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RESUMO
Introduo: Biomarcadores vem sendo utilizados para monitorar o uso do lcool e, atualmente, os mais
sensveis e especficos so enzimas hepticas, por exemplo, gama glutamiltransferase (GGT), alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e fosfatase alcalina (ALP). Objetivo: Verificar, a partir da
experimentao animal, as alteraes provocadas pelo uso de lcool e pela prtica de atividade fsica nas
enzimas hepticas e pancreticas. Mtodos: Vinte e quatro ratos da linhagem Wistar foram distribudos aleatoriamente em grupos experimentais, alojados em gaiolas com ambiente controlado, divididos de acordo
com os tratamentos recebidos. No tratamento inicial, foi administrado lcool aos grupos lcool sedentrio
(AS) e lcool exercitado (AE) e, ao final da quarta semana, iniciou-se o programa de treinamento fsico em
esteira com os grupos AE e controle exercitado (CE). A coleta de sangue foi realizada por puno cardaca ao
final de cada experimento. Na anlise estatstica, utilizou-se teste de anlise de varincia (ANOVA) seguido de
teste de Tukey e teste de Kruskal-Wallis. Resultados: O grupo AS apresentou valores significativamente mais
elevados de ALT e ALP quando comparado aos grupos CE e AE, respectivamente. No foram observadas
diferenas significativas entre os quatro grupos estudados para os parmetros AST, GGT e amilase. Concluso:
A associao entre consumo de lcool e sedentarismo aumentou a liberao das enzimas ALT e ALP em ratos
Wistar; a prtica de exerccio fsico aerbico aps abstinncia alcolica evitou o aumento da liberao de ALP
no plasma desses animais.
Descritores: alcoolismo/enzimologia, atividade motora, ratos Wistar.
ABSTRACT
Introduction: Biomarkers have been used to monitor the use of alcohol and currently the most sensitive and
specific are the liver enzymes, for example, gamma-glutamyl transferase (GGT), alanine aminotransferase (ALT),
aspartate aminotransferase (AST) and alkaline phosphatase (ALP). Objective: To determine through animal experiments the changes caused by alcohol and the physical activity in liver and pancreatic enzymes. Methods: Twenty-four
Wistar rats were randomly assigned into experimental groups, housed in cages with controlled environment, divided
according to the treatment received. In the initial treatment, alcohol was administered to sedentary alcohol (SA)
and exercised alcohol (EA) groups and at the end of the fourth week the program of physical training on a treadmill
began with the AE and control exercised (CE) groups. Blood collection was performed by cardiac puncture at the
end of each experiment. For the statistical analysis we used analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey test and
Kruskal-Wallis test. Results: The AS group had significantly higher values of ALT and ALP when compared to CE and
EA groups, respectively. No significant differences were observed between the four groups for the parameters AST,
GGT and amylase. Conclusion: The association between alcohol consumption and physical inactivity increased the
release of the enzymes ALT and ALP in Wistar rats; the practice of aerobic exercise after alcohol withdrawal prevented
the increased release of ALP in the plasma of these animals.
Keywords: alcoholism/enzymology, motor activity, rats, Wistar.
RESUMEN
Introduccin: Los biomarcadores se han utilizado para controlar el consumo de alcohol y en la actualidad las
enzimas hepticas son las ms sensibles y especficas, por ejemplo, gamma glutamil transferasa (GGT), alanina
aminotransferasa (ALT), aspartato aminotransferasa (AST) y fosfatasa alcalina (ALP). Objetivo: Determinar, a partir
de experimentos con animales, los cambios provocados por el alcohol y la actividad fsica en las enzimas hepticas
y pancreticas. Mtodos: Veinticuatro ratones Wistar fueron asignados al azar a los grupos experimentales, fueron
alojados en jaulas con ambiente controlado, divididos de acuerdo a los tratamientos recibidos. En el tratamiento
inicial, el alcohol se administr a los grupos alcohol sedentario (AS) y alcohol ejercicio (AE) y el final de la cuarta
semana, se inici el programa de entrenamiento fsico en una caminadora con los grupos AE y el control ejercitado (CE). La recogida de sangre se realiz mediante puncin cardiaca al final de cada experimento. En el anlisis
estadstico se utiliz el anlisis de varianza (ANOVA), seguido por la prueba de Tukey y la prueba de Kruskal-Wallis.
40
Resultados: El grupo AS tuvo valores significativamente ms elevados de ALT y ALP en comparacin con los grupos
CE y AE, respectivamente. No se observaron diferencias significativas entre los cuatro grupos para los parmetros de
AST, GGT y amilasa. Conclusin: La asociacin entre el consumo de alcohol y la falta de actividad fsica aumenta
la liberacin de las enzimas ALT y ALP en ratones Wistar; la prctica de ejercicio aerbico despus de la retirada del
alcohol impidi el aumento de la liberacin de ALP en el plasma de estos animales.
