Practicas

de Biotecnologa Animal, XIX Semestre, Practica

6, 2015

DE OVULOS

RECUPERACION
DE OVARIOS DE
VACUNOS
Salas
Carlos Francisco Munoz
Resumen
de ovulos

La recoleccion
es una de las tecnicas
basicas
en la biotecnologa reproductiva. La capacidad de
generar embriones in vitro nace a partir de poder obtener los ovulos y los espermatozoides en buen estado.

Para obtener los ovulos

se debieron utilizar ovarios recolectados en el camal y dos tecnicas
diferentes: aspirado
Luego tambien
se evaluo el estado de los ovocitos mediante su observacion
al microscopio. Sin
y diseccion.
embargo no se pudo obtener los ovarios frescos y se utilizo un ovario conservado en formol de hace unas
debido al tiempo que llevaba el ovario.
semanas. No se pudieron observar ovocitos despues de la extraccion
Abstract
The egg collection is one of the basic techniques in reproductive biotechnology. The ability to generate embryos
in vitro comes from to get the eggs and sperm in good condition. For the eggs we should have used ovaries
collected at the slaughterhouse and two different techniques: aspirated and dissection. Then the state of the
oocytes was also evaluated by microscope observation. But we could not get the fresh ovaries and ovarian
preserved in formaldehyde a few weeks ago was used. No oocytes were observed after extraction due to the
time the ovary had.
1 Programa

Profesional de Ingeniera Biotecnologica,

Universidad Catolica
de Santa Mara, Arequipa, Peru

*: carlosfms2810@gmail.com

Indice

Introduccion

Marco Teorico

Materiales y Metodos

2.1 Materiales . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2

2.2 Metodos
.............................2
por aspirado Extraccion
por corte
Extraccion

Resultados y Discusion

3.1 Resultados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
por aspirado Extraccion
por corte
Extraccion

Discusion

Conclusiones

Recomendaciones

Referencias

va. El recolectar ovocitos ayuda a no perder esos potenciales

terneros, sino que aunque la madre ya halla sido sacrificada
aun puede generar descendencia. Tambien nos ayuda en la clonacion como fuente de ovocitos,a los cuales se les retirara el
nucleo y se les implantara un nucleo de una celula somatica
del animal que se desea clonar.
Se debe recordar que los ovocitos son celulas delicadas y
que se requiere que esten en buen estado para su fertilizacion,
por lo tanto se debe dominar tanto la extraccion como la evaluacion de los ovocitos para garantizar el e xito en el programa
de reproduccion. Los metodos de extraccion convencionales
para la extraccion de ovocitos son el aspirado y la diseccion
de los folculos; mientras que los indicadores para la calidad
de los ovocitos son: la esfericidad, estado de la zona pelucida
y tamano
Los objetivos de esta practica fueron : preparar y capacitar
en la obtencion de ovocitos de ovarios de vacunos y determinar
la calidad de los ovocitos.

Introduccion

1. Marco Teorico

La recuperacion de ovocitos a partir de ovarios ya sea

de animales sacrificados o vivos, es una de las tecnicas que
mas auge y aplicacion esta teniendo en la actualidad. Se necesitan los ovocitos paradiferentes tecnicas de reproduccion
como la fecundacion in vitro, la transferencia de embriones,
la clonacion, etc.
Esta tecnica nos permitira obtener ovocitos que posteriormente seran embriones, para mejorar la eficiencia reproducti-

Para poder aplicar la tecnica de recuperacion de ovocitos

se necesita un amplio conocimiento de la anatoma y fisiologa
de los ovarios, ya que son los o rganos responsables de la la
gametogenesis y la maduracion de los ovocitos.
Los Ovarios son los o rganos principales del aparato reproductor femenino. Tienen dos funciones: la produccion de
o vulos y la produccion de hormonas, principalmente estrogenos y progesterona, durante los distintos estados del ciclo

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RECUPERACION
DE OVARIOS DE VACUNOS 2/3

