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UNIVERSIDAD NACIONAL DE

INGENIERA
Facultad de Ingeniera Ambiental

LABORATORIO N1
Tema:

Distribucin Universal de lo
Microorganismos
Curso:
Microbiologa Sanitaria I
Profesor Jorge Gilberto Tello Cebreros
:
Alumno:
Salinas Soto, Pedro

2015 - I

Distribucin Universal de los


Microorganismos

I.

II.

OBJETIVOS:
Aprender a utilizar los equipos y materiales en el laboratorio de
microbiologa, necesarios para la preparacin de medios de cultivo
y conteo de Reconocer la presencia de microorganismos patgenos en el agua.
Utilizar mtodos bacteriolgicos para comprobar la potabilidad del agua de
distintos lugares de la UNI, por medio de placas con medio agar
Conocer los factores que influyen en el crecimiento de microorganismos en el
agua, para su respectivo tratamiento.
Realizar un recuento de bacterias heterotrficas mediante la unidad formadora de
colonias(U.F.C)
Determinacin del nmero ms probable de bacterias coliformes en agua potable.
Analizar la relacin entre concentracin de la muestra de agua usada y la cantidad
de colonias que crecen en el medio.
Presenciar la reduccin de microorganismos conforme se reduce la concentracin
en el tratamiento usado.

FUNDAMENTO TERICO:

El reino protista, definido en el sistema de clasificacin de Haeckel comprende a las


bacterias, hongos, algas y protozoos. El trmino microorganismo comprende adems
de los grupos anteriores a los virus, que son considerados como entidades
microscpicas no vivas. Todos estos organismos presentan diversas formas y
tamaos, pero se caracterizan porque para observarlos y estudiarlos como
organismos individuales se requiere el uso del microscopio.
Los microorganismos se encuentran ampliamente distribuidos en la naturaleza. Sus
hbitats naturales son extremadamente diversos. Los encontramos en todas partes:
en el agua que bebemos, el aire que respiramos, en el suelo, en los alimentos, y
algunos viven en el interior de animales y plantas y sobre cualquier material que les
proporcione materias nutritivas y condiciones de PH, humedad, temperatura,
nutrientes ,etc que sean favorables para su desarrollo y multiplicacin.
Hay muchos hbitats donde, debido a las extremas condiciones fsicas y qumicas no
se encuentran organismos superiores, sin embargo pueden existir microorganismos.
Estos microorganismos pueden tener repercusiones beneficiosas o perjudiciales en
el hombre, y en otros organismos superiores o simples.
Factores que condicionan el desarrollo de los microorganismos
TEMPERATURA

Constituye uno de los factores ms importantes en el desarrollo de los


microorganismos, afecta su respectivo crecimiento y supervivencia en un ambiente o
condicin dada.
El crecimiento de los microorganismos se encuentra influenciado por varios factores.
Entre ellos los ms importantes son la aireacin y la temperatura. En cuanto a este
ltimo, la Temperatura, los microorganismos tienen un margen de temperaturas en
el cual pueden crecer. Este margen viene delimitado por la temperatura mxima de
crecimiento, a partir de la cual no pueden vivir e incluso mueren; la temperatura
mnima por debajo de la cual no pueden crecer aunque generalmente no mueren; y
la temperatura ptima a la cual ofrecen el mejor crecimiento.

Atendiendo a este margen de temperatura de crecimiento, los microorganismos se


clasifican en:
Hipertermfilos: Su temperatura ptima se encuentra por encima de los 80C.
Muchos de ellos son arqueas.
Termfilos: Su temperatura ptima se encuentra entre 45-70C. Suelen ser
microorganismos de vida libre
Mesfilos: Su temperatura ptima se encuentra entre los 25-45C. Incluye
microorganismos patgenos y comensales del
hombre y animales de sangre
caliente y algunos de vida libre.
Psictrofos: La temperatura ptima de los microorganismos de este grupo
est por debajo de los 25 30C
incluye microorganismos de vida
libre.
Psicrfilos: Su temperatura ptima de desarrollo se encuentra entre los 12 15C

HUMEDAD
Los microorganismos requieren unas condiciones mnimas de humedad para su
crecimiento. El agua forma parte del protoplasma bacteriano y sirve como medio de
transporte a travs del cual los compuestos orgnicos y nutrientes son movilizados
hasta el interior de las clulas. Un exceso de humedad inhibir el crecimiento
bacteriano al reducir la concentracin de oxgeno en el suelo. El rango vara en funcin
de la tcnica

Actividad de Agua
El agua es el solvente en donde ocurren las reacciones qumicas y enzimticas de la
clula y es indispensable para el desarrollo de los microorganismos.
La actividad de agua (aW) del medio representa la fraccin molar de las molculas de
agua totales que estn disponibles, y es igual a relacin que existe entre la presin de
vapor de la solucin respecto a la del agua pura (p/po). El valor mnimo de a W en el
cual las bacterias pueden crecer vara ampliamente, pero el valor ptimo para muchas
especies es mayor a 0.99. Algunas bacterias halfilas (bacterias que se desarrollan en
altas concentraciones de sal) crecen mejor con aW = 0.80.
Variaciones en la actividad de agua puede afectar la tasa de crecimiento, la
composicin celular y la actividad metablica de la bacteria, debido a que si no
disponen de suficiente cantidad de agua libre (no asociada a solutos, etc) en el medio
necesitaran realizar ms trabajo para obtenerla y disminuir el rendimiento del
crecimiento.

Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del


substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0):

El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible


metablicamente.
El valor de la actividad de agua est relacionado con el de la humedad relativa (HR) de
la siguiente forma:

Cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con una actividad de agua


menor que la que necesita, su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento
no suele llevar asociada la muerte del microorganismo, sino que ste se mantiene en
condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos largo. En el caso de las
esporas, la fase de resistencia puede ser considerada prcticamente ilimitada.
La gran mayora de los microorganismos requiere unos valores de actividad e agua
muy altos para poder crecer. De hecho, los valores mnimos de actividad para
diferentes tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo, los siguientes: bacterias
aw>0.90, levaduras aw>0.85, hongos filamentosos aw>0.80. como puede verse, los
hongos filamentosos son capaces de crecer en substratos con una actividad de agua
mucho menor (mucho ms secos) de la que permite el crecimiento de bacterias o de
levaduras. Por esta razn se puede producir deterioro de alimentos de baja actividad
de agua (por ejemplo, el queso o almbares) por mohos (hongos filamentosos) y no por
bacterias.
Existen microorganismos extremadamente tolerantes a las actividades muy bajas
(toleran valores de aw=0.60). Algunos de estos microorganismos pertenecen al grupo
de las Arqueas y pueden observarse en las salinas de desecacin formando manchas
coloreadas en los depsitos de sal.
La reduccin de la actividad de agua para limitar el crecimiento bacteriano tiene
importancia aplicada en industria alimentaria. La utilizacin de almbares, salmueras y
salazones reduce la actividad de agua del alimento para evitar su deterioro bacteriano.
PH
Este es un parmetro que presenta un rango estrecho de variacin correspondiente a
cada tipo de microorganismo, ya que si no es as este no podra sobrevivir ni
desarrollarse.
Respecto a este criterio las bacterias se caracterizan en:
Neutrfilas: Crecen de un modo ptimo en torno a un PH neutro (entre 5.5 y 8)
Acidfilas: Crecen en un entorno cido (PH entre 0 y 5)
Alcalfilas: Crecen en un entorno alcalino o bsico (PH entre 8.5 y 11.5)
OXIGENO
No todos los microorganismos necesitan O2, sin embargo, muchas formas de vida
requieren oxgeno para llevar a cabo respiracin aerbica. Los microorganismos que
utilizan oxgeno molecular son llamados aerbicos. Estos se clasifican en aerbicos
obligados que son los que requieren oxgenos molecular para vivir, y
los aerbicos facultativos los cuales utilizan el oxgeno molecular cuando est
presente, pero en su ausencia continan su crecimiento por la va de fermentacin o
respiracin anaerbica, un ejemplo es Escherichia coli. Por otro lado tenemos los
anaerbicoS obligados que necesitan ausencia de oxgeno molecular para crecer y

donde este generalmente es txico, un ejemplo es el gnero Clostridium. Estos


microorganismos obtienen el tomo de oxgeno molecular del agua. Tambin se
observan microorganismos anaerbicos aerotolerantes los cuales no utilizan el
oxgeno molecular para su crecimiento, pero pueden tolerarlo. Los
microaeroflicos slo pueden crecer en concentraciones de oxgeno molecular menor a
las encontradas en el aire.
Factores orgnicos de crecimiento: Estos son compuestos orgnicos esenciales
que el organismo no puede sintetizar, aqu se incluyen las vitaminas, los aminocidos,
las purinas y las pirimidinas.
Medios de cultivo
Es un material nutriente preparado para el crecimiento de microorganismos en el
laboratorio.
Un microorganismo necesita para crecer nutrientes que le aporten energa y
elementos qumicos para la sntesis de sus constituyentes celulares. Dependiendo de
la fuente de carbono que utilizan, los microorganismos se pueden clasificar en
auttrofos si es el CO2 atmosfrico (microorganismos que fotosintetizan) y
hetertrofos (aprovechan los nutrientes de otro organismo) si utilizan carbono
orgnico.
La frmula elemental de un microorganismo es, aproximadamente, C4H7O2N
lo que supone que los componentes de las clulas son: carbono que representa
alrededor del 50% del peso seco, oxgeno (32%), nitrgeno (14%), fsforo (3%), azufre
(entorno al 1%) y otros elementos traza entre los que se encuentran Fe, K, Mg, Mn,
Co,Mb, Cu y Zn.
La elaboracin de medios de cultivo requiere proporcionar los elementos antes citados
en una forma asimilable. As, por ejemplo, el C debe estar en forma de carbono
orgnico para los heterotrofos y como CO2 para los autotrofos, el N en forma de NH4,
deNO3- o de NO2- o en forma de aminocidos a los que se pueda tomar su grupo
amino; el P debe estar en forma de PO4, el S procede de aminocidos sulfurados o de
SO4, etc.
Adems, en ciertos casos, es necesario aadir a los medios de cultivo algunos
aminocidos o vitaminas que determinados tipos de microorganismos no pueden
sintetizar.
Los medios de cultivo se pueden clasificar en definidos cuando su composicin
qumica se conoce totalmente y complejos cuando no es el caso porque estn
compuestos por mezclas de extractos de materiales complejos (extracto de levadura,
extracto de carne, etc.).
Por otra parte, los medios de cultivo pueden ser lquidos o slidos si se aade algn
agente solidificante que no sea consumible por los microorganismos (normalmente
agar).
En funcin de los microorganismos que pueden crecer en ellos, los medios pueden ser
generales, selectivos cuando favorecen el crecimiento de ciertos microorganismos
mientras suprimen el de otros (por ejemplo, el medio SPS para clostridios),
diferenciales cuando alguno de sus componentes permite identificar las colonias de un
tipo de

microorganismos (por ejemplo medios con hemates para identificar colonias de


microorganismos hemolticos), selectivo-diferenciales cuando combinan las dos
caractersticas anteriores (por ejemplo, el agar de MacConkey para identificar
Escherichia coli), y medios de enriquecimiento que permiten aislar un tipo determinado
de microorganismo a partir de una mezcla una poblacin mixta de gran tamao.