Descriptores: alcoholismo/enzimologa, actividad motora, ratas Wistar.
DOI: http://dx.doi.org/10.1590/1517-869220162201141536
INTRODUO
MATERIAL E MTODOS
41
p
0,357
0,029a
0,035b
0,828
0,270
0,405
CS=controle (sem lcool) sedentrio; CE=controle (sem lcool) exercitado; AE=alcolico exercitado; AS=alcolico
sedentrio; AST=aspartato aminotransferase; ALT=alanina aminotransferase; ALP=fosfatase alcalina; GGT-1=gama
glutamiltransferase; GGT-2=gama glutamiltransferase. Dados apresentados como mdia e desvio padro, (*)
dados apresentados como mediana e diferena interquartil. As diferenas significativas esto representadas
pelas letras: a vs Grupo CE; b vs Grupo CS e AE (ANOVA seguida de Teste de Tukey).
Valores expressos em U/L para os grupos controle (sem lcool) sedentrio (CS), controle (sem lcool) exercitado (CE), alcolico exercitado (AE) e alcolico sedentrio (AS). Cada box representa a mediana, primeiro
e terceiro quartis dos grupos, enquanto as linhas horizontais representam os valores mnimos e mximos
de cada grupo, () indica diferena significativa em relao ao grupo CE (p<0,05).
RESULTADOS
A Tabela 1 apresenta as comparaes realizadas entre todos os
grupos experimentais.
A Tabela 2 apresenta os resultados obtidos para os parmetros
bioqumicos estudados. O grupo AS apresentou valores significativamente mais elevados de ALT e ALP quando comparado aos grupos CE
e AE, respectivamente. No foram observadas diferenas significativas
entre os quatro grupos estudados para os parmetros AST e amilase.
As Figuras 1 e 2 apresentam a distribuio dos valores de ALT e
ALP nos grupos estudados, respectivamente. Foram observadas correlaes positivas e significativas entre as variveis ALT e AST (r=0,45;
p=0,026) e entre as variveis GGT1 e GGT2 (r=0,898; p<0,001), quando
comparadas de forma univariada. Entre as demais variveis no foram
observadas correlaes estatisticamente significativas.
Tabela 1. Efeito das comparaes experimentais.
Tratamento
AS x CS
AE x CE
AS x AE
CS x CE
AS x CE
AE x CS
42
Objetivo
Efeito do uso do lcool em animais sedentrios
Efeito da combinao lcool e atividade fsica comparada ao
efeito individual da atividade fsica
Efeito da combinao lcool e atividade fsica comparado ao
efeito individual do lcool
Efeito da atividade fsica nos animais
Comparao do efeito individual do lcool em animais
sedentrios e o efeito individual da atividade fsica
Comparao entre o efeito combinado do lcool e exerccio
com os animais sedentrios
Valores expressos em U/L para os grupos controle (sem lcool) sedentrio (CS), controle (sem lcool) exercitado (CE), alcolico exercitado (AE) e alcolico sedentrio (AS). Cada box representa a mediana, primeiro
e terceiro quartis dos grupos, enquanto as linhas horizontais representam os valores mnimos e mximos
de cada grupo, () indica diferena significativa em relao aos grupos CS e AE (p<0,05).
DISCUSSO
O principal resultado foi que o consumo de lcool durante quatro
semanas promoveu uma maior liberao das enzimas ALT e ALP nos
animais sedentrios. Alm disso, a prtica de corrida aerbica em esteira
por duas semanas evitou uma maior liberao plasmtica de ALP nos
ratos que consumiram lcool.
Observou-se que grupo de animais que recebeu etanol e permaneceu sedentrio (AS) no protocolo experimental apresentou
nveis mais elevados das atividades plasmticas das enzimas ALT e
ALP, quando comparado com os demais grupos estudados. Esses
dados permitem inferir que a associao do sedentarismo e consumo de lcool pode ter promovido uma maior liberao destas
enzimas para o plasma.
No h na literatura dados que demonstrem se existe uma relao
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direta entre a prtica de atividade fsica e a reduo das aminotransferases em etilistas, sendo que os nveis dessas enzimas variam de acordo
com mltiplos fatores, como o ndice de massa corporal e a idade2224.
Diversos autores3,6,7,10,11 tentam demonstrar os mecanismos envolvidos na injuria heptica causada pelo lcool que corroboram para a
elevao plasmtica das aminotransferases. O etanol oxidado no fgado at a forma de acetaldedo, que em excesso compromete a funo
de organelas dos hepatcitos, em especial as mitocndrias. A alterao
desse equilbrio entre meio interno e externo culmina com o processo
de morte celular e liberao das enzimas intracelulares para o plasma.
