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DG = DH - TDS
- La energa libre de Gibbs es un criterio vlido para verificar
la espontaneidad de una reaccin. Pueden cursar espontneamente aquellos procesos en los que se desprende energa libre,
exergnicos, (DG < 0). No pueden hacerlo, sin embargo,
aquellos procesos en los que se absorbe energa libre,
endergnicos (DG > 0)
Sea un sistema
La reaccin cursar de izquierda a derecha cuando las concentraciones de A y B sean tales que la energa libre del sistema sea
negativa. La energa libre del sistema viene dada por:
DG =
DG0
+ RT ln
[B]
[A]
Ejemplo:
Calcular la energa libre del proceso de descomposicin del
ster Glucosa-6-fosfato a Glucosa y fosfato inorgnico en las
condiciones intracelulares, que son:
Temperatura: 37 C, equivalentes a 310 K
[Glucosa-6-fosfato], 1 mM
[Glucosa], 0.01 mM
[fosfato], 10 mM
La Energa Libre Standard de la reaccin es de -3250 cal/mol
La reaccin es:
G6P + H2O
G + Pi
DG0
+ RT ln
[Glucosa] [Fosfato]
[Glucosa-6-fosfato]
Sustituyendo, obtenemos:
DG = -3250 + 1.98*310*2.303* log
10-5*10-3
= -8900 cal/mol
10-2
Por lo tanto, en las condiciones intracelulares el
proceso puede tener lugar espontneamente.
DG0
+ RT ln
[B]
[A]
DG0
[Beq]
+ RT ln [A ]
eq
Estructuras complejas
Catabolismo
DG
Estructuras simples
Anabolismo
A+B
A-B
(DG > 0)
As, la reaccin
A+B
A-B
(DG1 > 0)
Se acopla a
X-Y + H2O
Siendo
X + Y (DG2 < 0)
A + B + X-Y + H2O
A-B + X + Y
(DG < 0)
El tipo de reaccin
X-Y + H2O
X + Y (DG2 < 0)
Que tiene lugar en los seres vivos para acoplarse a procesos endergnicos es, en la mayora de los casos, la hidrlisis de anhdridos
de cido, y particularmente, la hidrlisis de polifosfatos :
R O P O P O- + H2O
O-
O-
R O P OH + HO P OO-
O-
NH2
N
O
-
O P O P O P O CH2
-
OH
OH
Los dos enlaces anhdrido del polifosfato del ATP son el ejemplo
de configuraciones de alta energa de hidrlisis:
O
O P O P O P O R
O-
O-
O-
O-
Fosfoenolpiruvato
CH3
O
C CH2
-
N C NH P ONH
Fosfocreatina
O-
H2N C O P O-
O
R C
S CoA
O-
Carbamilfosfato
Tiosteres de Coenzima A
C6H12O6 + 6O2
6CO2 + 6H2O
Energa
Ea
G + O2
DG0
CO2 + H2O
Coordenada
de reaccin
Introduccin a la Enzimologa
Catlisis
Ea
Ea
DG
DG
Reaccin
no catalizada
Reaccin
catalizada
Lisozima y su
substrato
EI
Cofactor (Coenzima):
tomo, ion o molcula que participa en el proceso
cataltico sin ser enzima ni substrato.
Aminocido
LAO
R CH COO- + O2 + H2O
Cetocido
R CO COO- + H2O2 + NH4+
NH3+
H3C
NH
NH
N
L-Lactato
Piruvato
COOC O
COO-
LDH
HO C H
CH3
CH3
NADH + H+
NAD+
Especificidad absoluta:
COOCH
CH
COOFumarato
(trans-)
H 2O
COOHO CH
CH2
COOL-Malato
Enzima:
Fumarato hidratasa
Especfica para el
ismero trans- por
un lado y para el
L- por otro.