MTODOS DE AISLAMIENTO
El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayora de
los casos, mediante la produccin de colonias aisladas en cultivos slidos. El
crecimiento explosivo de las bacterias permite producir un gran nmero de ellas a
partir de una nica clula inicial de forma que, tras un periodo de incubacin en las
condiciones ambientales adecuadas, se produce una colonia observable a simple vista
y formada por individuos iguales (un clon bacteriano).
Sin embargo, no todos los microorganismos presentes en las muestras ambientales
son cultivables (microorganismos no cultivables). Esto es debido a dificultades
intrnsecas en el cultivo (microorganismos parsitos de otros), al desconocimiento de
los requerimientos especficos de cultivo, y a la existencia de grupos de
microorganismos que deben mantenerse en equilibrio para poder sobrevivir (casos de
sintrofa por ejemplo).
Se estima que en slo en torno al 1% de las bacterias del suelo al 0,1 - 0,01 % de las
bacterias marinas son cultivables.
Existen procedimientos de enriquecimiento del nmero de bacterias de ambientes
naturales para facilitar su aislamiento. Uno de ellos es la Columna de Winogradski que
crea un microcosmos para enriquecer el nmero de ciertos tipos de microorganismos
presentes en ambientes naturales con objeto de facilitar su aislamiento.

III.

PROCEDIMIENTO:

Procedimiento A (grupos 1 y 3)
1. Tomamos 4 tubos de agar nutritivo fundido y esterilizado a 45C, flameamos la parte
superior de los tubos.
2. Tomar 3 placas Petri ya habindolas esterilizado y una placa sin esterilizar, a
continuacin numerarlas del 1 al 4 respectivamente. Vertimos el agar nutritivo en las
placas.
PLACA N1
Exponer el agar nutritivo al ambiente del laboratorio duran te 15 minutos para que
solidifique.
PLACA N2
Dividimos la placa en 4 zonas (A, B, C, D)

Zona A: Cabello
Zona B: Huella digital
Zona C: Inoculador estril
Zona D: Inoculador no estril
PLACA N3
No abrir la placa Petri
PLACA N4
No abrir la placa Petri
3. Despus de realizar todo lo anterior, las placas se invierten y se dejan reposar por
48 horas, para verificar la formacin de microorganismos y se colocan a la
refirgeradora.

Procedimiento B (grupos 2 y 4 y 5)
1. Usamos una pipeta estril para transferir el caldo nutritivo esterilizado del tubo a un
tuvo estril y vaco.
2. Usamos una pipeta no estril para transferir el caldo nutritivo esterilizado del tubo a
un tubo estril y vaco.
3. Usamos una pipeta estril para transferir el caldo nutritivo esterilizado del tubo a un
tubo no estril y vaco.
4. Colocar los tubos en la incubadora por 48 horas.

Procedimiento C (todos los grupos)


1. En una placa Petri verter el Agar Saboraud ya preparado.
2. Exponerlo a un ambiente determinado y esperar 15 minutos a que el agar haya
solidificado.
3. Esperar 48 horas para ver el resultado (ideal).Se visualiz 7 das despus

IV.

RESULTADOS:

(Grupo 1)
PROCEDIMIENTO A: colonias de bacterias desarrolladas en agar nutritivo
Grupo

Placa N1 estril

Ambiente:
Laboratorio de

Placa N2 estril
Sector
A: Pelo

Sector B:
Huella

Sector C:
Inoculador

Sector D:
Inoculador no

Placa
N3
estril
No
abrir

Placa N4 no
estril
No abrir

N de Colonias (X)

Tamao

Margen

Microbiologa
6
X1= 10mm
X2= 3mm
X3= 2mm
X4= 1.5mm
X5= 5mm
X6= 1.5mm

X1= Rizoide
X2= Liso
X3= Liso
X4= Liso
X5= Rizoide
X6= Liso
X1= Convexa
con botn

Elevacin

Cromognesis

Caracteres
pticos

X2= Plana
X3= Plana
X4= Plana
X5= Convexa
X6= Plana
X1= Crema
X2= Crema
X3= Crema
X4= Crema
X5= Crema
X6= Crema
X1=Translcido
X2= Opaco
X3= Opaco
X4= Opaco
X5= Translcido
X6= Translcido

3
X1=
2.5cm
X2=
1mm

estril
0

estril

15

X3=
1mm

X1= Liso
X1=
X2= Liso
Filamentoso
X3= Liso

X1=
Plana
X2=
Plana
X3=
Plana

X1= Plana

X1=
Crema
X2=
Crema
X3=
Crema

X1= Crema

X1=
Opaco
X2=
Opaco

X1= Opaco

X3=
Opaco

Grupo3
PLACA 1 AMBIENTE: FOTOCOPIADORA 13 COLONIAS
IC
X1:2mm
MARGEN:
X2:2mm
SOLO X5: ONDULANTE LOS DEMAS
X3:6,5mm
LISOS
IIC
X4:3mm
ELEVACION:
X5: CONVEXA EL RESTO
X5:10mm
PLANOS
X6:1mm
CARACTERISTIAS OPTICAS:
IIIC
X7:2mm
OPACAS
X8:3mm
PIGMENTACION:

IVC

X9:1,5mm
X10:1,5mm
X11:2mm
X12:1mm
X13:3,5mm

CREMA
FACTORES:
HUMEDAD, SUSPENSION DE
PARTICULAS,
# DE PERSONAS, RADIACION,
FLUJO DE AIRE,
OBSERVACIONE
S:
X5: LINEA AMARILLA INTERNA
RISOIDE
HUMEDAD RECOMENDADA 50 O
MENOR

