1.

Introduo
As protenas so polmeros de aminocidos unidos por covalncia, atravs de ligaes
peptdicas, uma ligao peptdica a unio do grupo amino (-NH 2 ) de um aminocido com o
grupo carboxila (-COOH) de outro aminocido, atravs da formao de uma amida. Alm disso,
os diferentes grupamentos "R" encontrados nos aminocidos influenciam na estrutura, na
funcionalidade e nas propriedades das protenas individuais (Valter T.Motta 2012).
As protenas so componentes essenciais a matria viva. Atuam como catalisadores
(enzimas),

transportadores

(oxignio,

vitaminas,

frmacos,

lipdeos,

ferro,

cobre),

armazenamento (casena do leite), proteo imune (anticorpos), reguladores (insulina, glucagon),

movimento (actina e miosina), estruturais (colagnio), transmisso dos impulsos nervosos
(neurotransmissores) e o controlo do crescimento e diferenciao celular (fatores de
crescimento).
Alem das resumidas funes, citam-se algumas outras funes de grande importncia
fisiolgica das protenas: manuteno da distribuio de gua entre o compartimente intersticial e
o sistema vascular do organismo; participao da homeostase e coagulao sangunea; nutrio
de tecidos; formao de tampes para a manuteno do pH.
Baseado na sua composio, as protenas so divididas em simples, que consistem somente de
cadeias polipeptdicas, e conjugadas que alem das cadeias polipeptdicas tambm possuem
componentes orgnicos e inorgnicos. A poro no-peptdica das protenas conjugadas
denominada grupo prosttico. As mais fosfoprotenas, metaloproteinas, glicoprotenas,
hemoproteinas e flavoproteinas (Valter T.Motta 2012).
Quanto a classificao de protenas quanto a sua composio em aminocidos encontramse grupos R no polares (alifticos) que estabilizam a estrutura pelo efeito hidrofbico; grupos R
aromticos tem cadeias laterais aromticas e so relativamente hidrofbicos; grupos R no
carregados estes so bastante solveis em gua devido a presena de grupos polares; grupos R
positivamente carregados os resduos mais hidrofilicos so aqueles que se encontram ionizados a
pH 7; grupos R negativamente carregados o seu pKa esto abaixo de 7.

2. Objectivos
2.1. Objectivo geral

Estudar as reaces principais das protenas.

2.3. Objectivos especficos

Realizar o teste de Biureto;

Fazer a reaco xantoproteica;
Realizar o teste da ninidrina;
Fazer a reaco de precipitao de protenas pela formao de sais de metais pesados.

3. Reagentes

CuSO4, 0.01%
HNO3, conc.
Clara de ovo
Soluo de albumina

Ninidrina
HgCl2, 0,2M
NaOH, 10%
NaOH, 0,1%

4. Parte experimental

Experiencia 2

Teste de biureto
i.
ii.

Misturou-se 2 mL de NaOH a 2% com 2 mL da soluo de protena;

Juntou-se uma gota de CuSO4 a 0,01%.

Observaes: Ao final dos procedimentos verificou-se a formao de uma cor violeta.

Experiencia 3

Reaco xantoproteica
i.
ii.
iii.

Adicionou-se 1mL de HNO3 concentrado a 2mL da soluo a ensaiar e misturou-se;

Aqueceu-se cuidadosamente o tubo em banho Maria;
Arrefeceu-se o tubo de ensaio em gua corrente e adicionou-se algumas gotas de NaOH a
10%.

Observaes: Ao misturar-se 1mL de HNO 3 concentrado a 2mL da soluo a ensaiar

verificou-se o aparecimento de precipitado branco. Aps o aparecimento do precipitado,
ao aquecer o tubo em banho-Maria a cor da soluo mudou para amarelo.

Experiencia 5

Teste da ninidrina
i.
ii.