Outro mecanismo proposto que a ingesto crnica de etanol conduz
a uma diminuio de substncias antioxidantes produzidas no prprio
fgado, incluindo a superxido dismutase, catalase e enzimas da famlia
da glutationa, levando ao aumento de radicais livres que contribuem
com a leso heptica25.
Os dados do presente estudo mostram que a atividade da enzima
ALP foi significativamente mais elevada no grupo AS quando comparado com o grupo CS e AE. Acredita-se que haja relao entre a prtica
de exerccios aerbicos e a reduo da concentrao plasmtica de
lcool em ratos, o que resulta em menor agresso ao tecido heptico.
Os estudos realizados por Ardies et al.19 corroboram com essa teoria indicando que tanto o exerccio agudo quanto treinamento fsico
regular podem colaborar para o reduzir as taxas de etanol no sangue
pelo aumento de sua excreo urinria. A longo prazo, a atividade fsica
parece aumentar o metabolismo de etanol pelo sistema microssomal
heptico, sem alterar a atividade da enzima lcool desidrogenase heptica, grande responsvel pela formao de acetaldeido19,26.
Outros autores consideram que a prtica da atividade fsica regular
tem como propriedade a otimizao da capacidade antioxidante em
diversos tecidos do organismo, incluindo o fgado27,28. Estudos anteriores demonstraram que o treino de resistncia pode melhorar os nveis
previamente reduzidos de enzimas antioxidantes hepticas em ratos
tratados com lcool29.
Foi observado que a comparao dos nveis plasmticos de AST
entre os grupos do estudo no apresentou diferenas estatisticamente significativas. A anlise isolada da meia-vida da AST em relao
ALT, respectivamente de 17 e 47 horas, pode explicar, em parte, os
dados obtidos.
No presente estudo, os grupos que utilizaram lcool foram submetidos a duas semanas de abstinncia, portanto a meia-vida curta de AST
pode ter influenciado nos resultados. Torna-se importante considerar
tambm que as aminotransferases no so enzimas especficas do consumo do lcool e outras condies clnicas podem alter-las como
as hepatopatias de diferentes etiologias, miopatias e miocardiopatias.
Este estudo demonstrou elevaes na atividade plasmtica da
enzima ALP no grupo de animais que recebeu lcool e permaneceu
sedentrio (AS) durante protocolo experimental, quando comparado
com o grupo que permaneceu sedentrio sem ingerir lcool (CS) e
com o grupo que recebeu lcool e exercitou. Tais resultados sugerem
que nos dois grupos onde houve consumo de lcool houve menor
injria heptica naquele que praticou atividade fsica, em relao ao
grupo sedentrio.
A GGT tem alta sensibilidade no alcoolismo, sendo um dos principais marcadores utilizados no controle clnico de pacientes etilistas30, no entanto seus valores no se mostraram alterados nos grupos
durante o estudo. Apesar da correlao positiva e estatisticamente
significativa (r=0,898; p<0,001) observada entre os dois kits utilizados
para a dosagem de GGT, os valores obtidos neste estudo foram extremamente baixos, no apresentando diferenas significativas entre
os grupos estudados.
Rev Bras Med Esporte Vol. 22, No 1 Jan/Fev, 2016
CONCLUSES
Os resultados do presente estudo permitem concluir que a associao entre consumo de lcool e sedentarismo aumentou a liberao
das enzimas ALT e ALP em ratos Wistar; e a prtica de exerccio fsico
aerbico aps abstinncia alcolica evitou o aumento na liberao
plasmtica de ALP nestes animais.
AGRADECIMENTOS
AJ Natali bolsista de produtividade do Conselho Nacional de
Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq). LM Ribeiro bolsista de iniciao cientfica do Conselho Nacional de Desenvolvimento
Cientfico e Tecnolgico (CNPq).
Todos os autores declararam no haver qualquer potencial conflito
de interesses referente a este artigo.
43
Contribuies dos autores: Cada autor contribuiu individual e significantemente para o desenvolvimento deste artigo. TR (0000-0003-2254-3084)*, LMR (00000002-9932-1749)* e LML (0000-0001-5349-1577)* foram os principais contribuintes na redao do manuscrito; TR, ACSP (0000-0001-8486-0531)*, CAC (0000-00019539-8653)* e DNQC (0000-0002-0354-7269) realizaram a parte experimental, acompanhando os tratamentos com os grupos e realizando a eutansia; LML e CAC
realizaram as anlises laboratoriais e a anlise estatista dos dados; LML, AJN (0000-0002-4927-4024)* e ETP (0000-0002-4927-4024)* realizaram a reviso do manuscrito
e contriburam com o conceito intelectual do estudo. *Nmero ORCID (Open Researcher and Contributor ID).
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