ESPECTROFOTOMETRA

INTRODUCCIN

Espectrofotometra
Es la medida de la cantidad de energa radiante absorbida por las molculas a longitudes
de onda especficas.
La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones
biolgicas.

Tipos de Espectrofotometra

La espectrofotometra de absorcin de infrarrojos

La espectrofotometra por resonancia magntica nuclear (RMN)

La espectrofotometra de fluorescencia.

La espectrofotometra de emisin atmica

La espectrofotometra absorcin atmica

La espectrofotometra de masas

La espectrofotometra de fluorescencia de rayos X

Espectrofotmetro
El espectrofotmetro es un instrumento usado en la fsica ptica que permite comparar la
radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad
desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia
en funcin de la longitud de onda

Mtodos Espectroscpicos

Los mtodos espectroscpicos de anlisis se basan en la medida de la radiacin

electromagntica emitida o absorbida por la materia.

Los mtodos de emisin utilizan la radiacin emitida cuando un soluto es excitado

por energa trmica, elctrica, o energa radiante.

Los mtodos de absorcin, por el contrario, estn basados en la disminucin de la

potencia (o atenuacin) de la radiacin electromagntica como consecuencia de la
absorcin que se produce en su interaccin con el soluto.

Los mtodos de absorcin poseen la considerable ventaja de producir poca o

ninguna alteracin en el sistema estudiado.

Los mtodos espectroscpicos se consideran como una de las mejores y ms

utilizadas tcnicas instrumentales a disposicin del cientfico, para la adquisicin
de informacin tanto cuantitativa como cualitativa.

Mtodos Espectroscpicos
Los mtodos espectroscpicos se clasifican segn la regin del espectro
electromagntico que est implicada; siendo las ms importantes las regiones de:

rayos X,

ultravioleta,

visible,

infrarroja,

microondas

Radiofrecuencia.

El Espectro Electromagntico

Color de

la

sustancia
El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la
luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de
onda no absorbida

Colores De La Luz Visible

Leyes Fundamentales de la Absorcin

Se denomina absorcin al proceso por el cual una especie, en un medio transparente,
capta selectivamente ciertas frecuencias de la radiacin electromagntica.

Ley de Lambert: cuando un haz de luz atraviesa un medio absorbente de

concentracin constante, la cantidad de energa luminosa absorbida por el medio
vara en forma directamente proporcional a la distancia recorrida.

Energa absorbida b

Ley de Beer: cuando un haz de luz atraviesa un medio absorbente de espesor

constante, la cantidad de energa luminosa absorbida por el medio varia en forma
directamente proporcional a la concentracin del absorbente en el medio
Energa absorbida [C]

Transmitancia

es la fraccin de radiacin incidente transmitido por la solucin, por lo general la

transmitancia se expresa en porcentaje. Est definida por la ecuacin:
T= P / P0

T= 10-A

%T= T * 100

Absorbancia

Es la medida de la energa radiante que es absorbida por un material o una

superficie como funcin de la longitud de onda de dicha energa. A diferencia de la
transmitancia, la absorbancia de una solucin que aumenta la atenuacin del haz
est definida por la ecuacin:
A= Log P0 / P

A= Log 1/T

Absorvatividad y Absorvatividad Molar

la absorbancia es directamente proporcional a la trayectoria de la radiacin a

travs de la solucin y a la concentracin de la especie que produce la
absorbancia. Est definida por la ecuacin:
A= abC ( g/lt )

a= A/bC