Especificidad de grupo:
R CO O R' + H2O
R COOH + HO R'
Esterasa
O
R C O R'
OR C O R'
O-
Substrato: un ster
Estado de transicin:
intermediario tetradrico,
inestable
O
R C O
HO R'
Productos
R P O R'
O-
Nombre sistemtico:
Grupo transferido
Aceptor
Grupo Subgrupo
Nmero sistemtico
Enzyme
Comission
EC 2.7.1.1
Sub-subgrupo
Enzima
1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
Clasificacin de enzimas:
Grupos
[ ]
d[ ]
v = dt , t -> 0
1. Concentracin de enzima
2. Concentracin de substrato
3. pH
4. Temperatura
5. Efectores (Activadores e Inhibidores)
.
..
.
.
.
.
.
.
.
.
[E]
S
Una cintica lineal implica
un proceso regenerativo,
cclico
ES
E
EP
Ciclo cataltico
de una enzima
.
.
.
.
.
.
.
[s]
E+S
k+1
k-1
ES
k+2
E+P
E+S
k+1
ES
k+2
E+P
k-1
s = [S]
x = [ES]
e = [E]
e0 = [ES] + [E] = x + e
E+S
k+1
ES
k+2
E+P
k-1
No admite solucin analtica. Para describirlo recurrimos a:
- Simulaciones numricas
- Hiptesis que lo simplifiquen
E+S
k+1
k-1
ES
k+2
E+P
E+S
k+1
ES
k+2
E+P
k-1
- La primera parte del mecanismo,
k+1
E+S
ES
k-1
Tiene lugar mucho ms rpidamente que la segunda:
ES
k+2
E+P
Hiptesis de
Michaelis-Menten
E S es e0 xs
Km
ES x
x
Equilibrio rpido
e0 s
x
Km s
v k2 x
k 2 e0 s
v
Km s
Vmax s
v
Km s
k2e0 Vmax
dx
0 k 1es k 1 k 2 x
dt
k1es k1 e0 xs k1 k2 x
e0 s
e0 s
x
k 1 k 2
Km s
s
k 1
Vmax s
v
Km s
v k2 x
k2e0 Vmax
Hiptesis de
estado estacionario
v=
Vmaxs
Km + s
Significado de la constante Km
1. Constante de equilibrio de disociacin del complejo ES
(en condiciones de equilibrio rpido)
2. Medida inversa de la afinidad de la enzima por el substrato
(en condiciones de equilibrio rpido)
Representacin directa
Vmax
100
80
60
Vmx s
v
Km s
40
20
s
0
0
20
Km
40
60
80
100
1/v
0.03
1/Vmax
-1/Km
0.02
1 Km 1 1
v Vmx s Vmx
0.01
0.00
-0.4
-0.2
0.0
0.2
0.4
0.6
1/s
Efecto del pH
v
pH
Efecto del pH
NH
-
H3N
COO
Arg
NH
CH2
CH
CH2
COO+
H3N
Lys
CH
Succinato y
centro activo de SDH
pH 7
NH
+
H 3N
COOH
NH
CH2
CH
CH2
COOH
+
H 3N
CH
Succinato y
centro activo de SDH,
pH 2
NH
C
COO-
H2N
NH
CH2
CH
CH2
COOH2N
CH
Succinato y
centro activo de SDH,
pH 13
Efecto de la temperatura
v
k = A exp (-Ea/RT)
2. Desnaturalizacin trmica de la protena
Inhibicin enzimtica
Inhibidor:
Efector que hace disminuir la actividad enzimtica, a travs de
interacciones con el centro activo u otros centros especficos
(alostricos).
Esta definicin excluye todos aquellos agentes que inactivan a
la enzima a travs de desnaturalizacin de la molcula enzimtica
De esta forma, habr dos tipos de inhibidores:
I. Isostricos: ejercen su accin sobre el centro activo
II. Alostricos: ejercen su accin sobre otra parte de la
molcula, causando un cambio conformacional con
repercusin negativa en la actividad enzimtica.
