Espectroscopia Infrarroja

Análisis Instrumental

Universidad Autónoma de Zacatecas

Área de Ciencias de la Salud
Unidad Académica de Ciencias Químicas
Químico Farmacéutico Biólogo

REPORTE DE PRÁCTICA DEL LABORATORIO DE ANALISIS QUIMICO

INSTRUMENTAL
(Química analítica III)

PRACTICA 10

PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS EN ESPECTROSCOPÍA INFRARROJA

*Calderón Ríos N., *López Arellano A., *Flores Ramírez María Guadalupe
Dra. Solís Recendez M. G.

*4°Semestre Grupo “C” Programa educativo Q.F.B. UACQ, ACS, Campus UAZ Siglo
XXI, carretera Zacatecas-Guadalajara Km 6 s/n ejido La Escondida Cp. 98160
Zacatecas Zac. Ciclo enero junio 2010

Martes 4 de mayo 2010-lunes 10 de mayo 2010

RESUMEN

Conocimos el funcionamiento de un espectrofotómetro de infrarrojo y la forma de

preparar las muestras además de analizar el espectro de absorción de una sustancia
muestra, estudiamos los principios básicos de la cromatografía de gases en acoplado con un
espectro de masas o detector másico que es como se utiliza comúnmente para así tener
mayor eficiencia de resultados al analizar muestras.

Palabras clave: espectroscopia IR, Infrarrojo, preparación de muestras, cromatografía de

gases.

INTRODUCCIÓN

ESPECTROSCOPÍA DE INFRARROJO
Es una técnica analítica instrumental que permite conocer los principales grupos
funcionales de la estructura molecular de un compuesto. Esta información se obtiene a partir
del espectro de absorción de dicho compuesto al haberlo sometido a la acción de la radiación
infrarroja en el espectrofotómetro. La región del espectro IR normal queda comprendida entre
2.5µ a 15µ, medido en unidades de longitud de onda, que corresponde a 4000 cm-1 y 666
cm-1 respectivamente si se expresa en número de onda (que es el inverso de la longitud de
onda, cm-1)
Características de un espectro
El espectro de infrarrojo de un compuesto es una representación gráfica de los valores de
onda (µ) o de frecuencia (cm-1) ante los valores de % de transmitancia (%T).La absorción de

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radiación IR por un compuesto a una longitud de onda dada, origina un descenso en el %T, lo
que se pone de manifiesto en el espectro en forma de un pico o banda de absorción.
A continuación se muestran cuatro técnicas espectroscópicas o técnicas relacionadas que
servirán como herramientas para la determinación de estructuras en química orgánica:
1. La espectroscopia infrarroja (IR): se debe a las vibraciones de los enlaces y proporciona
información de los grupos funcionales presentes.
2. Espectrometría de masas (EM): se bombardean moléculas con electrones y otras
partículas, rompiéndose las moléculas. El análisis de las masas de los fragmentos da
información sobre la masa molecular, permite conocer la fórmula molecular y da pauta sobre
la estructura y los grupos funcionales presentes.
3. Espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN): se permite determinar el entorno
que rodea a los átomos de hidrogeno (o a los átomos de carbono), y proporciona información
sobre la estructura de los grupos alquilo y claves sobre la presencia de grupos funcionales.
4. Espectroscopia ultravioleta (UV): se basa en las transiciones electrónicas y proporciona
información sobre el tipo y la naturaleza (electrónica) de los enlaces en la molécula de la
muestra. [1]
Manipulación de la muestra
En la espectroscopia infrarroja no existen buenos disolventes que sean transparentes en
toda la región espectral de interés. Como consecuencia, la manipulación de la muestra es,
con frecuencia la parte más difícil de este análisis.
Gases
El espectro de un líquido de bajo punto de ebullición o de un gas se puede obtener
permitiendo a la muestra que se expanda en una cubeta cilíndrica en la que se ha hecho el
vacío, equipada con las ventanas adecuadas. Para este fin se dispone de una variedad de
cubetas cilíndricas con caminos ópticos que oscilan entre pocos cm y 10 o más metros. Los
caminos ópticos más largos se obtienen en cubetas compactas provistas de superficies
internas reflectantes de modo que el haz pasa numerosas veces por la muestra antes de salir
de la cubeta.

Disoluciones
Siempre que sea posible es mejor
obtener el espectro Ir de una
disolución sin embargo esta técnica se
limita en cuanto a sus aplicaciones por
la disponibilidad de disolventes que
sean transparentes en las regiones
del IR importantes.

Cubetas

Debido a la tendencia de los disolventes a

absorber, las cubetas para el IR suelen ser
más estrechas (0.1 a 1m) que las de UV-VIS.

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Son cubetas desmontables con espaciadores de teflón que permiten variar la longitud del
camino óptico, las de camino óptico fijo se pueden llenar o vaciar con una jeringa
hipodérmica. Las ventanas de NaCl son las más utilizadas; se deslustran con la humedad por
lo que hay que conservarlas en un desecador.

