Espectrofotometría Del Visible - Informe

Laboratorio de Anlisis Qumico II
INGENIERA BIOTECNOLGICA
ESPECTROFOTOMETRA DEL VISIBLE

SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA
ANALTICA
I OBJETIVOS
Operar adecuadamente el espectrofotmetro computarizado Shimadzu 160 - A .
Obtener espectros o Curva de absorcin
Seleccionar la longitud de onda de trabajo, mxima o analtica
II GENERALIDADES
En cada tipo de sustancias los tomos, iones o molculas absorben con cierta
preferencia longitudes de onda de una determinada gama de frecuencias; esto hace
que los tomos, iones o molculas puedan identificarse mediante la longitud de onda
a que se da lugar la absorcin. En el anlisis espectrofotomtrico, las mediciones de
absorbancia se realizan ordinariamente a una longitud de onda que corresponda a un
mximo del espectro de absorcin.
Para ello en una determinacin deber obtenerse siempre una curva de absorcin o
espectro de absorcin para ubicar en ella el pico ms alto y seleccionar la longitud de
onda a la cual se produce ese mximo de absorcin. A esta longitud de onda se
denomina longitud de onda analtica, de trabajo o mxima y es la longitud de onda a
la cual se realiza la medicin cuantitativa. A esta longitud de onda la variacin de
absorbancia por unidad de concentracin es mxima, con lo cual se obtiene la
sensibilidad mxima.
III FUNDAMENTO
Para encontrar la curva de absorcin se irradia a la solucin coloreada con energa
radiante de una gama de longitudes de onda de tal manera que a cada longitud de
onda se mide su valor de absorbancia o de % de transmitancia; esta energa
absorbida se traduce en un espectro de absorcin que es obtenido en funcin de los
valores de absorbancia o de % de transmitancia frente a las longitudes de onda. En
la curva se hace un barrido espectral y se ubica el mximo pico o valle ms profundo
que corresponde a un mximo de absorbancia a una determinada longitud de onda; a
esta longitud se denomina longitud de onda analtica, ptima o de trabajo.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
V APARATOS
Espectrofotmetro Shimadzu 160 - A.

Cubeta: 1cm de trayecto ptico.
Regin de trabajo: espectro visible (450 - 600 NM).
Blanco: agua destilada.
VI MATERIALES
Fiolas de 100 y 250 ml.
Buretas de 25ml.
Vasos de precipitacin de 250ml.
VII REACTIVOS
Solucin Stock de permanganato de potasio 0,1000 N.
Solucin de permanganato de potasio con concentracin de 100 mg/L
(ppm) de manganeso
Soluciones estandares o patrones.
VII TCNICA
1.- PREPARACIN
DE SOLUCIONES
A) Preparacin de una solucin dluida de 100 ppm en

manganeso
Disponer de una solucin stock de KMnO4 0.1000 N, previamente
valorada. Calcular su concentracin en partes por milln referida a
manganeso. Preparar a partir de la solucin stock de 250 ml de una
solucin de 100 p.p.m. de manganeso
B) Preparacin de soluciones patrones o estndares

Preparar por dilucin 100 mililitros de los siguientes patrones: 2, 4, 6,
8,10, 12, y 16 ppm.
2.- SELECCIN DE MODO BSICO DE TRABAJO

Cuando el interruptor de potencia es llevado a on , el instrumento es
inicializado en 3 minutos, y entonces indica en pantalla el men de modo
bsico,
MENU DE MODO BASICO

Modo No
1.- Fotmetro
2.- Espectro
3.- Barrido de tiempo
4.- Cintica
5.- Cuantitativo
6.- Multicomponente
7.- Memoria
8.- Sealamiento de condicin
9.- Enlace
Presione el Nro 2 y luego la tecla ENTER para seleccionar el modo espectro . El
blanco a emplear es agua destilada.
3.- AJUSTE DE PARMETROS ANALTICOS
Luego que el modo bsico es seleccionado, es necesario primero establecer los
parmetros analticos de medicin siguientes:
MOSTRARIO DE CAMBIO DE PARAMETRO

