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Technologie/Process

Les mtaux lourds :

Evolution de l'USP

Sylviane
JOANNON
Albhades
info@albhades.com

Le chapitre <231> Heavy Metals de la

Pharmacope Amricaine, dcrit le
dosage des mtaux lourds. Les mthodes
prconises sont essentiellement des
mthodes de paillasse. Aprs avoir
compar le dosage de 14 lments par la
mthode II (prcipitation des sulfites) de
l'USP avec le dosage de ces mmes
lments par ICP-MS, la pharmacope
Amricaine n'a pu faire qu'un constat
d'chec quant au recouvrement des
valeurs entre les 2 mthodes. Si le
recouvrement est bon sur l'Argent, il est
infrieur 50% pour 8 lments (Pb, As,
Cd, Pd, Pt, Bi, Mo, In) et il n'y a pas de
recouvrement pour 5 lments (Se, Sn,
Sb, Ru, Hg).
Face un tel constat, l'USP propose une
volution du rfrentiel et 2 chapitres
sont en cours de rdaction : le chapitre
<232> et le chapitre <233>. Cet article
est rdig sur la base des documents de
travail accessibles sur le site de l'USP,
version du 6/10/2010
Le chapitre <232> Elemental
Impurities-Limits concerne surtout les
industriels et prcise notamment les 16
mtaux doser et les valeurs maximales
journalires pour ces lments.
Mtaux doser :
Les 4 mtaux : Pb, As, Hg et Cd seront
systmatiquement doss. Les autres
mtaux, pouvant provenir soit d'une
contamination environnementale soit du
process (catalyseurs), seront doss en
fonction d'une valuation de risque
ralise par les industriels. Selon le type
de produit (fini, substance active ou
excipient), les limites ne seront pas
dfinies de la mme faon.

Pour les produits finis, pour chaque

catgorie de produit, on dfinit un facteur
d'exposition (cf tableau 1).

Tableau 1 : Facteurs d'exposition

Le tableau 2 bas sur les voies d'administration prsente les doses journalires maximales
autorises pour les 16 lments pour une personne de 50kg et les concentrations
maximales dans un solut injectable sur la base d'un volume inject maximal de 100 ml.
Tableau 2 : Impurets lmentaires dans les mdicaments

Technologie/Process
Il existe plusieurs techniques
instrumentales pour le dosage des
lments minraux dont les 4 suivantes :
la Spectroscopie d'Absorption Atomique
(SAA) four,
la Spectroscopie d'Absorption Atomique
flamme,
l'ICP-OES (Plasma couplage inductif
spectromtrie d'mission atomique)
l'ICP-MS (Plasma couplage inductif
spectromtrie de masse).
Notre structure possde ces 4
techniques, qui prsentent chacune ses
avantages et ses inconvnients:

La dose journalire maximale corrige

pour l'lment (Modified Daily dose PDE)
est calcule en multipliant le facteur
d'exposition par la dose journalire
maximale autorise pour ce mme
lment.
Pour l'valuation analytique (par dosage)
le produit de la valeur mesure sur le
produit fini par la posologie maximale
devra tre infrieur la dose journalire
maximale corrige.
L'estimation de la quantit de mtaux
dans le produit fini pourra tre faite soit
par un dosage sur le produit fini luimme, soit en faisant la somme, pour
chaque lment, des quantits apportes
par les ingrdients :

1 m (C m x W m )) x D D
m = chaque ingrdient utilis pour la
fabrication d'une dose unitaire
C m = concentration mesure de
l'lment dans l'ingrdient (g/g)
W m = quantit de l'ingrdient par unit
de conditionnement.
D D = posologie journalire maximale en
nombre d'units de conditionnement.
Cette valeur devra tre infrieure la
dose journalire maximale corrige.
Le dosage instrumental des mtaux,
concerne galement les excipients et les
principes actifs, les niveaux acceptables
devront tre dfinis en fonction de leur
utilisation finale.
Le chapitre <233> Elemental
ImpuritiesProcedures traite
des techniques
instrumentales
pouvant tre
utilises, des
procdures pour les
contrles de routine
et des validations de
mthodes.
Avant de dcrire ce
chapitre et au vu de
notre expertise, il est
important de faire le
point sur les
techniques
existantes, leurs
principes, avantages
et inconvnients.