Líquidos puros.
Cuando la cantidad de muestra es pequeña o cuando no se dispone del disolvente
apropiado, es habitual obtener los espectros del líquido puro. En este caso, sólo una
película muy delgada tiene un camino óptico suficientemente corto como para producir
espectros satisfactorios. Por lo común, una gota del líquido puro se comprime entre dos
placas de sal de roca para obtener una placa con un grosor de 0.01 mm o menos. Las
dos placas, se mantienen unidas por capilaridad, y se colocan entonces en la trayectoria
del haz. Sin duda, con esta técnica no se obtienen datos de transmitancia muy
reproducibles, pero resultan satisfactorios para muchas investigaciones cualitativas.
Sólidos
Una de las técnicas más popular de manipulación de las muestras solidas es la
formación de pastillas de KBr (también se han utilizado otros metales alcalinos)
Formación de la pastilla. La muestra solida homogeneizada con el KBr, se deposita en
la pastilladora, con el fin de comprimirla durante 5 minutos a una presión de 5000 Kg/cm2. En
tales condiciones el KBr se vuelve muy plástico, y fluye hasta formar un disco claro y
transparente en la región de 4000 a 400 cm-1. Así las absorciones de la radiación infrarroja
solo pueden atribuirse a los grupos funcionales de la muestra.
Tiene aplicaciones cualitativas como cuantitativas
Muchas especies moleculares orgánicas e inorgánicas absorben en el IR podemos así
determinar un número extraordinario de sustancias ejemplo: Análisis de una mezcla de
hidrocarburos aromáticos, análisis de especies moleculares inorgánicas, determinación de
contaminantes del aire. Espectroscopia de reflexión interna para determinar películas, fibras,
pastas, adhesivos y polvos. (Forense).Espectroscopia infrarroja foto acústica se ha utilizado
para el control de contaminantes gaseosos en la atmósfera. [2]

Cromatografía de gases (GC)

Fundamentos y principios básicos
La idea de esta técnica se basa en la volatilización de la muestra y su posterior inyección en
la cabeza de una columna cromatográfica. Para la elución de la muestra se usa un gas inerte
como fase móvil, de esta manera la fase móvil no interacciona con las moléculas del analito,
simplemente transporta el analito a través de la columna. Existen dos tipos de cromatografía
de gases (GC):
Cromatografía gas-sólido (GSC):
La fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos se produce mediante
adsorción.
Cromatografía gas-líquido (GLC): la fase estacionaria son moléculas de líquido inmovilizadas
sobre la superficie de un gas inerte. Esta es
la que se usa más ampliamente.
GSC la fase estacionaria es sólida y la
retención de los analitos en ella se produce
mediante el proceso de adsorción.
Precisamente este proceso de adsorción,
que no es lineal, es el que ha provocado
que este tipo de cromatografía tenga
aplicación limitada, ya que la retención del
analito sobre la superficie es
semipermanente y se obtienen picos de

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elución con colas. Su única aplicación es la separación de especies gaseosas de bajo peso
molecular.
La GC es un sistema compuesto de gas portador, sistema de inyección de muestra, columna
(generalmente dentro de un horno), y detector. [3]

MATERIALES Y METODOS
Para realizar la practica utilizamos un equipo espectrofotométrico infrarrojo Perkin-Elmer
modelo 1320 con una celda desmontable de infrarrojo para muestras líquidas, El principal
inconveniente que puede presentarse en la interpretación del espectro infrarrojo es la
presencia de humedad en las muestras, el agua produce bandas anchas que solapan a las
otras absorciones. Otro inconveniente importante es la elevada facilidad con la que se tornan
opacas las celdas de NaCl, KBr o CsI, por la presencia de humedad. Altos porcentajes de
humedad relativa en el medio ambiente, pueden causar daños severos a la óptica del
espectrofotómetro. Primeramente se saco la celda del desecador luego se le inyecto la
muestra con una aguja hipodérmica teniendo cuidado de no dejar burbujas, En cualquier tipo
de preparación las absorciones deben estar ajustadas entre 80-85% de %T ya que si en un
espectro se observan algunas bandas saturadas, que se cuadran en su porción inferior, en
tanto que los demás grupos funcionales de la muestra generan picos de concentraciones
adecuadas, será necesario correr a menor concentración las zonas que muestran saturación
para así lograr la interpretación espectral de toda la molécula. Calibramos el aparato con una
lámina de poliestireno, las delgadas absorciones producidas por una lámina de poliestireno,
son adecuadas para verificar si los números de onda, que se muestran en las graficas
generadas en los espectrofotómetros dispersivos, guardan buena relación con la radiación
absorbida. Generalmente se emplea el pico de 1601 cm-1, pero pueden usarse 2850 o 906
cm-1.Despues ajustamos el papel que comience en 4000cm-1, también ajustamos el tiempo de
corrida a 12 minutos y esperamos mientras el espectro se va construyendo.
Para la segunda parte de la practica fue necesario trasladarnos de laboratorio para
conocer el equipo de cromatografía de gases que esta acoplado a un espectrofotómetro de
masas el equipo era un Hp-6890 series GC System acoplado a un Hp-5973 Mass Selective
Detector, es un equipo de cromatografía de columna, esta vez se utilizo una columna de sílice
fundido de 0.25mm de diámetro y 30m de largo, es de tres cámaras con fuente de electrones
de alta energía que pasan atraves de los átomos y los ionizan o los fragmenta, la carga pasa
por un campo magnético, si los fragmenta el detector señala la trayectoria formando un
cromatograma que contiene los picos Gaussianos que nos indican tanto datos cualitativos por
la posición del pico y cuantitativos por el área bajo la curva y en base a esto referenciado a
una biblioteca interna señala cual es el posible compuesto que contenía la muestra el equipo
utiliza gas Argón 99.999% puro como gas de arrastre, además controla la temperatura y el
flujo de gas y cantidad de muestra, que es añadida con una aguja para cantidades en micro
litros.