Espectro
Cambio de parmetros s/n
1.- s = 600,0 nm
E = 450,0
2.- Medicin (ABS / T %) = ABS.
3.- Superior = + 1,00 A
Inferior = + 0,00 A
4.- Velocidad de barrido = rpida
5.- Ciclo T = 60 seg.
N =1
6.- Cubrir
Si
7.- Copiar
No
8.- Barrido OBS
No
9.- Fila
Si desea cambiar un parmetro presione la tecla Yes e ingrese el nmero del
parmetro correspondiente, y luego ingrese el nuevo valor para el parmetro indicado
por el cursor. Ahora si el ingreso es errneo presione la tecla CE y reingrese el
nuevo valor. Cuando el parmetro indicado por el cursor no ser cambiado, presione
directamente la tecla ENTER .
Cuando el proceso de cambio de parmetro est completo, presione la tecla NO
para terminar el procedimiento.
4.- MEDICIN DE STNDARES
Una vez ajustados los parmetros de medicin y al presionar la tecla No para el
cambio de parmetro aparece el mensaje de insertar una muestra y presionar la tecla
Star / Stop .El espectro medido es indicado en la pantalla.
5.- PROCESAMIENTO DE DATOS

Cuando la medicin termina, se indica el mensaje PROCESAMIENTO DE DATOS
S/N.
a) Si no es necesario el procedimiento de datos, presionar NO y es posible indicar
la longitud de onda y valor medido a cualquier posicin deseada en el espectro
medido, la cual es recogida por el cursor usando la techa ----- o ------ .Al
espectro medido puede ser grabado en copia con la techa COPY .
b) Si es necesario un procesamiento de datos, presionar SI y es posible hacer los
siguientes procesamientos de datos:
1* Para almacenar el espectro medido en la memoria... presionar 1 ENTER (nmero
de canal) ENTER.
2* Para expandir o comprimir el espectro...presionar 2 ENTER, y entonces ajustar los
parmetros de escala en la abcisa y ordenada de acuerdo con la indicacin del
cursor presionando (valores) ENTER, sino hay cambio necesario, slo presionar
ENTER.
Despus de que el espectro es indicado con nuevos parmetros de escala, el

sistema pregunta VOLVER A LA CURVA ORIGINAL S/ N .Si presiona SI se obtiene
de nuevo el espectro original; si presiona la tecla NO el espectro expandido es
almacenado en la memoria.
Para hacer una deteccin de pico...presionar 3 ENTER, y entonces cada pico
y valle son marcados y tambin sus longitudes de onda y valores son
impresos.
Para obtener un espectro derivado o espectro suavizado... presionar 4
ENTER y luego ingresar la orden derivada presionando (N) ENTER de
acuerdo con la indicacin de la pantalla. Cuando el procedimiento es
terminado, con la escala automticamente ajustada al valor derivado. El
suavizado corresponde a la orden derivada.
Para imprimir datos a intervalos de longitud de onda regulares... Presionar 5
ENTER (intervalo de longitud de onda) y presionar ENTER
Para plotear los datos en el ploteador X-Y,... presionar 6 ENTER.
Cuando termine sus procedimientos de datos aparece en pantalla la curva debidamente
suavizada con los parmetros de absorbancia frente a las longitudes de onda en NM. Con
el cursor ubicar el pico ms alto de la curva, apareciendo en pantalla los valores de
absorbancia y longitudes de onda que corresponde a ese pico.
VIII INTERPRETACION DE DATOS

