PRCTICA N 1: ACCIN DE LA AMILASA SALIVAL

CURSO: BIOQUMICA 1 PARA ESTUDIANTES DE FARMACIA

UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS CHICLAYO
DOCENTE: MG. RICHARD GARCA ISHIMINE

I.

GENERALIDADES

La saliva contiene amilasa que hidroliza el almidn para formar maltosa y dextrina. Esta isoforma de la amilasa
se conoce tambin como ptialina, nombrada as por el qumico sueco Jns Jacob Berzelius, el nombre deriva de
la palabra griega (pti, escupir), debido a que la sustancia se obtuvo de la saliva.4 La ptialina hidroliza las
grandes molculas de almidn insoluble, para formar almidones solubles (amilodextrina, eritrodextrina y
acrodextrina), produciendo sucesivamente molculas de almidones cada vez ms pequeas, hasta formar al
final maltosa. La ptialina acta sobre los enlaces glicosdicos (1,4), pero la hidrlisis completa requiere de una
enzima que acte adems sobre los productos ramificados. La amilasa salival resulta inactivada en el estmago
por el cido gstrico. En el jugo gstrico a pH 3,3 la ptialina resulta totalmente inactivada en 20minutos a 37C.
En contraste, luego de 150 minutos en jugo gstrico a pH 4,3, an se retiene el 50% de la actividad amilasa.5
Tanto el almidn, el sustrato para la ptialina, como el producto, polmeros de glucosa de cadena corta, son
capaces de protegerla parcialmente contra la inactivacin debida al cido gstrico. Al aadir ptialina a una
solucin tamponada a pH 3,0, esta resulta totalmente inactivada en 120 minutos; sin embargo la adicin de
almidn al 0,1% produce que luego de 120 minutos la solucin an conserve 10% de actividad amilasa; y la
adicin de almidn al 1,0 permite el mantenimiento del 40% de la actividad amilasa a los 120 minutos.
El gen de la amilasa salival ha sufrido duplicaciones durante la evolucin, y los estudios de hibridacin de ADN
indican que muchos individuos poseen mltiples repeticiones en tndem del gen. El nmero de copias del gen se
correlaciones con los niveles de amilasa salival, como puede ser medida por ensayos tipo blot utilizando
anticuerpos contra la amilasa humana.
El nmero de copias del gen se encuentra aparentemente asociado con la exposicin evolutiva a dietas ricas en
almidn. Por ejemplo, un individuo japons posee 14 copias del gen de la amilasa (un alelo con 10 copias, y un
segundo alelo con cuatro copias). La dieta japonesa, tradicionalmente, contiene grandes cantidades de almidn
proveniente del arroz. En contraste, un individuo de la etnia biaka posee solo seis (tres copias en cada alelo).
Los biaka son cazadores-recolectores de la selva hmeda que tradicionalmente han consumido bajas cantidades
de almidn en su dieta. Perry y colegas han especulado que este aumento en el nmero de copias del gen de la
amilasa salival pudo haber desempeado un papel en el aumento de la supervivencia durante la transicin a
dietas ricas en almidn durante la evolucin humana

II.

REACTIVOS Y MATERIALES
- Cocina elctrica
- Vasos de precipitado de 50 ml y 100 ml
- Gradilla
- Pipetas de 5 ml y 1ml
- Pizeta
- Agua destilada
- 8 tubos de ensayo
- Gotas de Lugol
- Reactivo de Benedict
- Hidrxido de sodio al 10%
- 200 gr de maicena
- H2SO4 al 10%
- Cubos de hielo
- Gasa Mdica
- Amilasa Salival

III.

PROCEDIMIENTO

En un vaso de precipitado agregar 5 gr de maicena luego aadir 40 ml de agua destilada

Homogenizar la muestra
Cubrir con una gasa en otro vaso de precipitado
Enjuagar la boca. Adicionar 10 ml de saliva. No debe formarse espuma

Preparacin de bao Mara. Temperatura 37 C

Hervir agua corriente en un vaso de precipitacin, 100 ml, luego enfriar a 37C. Medir con
termmetro.

Esquema:

Tubo / Solucin
Solucin de
almidn
Lugol
Sol. H2SO4
Sol. NaOH
Saliva
Bao mara 15
min

1
2 ml

2
2 ml

3
2 ml

4
2 ml

4 gotas
1 ml

4 gotas

4 gotas

4 gotas

1ml
SI

2 gotas
1ml
SI

1ml
SI

1 ml
NO

Tubo / Solucin
Solucin de
almidn
Benedict
Sol. H2SO4
Sol. NaOH
Saliva
Bao mara 15
min

1
2 ml

2
2 ml

3
2 ml

4
2 ml

1 ml
1 ml

1 ml

1 ml

1 ml

2 gotas
1ml
SI

1ml
SI

1 ml
NO

1ml
SI

PARA EL INFORME:

Reacciones de los diferentes experimentos

Porque las diferentes coloraciones en cada tubo de ensayo?
Explique las razones de las reacciones en cada tubo de ensayo?
Cules son los factores que aceleran las reacciones?
Procedimiento