PRIONES

En 1982 Stanley B. Prusiner propuso el nombre de "prin" para el agente

causante de un grupo de enfermedades degenerativas del sistema
nervioso central caracterizadas por ser patologas crnicas y
progresivas. En 1997, Stanley B. Prusiner fue galardonado con el premio
Nobel de fisiologa y medicina por los trabajos llevados a cabo para la
identificacin de agente infeccioso de las encefalopatas espongiformes
transmisibles (EETs). Estas enfermedades incluyen la encefalopata
espongiforme bovina (BSE), el scrapie de las ovejas y cabras as como la
enfermedad de Creutzfeldt-Jakob y su nueva variante en seres humanos.
Los priones son pequeas partculas infecciosas de naturaleza proteica
con unas sorprendentes propiedades que las hacen ms resistentes que
la mayora de las protenas a la inactivacin por mtodos fsico-qumicos.
La naturaleza proteica de los priones se sugiri dada su resistencia a la
inactivacin por procedimientos que destruyen los cidos nucleicos,
como por ejemplo la radiacin ultravioleta. Hasta la fecha la asociacin
de algn tipo de cido nucleico especfico con los priones no se ha
confirmado formalmente. A pesar de todo la controversia cientfica
existe entre aquellos defensores de la teora de la protena nica y los
defensores de la hipteis del virino o de la nucleoprotena, que sostiene
que el agente infeccioso consiste en un genoma formado por cido
nucleico y la protena del prin (PrP) derivada del husped.
De acuerdo con la hiptesis de la protena nica, los priones se
componen de una protena denominada PrPSc (isoforma scrapie de la
protena del prin). La PrPSc se produce por el plegamiento errneo de
una protena celular de idntica secuencia de aminocidos, presente en
prcticamente
todos
los
tejidos
del
organismo,
denominada
PrPC
(isoforma celular
de la protena del prin)

Cambio de plegamiento de PrPC a PrPSc

Este plegamiento errneo confiere a la PrP Sc dos propiedades que

permiten diferenciarla de la PrPC, la resistencia parcial a la digestin por
proteasas y la insolubilidad. Las causas que provocan el error en el
plegamiento de la PrPC definen las formas descritas de las enfermedades
producidas por priones:
1. FORMAS ESPORDICAS DE LA ENFERMEDAD. Son las que aparecen sin
causa aparente y para las que no hay explicacin en la actualidad.
2. FORMAS INFECCIOSAS. Se explican por la interaccin de la PrP Sc sobre
la PrPC lo que provoca su transformacin a PrPSc.
3. FORMAS HEREDITARIAS. Provocadas por alteraciones genticas
heredables que facilitan el plegamiento errneo de la PrPC

COMO SON LOS PRIONES

Los priones son patgenos infecciosos que difieren de las bacterias,

hongos, parsitos, virus y viroides tanto en su estructura y
caractersticas fsico-qumicas como en la enfermedad que causan.
Los priones presentan importantes caractersticas que los diferencian
de los virus.
Diferencias fundamentales entre los
priones y los virus
PRIONES

VIRUS

Formas
moleculares
mltiples
(Isoformas).

Formas nicas
diferentes
morfologas
estructurales

con

No
presentan
cido
nucleico
esencial dentro
de la partcula
infecciosa

Poseen un genoma
formado por cido
nucleico que sirve de
molde
para
la
replicacin.

Inducen
respuesta
No
inducen
inmune
ms
o
respuesta
menos intensa segn
inmune.
el tipo

Estn
compuestos
El
nico
por cidos nucleicos,
componente
protenas
y,
a
conocido es la
menudo, por otros
protena PrPSc
constituyentes.

Propiedades fsico-qumicas de los priones

La masa relativa (Mr) de la PrPSc es de 33-35 x 103. Los priones se
agregan en partculas sin tamao uniforme y no pueden solubilizarse
con detergentes si no es en condiciones que alteran la estructura de la
PrPSc, con la consiguiente prdida de infectividad. Sin embargo,
utilizando fosfolpidos fue posible conseguir la solubilizacin de la
PrPSc.

Los priones resisten la inactivacin con nucleasas, radiacin UV a 254

nm, tratamiento con psoralenos, cationes divalentes, iones metlicos
quelantes, cido (entre pH 3 y 7), hidroxilamina, formalina, ebullicin y
proteasas. La infectividad de los priones se disminuye mediante la
digestin prolongada con proteasas, o con tratamientos como urea,
ebullicin en SDS, lcali (>pH 10), autoclave a 132C durante ms de
dos horas, solventes orgnicos desnaturalizantes (e. g., fenol) o

agentes caotrpicos como el isocianato de guanidina.