El espectro medido puede ser grabado en copia con la tecla de COPY . Imprimir las
curvas espectrales en un sistema de coordenadas teniendo en cuenta los siguientes
parmetros:
Absorbancia frente a longitudes de onda
Porcentaje de transmitancia frente a longitudes de onda.
IX DISCUSION DE DATOS
Sealar las conclusiones que se desprenden de los grficos obtenidos.
X CUESTIONARIO
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica y policromatica
b) Espectro de absorcin
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica
2.- describir la diferencia entre un espectrofotmetro y un fotmetro
3.- En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525 nm calcular la
cantidad de energa que le corresponde a esa radiacin. Compararla con una longitud de
onda de 200 nm que corresponde a la regin UV
4.- Que tipo de informacin proporciona el espectro de absorcin
5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica o de trabajo
6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin
7.- Que es un espectro de absorcin atmica y que es un espectro de absorcin molecular
INFORME DE LABORATORIO # 1
SELECCIN DE LA LONGITUD DE ONDA DE
TRABAJO
FECHA
: 22/03/2016
No GRUPO: 7
ANLISIS: Obtencin del espectro de absorcin y seleccin de la longitud de

onda de trabajo mximo o analtica.
METODO: Espectroscopia del visible
MUESTRA: Solucin stock de KMnO4 0.1000 N
Solventes patrones de KMnO4
CALCULOS:
A)
Clculo de la concentracin de la solucin stock de KMnO 4 0.1000N

expresada en ppm referida en Manganeso.
0.0933
meq 0.031603 g KMnO 4

54.94 g Mn
1000 mg 1000 ml
x
x
x
x
ml
1meq KMnO 4
158.03 KMnO 4
1g
1L
X I =1025.1804 mg
B) Clculo del volumen de la solucin stock requerido para preparar una

solucin de 100 ppm en manganeso para un volumen de 250 ml.
X I x V I =100 ppm x 250 ml

1025.1804 ppm x V I =100 ppm x 250 ml
V I =24.38 ml
C) Clculos para preparar 100 ml de las soluciones patrones o estndares de

2, 4, 6, 8,10, 12 y 16 ppm.
Patrn 1:
100 ppm x V I =2 ppm x 100 ml
V I =2 ml
Patrn 2:

V I =4 ml
Patrn 3:

V I =6 ml
Patrn 4:

V I =8 ml
Patrn 5:

V I =10 ml
Patrn 6:

V I =12 ml
Patrn 7:

V I =16 ml
PATRON
1
2
3
4
5
6
7
VOLUMEN
SOLUCION DILUIDA
2.0 ml
4.0ml
6.0ml
8.0ml
10.0 ml
12.0ml
16.0 ml
VOLUMEN FINAL
100.0 ml
100.0 ml
100.0 ml
100.0 ml
100.0 ml
100.0 ml
100.0 ml
CONCENTRACION
ppm Mn
2.0
4.0
6.0
8.0
10.0
12.0
16.0
TABLA DE RESULTADOS
OBTENER LOS VALORES DE ABSORBANCIA (ABS) DE LA SOLUCIN PROBLEMA EN UN
INTERVALO DE LONGITUDES DE ONDA DE 450 - 600 NM.
(a) Espectro de absorcin en trminos de absorbancia (ABS) frente

a las longitudes de onda (nm )
OBTENER LOS VALORES DE TRANSMITANCIA (% T) DE LA SOLUCIN

PROBLEMA EN UN INTERVALO DE LONGITUDES DE ONDA DE 450 - 600 nm.
(b) ESPECTRO DEL PORCENTAJE DE TRANSMITANCIA (% T) FRENTE A