EI
ES + I
ESI
E+I
Inhibicin reversible
(a) El inhibidor se fija al centro activo de la enzima libre,
impidiendo la fijacin del substrato: Inhibicin Competitiva
S
E
ES
E+P
I
Inhibicin
Competitiva
EI
Las fijaciones de substrato e inhibidor son
mutuamente exclusivas; el complejo EI no es productivo
S
E
ES
Inhibicin
No Competitiva
S
EI
E+P
ESI
S
E
ES
E+P
I
Inhibicin
Acompetitiva
ESI
El inhibidor slo puede fijarse al complejo ES;
el complejo ESI no es productivo
Inhibicin Competitiva
S
E
ES
E+P
I
EI
[E] [I]
Ki =
[EI]
Caractersticas:
- Las fijaciones de substrato e inhibidor son mutuamente exclusivas
- A muy altas concentraciones de substrato desaparece la inhibicin
- Por lo general, el inhibidor competitivo es un anlogo qumico del
substrato.
- El inhibidor es tan especfico como el substrato
(e0 x y ) s
Km
x
(e0 x y )i
Ki
y
Que resuelto para x nos da
e0 s
x
i
Km 1 s
Ki
De donde
Vmx s
v
i
Km 1 s
Ki
Representacin directa
Inhibicin competitiva
120
100
80
60
40
20
s
0
0
20
40
60
80
100
120
1/v
0.06
0.05
0.04
1/Vmax
0.03
0.02
-1/Km
0.01
1/s
0.00
-0.3
-0.2
-0.1
0.0
0.1
0.2
-1/(Km(1 + i/Ki))
0.3
0.4
0.5
0.6
Inhibidores
competitivos
Succinato deshidrogenasa
COO-
FAD
FADH2
COO-
CH2
CH
CH2
CH
COOSuccinato
SDH
COOCH2
COOMalonato
COO-
COO-
Fumarato
C O
CH2
COOOxalacetato
COOInhibidores competitivos
como nalogos estructurales
del substrato
CH2
CH2
COOSuccinato
COOC O
CH2
COO-
Oxalacetato
O
H2N
C
O-
H2N
S NH2
O
4-aminobenzoato
4-aminobenceno
sulfonamida
H 2N
N
H
CO OH
OH
CH2
c. Flico
CH2
C NH C H
O
COOn
H 2N
N
CH3
CO OH
CH2
Methotrexate
CH2
C NH C H
O
COOn
O
CH3
HN
O
Anlogos de base
NH
Timina
O
Br
HN
O
NH
5-Bromouracilo
NH2
Anlogos de
nuclesido
O
HOCH2
Citidina
OH
OH
NH2
O
HOCH2
N
OH
OH
Citosina
arabinsido
O
O2N
N+ CH3
H3C
N+ CH3
OH
O2N
HO
O-
O
P
Estado de transicin
CH3
O
O2N
Susbtrato
CH3
O-
O2N
H3C
H3C
O
N+ CH3
Productos
CH3
H3C
N+ CH3
CH3
Anlogo de
estado de transicin
Estado de
transicin
Substrato
Anlogo de
estado de transicin
Aspartato
transcarbamilasa
COOH 2C
-
NH2
NH
OOC
OO
O P O-
Estado de
transicin
O-
COOO
H 2C
-
NH
OOC
CH2
O P OO-
Anlogo de
estado de transicin:
N-fosfonoacetil L-aspartato
(PALA)
Angiotensingeno
Hipotensin,
hipovolemia,
ortostatismo
Renina
Angiotensina I
DRVYIHPFHL
Enzima convertidora
de Angiotensina, ECA
HL