PLACA 4

PLACA 2
B: DEDO

X1:
1,5mm
X2: 2
mm
MUCHAS COLONIAS
AGRUPADAS >100
TAMAO PROMEDIO:
2mm

A: CABELLO
C
D

NO HAY COLONIAS
NO HAY COLONIAS
NO HAY COLONIAS

PLACA NO ESTERIL

MARGEN:

ELEVACION: PLANO
MARGEN:
CARACT.
LAS MAS PEQUEAS ONDULADAS, LAS
OPTICAS:
OPACAS
MAS GRANDES LISAS
PIGMENTACI
ELEVACION:
ON:
CREMAS
TODAS PLANAS
CARACTERISTICAS OPTICAS:
TRANSLUCIDAS
PIGMENTACION:
CREMA

PLACA 3
PLACA
ESTERIL

LISO

NO SE ENCONTRO
NADA

PROCEDIMIENTO B: Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo


Grupo 2

TUBO #1
TUBO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO #2
TUBO
ESTERIL/PIPETA
NO ESTRIL

TUBO #3
TUBO NO
ESTRIL/PIPETA
ESTRIL

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

NO HAY
CRECIMIENTO

ESCASO

DISTRIBUCION
DE
CRECIMIENTO

NO HAY
DISTRIBUCIN

ACUMULADO EN
EL FONDO COMO
SEDIMENTO

NO HAY
OLOR

AROMTICO

TUBO #1
TUBO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO #2
TUBO
ESTERIL/PIPETA
NO ESTRIL

TUBO #3
TUBO NO
ESTRIL/PIPETA
ESTRIL

NO HAY
CRECIMIENTO

ESCASO

GRUPO N02

OLOR

Grupo4:

GRUPO N04

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

DISTRIBUCION
DE
CRECIMIENTO

NO HAY
DISTRIBUCIN

ACUMULADO EN
EL FONDO COMO
SEDIMENTO

NO HAY
OLOR

AROMTICO

TUBO #1
TUBO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO #2
TUBO
ESTERIL/PIPETA
NO ESTRIL

TUBO #3
TUBO NO
ESTRIL/PIPETA
ESTRIL

OLOR

Grupo 5:

GRUPO N05

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

DISTRIBUCION
DE
CRECIMIENTO

OLOR

V.

DISCUSIN:

VI.

CONCLUSIONES:

En el procedimiento A, se visualiza que la placa N1 del Grupo1 (expuesta al


laboratorio de microbiologa) contiene menor cantidad de colonias que la placa
N1 del Grupo3 (expuesta a la fotocopiadora), de lo cual se concluye que la
contaminacin en la fotocopiadora es mayor que en el laboratorio de
microbiologa, y esto se puede explicar basndose en la cantidad de personas
que hay en la fotocopiadora, humedad, polvo, etc.
Se ha aprendido los procesos de esterilizacin mediante el uso del calor (tanto
en el autoclave con el vapor de agua como en el horno)

VII.

En las placas de agar Sabouraud se desarrollan levadura y hongos de acuerdo


al ambiente (alternara, aspergillus, rhizopus)
Gracias al procedimiento A, la placa 2, en los sectores A (cabello) y B (huella)
se concluye que en el dedo presentamos mayor cantidad de bacterias que en
el cabello.
Se pudo comprobar mediante las esterilizaciones, que los microorganismos
tratados en el laboratorio no son capaces de sobrevivir a altas temperaturas.

RECOMENDACIONES:
No agitar los tubos de ensayo al momento de observar los resultados, pues ya
no se distingue adecuadamente la distribucin del crecimiento (anillo o
sedimento).
Verificar que absolutamente todos los materiales se encuentren en el estado
ptimo para llevar a cabo los experimentos.
Procurar tener selladas las placas Petri, para evitar el ingreso de
microorganismos.
Hacer un control riguroso de los tiempos requeridos en los experimento para
evitar complicaciones posteriores.
Realizar bien la medicin del peso de los medios de cultivo, as como del
volumen de agua destilada, para llevar a cabo los experimentos de manera
exitosa.

VIII. CUESTIONARIO:
1. Qu factores influyen en la flora microbiana del aire?
El aire no es un medio apto para la multiplicacin bacteriana, ya que carece de
los nutrientes necesarios para ella, pero si se puede albergar como flora
transente, microbios que estn asociados a gotas de agua, polvo u otra
materia particulada. Dichos microorganismos son en general bacterias de bajos
poderes patgenos y generalmente pigmentados, Ya que estos metabolismos
secundarios los protegen de las radiaciones de luz ultravioleta y del ozono
presente en nuestra atmsfera.
El aire puede considerarse como un vector de microorganismos ya que su
movimiento puede arrastra grmenes de un lugar a otro, los vientos pueden
levantar flora de tierras y desiertos en los fenmenos de evaporacin
transportar gotitas de agua con microorganismos. Por ende como ya se dijo si
bien alberga bacterias de poca patogenicidad, en algunos momentos puede
transportar patgenos con el consecuente peligro para los humanos.

Entre los factores influyentes tenemos: la humedad, la temperatura, radiacin,


desecacin, corrientes de aire, partculas en suspensin, materia orgnica del
ambiente.

HUMEDAD: En las zonas con clima seco, el aire contiene numerosos


microorganismos y el nmero desciende despus de la lluvia debido a que
sta los arrastra por lavado del aire. Los ambientes muy hmedos favorecen
el desarrollo de los hongos, de las bacterias y de los caros del polvo
domstico.
CORRIENTES DE AIRE: Un ambiente activo contiene ms bacterias que
uno seco, las bacterias permanecen en el aire durante tiempos variables,
segn la velocidad de corrientes.
MATERIA ORGNICA: La materia orgnica presente en el suelo y la
superficie de las aguas proporciona riqueza en bacterias al aire, debido a los
vientos.
LUZ SOLAR, TEMPERATURA Y DESECACIN: El grado y tipo de luz
tambin pueden favorecer o inhibir el desarrollo de los microorganismos. Por
ejemplo, la luz ultravioleta inhibe dicho crecimiento y la ausencia de luz
impide la formacin de esporas de algunos hongos (Altemariasp.).