LONGITUDES DE ONDA (NM)
DISCUSIN DE RESULTADOS
La longitud de onda de trabajo encontrada es de, 525.4 nm ya que ese fue
el pico ms alto en el espectro de absorbancia.
La operacin de espectrmetro el espectrofotmetro computarizado
Shimadzu 160 A es muy delicada, pero se pudo completar la prctica.
CUESTIONARIO
1.- Defnase brevemente:
a) La radiacin monocromtica y policromatica
La luz monocromtica es aquella que est formada por componentes de un
solo color. Es decir, que tiene una sola longitud de onda, correspondiente a
ese color. Esto quiere decir que para producir radiacin monocromtica, se
generan los electrones por medio del calentamiento de un filamento y luego
los aceleramos en un campo electromagntico, los electrones de alta energa
chocan contra un nodo con suficiente velocidad para penetrar las capas
electrnicas externas del material del nodo. Cuando el electrn choca con la
capa de electrones K, el electrn incidente remueve su rbita al electrn de la
capa K. El tomo pierde uno de sus electrones de la capa K y est en
condicin metaestable, en consecuencia el electrn de la capa L entra a llenar
la capa K.
La radiacin que contiene varias longitudes de onda se llama radiacin
policromtica. La agrupacin de todas las longitudes de onda que componen
la radiacin policromtica (y sus intensidades luminosas respectivas) se
denomina espectro.
b) Espectro de absorcin
Es, en cierto sentido, el opuesto de un espectro de emisin. Cada elemento
qumico posee lneas de absorcin en algunas longitudes de onda, hecho que
est asociado a las diferencias de energa de sus distintos orbitales atmicos.
c) Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica
Porque es importante monocromatizar la radiacin policromtica: Porque
cuando hacemos pasar una luz policromtica a travs de un objeto, este
absorbe algunas longitudes de onda y transmite las que no absorbe como
colores.
2.- describir la diferencia entre un espectrofotmetro y un fotmetro
Estos son equipos utilizados en el Laboratorio para el anlisis de muestras
fisiolgicas, basndose en el principio que cada compuesto qumico absorbe o
emite energa lumnica de diferente longitud de onda. Esta longitud puede
estar en el espectro de luz visible, o en otra parte del espectro
electromagntico. La diferencia fundamental entre un espectrofotmetro y un
fotmetro o fotocolormetro, consiste en que el fotocolormetro trabaja
nicamente en el espectro de luz visible y selecciona una longitud de onda
determinada mediante filtros fijos.En cambio, un Espectrofotmetro es capaz
de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras regiones del espectro
electromagntico (ultravioleta e infrarroja). Adems posee un monocromador
para seleccionar la longitud de onda deseada
3.- En la longitud de onda de trabajo obtenida en la parte experimental a 525

nm calcular la cantidad de energa que le corresponde a esa radiacin.
Compararla con una longitud de onda de 200 nm que corresponde a la regin
UV
4.- Que tipo de informacin proporciona el espectro de absorcin
Un espectro de absorcin nos proporciona una representacin grfica de la

absorbancia de un analito o (o de otra magnitud equivalente) en funcin de la
longitud de onda de la radiacin, l, (o de otro parmetro relacionado con la energa
de la radiacin utilizada). El mximo de absorbancia obtenido en el espectro de
absorcin de un analito, nos dar la longitud de onda que proporciona la mayor
sensibilidad posible, y por tanto ser la que se utilizar en el anlisis
espectrofotomtrico de dicho analito.
5.- Seale algunas razones el porque determina la longitud de onda analtica
o de trabajo
Se escoge para el registro y/o la observacin de la curva espectral o espectro de la

sustancia que indicar si es adecuado tomar la longitud de onda de mxima
absorcin u otra banda caracterstica de la sustancia como longitud de onda para
realizar las medidas, la longitud de onda escogida se conoce como longitud de onda
analtica.
6.- Indicar que formas conoce para representar una curva de absorcin
7.- Que es un espectro de absorcin atmica y que es un espectro de
absorcin molecular
La espectroscopia de absorcin atmica usa la adsorcin de la

luz para medir la concentracin de la fase gaseosa de tomos. Ya
que la mayora de las muestras son slidas o lquidas, los tomos o
iones de los analitos deben ser vaporizados a la flama o en un
horno de grafito. Los tomos adsorben luz visible o ultravioleta y
hacen transiciones a niveles de energa ms altos. La
concentracin del analito es determinada por la cantidad de
absorcin.
Las tcnicas espectroscpicas de anlisis se basan en la
observacin de las interacciones entre la materia y la radiacin
electromagnetica. La especificidad de la deteccin del analito se
basara en la seleccin de longitud de onda de la radiacin
absorbida en la regin visible(VIS) y ultravioleta(UV) del espectro
electromagntico.
ESPECTROFOTOMETRIA DEL VISIBLE