Morfologa del prin.

A partir de tejido cerebral procedente de un individuo infectado se
pueden extraer vesculas membranosas ricas en PrP Sc. La proteolisis
parcial de estas vesculas da lugar a partculas con forma de varilla,
visualizables al microscopio electrnico.

La mayora de estas partculas tienen un dimetro uniforme de 11 nm

con una longitud media de 165 nm. Estas varillas son lisas, parecidas a
listones, y raramente aparecen retorcidas. Las varillas estn formadas
por polmeros de PrPSc 27-30 (generada por la proteolisis parcial de la
PrPSc 33-35).

Biologa Molecular de los priones.

La protena PrPC est codificada en un gen cromosmico muy similar
entre las distintas especies de mamferos. El gen de la PrP existe en
una nica copia y est localizado en el brazo corto del cromosoma 20
en el hombre y en una regin equivalente del cromosoma 2 en
ratones. El gen del ratn contiene tres exones, mientras que el gen
humano y de hmster nicamente dos. La secuencia de aminocidos
(ORF) de todas las protenas conocidas de priones se encuentra

codificada en su totalidad dentro de un nico exn.

El gen se expresa de manera constitutiva prcticamente en todos los

tejidos del organismo adulto siendo su expresin mxima en tejidos
neuronales, fundamentalmente en el cerebro, cerebelo, mdula e
hipotlamo.
La PrPC tiene un tamao comprendido entre los 33 y 35 kDa (PrP 3335). El suceso crtico en la patognesis parece estar relacionado con
un cambio estructural que transforma a la PrP C en la PrPSc, el
componente principal de las partculas infecciosas. Por tanto, ambas
formas proteicas poseen idntica secuencia de aminoacidos y la nica
diferencia entre ellas estriba en su estructura secundaria, es decir en
la forma de plegamiento de la cadena polipeptdica. Estas diferencias
conformacionales entre ambas isoformas confiere a la PrP Sc las
propiedades que permiten diferenciarla de la PrPC: mientras que la PrPC
es digerida completamente por proteasa, la PrP Sc es parcialmente
resistente a esta digestin, resultado una protena de 27 a 30 kDa (PrP
27-30).

Biosntesis de las isoformas PrPC y PrPSc

Biosntesis de las isoformas PrPC y PrPSc

El prin es pues una forma alterada de una protena celular normal

que ha podido perder su funcin pero que ha adquirido la capacidad
de transformar la forma normal en patolgica. La patologa se
manifiesta probablemente por la acumulacin de la protena anormal.
Estructura de la protena del prin.

La protena celular madura, purificada en su forma nativa, tiene una

estructura secundaria compuesta por un 43% de -hlice y un 3% de
lmina . Por el contrario, los estudios espectroscpicos permitieron
establecer que la estructura secundaria de la PrP Sc contiene un 43 %
de lmina lo que le confiere la capacidad de formar complejos
supramoleculares acumulables denominados amiloides.
La estructura terciaria de la protena recombinante del prin humano
se ha desvelado recientemente. sta consiste en tres -hlices que
conforman un ncleo ordenado en el extremo carboxilo terminal de la
molcula y una zona amino terminal desestructurada y flexible.

Se ha propuesto que la transformacin de PrPSc a PrPSc consiste en una

transicin de las -hlices a lminas , coincidiendo con las zonas
conservadas de la cadena polipeptdica.
Sin embargo, se desconocen muchos detalles sobre el mecanismo de
accin del proceso de transformacin. Se ha sugerido que las dos
isoformas deben interaccionar entre ellas debido a que:
La transmisin de los priones precisa de cierta especificidad entre las

secuencias interaccionantes
Fue posible generar molculas parecidas a la PrPSc in vitro, mezclando
PrPC purificada con PrPSc o con pptidos sintticos.

