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Ao de la consolidacin del mar de

Grau

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN


BAUTISTA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA
CICLO III - MB

PRCTICA N2:
LOS AMINOCIDOS Y LAS PROTEINAS COMO
ELECTROLITOS: SU CAPACIDAD AMORTIGUADORA EN EL
ORGANISMO HUMANO

ALUMNO:
TORRES SOTO GINO JESS
DOCENTE:
HERNANDEZ PACHECO Mirtha
CURSO:
BIOQUMICA Y NUTRICIN

ICA PER
2016

OBJETIVOS

Determinar el pH de una solucin utilizando mtodos potenciomtricos.


Reconocer la capacidad tampn de aminocidos y protenas
Relacionar los conocimientos adquiridos del funcionamiento de las soluciones
tampn de importancia biolgica.

INTRODUCCION.
El mantenimiento del pH del medio interno, dentro de unos lmites estrechos, es de vital
importancia para los seres vivos. Diariamente el metabolismo intermedio va a generar
una gran cantidad de cidos, pese a lo cual, la concentracin de hidrogeniones [H + ]
libres en los distintos compartimentos corporales va a permanecer fija dentro de unos
lmites estrechos. Ello es debido a la accin de los amortiguadores fisiolgicos que van
a actuar de forma inmediata impidiendo grandes cambios en la concentracin de
hidrogeniones, y a los mecanismos de regulacin pulmonar y renal, que son en ltima
instancia los responsables del mantenimiento del pH.
Qu es el pH?
Cuando se habla de la regulacin del equilibrio cido-base, se habla en realidad de la
regulacin de la concentracin de iones hidrgenos (H+) en los lquidos corporales.
Pero resulta difcil expresar esta concentracin en trminos de concentraciones reales;
en consecuencia se ha introducido el concepto de pH para expresar la concentracin de
los iones hidrgenos. Pequeos cambios en la concentracin de iones hidrgeno pueden
producir grandes alteraciones en las reacciones qumicas celulares. Por este motivo, la
regulacin de la concentracin de los iones hidrgeno es uno de los aspectos ms
importante de la homeostasis. Considerando al pH como un subsistema del medio
interno, y que merece un tratado aparte por la importancia de su conocimiento, pasamos
a describir el concepto de pH, sus aspectos estructurales, funcionales y la forma de
evaluar el estado cido-base del organismo
Regulacin del pH: Equilibrio acido - base
El organismo posee tres mecanismos o lneas de defensa para mantener el pH en
valores compatibles con la vida:
1. amortiguadores.
2. regulacin pulmonar de la pCO2 .
3. resorcin y eliminacin renal de bicarbonato y la excrecin de cidos.
1. El manejo instantneo de la carga cida es realizado por las sustancias llamadas
amortiguadoras, tampones o buffer. Las sustancias amortiguadoras desarrollan

rpidamente su accin (fraccin de segundos) previniendo de esta forma cambios


excesivos en la concentracin de iones hidrgenos.
2. Cuando la concentracin de iones H+, aumenta en forma manifiesta se produce una
estimulacin del centro respiratorio. En consecuencia aumenta la ventilacin pulmonar,
y puede ser eliminada una mayor cantidad de CO 2, provocando un descenso en la
concentracin de iones H+ que estaba aumentada (dicha accin se cumple en
aproximadamente 3 minutos).
3. Cuando la concentracin de H+ se modifica significativamente, los riones producen
una orina cida o alcalina, ayudando tambin al reajuste del equilibrio. El rin
manejar la carga de cidos como rgano ms poderoso, pero requiriendo horas o das
para reajustar las alteraciones en los valores de pH.
Por ejemplo, si se aade cido clorhdrico (ClH) a una solucin de agua pura, el pH
caer a 1. Sin embargo, si hay un buen amortiguador el ClH se combinar con l y
variar muy poco el pH.
Podemos utilizar, para ilustrar este ejemplo, la reaccin de amortiguacin que ocurre
con el sistema tampn de bicarbonato de sodio (CO3Na)/ cido carbnico (CO3H2). El
CO3H2 es un cido dbil porque su disociacin en CO 3H- y H+ es muy pobre en
comparacin con otros cidos (999 partes de cada 1000 de CO3H2 se disocian en CO2
y H2O, dando una elevada concentracin de CO2 y muy poco de cido).
Enfoque clnico de los trastornos cido-base
Habamos dicho que en el hombre la homeostasis de los cidos y bases logra conservar
el pH arterial sistmico dentro de un lmite estrecho a pesar de las cargas de cidos y
lcalis que se originan por ingestin y degradacin diaria de alimentos.
Tengamos bien presente que el pH est determinado por la proporcin de CO3H- y
pCO2, y no por la cantidad absoluta de cada uno de ellos. En consecuencia, una
concentracin normal de CO3H- o de pCO2 no necesariamente significa que el pH es
normal. A la inversa, un pH normal no implica que el CO3H- o la pCO2 sean normales.