La SAA, est base sur le principe de la

mesure, une longueur d'onde
dtermine par une lampe cathode
creuse monolmentaire, de l'absorbance
de la lumire produite par l'chantillon
partir d'une source thermique (flamme ou
four). Le recul sur cette technique est
assez important du fait de son
anciennet, mais cette technique
prsente l'inconvnient de ne pas pouvoir
doser tous les lments (la temprature
de la source tant trop faible).
L'ICP-OES est base sur le principe de la
mesure des longueurs d'onde spcifiques
mises par l'chantillon partir d'une
source plasma haute temprature sous
Argon. Cette technique rcente bnficie
de technologies modernes. Elle offre la
possibilit de dtecter simultanment la
quasi totalit des lments du tableau
priodique et permet la mise en vidence
d'interfrences. Le seuil de cette
technique est de l'ordre de 0,1mg/l sur
une solution standard.
L'ICP-MS est base sur le principe de la
mesure par spectromtrie de masse des
ions mis par l'chantillon partir d'une
source plasma haute temprature sous
Argon. Cette technique, assez similaire
l'ICP-OES, prsente en plus l'avantage de
permettre de mesurer plusieurs isotopes
pour un mme lment. Le seuil de cette
technique est de l'ordre de 1g/l sur une
solution standard.
Concernant le chapitre <233>, le point
fort de l'volution de l'USP est le choix de
mthodes instrumentales modernes
permettant une dtection
multilmentaire : l'ICP-OES et l'ICP-MS.

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Technologie/Process
En pratique, les mtaux lourds As, Cd, Pd
et Hg seront doss en ICP-MS et les
autres mtaux en ICP-OES. La SAA four,
qui avait t initialement envisage, a
finalement t carte au motif que,
mme si les analystes possdent sur
cette technique un bon recul, elle n'en
demeure pas moins dpasse et
prsente l'inconvnient d'une dtection
monolmentaire.
Ce chapitre dcrit les paramtres
prendre en considration pour valider les
mthodes soit en essai limite soit en
dosage.
En essai limite, la prcision (ralise sur
6 chantillons dops), la justesse et la
spcificit sont vrifies.
Pour le dosage quantitatif, la validation
intgre les paramtres de prcision, de
rptabilit, de justesse intermdiaire, de
spcificit et de limite de quantification.

Les guidelines ICH exigent pour les

validations de mthodes, la ralisation des
essais sur 3 jours diffrents avec au moins
2 techniciens et si possible avec du
matriel diffrent et des critres
d'acceptation souvent proches de 2 5 %.
Les protocoles de validation et les critres
d'acceptation dfinis dans le chapitre
<233> sont moins restrictifs. D'aprs
notre exprience et, compte tenu du fait
que nous mesurons des impurets des
concentrations extrmement faibles (de
l'ordre du ppm, ppb), soumises de forte
variation intra ou inter lot, les critres
d'acceptation du chapitre <233> nous
semblent logiques et justifis.
L'USP prvoit l'application de ces
mthodes d'ici fin 2013 ce qui implique
qu'il faut s'en proccuper ds
aujourd'hui. La consquence de cette
volution concernera tous les
tablissements pharmaceutiques qui
devront passer d'un test paillasse une

mesure instrumentale ralise sur des

quipements de haute technologie. Ces
volutions sont attendues dans le monde
analytique o il est toujours frustrant de
devoir mettre en uvre des mthodes de
dosage dpasses quand d'autres
technologies beaucoup plus performantes
les ctoient au sein du laboratoire.