El gen PRNP

La protena prinica est codificada por un gen denominado PRNP y se

localiza en 20 p12 pter, el locus es pter PRP SCG1 (figura 1).
Contiene 15 000 pares de bases y se encuentra altamente conservado.
Ha sido identificado en ms de trece especies de mamferos. Est
compuesto por dos exones y un intrn. El extremo 5 del sitio de inicio
de la transcripcin presenta alta repeticin de pares GC. 7, 10

En ovejas se conocen ocho alelos para PRNP. Cada uno resulta de una
mutacin puntual y su frecuencia vara segn raza y rebao. El alelo
PrPMARH se asocia con elevadas incidencias de scrapie. La
secuenciacin del gen en ovejas ha puesto de manifiesto la existencia
de regiones homlogas en los genes ovino y humano. En hamsters el
gen PRNP contiene dos exones separados por un intrn de 10 Kb. El exn
1 codifica una porcin de la secuencia lder 5, y el exn 2 codifica la
protena PrP y la secuencia no traducida 3. En ratones el gen PRNP est
compuesto por tres exones, el exn 3 es anlogo al exn 2 del hamster.
La localizacin de los genes PRNP en el brazo corto del cromosoma 20
humano y en una regin homloga del cromosoma 2 del ratn sugiri
que estos genes existan antes de la especiacin de los mamferos. 11
En el hombre se han registrado ms de 20 mutaciones, resultado de
deleciones o inserciones de una o ms bases nucleotdicas, en la regin
codificadora del gen PRNP en todas las formas familiares de prionpatas;
sin embargo, en las formas espordicas de estas enfermedades no se
han demostrado mutaciones en el gen. 2, 7

Protenas crinicas

El producto proteico del gen PRNP es una protena celular (PrPc)

proteasa sensible que se acumula especialmente en la membrana
citoplasmtica de las neuronas y tiene entre 33 35 KD. Est constituida
por una sola cadena peptdica, presenta una estructura compacta de
cuatro hlices alfa (H1 H4) y oligosacridos complejos unidos a la
protena. La composicin total incluye 2% de hlices alfa y 3% de hlices
beta. 8, 11 La PrPc consta de 253 amonicidos en el hombre y 254 en
ratones y hamster, est muy conservada en diversas especies que
incluyen humanos, ovejas, bvidos, ratones, hamsters y Drosophila. Se
encuentra anclada a la membrana neuronal por un glicosyl
fosfatidilinositol (GPI). Adems est ampliamente expresada en el
organismo (bazo, msculo esqueltico, pulmones y epitelios secretores)
aunque con niveles muy inferiores al cerebro. Se sintetiza en el retculo
endoplsmico rugoso, es modificada en el aparato de Golgi y luego
transportada a la superficie celular mediante vesculas secretoras. La
forma patgena de PrP (PrPsc), a diferencia de PrPc, presenta gran
proporcin de hlices beta (43% de hlices beta y 30% de hlices alfa).
8,11 La estructura tridimensional de la protena ha sido estudiada por
resonancia magntica nuclear (RMN), pues no ha sido posible producir
cristales de esta en el laboratorio. De tal forma pudo determinarse la
presencia de un extremo N terminal flexible (a.a 23 124), un dominio
globular central (a.a 125 228) y una cadena C terminal corta (a.a 228
230 o 231). El dominio globular contiene tres hlices alfa y a cada lado
de la segunda hlice se encuentra una lmina beta corta. La
transformacin de PrPc en PrPsc implica probablemente el
replegamiento de la regin que incluye los aminocidos 90 140, que se
transforman en lminas beta (figura 2). Esta enorme proporcin de
hlices beta conduce a la formacin de fibrillas o bastoncillos amiloides
denominados SAF (Scrapie Associated Fibrils) que se encuentran en el
cerebro de las personas y animales enfermos.

Conversin de PrPc en PrPsc

Aunque ambas formas proteicas, PrPc y PrPsc son codificadas por el gen
PRNP, no pueden ser el resultado de un procesamiento alternativo del
ARNm. Para explicar la conversin de PrPc en PrPsc se han propuesto
diversas hiptesis. 10-13 Segn la teora de Prusiner, hay una
interaccin directa entre una molcula PrPc y una PrPsc. Esta ltima
induce la conversin de la primera en una segunda molcula PrPsc
(figura 3), sin embargo, an no se han detectado agregados PrPc - PrPsc.

Clasificacin de las enfermedades prinicas humanas

La presente clasificacin se deriva de la historia de estas enfermedades

y refleja las incgnitas que an persisten sobre estas, por lo que tiene
carcter provisional. 20- 22
Espordicas:
- Enfermedad de Creutzfeldt - Jacob
Clsica
Variante de Heidenhain
Variante de Brownell Oppenheimer
Panencefalopata
Adquiridas:
- Kuru (canibalismo)
- Enfermedad de Creutzfeldt Jacob iatrognica
Hormona de crecimiento
Gonadotropina
Trasplante de crnea
Electrodos de EEG de implantacin directa
Implante de duramadre
Neurociruga?
- Nueva variante britnica