DEMOSTRACION DE LAS LEYES
FOTOMETRICAS Y ERROR RELATIVO DE LA
CONCENTRACION
I OBJETIVOS
Construir curvas de calibracin
Verificar la conformidad de la ley Beer
Determinar las concentraciones lmites de los patrones
II GENERALIDADES
Despus de determinar la longitud de onda a la cul deben de realizarse las medidas, se calibra el
mtodo midiendo una serie de patrones del constituyente en estudio. Generalmente se prepara una
solucin diluida de la sustancia que se desea determinar, se pipetean cuidadosamente porciones de
esta solucin, de distinto volumen, se aade el reactivo que forma color, y se ajustan las condiciones
para que se desarrolle el color en forma ptima, se diluye cada solucin a un volumen predeterminado
en una fiola, y luego se mide la absorbancia de cada solucin a la longitud de onda analtica o de
trabajo.
Las medidas de la absorbancia se realizan comnmente utilizando un blanco, que debe ser idntico a
la muestra en todo, excepto en que no debe contener el constituyente que se ha de determinar. El
blanco deber contener los reactivos, aditivos, disolvente, etc., en la misma naturaleza y concentracin
que las utilizadas en cada muestra desconocida en la que se desarrolle color. De esta manera, las
lecturas de las muestras estn corregidas automticamente para cualquier absorcin pequea por
accin de los reactivos y del disolvente. Con los datos absorbancia para las diferentes concentraciones
de las series patrn se construye una curva de calibrado. La cantidad de luz absorbida por cada patrn
se encuentra bien definida y se debe ajustar a ciertas leyes fsicas denominadas leyes fotomtricas:
a) Ley Lambert - Bouguer

Presenta dos partes:
1.- La relacin entre la energa radiante transmitida, P, y la incidente, Po, es una constante expresada
como T, y se denomina TRANSMITANCIA.
T = P / Po
2.- La energa de radiacin transmitida decrece en progresin geomtrica cuando la longitud del
camino ptico aumenta en progresin aritmtica. Se expresa matemticamente de la siguiente
manera:
log T = ab = A = - log T = - ( P/ Po ) = log ( Po/ P )
b)
Ley Beer
Expresa la relacin entre transmitancia y concentracin de material absorbente, es decir, que la

transmitancia disminuye en progresin geomtrica cuando la concentracin aumenta en progresin
aritmtica. Por tanto:
-log T = ac = A = - log (P / Po) = lo (1/ T)