Angiotensina II
DRVYIHPF
R
HN
CH COO-
C O
R'
C H
NH
HO C
C
O
Zn2+
Estado de transicin
de la ECA
CH COO-
C O
H 3C C H
H C
H
S
Zn2+
Captopril
Enalapril
Ramipril
Inhibicin Irreversible
- Los inhibidores irreversibles reaccionan con un grupo
qumico de la enzima, modificndola covalentemente
- Su accin no se describe por una constante de equilibrio Ki,
sino por una constante de velocidad ki:
E+I
4. Metales pesados
Yodoacetato
ICH2 COO-
E SH
IH
E S CH2 COOO
E SH
N CH2 CH3
O
N CH2 CH3
E SH
COO-
p-Hidroximercuribenzoato
E S Hg
COO-
(d) Oxidantes
Promueven la oxidacin de dos tioles a un disulfuro
Organofosfricos
Ser CH CH2
H3C
OH
Ser CH CH2
H3 C
CH3
CH
P O
CH
H3 C
CH3
DFP:
diisopropil
fluorofosfato
CH3
CH
O P O
CH
H3C
CH3
Substratos suicidas
(Inhibidores activados enzimticamente)
- Se trata de molculas que se unen al centro activo de manera
especfica, igual que el substrato o los inhibidores competitivos
E+I
EI
EI*
E + I*
Penicilina (activa)
S
R CO NH
CH3
CH3
N
O
COO-
b-Lactamasa
R CO NH
O C HN
O-
CH3
CH3
COO-
c.peniciloico (inactivo)
CH2OH
C
b-Lactamasa
C
O-
HN
CH2OH
C
H
COO
COO-
c.clavulnico
C
CH CH2
Ser
HN
CH2OH
C
H
COO-
Esta molcula
reacciona con la
serina activa de la
b-lactamasa,
produciendo su
inactivacin
Noradrenalina
HO
HO
O2 + H2O
Monoamino
oxidasa
NH3 + H2O2
HO
HO
CHOH CHO
Dihidroxifenilglicol
O
H3C
E S H2C
NH
N
Flavina
Inhibicin suicida de la
MAO mediante Pargilina
Selegilina
(antiparkinsoniano
y antidepresivo)
N,N dimetil
propargilamina
(pargilina)
CH3
HC C CH N
CH3
H3C
N+
CH CH
H3C
CH
H3C
E S H2C
N
R
Flavina modificada
O
NH
NH
Cofactor (Coenzima):
tomo, ion o molcula que participa en el proceso
cataltico sin ser enzima ni substrato.
Tiamina pirofosfato
Flavinas: FAD, FMN
Piridoxal fosfato
Coenzimas cobamdicos
Ac. Ascrbico
NAD+, NADP+
Lipoamida
Coenzimas folnicos
Pantetenas (CoA, p.e.)
B1
B2
B6
B12
C
PP
2. Liposolubles
Naftoquinonas
g-Carboxilacin
Hemoenzimas, citocromos
Ferredoxinas
Tr.electrnico mitocondrial y fotosinttico
Redox; transporte de aminocidos
Transf.de fosfato y/o de energa
Transf.de grupos glicosdicos
Transf.de grupos sulfato
Transf.de grupos metilo
Transportador de grupos acil-
vit. A
vit. D
vit. E
Cofactores redox
Operan en procesos de transferencia electrnica, a veces
como aceptores, a veces como donadores.