Los organismos vivos precisan de nutrientes para su supervivencia y


desarrollo; stos son muy variados pero resumiendo, se podra decir que el
agua y la materia orgnica son los dos recursos principales de que se sirven
estos organismos para vivir. Por lo tanto, todos aquellos materiales y
estructuras en las que se renan esas dos condiciones pueden ser
considerados como substratos colonizables por los microorganismos.

2. Mencione enfermedades transmitidas por el aire


2.1 DIFTERIA (corynebacterium diphtheriae)
La difteria es una infeccin bacteriana grave que suele afectar a las membranas
mucosas de la nariz y la garganta. La difteria suele causar un dolor de garganta,
fiebre, inflamacin de los ganglios y debilidad. Sin embargo, el signo distintivo es una
lmina de material espeso, gris que cubre la parte posterior de la garganta. Este
material puede bloquear la trquea de manera que hay que luchar para recuperar el
aliento.
Hoy en da, la difteria es extremadamente rara en los pases desarrollados gracias a la
vacunacin generalizada contra la enfermedad.
SINTOMAS: Los sntomas pueden incluir dolor de garganta y ronquera, fiebre,
escalofros, malestar, etc. Comienzan de dos a cinco das despus de infectarse.
Agente causal:

La bacteria Corynebacterium diphtheriae solo afecta al ser humano.


Es tambin conocido como bacilo de Klebs-Lffler.
Es una bacteria Gram positiva, aerobia, catalasa positiva y quimioorganotrofa, y fue
descubierto en 1884 por el patlogo Edwin Klebs y el bacterilogo Friedrich Lffler.
Este bacilo (con forma de bastn recto o ligeramente curvado), no esporulado, no
capsulado y carente de movilidad, mide de 1 a 8 m de largo y de 0,3 a 0,8 m de
dimetro y forman en cultivos agrupaciones ramificadas con la apariencia de
ideogramas chinos.
Biotipos:
Cuatro biotipos son hoy reconocidos de C. diphtheriae: mitis, intermedius,gravis,
belfanti
Se transmite a otros por medio del contacto directo por estornudos, tos o cualquier otro
tipo de secrecin de las personas infectadas.
Las personas infectadas con el germen de la difteria pueden contagiar hasta durante
dos semanas, pero raramente ms de cuatro semanas. Si el paciente recibe el
tratamiento con los antibiticos adecuados, el perodo de contagio puede limitarse a
menos de cuatro das.
La infeccin se contagia de persona a persona mediante el contacto con:

Pequeas gotas de humedad que quedan suspendidas en el aire cuando una

persona infectada tose o estornuda y una no infectada las inhala.

Artculos personales, como pauelos o vasos para beber, que han sido usados

por una persona infectada

2.2 TUBERCULOSIS (mycobacterium tuberculosis)


La tuberculosis es una infeccin persistente causada por el Mycobacterium
tuberculosis, que afecta a diversos rganos, pero particularmente los pulmones. Un
feto puede contraer tuberculosis a travs de su madre antes de nacer, al respirar o
tragar lquido amnitico infectado antes o durante su nacimiento, o despus de nacer,
al respirar aire con microgotas infectadas. Alrededor de la mitad de los hijos de madres
afectadas de tuberculosis activa desarrolla la enfermedad durante el primer ao de
vida si no reciben tratamiento con antibiticos o si no se les vacuna.
La tuberculosis es una enfermedad infecciosa que alcanz su mximo apogeo en el
siglo pasado durante la Revolucin Industrial, debido al desplazamiento de la gente a
las ciudades, donde viva hacinada y en penosas condiciones higinicas. El
responsable de esta infeccin es el Mycobacterium tuberculosis que, en honor a su
descubridor, Roberto Koch, recibe el nombre de bacilo de Koch.
Entre los humanos se transmite a travs del aire, por minsculas gotas que contienen
los bacilos y que las personas infectadas sin tratamientos, o que se encuentran en los
primeros das de incubacin, eliminan al toser, estornudar o hablar.
SINTOMAS: Los sntomas ms frecuentes son el cansancio intenso; malestar general;
sudoracin abundante, especialmente al caer el da; prdida de peso, y sangre en los
esputos. Tambin se puede presentar con una tos seca, persistente, con una
temperatura corporal que oscila entre los 37 y 37,5 grados. No obstante, en ocasiones
no aparece ningn sntoma.
Se distinguen dos tipos de tuberculosis: pulmonar y extrapulmonar. La tuberculosis
pulmonar puede aparecer inmediatamente despus de la infeccin. Esta variedad se
conoce como infeccin primaria y afecta especialmente a los nios del continente
africano. Cuando el nio goza de buena salud la enfermedad puede cursar con
alteraciones locales en los pulmones y ganglios. Pero si est desnutrido o sufre otras
infecciones, como sida aparecen complicaciones graves entre las que destacan la
obstruccin bronquial, derrame pleural o acumulacin de lquido en el espacio
comprendido entre las membranas que recubren el pulmn.
Si la tuberculosis aparece al menos dos aos despus de contraer la infeccin, se
habla de enfermedad postprimaria o tuberculosis del adulto. Esto indica que la
infeccin permaneca latente, por lo que es ms agresiva que la primaria, provoca
lesiones pulmonares graves y se disemina ms fcilmente por el resto del cuerpo.

