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Introduo
Aumento da viabilidade
econmica: fermentao
de hexoses e pentoses
Microrganismos
Problemas de aplicao
escala industrial
Desvantagens da
modificao gentica
Composio da
biomassa de materiais
lignocelulsicos
celulose
hemicelulose
lignina
outros
Introduo
Glicose
Fermentao
industrial:
pH 4-5
T 30-35C
Isomerase(EC.5.3.1.5)
Aplicaes
Caractersticas
Deslocamento
do
GI:
5:1
pH 7-8
T 70C
equilbrio
D-xilose
D-xilulose
Introduo
Imobilizao
Recuperao e
reutilizao
Quitosana
Glutaraldedo
Aumento da estabilidade
trmica
Imobilizao estvel:
altas taxas de enzima no
reator
Objetivo
Mtodos
1)
Soluo
Soluo
a 50C
Sol. +
Quitosana
coagulada
+
Glutaraldedo
0,8% (v/v);
Agitao a
50C por
30min
+ KOH
0,5M
(3:2) em
agitao
por 30min
Suporte
Filtrao sob
vcuo e
lavagem
Imobilizao de glicose-isomerase
Extrato de enzima +
tampo
Retirada de amostra
para controle
Adio de suporte na
proporo m/v 1:10,
sob agitao a 150
rpm
Testes: Tempo de
imobilizao 3, 24
e 43h; Carga de
enzimas 30, 50 e
70 mgenzimag-1suporte
Determinao da
atividade enzimtica
e concentrao
proteica
Adio de hidroborato
de sdio (1 mgmL-1)
por 30min
Filtrao vcuo e
lavagem dos derivados
Armazenagem dos
derivados em tampo
TRIS-maleato 50mM,
pH 7
Eletroforese
Isomerizao de xilose
Centrifugao;
filtrao;
determinao do teor
de umidade
Sol. 1% Alginato
de sdio
Levedura +
quitosanaglutaraldedo
contendo glicose
isomerase
imobilizada (IGI-Ch)
Sol. 5% Alginato
de sdio
Sol. 13%
Alginato de
sdio
Suspenso + 0.25 M
CaCl2/0.25 M MgCl2
Partculas esfricas
(=1-1,5mm)
Partculas curadas em
refrigerador por 18-20h
Isomerizao e fermentao
simultnea da xilose
Concentrao de protena:
Refratometria e HPLC;
30 mg
protena/g suporte
50 mg
protena/g suporte
70 mg
protena/g suporte
Protenas de menor
peso molecular
SGI e IGI-Ch;
Para T fixo de 60 C pH de 5 a 9;
Estabilidade da GI:
SGI e IGI-Ch a 80 C;
0 a 70 g/L.
pH 5, 35 C, 150 rpm
GI solvel e imobilizada;
% de atividade inicial.
Temperatura
pH 5, temperatura ~ 30C
Alta carga de enzimas.
Suporte extremamente ativado.
pH
Inativao trmica
GI imobilizada
com levedura
GI imobilizada
GI solvel
etanol
xilitol
xilulose
Optimizao do processo
Controle de pH.
Concluses
Derivado
de
IGI-Ch
catalisa
a
isomerizao
xilose/xilulose (pH=5, T= 30-35C) ao contrrio da GI
solvel.
Concluses
Viabilidade industrial:
Obrigado.