Ovejas transgnicas

Los pacientes de enfisema hereditario necesitan ingerir grandes dosis de a -1antitripsina para suplir su deficiencia en plasma, donde la concentracin es de
2 mg/ml. Pues bien, en el Roslin Institute de Edinburgo, en colaboracin con la
empresa PPL, se han obtenido por diversos procedimientos ovejas transgnicas
portadoras del gen humano que codifica para la a -1-antitripsina (unido al
promotor de la b -lactoglobulina para que se exprese exclusivamente en las
clulas de la glndula mamaria. As, el grupo que dirige el Dr. Ian Wilmut
microinyectaron 549 cigotos con el ADN del gen humano unido al promotor del
gen de la b -lactoglobulina de oveja, obteniendo 113 individuos de los que
cinco (un cordero y cuatro ovejas) eran transgnicos. Las ovejas producan ms
de 1 mg/ml de a -1-antitripsina en la leche e, incluso, una de ellas, que
presentaba un mayor nmero de copias del transgn integradas en el genoma,
lleg a producir hasta 63 mg/ml durante la primera semana, pero luego se
estabiliz en 35 mg/ml (Wright et al., 1991).
El mismo grupo de investigacin ha obtenido tambin ovejas transgnicas
portadoras del gen humano que codifica para el factor IX de coagulacin de la
sangre (antihemoflico), primero mediante la tcnica de microinyeccin en el
proncleo del cigoto del correspondiente gen humano (ADNc) unido al
promotor del gen de la b -lactoglobulina de la oveja (Clark et al., 1989) y ms
tarde mediante la tcnica de clonacin: transferencia de ncleos de
fibroblastos fetales genticamente modificados (Schnieke et al., 1997).
Cabras transgnicas
Las cabras tambin pueden constituir unos buenos biorreactores de protenas
humanas puesto que producen 4 litros/da de leche y sus perodos de gestacin
y de desarrollo son cortos (5 y 8 meses, respectivamente). As, Ebert et al.
(1991) obtuvieron cabras transgnicas portadoras del gen humano que codifica
para el activador tisular de plasmingeno (AtPH) que, al estar unido al
promotor del gen de la b -casena de la cabra, produca hasta 2-3 mg/ml de
AtPH en la leche del animal. La protena poda ser aislada con una pureza del
98% y una actividad especfica de 610.000 U/mg (Denman et al., 1991).

Vacas transgnicas
La gran produccin lechera de las vacas (10.000 litros/ao, 35 g protena/litro
de leche) las convierte en poderosos biorreactores de protenas humanas. En
1991, tres grupos de investigacin de Holanda (la Universidad de Leiden, la
empresa Gene Pharming Europe y el Instituto de Produccin Animal de Zeist)
obtuvieron vacas transgnicas portadoras del gen humano de la lactoferrina
que se sintetizaba en la leche del animal por estar unido al promotor de la a
-S1-casena bovina. As, Krimpenfort et al. (1991) inyectaron 1.154 proncleos
de otros tantos cigotos obtenidos por fecundacin in vitro, de los cuales
sobrevivieron 981.

A los 9 das transfirieron 129 embriones a vacas estimuladas hormonalmente

(pseudopreez), quedando 21 de ellas preadas y slo 16 llevaron a trmino la
gestacin. Se obtuvo un macho y una hembra (que era un mosaico). El macho
dio positivo para la presencia del gen humano en todos los tejidos analizados
(placenta, oreja y sangre), estimndose que era portador de 5 a 10 copias del
gen humano.
Ms tarde, otro grupo de investigacin (Cibelli et al., 1998) obtuvo tres terneros
clnicos transgnicos que llevaban el trasgn hbrido b -gal-neo que se
expresaba con un promotor muy potente del citomegalovirus.
En el caso de las vacas, otros objetivos pueden ser la aplicacin de la tcnica
conocida como "modelo de la glndula mamaria" para reducir la lactosa (para
los casos de intolerancia) o fabricar "in vivo" leche maternizada, suprimiendo
mediante la tcnica de "knockout" del gen de la b -lactoglobulina de la leche de
vaca para imitar a la leche humana que no la tiene.
Tracy fue la primera oveja transgnica del mundo, y vivi entre 1991 y 1998.
Produca alfa-1-antitripsina en la leche que sirve para curar una enfermedad.
Mansa es una ternera argentina que naci en 2002 en Argentina. Es la primera
ternera clonada y transgnica. Produce la hormona de crecimiento humana en
la leche.
La Dinasta Patagonia son vacas transgnicas que producen en su leche
insulina y la Dinasta Portea son vacas que producen hormona de crecimiento
bovina (bGH). Otro logro argentino lo constituye el trabajo realizado por el
Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria (INTA) y la Universidad Nacional
de San Martn (UNSAM). Los investigadores desarrollaron a Rosita ISA, el primer
bovino clonado con genes humanos que codifican dos protenas presentes en la
leche materna, de gran importancia para la nutricin de los lactantes:
lactoferrina y la lisozima.
La obtencin de productos en la leche de animales transgnicos es
particularmente interesante para protenas que se requieren en gran cantidad
o que son muy complejas. La produccin en leche permite, adems, una
purificacin relativamente simple de la protena de inters.
Recientemente se public en la revista Nature Biotechnology un artculo que da
cuenta de un nuevo OGM que est en proceso de desarrollo. Se trata de vacas
transgnicas que produciran ms cantidad de la protena casena en la leche.
Esto permitira fabricar ms queso con el mismo volumen de leche y ms
rpido porque el tiempo de coagulacin sera menor