2.3 TOSFERINA (bordetella pertussis)


La tos ferina es una enfermedad infecto-contagiosa aguda que afecta al aparato
respiratorio, cuyo sntoma tpico es una tos en accesos o paroxismos. El contagio se
realiza directamente desde la persona enferma a la sana por el aire (al hablar, toser...),
por las gotas de Pflgge.
El causante habitual de la tos ferina es un bacilo (una bacteria) del gnero Bordetella,
llamado Bordetella Pertusis, que tiene una apetencia especial por el aparato
respiratorio. Produce inmunidad pero sta va disminuyendo con el tiempo, por lo que
se puede volver a padecer la enfermedad. Otras Bordetellas como parapertusis,
bronquiosptica y otros agentes como Mycoplasmas o virus, pueden ser causantes de
tos prolongada, pero ninguno de ellos es causa importante de tos ferina.
SINTOMAS:
Se pueden distinguir los siguientes periodos:

1.- Periodo de incubacin: dura entre 1-2 semanas. Es asintomtico.

2.- Periodo catarral o de inicio: dura 2 semanas con sntomas catarrales


inespecficos: rinitis, estornudos, febrcula (si la hay), lagrimeo, tos leve, seca e
irritativa, que se va haciendo cada vez ms intensa, de predominio nocturno y que
puede provocar vmitos. La tos comienza a ser en accesos provocados por el mnimo
estmulo.

3.- Periodo de estado, convulsivo o asfctico: dura unas 4-6 semanas. La tos se
vuelve paroxstica o convulsiva en accesos o quintas: el enfermo, encontrndose
bien, nota que va a tener un acceso, realiza una inspiracin profunda y comienza con
una tos a golpes, ininterrumpida, atropellada, que dificulta la respiracin por lo que el
nio estira la cara y el pecho hacia delante, saca la lengua, se va poniendo colorado,
ciantico y con ojos llorosos y tiene una gran sensacin de angustia. Al terminar la
crisis aparece una inspiracin ruidosa (al pasar el aire por una faringe muy estrecha)
que es lo que se llama gallo de la tos ferina. La tos va cediendo, al final de acceso se
expulsa un esputo mucoso blanquecino y con mucha frecuencia vmitos. El enfermo
est agotado. El nmero de quintas diarias y su intensidad vara dependiendo de la
agresividad del germen, as como del carcter del paciente (ms frecuente en
nerviosos e irritables). Tras unos das la cara est abotargada, edematosa, con los
prpados hinchados: facies tosferinosa. Debido a las quintas de tos pueden
aparecer: pequeas hemorragias subconjuntivales, petequias en cara, epistaxis,
prdida de conciencia (si la apnea o falta de respiracin es prolongada, ulceracin en

el frenillo de la lengua (al golpearse con los dientes), incontinencia de orina, prolapso
rectal... No hay fiebre.

4.- Periodo de convalecencia o remisin: dura entre 1-3 semanas. Las quintas
se van haciendo menos frecuentes hasta desaparecer. Pueden aparecer nuevas crisis
de tos convulsiva despus de varios meses de superada la enfermedad, ante la
presencia de un catarro banal.
Aunque esta es la forma de presentarse normalmente podemos encontrar variaciones
o distintas formas clnicas.

Abortiva: muy frecuente actualmente debido al uso de vacuna: el cuadro es


menos intenso y duradero, a veces de difcil diagnstico, parecindose ms a un
catarro prolongado.

Del recin nacido y lactante: ms breve. No existe gallo, con frecuentes crisis
de apnea (que pueden ser graves) y frecuentes complicaciones respiratorias y
neurolgicas.

Del adulto: tos irritativa de predominio nocturno. Sensacin de opresin en el


pecho, no se diferencian los periodos y faltan caractersticas tpicas de la enfermedad.

Una persona infectada propaga organismos de tos ferina al aire a travs de las gotas
de humedad que expulsa al toser. Cualquiera que se encuentre cerca puede inhalarlas
e infectarse.

2.4 MENINGITIS (neisseria meningitidis)


La meningitis es una enfermedad infecciosa provocada por virus o bacterias que se
encuentran en la nariz y la garganta de personas sanas (portadores sanos) que la
contagian a terceras personas. La enfermedad provoca la infeccin e inflamacin de
las meninges, unas membranas que rodean al cerebro y la mdula espinal. Lo normal
es que se infecten solo las meninges. En este caso se habla de meningitis
meningoccica. En algunas ocasiones el meningococo se introduce en la sangre,
diseminndose. A este problema se le denomina sepsis meningoccica. Tambin
puede ocurrir que se den ambos problemas a la vez.

La meningitis afecta a dos de cada 10.000 recin nacidos a trmino y con peso normal
y a dos de cada 1.000 recin nacidos con bajo peso. Hay ms afecciones entre los
nios que entre las nias, y en la mayora de los casos, la meningitis de un recin
nacido es una complicacin de la sepsis (infeccin de la sangre que se extiende hasta
el cerebro).
La meningitis infecciosa puede estar provocada, bien por virus, bien por bacterias La
infeccin por virus es la ms comn. Aunque requiere tratamiento hospitalario, suele
ser benignas. En ocasiones aparecen como consecuencia de otras infecciones vricas,
como las paperas. Cuando es una bacteria el agente causante hablamos de una
patologa ms grave. En ocasiones pueden provocar la muerte.
SINTOMAS: Una vez contagiada, una persona puede padecer los primeros sntomas
entre los dos y los diez das posteriores al contagio. En ocasiones tiene un comienzo
brusco, en otros los sntomas son similares a los de un catarro o una gripe. Los ms
frecuentes y que anuncian una gravedad son:

Fiebre alta

Dolor de cabeza intenso

Rigidez de nuca

Vmitos bruscos

Somnolencia

Prdida de conciencia

Agitacin, delirio, convulsiones

Manchas de color rojo-prpura en la piel, lo que implica una mayor gravedad.

