Comercializadora de Lcteos y

Derivados S.A. de C.V.

PROCEDIMIENTO
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Determinacin de Lactosa
No. de Rev.
Fecha de revisin:
Primera
Mayo 2008

Departamento:
Aseguramiento de Calidad
Clave:
TZ-ACC-022-FQ
Fecha de elaboracin:
Enero 2005

1. FUNDAMENTO.
La lactosa es el principal carbohidrato de leche. La muestra primeramente se defeca con
acetato de zinc y ferrocianuro de potasio para precipitar las protenas. Se filtra y en el filtrado se
determina la lactosa. La lactosa reduce el cobre de la solucin de Fehling A, formndose un
precipitado de Cu2O de color rojo ladrillo en un medio alcalino.
El tartrato de sodio y potasio acta como secuestrante del cobre formando un complejo y
evitando as su precipitacin como Cu (OH)2.
2. ALCANCE.Leche fresca
3. MATERIALES Y EQUIPO.

Balanza analtica
Embudo para filtracin rpida
Matraces Erlenmeyer de 250 ml
Pipeta volumtrica de 5 ml
Pipeta graduada de 50 ml
Matraces volumtricos de 100 ml
Parrilla elctrica de control graduable
Papel filtro Whatman de 5 ml

4. REACTIVOS.

Asbesto preparado (No. de articulo Merck 1560)

Azul de metileno
Tartrato de sodio y potasio (sal de Rochelle)
Sulfato de cobre pentahidratado
Hidrxido de sodio
Agua destilada
Acetato de zinc (C2H3O2)2 Zn 2.H2O
Ferrocianuro de potasio
cido actico glacial
Perlas de vidrio para regular la ebullicin
Solucin de Fehling A (AC.08.PRE.13).
Solucin de Fehling B (AC.08.PRE.14).
Solucin de acetato de zinc (AC.08.PRE.15).
Solucin de ferrocianuro de potasio (AC.08.PRE.16).
Solucin de azul de metileno (0.2%) (AC.08.PRE.17)

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Primera
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Departamento:
Aseguramiento de Calidad
Clave:
TZ-ACC-022-FQ
Fecha de elaboracin:
Enero 2005

Elabor:

Revis:

Autoriz:

Aseguramiento de Calidad

Ing. Clara Hernndez Amador

Jefe Aseguramiento de Calidad

Ing. Diana Tovar G.

Coordinador HACCP

5.1.1.1 PROCEDIMIENTO.5.2 Pesar con exactitud 20 g de leche

5.3 Disolver en un matraz volumtrico de 250 ml con 50 ml de agua destilada.
5.4 Defecar con alumi respectivamente de las soluciones de acetato de zinc ferrocianuro de potasio y
aforar, dejar reposar 15 minutos, filtrar en papel filtro.
5.5 En caso de que la solucin no quede completamente clara, repetir el procedimiento poniendo 2 ml
de cada una de las soluciones defecantes en lugar de 1 ml
5.6 La solucin filtrada colocarla en una bureta graduada de 50 ml
TITULACIN PRELIMINAR
1. Colocar en un matraz erlenmeyer 250 ml de la solucin de Fehling A y 5 ml de Fehling B
medidos con pipeta volumtrica, mezclar
2. Adicionar 15 ml de filtrado medidos con bureta y 2 perlas de ebullicin.
3. Calentar el matraz sobre una parrilla cuando el liquido ebulla, adicionar mas cantidad de
la solucin de lactosa a intervalos de 10 a 15 segundos, manteniendo la ebullicin hasta
que el azul casi se decolore. (Nota 1)
4. Entonces adicionar de 2-5 gotas de la solucin acuosa de azul de metileno y continuar
titulando el lquido en ebullicin hasta que el azul sea decolorado y el liquido presente un
color rojo ladrillo.
TITULACIN EXACTA
1. Repetir la titulacin 2 veces mas adicionando antes de calentar, de 1.0 a 0.5 ml menos que
el total de la solucin filtrada requerida para el efecto de reduccin del cobre.
2. Ebullir por 2 minutos, adicionar de 3-5 gotas del indicador de azul de metileno y
completar la titulacion dentro de un tiempo total de ebullicin de 3 minutos.
3. El final de la titulacion ser cuando todo el color azul sea decolorado y el lquido sea rojo
ladrillo.
OBTENCION DEL FACTOR DE FEHLING PARA LA LACTOSA
1.

Pesar por separado 250 mg de lactosa pura deshidratada (Nota 2), aforar a 250 ml en
matraces Erlenmeyer de 250 ml.

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Adicionar 5 ml de la solucin de Fehling A y 5 ml de la solucin de Fehling B con

pipeta volumtrica y titular con esta solucin de lactosa empleando el indicador de azul de
metileno. Siguiendo las mismas indicaciones que para la muestra.
F=VX D

Donde:
F = Factor de Fehling para lactosa
V = ml Gastados para titular 10 ml de soluciones de Fehling
D = Dilucin en mg. Lactosa/ml
5.6.1.1 CALCULOS.% Lactosa =

F * 100
VD

Donde:
F = Factor de Fehling para lactosa (mg/mL)
V = Gasto del contenido de lactosa en la leche (mL)
D = Dilucin de la leche en mg/mL
NOTAS: No agitar en ningn momento durante la titulacin.
En caso de no tener lactosa anhidra, emplear hidratada y el factor quedara:
F=V * D

____________312____________
Peso molecular lactosa hidratada

5.6.1.2 REFERENCIAS.Elaboracin de Mtodos de Anlisis y Calibracin TZ- PCC 007

A.O.A.C.
12th De. 1975
Mtodo 31.034
Broanw and Zebra
Sgar Analysis
Pages 753 a 755
Pearson David
The Chemical Analysis of Food J. & A. Churchill
6 Ed. 1970
Pgs. 130, 123, 422 y 453