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FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS
ASIGNATURA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR
PRCTICA N 07
RECONOCIMIENTO DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA
I. GENERALIDADES
Las enzimas generalmente son sustancias de naturaleza proteica que catalizan reacciones
bioqumicas. En estas reacciones, las enzimas
actan sobre unas molculas denominadas
sustratos, las cuales se convierten en diferentes
molculas, los productos. Casi todos los procesos
metablicos en las clulas necesitan enzimas. A las
reacciones mediadas por enzimas se las denomina
reacciones enzimticas. No todos los catalizadores
bioqumicos son protenas, pues algunas molculas
de ARN son capaces de catalizar reacciones (como
el fragmento 16S de los ribosomas en el que reside
la actividad peptidil transferasa).
Las enzimas funcionan disminuyendo la energa de activacin de una reaccin, de forma que
se acelera sustancialmente la tasa de reaccin. Las enzimas no alteran el balance energtico de las
reacciones en que intervienen, ni modifican, por lo
tanto, el equilibrio de la reaccin, pero consiguen
acelerar el proceso incluso millones de veces. Una
reaccin que se produce bajo el control de una
enzima, o de un catalizador en general, alcanza el
equilibrio mucho ms deprisa que la correspondiente
reaccin no catalizada.
Las enzimas son extremadamente selectivas
con sus sustratos. La especificidad de las enzimas
depende de las caractersticas del sitio o centro
activo; es decir, la regin de la enzima donde esta
se une al substrato antes de que ocurran las
transformaciones del substrato. El conjunto de
enzimas sintetizadas en una clula determina el
metabolismo que ocurre en cada clula. A su vez,
esta sntesis depende de la regulacin de la
expresin gnica.
La actividad de algunas enzimas depende solamente de su estructura como protenas,
mientras que otras necesitan, adems uno o ms componentes no proteicos, llamados cofactores. El
cofactor puede ser un ion metlico (Cu++, Zn++, Co+
+
), o bien una molcula orgnica. Esta puede unirse
qumicamente al enzima, denominndose, en este
caso grupo prosttico, o puede interaccionar
dbilmente durante el proceso de catlisis y se
llamar coenzima (la mayor parte de coenzimas son
vitaminas).
El
complejo
apoenzima-cofactor
catalticamente activo recibe el nombre de
holoenzima. Cuando se separa el cofactor, la
protena restante llamada apoenzima es inactiva
catalticamente. Muchas enzimas se almacenan en la
clula en estado inactivo (proenzima o zimgeno) debido a que pueden actuar y atacar la sustancia
misma de la clula.
Dentro de las diferentes enzimas que se forman en los seres vivos, encontramos a las enzimas
antioxidantes denominadas catalasas. La participacin de las catalazas en la catlisis son importantes
para la vida, estas ayudan a descomponer el perxido de hidrgeno (un agente oxidante poderoso y
daino) en oxgeno y agua, previniendo la acumulacin de burbujas de dixido de carbono en la
sangre. La catalasa es una enzima muy
potente, una molcula de catalasa
puede
descomponer
millones
de
molculas de perxido de hidrgeno en
oxgeno y agua. El perxido de
hidrgeno es uno de los productos del
metabolismo
celular
en
diversos
organismos, pero dada su potencial
toxicidad, es transformado enseguida
por la enzima catalasa. Adems, la
catalasa cumple una funcin protectora
contra determinados microorganismos
patgenos, sobre todo anaerobios. Las
bacterias anaerobias, mueren al estar
en contacto con oxgeno, es por esta
razn que el oxgeno producido por esta
enzima tiene efecto bactericida sobre
estos microorganismos.
1. MATERIALES Y EQUIPOS
1.1 MATERIALES Y MUESTRAS
MATERIAL INDIVIDUAL: (Bajo responsabilidad de los estudiantes)
Paos limpiadores
Bistur u hoja de afeitar
Una caja de Fsforo
50 g de hgado de pollo
1 papa pequea
1 zanahoria pequea
1 manzana pequea
Chancador de ajos, pequeo
Cuchillo pequeo
100 ml de agua oxigenada
EXPERIMENTO 01
RECONOCIMIENTO DE ENZIMAS DIGESTIVAS COMERCIALES EN TEJIDOS
VEGETALES Y ANIMALES
II. PROCEDIMIENTO
N de
Tubo
1.
2.
3.
4.
5.
6.
2.
3.
4.
Muestra
cantidad
Hgado
triturado
Papa triturada
2g
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada
2g
2g
2g
EXPERIMENTO 02
RECONOCIMIENTO DE CATALAZAS EN TEJIDOS VEGETALES Y ANIMALES
I. PROCEDIMIENTO
N
de
Tubo
1.
2.
3.
2.
4.
3.
5.
4.
6.
Esquematice, compare los resultados de los cuatro tubos, analice y explique la experiencia.
1.
Muestra
cantidad
Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada
2g
2g
2g
2g
EXPERIMENTO 03
EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS
CATALAZAS
II. PROCEDIMIENTO
1.
2.
3.
4.
Hervir el contenido de cada uno de los tubos durante 5 minutos y deje enfriar.
5.
6.
7.
Agite cada uno de los tubos y observe si hay actividad enzimtica en las muestras analizadas.
8.
EXPERIMENTO 04
EFECTO DEL PH CIDO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS CATALAZAS
II. PROCEDIMIENTO
1. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al
4.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
N
de
Tubo
1.
2.
3.
4.
Muestra
cantidad
Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada
2g
2g
2g
2g
EXPERIMENTO 05
EFECTO DEL PH ALCALINO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LAS CATALAZAS
II. PROCEDIMIENTO
8. Coger 04 tubos de ensayo limpios y enumrelos del 1 al
4.
9.
N
de
Tubo
1.
2.
3.
Muestra
cantidad
Hgado
triturado
Papa
triturada
Zanahoria
triturada
Manzana
triturada
2g
2g
2g
2g
CUESTIONARIO
1. Qu diferencia hay entre una coenzima y un grupo prosttico?
2. Qu son los peroxisomas y cul es su funcin en las clulas?
3. Explique que es la acatalasia o enfermedad de Takahara
4. Cul es el principio activo de la frutenzima y del enzimatic (contenido,
descripcin , indicaciones teraputicas, contraindicaciones, etc?