PREVENCION:
Existen vacunas para los meningococos tipo A y C. Actualmente se est extendiendo
por toda Espaa la vacunacin obligatoria el tipo C. Cada vacuna es especfica.
Vacuna tipo C: Estimula la formacin de defensas contra el germen. La proteccin se
produce a las dos semanas de la vacunacin. Para nios mayores de un ao basta
con una dosis, pero para los nios de entre 7 y 12 meses son necesarias dos dosis, y
para los de entre 0 y 6 meses, tres. La vacunacin se realiza a los menores de 6 aos.
Provoca efectos secundarios leves, como inflamacin y molestias en el lugar de la
inyeccin, fiebre baja e irritabilidad. Est contraindicada cuando existen estados
febriles en el momento de la vacunacin; si el nio es hipersensible a alguno de los
componentes de la vacuna, o en personas inmunodeprimidas.

3. Qu
grupos
de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades respiratorias?
Gran nmero de infecciones humanas y animales se transmiten por el aire y
causan enfermedades en el aparato respiratorio principalmente.
Se caracterizan por su tendencia a causar epidemias, siendo ms frecuentes
durante el otoo y el invierno, cuando las personas se renen en sitios
cerrados.
La transmisin area de enfermedades no es nicamente de microorganismos
que salen de las vas respiratorias. En algunos casos se forman bioaerosoles
procedentes de animales y sus productos que se suspenden en el aire y
pueden ser inhaladas
A continuacin se presenta un cuadro en el cual se clasifica y posteriormente
se cuantifica los agentes causantes de enfermedades resspiratorias

-En lasbacterias tenemos principalmente esteptococos(7%) y otras bacterias(1.2%)


-En los virus tenemos a Rihinovirus(18%), virus de influenza(2-5%) y otros virus (virus
sincitial respiratorio, adenovirus, herpesvirus, coxsackie, parainfluenza) (11-14%)
4. Mencione las caractersticas
sacharomyce cerevisae.

de

Rhizopus

Nigrican,

alternara

ALTERNARIA
El gnero Alternara contiene especies cosmopolitas que se encuentran en un amplio
rango de materiales y productos. Como saprobias pueden deteriorar alimentos y
forrajes, produciendo compuestos biolgicamente activos tal como micotoxinas. Como
patgenas reducen el rendimiento de las cosechas o afectan a los vegetales
almacenados. Es necesaria una identificacin precisa de las especies porque cada
nombre entraa un conjunto de caractersticas (preferencias para el crecimiento,
patogenicidad, produccin de metabolitos secundarios) que permiten predecir el
comportamiento del hongo (Andersen et al. 2001).

CULTIVOS
Las caractersticas del crecimiento
constituyen uno de los criterios
para
la
clasificacin.
En
CzapekLevadura A. alternata y A.
infectoria producen colonias de
tamao similar (56 - 63 mm de
dimetro en 1 semana a 27C),
chatas y ligeramente algodonosas.
El micelio areo es gris verdoso
con reverso negro parduzco.
Muchas cepas de A. infectoria
forman escasos conidios, tienen
un micelio algodonoso y el reverso
de la colonia es obscuro en el
centro rodeado de un anillo
anaranjado
plido
(Andrews
1992).
En Malta-Glucosa. alternata forma
colonias algodonosas, elevadas,
con micelio gris verdoso y esporos negro parduzco. A. infectoria tiene colonias pardas
aceituna a negro parduzco, chatas y algodonosas, a veces con fasciculos y
esporulacin moderada mostrando el micelio gris y con frecuencia un pigmento soluble
verde amarillento. Otras especies casi no presentan esporulacin sobre este medio
(Andrews 1992).
En Czapek-Glicerol (cap. 3) A. alternata y A. infectoria producen colonias
indistinguibles, de color pardo grisceo a pardo oliva, 7 - 12 mm de dimetro en 1
semana a 27C, con micelio poco denso. En Malta-Diclorn, las colonias tienen un
dimetro de 40 - 45 mm en iguales condiciones. A. alternata muestra un color negro
verdoso en anillos concntricos, la colonia aterciopelada tiene largas cadenas no
ramificadas de conidios lisos. A. infectoria tiene colonias fasciculadas, de color gris
verdoso, con cadenas siempre ramificadas de conidios rugosos y con frecuencia
forman estructuras teleomrficas inmaduras
MORFOLOGA E IDENTIFICACIN
Los conidios de Alternaria tienen septos transversales y longitudinales y se los conoce
como dictiosporas, adems son pardos y picudos. Nacen por la brotacin apical de
una clula conidigena o de la espora anterior, dando lugar en este ltimo caso a una
cadena que suele ramificarse si una espora produce ms de un brote. La especie A.
infectoria tiene un estado perfecto que pertenece al gnero Pleospora. ste forma
pseudotecios sobre el tallo de cereales o hierbas con ascas bitunicadas cilndricas en
los lculos del estroma, dentro de las cuales hay 8 ascosporas provistas de septos
transversales y longitudinales .
Es comn observar en los hongos una plasticidad morfolgica. Cuando las especies
de Alternaria crecen en medios ricos y en la obscuridad bajo condiciones ambientales
no controladas, se forma un exceso de micelio areo que afecta al desarrollo
tridimensional de la esporulacin. Al hacer las preparaciones hmedas se destruyen
las estructuras y tambin se debe decir que presentan cadenas largas.

RHIZOPUS NIGRICANS

El comn moho negro del pan. El micelio est


diferenciado en rizoiden ramificado que penetran el
substrato, hifas horizontales que se extienden
sobre la superficie del substratoy esporangiforos,
no ramificado, se ensancha en el extremo para
formar un exporangio redondeado, el cual se
separa del resto del esporangiforo mediante un
tabique transversal. Esas esporangiosporas
asexuales se liberan en un momento dado por
ruptura de la pared que las rodea, siendo
dispersadas por las corrientes de aire. Al germinar
originan un nuevo micelio vegetativo
Se le puede indentificar mediante una
podredumbre blanda, con prdidas de lquidos, la
corteza adquiere una coloracin marrn. A
temperaturas superiores a 10C, los frutos son
recubiertos con un abundante micelio de color blanquecino, que origina unas largas
hifas terminadas en unos puntitos negros, que son las esporas.