RESULTADOS

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A continuación se presenta el espectro de absorción en infrarrojo del compuesto de fórmula

condensada C3H7ON

Asignación de picos

La N,N-dimetilformamida es un compuesto orgánico de fórmula (CH3)2-N-CHO.

Comúnmente abreviado como DMF, este líquido incoloro es miscible en agua y la mayoría de

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componentes orgánicos. El DMF es utilizado como disolvente para reacciones químicas. La

dimetilformamida pura es inolora, mientras que si está degradada presenta un cierto olor a
pescado debido a la impureza de la dimetilamina. Su nombre proviene del hecho de ser un
derivado de la formamida, la amina del ácido fórmico.

DISCUSION

Al conocer los fundamentos de la espectroscopia Infrarroja se abre un gran camino de

posibilidades dentro del análisis químico ya que comprobamos que es una herramienta básica
para realizar determinaciones principalmente cualitativas aunque como vimos también es
posible algunas determinaciones cuantitativas , en esta ocasión solo lo utilizamos para saber
que compuesto contenía una muestra problema y el funcionamiento del equipo además
particularizamos en la preparación de muestras liquidas porque como se vio anteriormente
utilizamos una de este tipo en el desarrollo del análisis.

El proceso cromatográfico, aparentemente simple en práctica, es en realidad una

compleja unión de fenómenos tales como hidrodinámica, cinética, termodinámica, química de
superficie y difusión. La columna es el lugar donde ocurre la separación. Se dice que es el
corazón de un cromatógrafo. Un detector es un dispositivo para revelar la presencia de las
sustancias eluídas a la salida de la columna cromatográfica. Podemos expresar que el
detector son los "ojos" de un cromatógrafo.
El Detector es un dispositivo capaz de convertir una propiedad física, no medible
directamente, en una señal elaborable y ofrecernos información sobre la naturaleza y
magnitud de la propiedad física.

CONCLUSION

La espectroscopia infrarroja es ampliamente usada en investigación y en la industria

como una simple y confiable práctica para realizar mediciones, control de calidad y
mediciones dinámicas. Los instrumentos son en la actualidad pequeños y pueden
transportarse fácilmente, incluso en su uso para ensayos en terreno. Algunas máquinas
indican automáticamente cuál es la sustancia que está siendo medida a partir de miles de
espectros de referencia almacenados.
Las máquinas modernas de investigación pueden tomar mediciones infrarrojas a lo largo de
todo el rango de interés. Esto puede realizarse mientras se realizan mediciones simultáneas
usando otras técnicas. Esto hace que la observación de reacciones químicas y procesos sea
más rápida y precisa.
Con el espectro infrarrojo determinamos que el compuesto ____________________ era el
que contenía la muestra.
La N,N-dimetilformamida es un compuesto orgánico de fórmula (CH3)2-N-CHO.
La GC tiene dos importantes campos de aplicación. Por una parte su capacidad para
separar mezclas orgánicas complejas, compuestos organometálicos y sistemas bioquímicos.
Su otra aplicación es como método para determinar cuantitativa y cualitativamente los
componentes de la muestra. Para el análisis cualitativo se suele emplear el tiempo de
retención, que es único para cada compuesto dadas unas determinadas condiciones (mismo
gas portador, rampa de temperatura y flujo), o el volumen de retención. En

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aplicaciones cuantitativas, integrando las áreas de cada compuesto o midiendo su altura, con
los calibrados adecuados, se obtiene la concentración o cantidad presente de cada analito.

“La espectroscopia infrarroja y la cromatografía de gases acoplada a un detector

másico hacen un gran equipo en la detección, cuantificación y determinación de
analitos en muestras problema”

BIBLIOGRAFIA

http://www.scribd.com/doc/14175170/2-ESPECTROSCOPIA-INFRARROJA[1]
Skoog A. D, Holler J. F, Nieman T .A. Principios de Análisis instrumental, 5a edición, capitulo
17 pp 435-440 Grupo editorial Mc Graw Hill/ Interamericana de España, Aravaca (Madrid),
2001. [2]
Mc Master, Marvin (1994) HPLC: A Practical User's Guide. Wiley-VCH. [3]

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