Hay dos grandes tipos de trastornos cido-base:


1.- respiratorio y
2.- metablico.
As Tenemos cuatro patentes clsicas de trastornos cido-base:
1.- acidosis metablica
2.- alcalosis metablica
3.- acidosis respiratoria
4.- alcalosis respiratoria
Hay que tener en cuenta que los trastornos metablicos primarios pueden originar una
respuesta respiratoria secundaria, y los trastornos respiratorios primarios originan una
respuesta metablica secundaria. Esta respuesta recibe el nombre de compensacin o
anormalidad secundaria
Es muy importante reconocer que las respuestas compensadoras tienen lmites (ver
tabla 3-III). Por ello, siempre que las respuestas compensadoras estn comprendidas
dentro de esos lmites, es que hablamos de un trastorno simple. Cuando sucede lo
contrario, estamos en presencia de un trastorno mixto.
FISIOLOGIA
En condiciones normales la concentracin de hidrogeniones del lquido extracelular es
baja (de unos 40 nEq/l). A pesar de ello, pequeas fluctuaciones de la misma va a tener
repercusiones importantes sobre procesos vitales. Por ello, existen unos lmites
relativamente estrechos entre los cuales la concentracin de hidrogeniones es
compatible con la vida. Dichos valores oscilan entre 16 y 160 nEq/l, lo que equivale a
un valor de pH de 7.80 a 6.80. El principal producto cido del metabolismo celular es el
dixido de carbono (CO2) que viene a representar un 98% de la carga cida total.
Aunque no se trate de un cido, pues el CO2 no contiene H + , se trata de un cido
potencial ya que su hidratacin mediante una reaccin reversible catalizada por la
anhidrasa carbnica (A.C.) va a generar cido carbnico (H2CO3):

Al ser un gas, el CO2 va a ser eliminado practicamente en su totalidad por los pulmones
sin que se produzca una retencin neta de cido, por lo que se denomina cido voltil.
Por otra parte, el metabolismo va a generar una serie de cidos no voltiles, tambin
denominados cidos fijos que representan de un 1-2% de la carga cida y cuya principal
fuente es el catabolismo oxidativo de los aminocidos sulfurados de las protenas. Estos
cidos fijos no pueden ser eliminados por el pulmn siendo el rin el principal rgano
responsable en la eliminacin de los mismos.
AMORTIGUADORES FISIOLOGICOS
Tambin denominados sistemas tampn o buffer. Representan la primera lnea de
defensa ante los cambios desfavorables de pH gracias a la capacidad que tienen para
captar o liberar protones de modo inmediato en respuesta a las variaciones de pH que se
produzcan. Un sistema tampn es una solucin de un cido dbil y su base conjugada:

La constante de disociacin del cido (K) viene expresada como:

El valor de pH en el cual el cido se encuentra disociado en un 50% se conoce como pK


(pK=- log [K]). El pK representa el valor de pH en el que un sistema tampn puede
alcanzar su mxima capacidad amortiguadora. Por tanto, cada sistema buffer tendr un
valor de pK caracterstico. Puesto que lo que se pretende es mantener un pH alrededor
de 7, sern buenos amortiguadores aquellos sistemas cuyo pK est prximo a dicho
valor. En este sentido, existen dos sistemas fundamentales que cumplen esta condicin:
los grupos imidazol de los residuos histidina de las protenas, y el fosfato inorgnico.

Sin embargo, como veremos a continuacin el sistema ms importante implicado en la


homeostasis del pH es el amortiguador cido carbnico/bicarbonato a pesar de tener un
pK de 6.1.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Potencimetro.
Beakers de 50 ml de vidrio (11 para cada mesa de trabajo).
Baguetas de vidrio (3 por cada mesa).
Pipetas de 10 ml graduadas 1/10 (3 por cada mesa).
Agua destilada.
Solucin de CH3-COOH 0.1N.
Solucin de NaOH 0.1N.
Papel milimetrado cuadriculado.

PARTE EXPERIMENTAL
Mezclar los volmenes de CH3-COOH 0.1N y de NaOH 0.1N con agua destilada
sealados en la tabla siguiente, mezclar bien y luego medir el pH en cada uno de los 11
Beakers con el potencimetro:

Beaker N
1

Acido actico

NaOH 0.1N

Agua

0.1 N (ml)
10

(ml)
0

destilada (ml)
10

pH

2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

10
10
10
10
10
10
10
10
10
10

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

9
8
7
6
5
4
3
2
1
0

Qu es un par tampn, como funciona y porqu las protenas sanguneas son


amortiguadores?
Son los sistemas encargados de mantener el pH de los medios biolgicos dentro de los
valores compatibles con la vida. Permitiendo con ello la realizacin de funciones
bioqumicas y fisiolgicas de las clulas, tejidos, rganos, aparatos y sistemas. Segn su
naturaleza qumica, los amortiguadores se clasifican en orgnicos e inorgnicos y, as
mismo, atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en plasmticos y tisulares
Las protenas y aminocidos como tampn
Los aminocidos y protenas son electrolitos anfteros, es decir, pueden tanto ceder
protones (cidos) como captarlos (bases) y, a un determinado pH (en su pI), tener ambos
comportamientos al mismo tiempo. La carga depende del pH del medio. En un medio
muy bsico se cargan negativamente, mientras que en el fuertemente cido lo hacen

positivamente. Desde el punto de vista fisiolgico este tipo de amortiguador es resulta


de especial inters a nivel tisular.
PRINCIPALES

SUSTANCIAS

AMORTIGUADORAS

DEL ORGANISMO

HUMANO.
Sistema amortiguador del bicarbonato.
Es el sistema ms importante en el lquido extracelular (especialmente en la sangre).
Se compone de dixido de carbono (CO2), agua (H2O), cido carbnico (H2CO3), ion
de hidrgeno (H+) y anin carbonato cido (HCO3-, muchas veces llamado
bicarbonato):

CO2 + H2O <=> H2CO3 <=> H+ + HCO3-

Durante la respiracin celular se produce CO2 como producto de desecho. Reacciona


con el agua para formar el cido carbnico, una reaccin que es catalizada por la
enzima anhidrasa carbnica. La disociacin de H2CO3 en iones no necesita
catalizador. La sangre que pasa el pulmn libera el CO2 otra vez y este es eliminado por
la respiracin. Cuando hay exceso de H+, segn el principio de Le Chatelier el
equilibrio se desplaza hacia la izquierda, es decir se produce ms CO2 que es eliminado
por el aire expiratorio. De esa manera se "exhala" la acidez excedente.
Sistema amortiguador de las protenas.
La carga negativa de las protenas les proporciona la capacidad de ligar protones (H+).
Aunque son abundantes en las clulas y en la sangre, tienen su importancia mayor en el
compartimiento intracelular.

Sistema amortiguador de la hemoglobina.


Primero, la hemoglobina es capaz de ligar el CO2 producido en los tejidos por medio de
sus grupos amino. En los alvolos pulmonares donde existe una concentracin alta de
O2, la hemoglobina desoxigenada tiende a liberar su CO2 al plasma sanguneo y aceptar
O2. Luego el CO2 difunde de los capilares al aire.

Segundo, como protena la hemoglobina amortigua el pH sanguneo capturando


protones. An ms: la hemoglobina desoxigenada es capaz de ligar ms H+ que la
hemoglobina oxigenada. Ese efecto es especialmente importante en los tejidos donde se
producen muchos iones hidrgeno como es el caso en los msculos que estn
trabajando. Despus de liberar su oxgeno al tejido muscular, la hemoglobina puede
ligar los H+ y llevarlos a los pulmones y al rin.

Sistemas amortiguadores del fosfato y del amonaco.


Los fosfatos orgnicos como el ADP, ATP, Glucosa-1-fosfato y el 2,3-DPG son
amortiguadores intracelulares.
Al contrario, los fosfatos inorgnicos y el amonaco son muy importantes a nivel del
rin. Cada da el rin tiene que excretar 60-100 mmol de H+ pero el pH de la orina no
puede caer por debajo de 3.5. Los fosfatos y el amonaco intervienen en los tbulos
renales para mantener constante el pH de la orina.
HPO4-- + H+ <=> H2PO4-.
El cuerpo puede tambin excretar los protones unindolos al amonaco (NH3) que en
solucin acuosa acta como base, creando iones de amonio (NH4) que se excretan con
la orina.

Otros sistemas regulatorios: pulmn y rin

El pulmn juega en la regulacin del equilibrio cido-bsico mediante la exhalacin o


retencin del CO2. Si se produce un desequilibrio que supera la capacidad de los
sistemas amortiguadores, el cuerpo reacciona aumentando o disminuyendo la frecuencia
respiratoria.
Es un mecanismo a corto plazo ya que la respiracin reacciona dentro de minutos a
cambios del pH sanguneo. La regulacin mediante el rion es un mecanismo a largo

plazo; reacciona ms lentamente. Es capaz de retener o excretar bicarbonato (HCO3-) y


H+ segn sea necesario.

Referencias bibliogrficas
1. Wilson, K., and Walker, J. 2000. Principles and Techniques of practical
Biochemistry. Fifth edition. Cambridge University Press.
2. UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN; DEPARTAMENTO DE
BIOQUMICA. Bioqumica: aulas prticas. 6. ed. Curitiba: Ed. Da UFPR, 2001.
178 p.
3. Nelson, D.L., Cox, M. M. Lehninger Principios de Bioqumica. Ediciones Omega.
Captulo 3 (2006).

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