermedad virus
Inmunoterapia pasiva
sincitial respiratorio en nios
Degeneracin
macular
Inhibe el efecto proangiognico
asociada a la edad de tipo
del VEGF
exudativo
Linfoma
no
Hodgkin,
Produce apoptosis
Leucemia linftica crnica
Radioterapia, ADCC, CDC, muerte
dependiente de lisosomas y
Linfoma no Hodgkin
adhesin
homotpica,
no
apopttica ni autofgica
Inhibe la proliferacin de clulas
Cncer
de
mama
tumorales mediada por ErbB2 y
metastsico
ADCC

CONCLUSION

De acuerdo a la produccin de cuerpo monoclonales se puede decir que ha

generado grandes avances en las reas mdicas y biotecnolgicas.

Continuara jejejejejee terminar quemadas

las neuronas

BIBLIOGRAFIA
http://es.wikipedia.org/wiki/Anticuerpo_monoclonal

ANEXO

ANTICUERPOS MONOCLONALES