SACHAROMYCE SEREVISAE

En la produccin del pan y la mayora de


bebidas alcohlicas, se utiliza la levadura
Saccharomyces cerevisiae para producir
etanol y CO2. Encontrada en varios
materiales ricos en azcar como zumos
de fruta y nctar, las levaduras pueden
llevar a cabo los dos tipos de opuestos de
metabolismo
quimiorganotrfico:
la
fermentacin y la respiracin. Cuando el
oxgeno est presente, las levaduras
crecen eficazmente sobre el azcar
formando biomasa y CO2 (derivado del
ciclo del cido ctrico). Sin embargo, en
ausencia de oxgeno las levaduras
cambian a un metabolismo anaerbico
que origina menor cantidad de biomasa
celular per cantidades notables de alcohol
y CO2.

5. Cules son los ingredientes del caldo nutritivo, agar nutritivo y agar
sabouraud?
Agar Nutritivo
A principios de 1900 la APHA (American Public Health Association) sugiri esta
formulacin como un medio de cultivo estndar para el anlisis de agua. El Agar Nutritivo
se encuentra descrito en los Mtodos
Estndar de la APHA y de la AOAC (Association of Oficial Analytical Chemists) para el
anlisis de agua, leche y sus derivados, alimentos y otros materiales.
El Agar Nutritivo sigue siendo un medio ampliamente utilizado para el cultivo de
microorganismos no fastidiosos.
En este medio el extracto de carne y la peptona aportan la fuente de nitrgeno, vitaminas
y carbono. El agar es adicionado como agente solidificante.
Agar Nutritivo
Extracto de carne
Peptona
Agar
Agua

Cantidad
3g
5g
15g
1000ml

1. Caldo Nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el desarrollo de
microorganismos con escasos requerimientos nutricionales.
Su uso est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y
otros materiales de importancia sanitaria.
Caldo Nutritivo

Cantidad

Extracto de carne

3g

Peptona

5g

Agua

1000ml

2. Agar Sabouraud
Es un medio para el cultivo de hongos y levaduras. El Agar Sabouraud es una
modificacin del Agar de Dextrosa. Este medio es usado para el cultivo de hongo
patgenos, particularmente de aquellos asociados con infecciones de la piel. La alta
concentracin de dextrosa y la acidez del pH hacen a ste un medio selectivo para
hongos. Con la adicin de cicloheximida, estreptomicina y penicilina, se obtiene un
Agar
Cantidad
excelente medio para el
aislamiento primario
Sabouraud
de dermatofitos.
Pluripeptona

10g/l

Cloranfenicol
Glucosa

0.05g/l
40g/l

Agar

15g/l

Qu clase de nutriente proporciona cada uno de los ingredientes?

Extracto de carne: Contiene las sustancias solubles en agua de tejidos


animales, entre ella carbohidratos, compuestos orgnicos nitrogenados,
vitaminas solubles en agua y sales.

Peptona: Fuente principal de nitrgeno orgnico, puede contener tambin


algunas vitaminas y algunas veces carbohidratos, esto en relacin a la clase de
material proteico digerido.

Agar: Se usa como agente solidificante de los medios de cultivo, se disuelve en


solucin acuosa, gelifica cuando la temperatura baja es 45C, no se considera al
agar como nutriente para las bacterias.

Extracto de levadura: Es una fuente muy rica en vitaminas B, tambin contiene


nitrgeno orgnico y compuesto de carbono.

IX.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

TEXTOS:
-Biologa de los microorganismos Brock
-Roger y Stanier. El mundo de los microbios. Aguilar, Madrid 1965
-Pelczar, Michael J. Microbiologa, Mxico, McGraw-Hill, 1982
PAGINAS WEB:
www.azc.uam.mx/cbi/quimica/microbiologia/p02.pdf
http://books.google.com.pe/books?
id=oQOSGAJPwZkC&pg=PA122&lpg=PA122&dq=distribucion+universal+de
+los+microorganismos&source=bl&ots=SEbZ9D9xya&sig=DMEexTWYdRe9
KdcIg4qRwpKG0BQ&hl=es&sa=X&ei=sbAuUvG4JfOq4APn5IHIDw&sqi=2&ve
d=0CEIQ6AEwAw#v=onepage&q=distribuci
https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-demicrobiologia/indice/influencia-del-medio-ambiente/temperatura

http://www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia
%20general/notas_de_microbiologia_de_los_al.htm

http://www.unavarra.es/genmic/micind-0.htm
foodsafety.psu.edu/front_line/1Factors_Microb_Sp.ppt - 29 Ago 2005
www.unavarra.es/genmic/curso%20microbiologia%20general/09- factores
%20de%20supervivencia.htm
OUTSIDE MICROBIOLOGA REQUERIMIENTOS QUMICOS
http://www.microbiologa.com.ar/fisiologa.php?Mostrar=qumicos
http://www.biologia.edu.ar/microind/crecimiento%20bacteriano.htm
http://facultad.bayamon.inter.edu/yserrano/crecimiento%20microbiano.htm
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.-%20Cultivo%20de
%20microorganismos.pdf
http://www.slideshare.net/grupofarmacoudea/flora-normal-1772185
http://proquimessa.com/Portals/0/CalidaddeAirePDF2_Microbiologiadelaire.pdf
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/NT
P/Ficheros/786a820/802%20web.pdf

X.

ANEXOS E IMGENES:

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