- Cofactores piridnicos (NAD+, NADP+)
- Cofactores flavnicos
- Cofactores hemnicos
- Ferredoxinas
- Quinonas
- c. Ascrbico
- c. Lipoico
- Glutatin
CONH2
+
N
O
CH2
OH
OH
O
O-
NAD+
O P O P O CH2
O-
NH2
N
H
OH
OH
O
CH2
OH
OH
O
NADP+
O P O P O CH2
O-
NH2
O-
H
OH
O
-
O P O
O-
NAD+, NADP+
(Formas oxidadas)
CONH2
N
NADH, NADPH
(Formas reducidas)
H
CONH2
AH2
AH2 + NAD(P)+
A + H+
A + NAD(P)H + H+
Flavina (Isoaloxazina)
O
Riboflavina
(vit. B2)
H 3C
H 3C
NH
N
CH2
H C OH
Ribitol
H C OH
H C OH
CH2
O P OO-
Fosfato
O
H 3C
H 3C
NH
N
CH2
H C OH
H C OH
H C OH
CH2
O P O P O CH2
-
NH2
H
H
H
H
OH
OH
O
H 3C
H 3C
N
N
NH
N
Forma oxidada
O
H 3C
H 3C
Semiquinona
(Radical libre)
NH
NH
O
H 3C
H 3C
NH
N
NH
NH
Forma reducida
CH2
H3C
H3C
N
-
OOC CH2
CH
CH2
CH3
Fe++ N
CH CH2
H2C
CH2
COO-
CH3
Citocromos
Son protenas de tamao pequeo, que operan como
transportadores monoelectrnicos debido a una transicin
Fe2+
Fe3+
Citocromo c
Cofactores quinnicos
Quinona
OH
OH
Hidroquinona
AH2
O
CH3
CH3
CH3
CH3
Ubiquinona (Coenzima Q)
OH H
H2 C C
OH H
H2 C C
O
O
O
O
HO
HO
HO
OH
cido Ascrbico
(vit. C)
AH2
COOH
S
c. Lipoico
Lipoamida
CO
AH2
NH
CO
SH
NH
SH
Dihidrolipoamida
CH
Lys
CH
Lys
Glutatin: g-Glu-Cys-Gly
(forma reducida, GSH)
g-Glu-Cys-Gly
S
COO-
COO-
H3N C H
H3N C H
g-Glu-Cys-Gly
CH2
CH2
CH2
CH2
CO NH CH CO NH CH2 COOH
CO NH CH CO NH CH2 COO-
CH2
CH2
SH
S
S
CH2
CO NH CH CO NH CH2 COO-
2GSH + A
GSSG + AH2
CH2
CH2
H3N C H
-
COO
Glutatin:
forma oxidada, GSSG
CH2 CH2OH
H3C
CH2 N
N
H3C
H 3C
CH2 N
O-
CHO
HOH2C
OH
N
CH3
CHO
O
O P O-
HOH2C
ON
CH3
Piridoxal fosfato
CHO
O P O-
HOH2C
CH2NH2 O
O P O-
HOH2C
O-
ON
CH3
Piridoxal fosfato
CH3
Piridoxamina fosfato
Pteridina
H 2N
N
H
CO OH
OH
CH2
CH2
4-amino
benzoico
C NH C H
O
COOn
c. Flico
Poliglutamato
H 2N
N
H
CO OH
OH
CH2
c. Flico
CH2
C NH C H
O
COOn
Folato
reductasa
c.Tetrahidroflico, THF
Methotrexate
H 2N
H 2N
NH
H
H
N
NH
NH
CO OH
OH
CO OH
OH
CH2
CH2
CH2
CH2
C NH C H
O
C NH C H
COO
c.Dihidroflico, DHF
DHF Reductasa
COOn
H 2N
N
N
NH
N
OH
H 2C N
CO
OH
CH2
CH2
C NH C H
O
COOn
H 2N
NH
H
N
OH
CO OH
C
H
CH2
O
CH2
C NH C H