estral. En la superficie del ovario se pueden encontrar dos

estructuras diferentes: Folculos y Cuerpo Luteo.
Los folculos son estructuras llenos de fluidos, que contienen los o vulos en desarrollo. Usualmente se pueden encontrar
varios folculos en cada ovario, que varan en tamano desde
apenas visibles, hasta 20 mm en diametro. El folculo mas
grande sobre el ovario es considerado el dominante, y es el
que probablemente ovule cuando el animal entre en celo. Con
el tiempo, mas del 95 % de los otros folculos entran en regresion y mueren sin ovular, siendo reemplazados por una nueva
generacion de folculos en crecimiento.
La otra estructura que se encuentra en la superficie del
ovario es el cuerpo luteo (CL). El CL crece sobre el sitio de la
ovulacion del celo anterior. A menos que haya habido mas de
una ovalacion, se debe hallar solo un CL en uno de los Ovarios.
El CL normalmente tendra una corona sobre su estructura, lo
cual facilita su identificacion durante la palpacion rectal. El
CL tambien puede tener una cavidad llena de fluidos, pero una
pared mas gruesa, por lo tanto tendra una textura mas tosca
al tacto. El CL en latn significa cuerpo amarillo..Aunque en
su superficie, esta estructura tiene apariencia oscura, un corte
transversal revela un amarillo rojizo en su interior. [1]
La aplicacion de los procedimientos de fertilizacion in
vitro(FTV) en la reproduccion bovina se ha incrementado en
los u ltimos anos y en un futuro puede llegar a ser utilizada
en programas de gran escala en la produccion comercial de
embriones in vitro. Dentro de este concepto, la recoleccion de
ovocitos es un paso necesario para poder llegar a establecer
estos programas de FIV.
Los ovarios contienen un elevado numero de folculos que
se encuentran en diferentes estados de desarrollo (primordiales, en crecimiento, atresicos), de los cuales solamente una
pequena proporcion va a ser utilizada durante la vida reproductiva del animal. La recoleccion de ovocitos permite recuperar
y aprovechar folculos no ovulatorios, que bajo condiciones
fisiologicas se tornaran en folculos atresicos.
La obtencion de ovarios provenientes de vacas sacrificadas
en el matadero suministra una fuente abundante de ovocitos
obtenidos a bajo costo, provenientes de animales en diferentes
estados del ciclo estral, que pueden ser madurados, fertilizados
y cultivados in vitro hasta estados avanzados del desarrollo
embrionario. [2]
Los ovarios, colectados de hembras faenadas son transportados en termos que contienen suero isotonico a 35-37 C. La
aspiracion de los COCs, se realiza aproximadamente dentro
de 4 a 6 horas despues de faenados los animales. Todos los
folculos que no presentan indicios de atresia folicular, entre
2 y 8 mm de diametro, son aspirados. La recuperacion es moderada y la calidad (capacidad de los ovocitos de completar
la meiosis) es buena, en comparacion con la tecnica de desmenuzamiento (con una hoja de afeitar, se corta la superficie
del ovario) en la cual la recuperacion es alta, pero la calidad
de los ovocitos es baja. Esto se debe mas que nada a que se
recuperan ovocitos de folculos muy pequenos no antrales que
no han alcanzado el tamano adecuado para ser madurados in

vitro. [3]

2. Materiales y Metodos
2.1 Materiales
1. Ovarios de vaca recolectados del camal
2. Suero fisiologico
3. Placas de Petri
4. Jeringas hipodermicas
5. Bistur
6. Pinzas
7. Guantes
8. Microscopio

2.2 Metodos
Primero se coloco el ovario en el suero fisiologico dentro
de una placa Petri y se procedio con los metodos de extraccion.
por aspirado
2.2.1 Extraccion

Se aseguro el ovario con las pinzas y se procedio a ubicar uno de los folculos, luego se aspiro el liquido folicular
utilizando una jeringa hipodermica y se deposito el aspirado en una placa de Petri con suero fisiologico. Se realizo su
evaluacion a traves del microscopio.
por corte
2.2.2 Extraccion

Nuevamente se aseguro el ovario con las pinzas y se

ubico uno de los folculos, luego se realizo un corte transversal y un corte longitudinal en el folculo con el bistur y se
recolecto el liquido folicular en una placa de petri con suero
fisiologico. Se evaluo el estado de los ovulos en el microscopio.

3. Resultados y Discusion
3.1 Resultados
por aspirado
3.1.1 Extraccion

Se consiguio aspirar buena parte del liquido folicular, sin

embargo, al realizar la evaluacion microscopica de los ovulos
y del liquido folicular no se encontraron ovulos
por corte
3.1.2 Extraccion

Realizados los cortes, el liquido folicular cayo a la placa

con suero fisiologico, sin mebargo al igual que en la extraccion
por aspirado no se encontraron o vulos.

4. Discusion
El hecho de haber utilizado un ovario que llevaba mas de
una semana siendo conservado en formol puede ser el responsable directo de la no presencia de o vulos. Sabemos por la
literatura que los ovulos son extraidos de ovarios recolectados
del matadero en un tiempo maximo de 8 horas, desde la muerte del animal. Por lo tanto despues de una semana es muy poco
probable poder encontrar algun o vulo vivo. El mal olor del
ovario indicaba que ya haba cierto grado de descomposicion.

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El metodo de extraccion que ha parecido mas efectivo ha

sido el de corte, ya que es mucho mas rapido que el metodo
por aspirado y requiere menos intervencion. Tambien se ha
reportado que es mas eficiente.

5. Conclusiones
Debido al tiempo transcurrido entre la recoleccion del
ovario y la extraccion de los ovocitos, no se pudo encontrar ovocitos en el liquido folicular.
El metodo por corte es mas eficiente que el metodo por
aspirado.

6. Recomendaciones
Como una autocrtica: el no poder conseguir los ovarios
del matadero nos significo el no poder obtener los ovocitos,
por lo tanto es mejor prevenir e informarse mejor acerca de
como obtener y en que horarios se debe ir a obtener los ovarios.

Referencias
[1]

Dr. Ray Nebel Mel DeJarnett. Anatoma y fisiologa de la

reproduccion bovina.

[2]

Nicolas Velarde Choque. Recuperacion de ovocitos recolectados de vacas criollas post mortem del sur del peru.
Ciencia y desarrollo, 2005.

[3]

MsC Dras. Yael Filipiak y Clara Larocca. BIOTECNO BOVINA MANUAL TEORI
EN REPRODUCCION
LOGIA

CO - PRACTICO. Universidad de la Republica, 2012.