UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Per, DECANA DE AMERICA)

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA
CURSO DE BIOQUIMICA
PRACTICA DE LABORATORIO N 24
DETERMINACION DE LIPIDOS TOTALES EN SUERO

I. COMPETENCIAS. Al finalizar la Prctica de Laboratorio el alumno ser capaz de:

Explica el fundamento del mtodo colorimtrico de la determinacin de

Lpidos Totales en suero.

Determinar la concentracin de Lpidos Totales en una muestra de

suero.

Interpreta los cambios de concentracin de Lpidos Totales que est

relacionado con su situacin normal y patolgica.

II. PRE-REQUISITOS PARA LA PRCTICA DE LABORATORIO.

Conceptos Bsicos:
-

Lpidos

Lpidos Totales

Lipemia

Dislipidemia

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Profesor Responsable Blgo. Marco Antonio Nez Fonseca

III. GENERALIDADES. -

SIGNIFICACION CLINICA
Los lpidos actan como fuente de energa para el organismo, sin embargo,
tienen un rol fundamental en el organismo dado que son el componente
mayoritario de las membranas biolgicas. Adems, forman capas de tejido
adiposo protector de otros tejidos y proveen al organismo de algunos
compuestos importantes en la sntesis de hormonas.

El estudio de los niveles de Lpidos circulante en la sangre son una ayuda para
la clasificacin de las dislipidemias, y para el diagnstico de otras patologas.

FUNDAMENTOS DEL METODO

Los lpidos sricos, incluyendo los cidos grasos no saturables (libres y
esterificados) y el colesterol con sus respectivos steres, reaccionan con el
cido fosfovainilico, previa accin del cido sulfrico en caliente, obtenindose
un cromgeno rosado que absorbe a 530
IV. PARTE EXPERIMENTAL. A. REACTIVOS PROVISTOS
- Acido fosfovainilinico
Vainilina 10 mM en cido fosfrico
- Solucin standard
Solucin acuosa de lpidos estabilizada 1000 mg/dL

PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro".

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B. MUESTRA
Debe usarse suero o plasma. Los lpidos son estables en el suero por a lo
menos 24 horas a temperatura ambiente y 3 das entre 2 a 8C.

C. MATERIAL Y EQUIPOS DE LABORATORIO

- Espectrofotmetro.
- Micropipetas.
- Pipetas capaces de medir los volmenes.
- Tubos de ensayo.
- Bao de agua a 37C.
- Cubetas espectrofotomtricas.
- Reloj.

D. DETERMINACION DE GLUCOSA EN SUERO.

TCNICA:

DIGESTION:
Manipular el cido sulfrico con precaucin dado a que es corrosivo.
TUBOS

Standard

Desconocido

Suero

---

20 uL

Standard

20 uL

---

cido Sulfrico concentrado

1000 uL

1000 uL

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COLORIMETRIA:
Preparar la siguiente batera de tubos:
TUBOS

BLANCO

STANDARD MUESTRA

Digerido Muestra

---

---

100 uL

Digerido Standard

---

100 uL

---

cido Fosfovainilinico

2.5 mL

2.5 mL

2.5 mL

Mezclar con una varilla de vidrio e incubar 10 minutos en bao de agua a 37C.
Luego leer en espectrofotmetro a 530 nm llevando el aparato a cero con el
blanco.

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

El color de la reaccin es estable por una hora por lo que la Absorbancia debe
ser leda dentro de ese lapso.
La reaccin es lineal hasta 2500 mg/dL. Para concentraciones mayores, diluir
el tubo de reaccin ya coloreado 1:2 o 1:5; segn sea necesario, con reactivo
fosfovainilinico. El resultado

CALCULO DE LOS RESULTADOS

Los clculos se realizan como sigue:

Lpidos Totales (mg/dL) = Abs MP x [Standard]

Abs St

VALORES DE REFERENCIA

Suero o plasma: 450 850 mg/dL

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