N5 Formil THF
COOn
CH2CONH2
H
H 3C
CH3
NH2COCH2
NC
Co+
N
H 3C
NH2COCH2CH2 CH3 H
NH2COCH2
CH2CH2CONH2
CH3
N
N
H 3C
CH2CH2CONH2
CH3
H
CH2
CH3
N
CH3
CH2
N
CH3
CO
O
OH
NH
H
OH
CH2
P
H 3C
CH
O
H
CH2OH
Cobalamina
(vit. B12)
HN
Biotina
NH
COOH
CO2
O
HO
C N
NH
Carboxibiotina
S
COOH
OC
HN
CH R
NH
HN
S
Biotinil- protena
CO
NH
CO
CH
Lys
NH
OC
CH R'
HN
c. Pantoico
b-Alanina
CH3
CH2OH C CHOH CO NH CH2 CH2 COOH
c. Pantotnico
CH3
CH3
c. Pantotnico
Cisteamina
Pantetena
Pantetena
H
HS
C
O
ADP
H HO H
O
O
N
C
O P O P O CH2
OOO H3C CH3
H
H
NH2
N
O
OH
Coenzima A
N
N
H
H
OH
O
-
O S O P O CH2
O
NH2
O-
H
H
N
N
H
H
OH
O P O
O-
3- Fosfoadenil 5- Fosfosulfato
(PAPS)
CH3
CH3 N CH2 CHOH CH2 COOH
CH3
Carnitina
O P O P O P O CH2
O-
O-
NH2
O-
H
H
H
H
OH
OH
CQGDSGGPV
CMGDSGGPL
CQGDSGGPL
CEGDSGGPF
CQGDSGGSW
GRGDSGGST
CQGDSGGPV
Lisozima y su
substrato
Colisiones
no productivas
Colisin
productiva
En la superficie de la enzima,
los reactivos se encuentran
en la orientacin correcta y a
una concentracin local mucho
mayor que en solucin
OH
P O
O
O CH2
His 119
HN
OH
-
Py
His 12
Lys 41
NH3+
OH
P O
O
O CH2
:N
NH
P O
O
O CH2
His 119
HN
OH
-
P O
O
O CH2
O
O
HN + NH
O
P
O
NH+
His 12
Lys 41
NH3+
Py
H
N:
CH2
OH
-
P O
O
O CH2
OH
P O
O
O CH2
His 119
OH
-
Py
His 12
Lys 41
NH3+
O
O
P
H
O
O
O
H
HN + NH
P O
O
O CH2
N:
HO
NH3+
HOCH2
His 12
Lys 41
:N
O
O-
HN
NH+
HOCH2
NH
O P O
His 119
HN
Py
OH
-
P O
O
O CH2
OH
-
P O
O
O CH2
CH
His
CH2
Ser
CH
CH
CH2
OH
CH2
NH
:N
R C NH R'
O
-
O
C
CH
His
CH2
Ser
Asp
HN + NH
R C NH R'
O
C
Asp
CH
CH
CH
His
CH2
Ser
CH
Ser
CH
CH2
HN
CH2
+ NH
R C NH R' O
O
CH His
CH2
NH
-
NH2 R'
R C
:N
O
C
Asp
Asp
CH
CH
CH His
CH2
Ser
CH
CH2
O
CH His
CH2
Ser
CH
:N
R C H O
O
CH2
NH
-
O
C
R C
Asp
HN
O
H
+ NH
O
C
Asp
CH
CH
CH His
CH2
Ser
CH His
CH2
Ser
CH
CH
CH2
O
CH2
+ NH
HN
-
OH
:N
R C
NH
O
O
C
Asp
OH
Asp
CH
CH
His 57
Asp 102
Ser 195
Configuracin en el centro
activo de la Quimotripsina,
con un inhibidor
v=
k+2e0 s
Km + s
Vmax s
Km + s
Regulacin alostrica
Procesos a nivel celular; regulacin de ajuste fino
de la actividad enzimtica, a travs de efectos de