c) Ley Combinada Lambert - Beer
Resulta de la combinacin de la ley de Lambert con la de Beer y suele llamarse simplemente ley de
Beer. Esta ley establece que: la cantidad de luz o energa ultravioleta o infrarroja absorbida o
transmitida por una solucin es una funcin exponencial de la concentracin de sustancia absorbente
presente y de la longitud de la trayectoria hacia la muestra. Se obtiene las siguientes relaciones:
A = abc = = - log T = -log (P/ Po) = log (Po / P ) = log ( 1 / T ).
Donde:
T = transmitancia
a = absortividad del medio
b = Trayecto ptico
P = poder de radiacin transmitida
Po= poder de radiacin incidente.
Esta forma matemtica de la ley combinada muestra que la absorbancia A en funcin de la
concentracin c es una lnea recta de pendiente a, y la representacin de log T frente a la
concentracin es una lnea recta de pendiente negativa. La representacin grfica de esta ley se
denomina representaciones de la ley Beer.
III FUNDAMENTO
La obtencin de la curva de calibrado y la demostracin de la ley de Beer se determinan
experimentalmente, preparando una serie de soluciones patrones y midiendo la absorbancia de cada
solucin a la longitud de onda analtica, mxima o de trabajo. Con los datos de absorbancia frente a
las concentraciones de los patrones se grfica en un sistema cartesiano y la representacin debe ser
una lnea recta de pendiente positiva si cumple con la ley Beer.
IV ARREGLO EXPERIMENTAL
V APARATOS
Espectrofotomtro
: Shimadzu 160 -A
Cubeta
: 1 cm. De trayecto
ptico
Regin de trabajo
: Espectro visible
Longitud de Onda de trabajo : 525.4 nm
VI MATERIALES
Fiolas de 100 y 250 ml.
Buretas por 25 ml.
VII REACTIVOS
Solucin Stock O,100N de permanganato de potasio
Solucin diluda de permanganato de potasio de 100 ppm .de manganeso
soluciones patrones.
VIII TECNICA
1.- Preparacin de soluciones patrones
Preparar a partir de la solucin Stock de KMnO 4 0, 1000N una solucin estandard diluida de 100 ppm
en manganeso para un volumen de 250 ml y luego por dilucin preparar las soluciones patrones
siguientes:
Figura 1. Preparacin de soluciones

patrones por dilucin
Figura 2. Preparacin de las muestras a las celdas

CUADRO DE SOLUCIONES PATRONES A PARTIR DE LA SOLUCIN DE 100
ppm
No
Patrn
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Concentracin
0,5
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
14,0
16,0
20,0
30.0
ppm
Volumen a
Volumen a preparar
Medir del estndar (ml)
ml
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
100.0
2.- Seleccin de Modo

Cuando se enciende el instrumento el interruptor es llevado hacia arriba en la posicin ON y es
iniciado su funcionamiento. Cuando aparece el men de modo bsico seleccionar el modo 5 que
corresponde al modo cuantitativo.
3.- Ajuste de Parmetros

En el mostrario de la funcin CUANTITATIVO o de determinacin de la concentracin, ajuste los
parmetros de medicin.
MOSTRARIO DE CAMBIO DE PARAMETRO EN EL MODO CUANTITATIVO

CUANT.
CAMBIO DE PARAMETRO S / N ?
1.2 .3.4.5.6.7.-
METODO
:
1
1
=
525 NM
STANDAR No =
12
MUESTRA No =
1
REPETIR
=
1
IMPRESION DE DATOS
CURVA DE TRABAJO NO LINEAL
FILA
NO
NO
Para ajustar el primer parmetro METODO se sigue los siguientes pasos:

Para una medida a una longitud de onda nica.presionar SI ENTER, 1 ENTER. Luego
introducir la longitud de onda de medicin.
Para una medida con 2, 3 longitudes de onda, o para un anlisis con valores
derivados...presionar SI ENTER, y presionar la opcin 2, 3 o 4 y ENTER.
El segundo parmetro STANDARD significa introducir el nmero de soluciones patrones cuyos
valores de absorbancia se van a medir.
El tercer parmetro MUESTRA No, significa la solucin muestra, este ser creado automticamente.
El sexto parmetro CURVA DE TRABAJO NO LINEAL, cuando este parmetro es colocado en SI,
la curva trabajada es no lineal. Cuando este es colocado para NO , el trabajo de la curva es lineal .
Cuando los parmetros han sido ajustados a las condiciones adecuados presionar en CAMBIO DE
PARAMETROS NO. De acuerdo con la indicacin de la pantalla, ingresar tantos valores de
concentracin como muestras standard o patrones exista. El sistema pregunta CAMBIO DE
CONCENTRACION S/ N. Si se cometi un error en la introduccin de datos, presionar SI
presionar el No del patrn para la correccin, ENTER, entrar el dato correcto, y ENTER.
Cuando no hay error en las entradas de concentracin, presionar la tecla NO luego el sistema
pregunta INGRESO MANUAL DE DATOS DE ABSORBANCIA S/ N? :
Al presionar la tecla SI puede ingresar los valores de absorbancias desde el patrn
nmero 1 hasta el ltimo.
Para medir las muestras standares o patrones...presionar NO y luego medir los
patrones desde el nmero 1.
Cuando la entrada manual de las absorbancias de los patrones se ha terminado, el sistema pregunta
CAMBIO DE DATOS S/N igual que antes. Luego corregir las entradas equivocadas como se seal
anteriormente, y presionar por ltimo la tecla NO .
El sistema pregunta al operador MOSTRARIO DE CURVA DE TRABAJO S/ N , cuando se presiona
NO se puede iniciar una medicin inmediatamente. Si se presiona SI , la curva de trabajo se indica
en la pantalla. Cuando el sistema pregunta CAMBIO DE CONCENTRACION EN CURVA DE
TRABAJO S/ N , para cambiar la escala del eje de concentracin de la curva de trabajo, presionar SI
(valor de concentracin) ENTER. En este caso si se presiona NO , se indican la curva de trabajo y su
ecuacin.
4.- Medicin de la Muestra

Insertar una muestra y entonces presionar la tecla STAR/STOP , para iniciar su medicin.
IX INTERPRETACIN DE DATOS
Para copiar la curva de trabajo obtenida en pantalla en funcin de los valores de absorbancia en el eje
de la ordenada frente a las concentraciones en partes por milln de manganeso en el eje de la abcisa,
presionar la tecla COPY .
Para seleccionar las soluciones patrones para la construccin de la curva de calibracin es necesario
calcular el error relativo de la concentracin o de la absorbancia que surge de un error fotomtrico de 1
%, y se efectua a partir de la ecuacin siguiente:
dA = dC = 0.434 dT
A
C
t log t
Donde:
dA = dC = error relativo de la concentracin o de la absorbancia
A
C
dT = error fotomtrico de 1 %
t = transmitancia.
X CUESTIONARIO
1.- Que son y cuales son las leyes fotmetricas?
2.- Como obtiene y para que se utiliza una curva de calibracin o de trabajo
3.- Como comprueba experimentalmente la ley Beer
4.- Sealar las razones por las cules se dan las limitaciones de la Ley de Beer
5.- A que se denominan y cuales son los errores personales
6.- Que criterios se maneja para seleccionar las soluciones patrones para ser utilizadas en un mtodo
espectrofotmetrico
7.- Representar en forma grfica el error relativo de la concentracin considerando el 0.5 % de error
fotomtrico si las lecturas son de 1, 5, 10, 20, 30 ,40, 50, 60, 70, 80, 90, y 95 % de transmitancia
8.- Dar razones porque en espectroscopia se utilizan soluciones diludas
9.- Cuando una curva de calibracin no parte del origen sealar las razones que determinan este tipo
de curva
10.- Sealar los rangos de transmitancias y absorbancias de los patrones y de la muestra coloreada
donde el error relativo es mnimo
INFORME DE LABORATORIO N 2
DEMOSTRACIN DE LAS LEYES FOTOMTRICAS Y ERROR
RELATIVO DE LA CONCENTRACIN
FECHA: 29/03/16
No GRUPO: 4
ANLISIS: Verificacin de la ley beer, obtencin de la curva de calibracin y seleccin de

soluciones
MTODO: Espectrofotomtrico del visible

MUESTRA: Solucin de KMnO4 0.9950 N
Soluciones patrones
SELECCIN DEL MODO DE TRABAJO (MODO CUANTITATIVO)