Adicionou-se 5mL da soluo de ninidrina a 0,1% a 3mL da soluo de protena;

Aqueceu-se at a ebulio.
Observaes: Observou-se que antes da ebulio a cor da soluo passou de branco a
rosa, de rosa a violeta e de violeta a azul; e aps a ebulio, a cor azul ganhou colorao
mais intensa.

Experiencia 6

Precipitao de protenas pela formao de sais de metais pesados

i.

Colocou-se 3mL da soluo de protena em um tubo de ensaio;

ii.

Adicionou-se uma gota de cloreto de Hg (II).

Observaes: Aps os procedimentos a soluo ficou branca e houve a formao de

precipitado.

5. Discusso dos resultados

Na reao do biureto, o NaOH, presente em soluo, conduz a cadeia peptdica a um

desarranjo em sua estrutura tridimensional. Os ons Cu 2+ presentes em soluo,
originados do sulfato de cobre, formam um complexo com os aminocidos,
estabelecendo interaes com os tomos de nitrognio da cadeia peptdica. Esse
complexo formado confere uma colorao prpura caracterstica a soluo.

A reao de biureto positiva para protenas e peptdeos com trs ou mais resduos de
aminocidos. A reao tambm positiva para substncias que contenham dois grupos
carbamnicos (-OC-NH2-) ligados diretamente ou atravs de um nico tomo de carbono
ou nitrognio. A soluo da clara de ovo, quando submetida reao do biureto,
apresentou colorao prpura, indicando a provvel presena de peptdeos em soluo.

Na reao xantoproteica, quando adicionamos um cido ao meio onde a protena est

dissolvida, a liberao de protes para o meio provoca uma queda do pH. Os aminocidos

cidos (aspartato e glutamato) captam os protes dissociados que se ligam ao carboxilo

que estava dissociada.

No teste da ninidrina, o aquecimento da soluo de protenas se estabelece a estrutura

tridimensional do peptdeo. A ninhidrina, ento, reage com o grupamento amina (sendo
positiva para protenas, peptdeos, aminocidos, aminas primrias e amnia) presente nos
aminocidos, formando como produto final um complexo de colorao azul-violeta.

Precipitao de protenas pela formao de sais de metais pesados, A adio de sais

de metais pesados, tais como mercrio, chumbo, cobre e zinco, levam formao de sais
denominados "quelatos" entre os aminocidos cidos e estes metais, fazendo desta forma
uma espcie de antidoto.

A precipitao de protenas dos metais s ocorre quando o pH do meio maior que o pHi
porque essa precipitao mais intensa quando o pH est acima do ponto isoeltrico (pI).
Isso porque, acima do pI, a carga lquida sobre a protena negativa, favorecendo a
interao com os caties provenientes do sal. Quando a protena est abaixo do seu pI, a
carga lquida total da molcula positiva. Isso facilita a interao da molcula com os
anies provenientes de cidos.

6. Concluses
As reaes de colorao e precipitao (com ou sem desnaturao) de protenas
permitem a

caracterizao dessas pela analise de suas propriedades qumicas e fsicas, entre elas, a
presena de ligaes peptdicas, estrutura molecular, solubilidade.

As reaes de colorao no alteram a estrutura tridimensional da protena, ao

contrrio das reaes de precipitao que podem alterar as estruturas quaternrias,
terciarias e secundrias das protenas como as reaes por ao trmica, presena de
alcalides, sais de metais pesados e solventes orgnicos.

possvel identificar as protenas como molculas carregadas e reconhecer os

fatores ligados a solubilidade das protenas em gua, devido ao uso de reativos que

conferem a sua presena e caracterizao do mesmo devido a resultados ligados com a

colorao e/ou precipitao.

7. Referncias bibliogrficas

Valter T.Motta. (2012). Bioquimica bsica. Analises clinicas, rio de janeiro.

Bioquimica-proteinas, acedido em 13/05/2016

http://www.scribd.com/doc/29031871/PROTEINAS-Reacoes-de-coloracao-eprecipitacao