retroalimentacin (negativa o positiva)
Treonina
desaminasa
a-cetobutirato
Ile
Sntesis de pirimidinas
ATP
+
Asp + CP
ATCasa
Carbamil aspartato
CTP
Ruta
Glicolisis
Neoglucognesis
Bios. cs. Grasos
Bios. Colesterol
Bios. Purinas
Enzima
Inhibidor
Fosfofructokinasa
ATP
FBP fosfatasa
AMP
AcetilCoA carboxilasa
AcilCoA
HMGCoA reductasa
Colesterol
PRPP sintetasa
AMP,GMP,IMP
Centro
alostrico
Centro
activo
En ausencia de inhibidor,
el substrato se fija normalmente al centro activo
Inhibicin alostrica
Centro
alostrico
Centro
activo
La presencia de una
sigmoide implica
la existencia de
cooperatividad en la
fijacin del substrato
s
+
1
s s
+
2
s s
s
+
3
s s
s s
Y
Mioglobina
0.8
0.6
0.4
Hemoglobina
0.2
0.0
0
10
12
pH 7.0
Saturacin de O2, %
80
pH 7.4
60
pH 6.6
40
20
0
0
20
40
60
PO2, mmHg
80
100
Saturacin de O2, %
80
60
0.1 mM
1 mM
40
20
0
0
20
40
60
PO2, mmHg
80
100
Inhibidores y activadores
alostricos
1.0
(+ Activador)
0.8
V+
0.6
(sin efectores)
V0
0.4
(+ Inhibidor)
0.2
V-
0.0
0
10
12
Ecuacin de Hill
h
Ks
y
h
1 Ks
_
h = 1, no hay cooperatividad
h < 1, cooperatividad negativa
v
k 2 x
s
Ka s
Km s
y
Vmx k 2 e0 Km s 1 1 s 1 Ka s
Km
_
Modelo MWC
Forma R
s
s s
s s
s
s s
s s
i
Forma T
a 1 a
y
n
L 1 a
_
n 1
1. Neurotransmisores
2. Hormonas
3. Factores de crecimiento
4. Estmulos morfogenticos y de diferenciacin
5. Muerte celular programada (apoptosis)
6. Estmulos antignicos
7. Luz y otros agentes fsico-qumicos
ATP
ADP
CH2OH
O
H
R CH
N
O C
Ser HC
H N
C
R' C H
N
H
O
CH2O P OOO
H
R CH
N
O C
Ser HC
H N
C
R' C H
N
H 2O
H
O
CH2O P OOO
H
Pi
R CH
N
O C
Ser H C
H N
C
R' CH
N
H
CH2OH
O
H
R CH
N
O C
HC
Tyr
H N
C
R' C H
N
H2 N
H
N
O
CH2
O P O CH2
O-
O
H
OH
OH
R CH
N H
O C
HC
H N
C O
R' CH
N H
H2N
O
OH
NH
N
C H
NH2
+
N
O
O
OH
CH2 O P O P O CH2
O-
OOH
OH
Rotura proteoltica:
Zimgeno
C
Proteinasa
especfica
C
Enzima activada
I
X
Efector
R
P
Glucgeno (n)
CH2OH
CH2OH
O
H
HO
H
OH
OH
H
O
CH2OH
H
OH
OH
H
O
H
OH
OH
H
O
....
Pi
Glucgeno fosforilasa
CH2OH
O
H
HO
H
OH
CH2OH
H
O
O P O-
O
H
OH
Glucosa-1-fosfato
H
OH
OH
OH
CH2OH
H
H
O
H
OH
OH
Glucgeno (n-1)
H
O
....