No
Patrn
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
Concentracin
ppm
0,5
1,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
12,0
14,0
16,0
20,0
30.0
Figura I. Soluciones patrones por dilucin
Volumen a
Volumen a preparar
Medir del estndar (ml)
ml
0.5
100.0
1.0
100.0
2.0
100.0
4.0
100.0
6.0
100.0
8.0
100.0
10.0
100.0
12.0
100.0
14.0
100.0
16.0
100.0
20.0
100.0
30.0
100.0
OBTENCION DE LOS VALORES DE ABSORBANCIA (ABS)
TABLA DE RESULTADOS
% T = -Log t (100)
1. %T = -Log 0.036 (100) = 92.44
2. %T = -Log 0.052 (100) = 88.92
3. %T = -Log 0.095 (100) = 80.35
4. %T = -Log 0.197 (100) = 63.53
5. %T = -Log 0.342 (100) = 44.49
6. %T = -Log 0.394 (100) = 40.36
7. %T = -Log 0.493 (100) = 32.13
8. %T = -Log 0.592 (100) = 25.58
9. %T = -Log 0.693 (100) = 20.27
10. %T = -Log 0.786 (100) = 16.36
11. %T = -Log 0.982 (100) = 10.42
12. %T = -Log 1.462 (100) = 3.45
N
PATRON
1
2
3
4
5
6
CONCENTRACION ppm
Mn
0.5
1.0
2.0
4.0
6.0
8.0
ABSORVANCIA
0.036
0.052
0.095
0.197
0.342
0.394
%T
92.44
88.92
80.35
63.53
44.49
40.36
7
8
9
10
11
12
10.0
12.0
14.0
16.0
20.0
30.0
0.493
0.592
0.693
0.786
0.982
1.462
32.13
25.58
20.27
16.36
10.42
3,45
CURVA DE CALIBRACIN
CLCULO DEL ERROR DE LA ABSORBANCIA O LA CONCENTRACIN

c = 0.434 T
c
t logt
Donde:
c/c = Error relativo de la concentracin
T = grado de inertidumbre 1% (0.01)
t
= transmitancia
Para 95%
c = 0.434 (0.01) = 20.51
c
95 log(95)
Para 90%
c = 0.434 (0.01) = 10.53

c
90 log(90)
Para 80%
c = 0.434 (0.01) = 5.59
c
80 log(80)
Soluciones diluidas
Para 70%
c = 0.434 (0.01) = 4.00

c
70 log(70)
Para 60%
Soluciones concentradas
c = 0.434 (0.01) = 3.26

c
60 log(60)
Para 50%
c = 0.434 (0.01) = 2.88

c
50 log(50)
Para 40%
c = 0.434 (0.01) = 2.73
c
40 log(40)
Para 30%
c = 0.434 (0.01) = 2.77

c
30 log(30)
Para 20%
c = 0.434 (0.01) = 3.10
c
20 log(20)
Para 15%
c = 0.434 (0.01) = 3.51

c
15 log(15)
Para 10%
c = 0.434 (0.01) = 4.34
c
10 log(10)
%T
95
90
80
70
60
50
40
30
20
15
10
5
Ac / c
20.51
10.53
5.59
4.00
3.26
2.88
2.73
2.77
3.10
3.51
4.35
6.67
Para 5%
c = 0.434 (0.01) = 6.67

c
5 log(5)
TABULACIN DE DATOS
DISCUSIN
En el
Soluciones muy diluidas
DE RESULTADOS
primer intento,
concentraciones
las
fueron muy altas, esto es ocasionado por una mala preparacin de la solucin Stock
de KMnO4 0, 1000N, luego se modific y se pudo realizar la prctica, se obtuvo las
absorbancias y a partir de esos datos se encontraron el % de transmitancias, y se
construyeron las curvas de calibracin, y a travs de los datos de error relativo de la
absorbancia o concentracin se pudieron determinar las concentraciones lmites de
patrones.
APELLIDOS Y NOMBRES:
FIRMA DEL ALUMNO: ____________________

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