Activacin de la
fosforilasa, 1
2 ATP
2ADP
Fosforilasa b
Fosforilasa a
Fosforilasa
kinasa, activa
Protein kinasa
inactiva (R2C2)
4 cAMP
Protein kinasa
activa (2C)
(cAMP)4R2
Glucgeno
Fosforilasa
kinasa, inactiva
Glucosa-1-fosfato
NH2
N
O
-
O P O P O P O CH2
O-
O-
O-
ATP
OH
Protenas G
OH
Adenilato
ciclasa
NH2
N
N
O
Formacin de cAMP
a partir de ATP
O O
-
OH
cAMP
AC
R
a
GTP
b
g
a
GDP
g
b
a
GTP
ATP
cAMP
GDP
g
Activacin de la
Adenilato ciclasa
L R
Ga
AC
cAMP
PKA
FK
NH2
N
N
O
O O
-
cAMP
fosfodiesterasa
OH
NH2
Metilxantinas
(p.e. cafena)
N
O
O P O CH2
-
OH
OH
cAMP
+
Protein kinasa A
Glucgeno
sintetasa
+
Glucgeno
Fosforilasa
Protein
fosfatasas
cAMP
fosfodiesterasa
Protein kinasas
1. Protein kinasas A (Activadas por cAMP)
2. Protein kinasas G (Activadas por cGMP)
3. Protein kinasas A (Activadas por DAG)
Activaciones proteolticas
N
Pepsingeno
C
N
pH < 5
Activacin del
pepsingeno
C
Pepsina
Protrombina (II)
Precursores,
va intrnseca
Fase 2
Fase 1
Protrombinasa
Precursores,
va extrnseca
Trombina (IIa)
Fibringeno (I)
Monmero
de fibrina (Ia)
Fase 3
Polmero
de fibrina
Va extrnseca
VII
VIIa
X
Xa
Ca++
Va
Complejo
protrombinasa
XII
XIIa
XI
Va intrnseca
XIa
IX
Ca++
IXa
VIII
Trombina
VIIIa
X
Xa
V
Ca++ Va
Complejo
protrombinasa
Protrombina
Va
Ca++
Xa
PLP
Complejo
protrombinasa
S
S
H
Trombina
Aa
Bb
g
Aa2Bb2g2
Fibringeno
Trombina
+
Monmero de fibrina a2b2g2
Fibrinopptidos
Aa
Bb
g
Fragmento C-terminal
del fibringeno
+
+
+
+
- +
- +
- +
- -
- +
- +
- +
+
Monmero de fibrina
+
+
- +
- -
+
- +
- +
- +
Lys CH
HOOC
NH2
CH
Glu
Factor XIII
(estabilizador
de la fibrina)
Lys CH
OC
NH
CH
Glu
Formacin de
enlaces covalentes
en la fibrina
Enzimas en Medicina
Biotecnologa enzimtica
1. Aminotransferasas
2. Creatin kinasa
3. Fosfatasa alcalina
4. a-Amilasa
5. Fosfatasa cida
6. Lactato deshidrogenasa
7. g-Glutamil transferasa
8. Seudocolinesterasa
Aminotransferasas (Transaminasas)
Catalizan la interconversin reversible de aminocidos
y cetocidos. Utilizan piridoxal fosfato como cofactor
COOH
H2N CH
R1
COOH
+ C O
R2
COOH
COOH
C O + H2N CH
R1
R2
COO-
C O
H3N CH
CH2
-
COO
Aspartato
CH2
COOC O
CH2
CH2
COO
COO
a-Cetoglutarato
Oxalacetato
COO+
H3N CH
CH2
CH2
COOGlutamato
COO-
C O
H3N CH
CH3
Alanina
CH2
CH2
COO-
a-Cetoglutarato
COOC O
CH3
Piruvato
COO+
H3N CH
CH2
CH2
COOGlutamato
ATP
CH3
ADP
N CH2 COOH
HN C
NH2
Creatina
N CH2 CO O P OHN C
NH2
O-
Creatin fosfato
MM
MB
BB
O
R OH + HO P OO-
g-Glu-aa + Cys-Gly
a-Amilasa, EC 3.2.1.1
Es una enzima producida por las glndulas salivales y el
pncreas.
Es un marcador muy importante de afecciones pancreticas
agudas (pancreatitis). Puede incluso aparecer en la orina, debido
a su bajo peso molecular (amilasuria)
O
R OH + HO P OO-
Biotecnologa enzimtica
- Procesos industriales enzimticos:
* Industrias del almidn
* Detergentes
* Industrias lcteas
* Industrias de la fruta
* Antibiticos
- Biosensores y biochips
Biosensores
Anodo
Ctodo
Membrana de Teflon
Producto
Substrato
Membrana semipermeable
Enzima inmovilizada
Esquema de un
biosensor de glucosa